超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法鉴定α-鹅膏毒肽在大鼠体内的代谢产物

目的 检测和鉴定大鼠尿中α-鹅膏毒肽的主要代谢产物,探讨α-鹅膏毒肽在大鼠体内的主要代谢途径。方法 大鼠以0.5mg/kg的剂量口饲α-鹅膏毒肽,分别采集实验组与对照组的尿液样品,尿液样品经简单处理后采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱仪检测,利用碰撞能量梯度(MSE) 、质量亏损过滤(MDF) 和离子色谱峰提取等技术处理数据。结果 在大鼠尿中共检测到8种代谢产物,其中,Ⅰ相代谢产物5种,Ⅱ相代谢产物3种,同时鉴定了代谢产物的结构,推测α-鹅膏毒肽在大鼠体内可能的主要代谢途径有氧化、脱氢、脱羧、甲基化反应。尿中主要代谢产物为原形、氧化代谢产物、脱氢代谢产物、脱羧代谢产物、甲基化结合物,α-鹅膏毒肽原形是尿液中的主要代谢产物,明显高于所有代谢产物的含量。结论 本研究将为确定α-鹅膏毒肽在动物体内的残留标志物及应用于α-鹅膏毒肽中毒应急检测与鉴定提供科学依据。     

CE-MS检测胃癌患者的尿液氨基酸代谢变化

目的检测胃癌患者尿液的游离氨基酸代谢轮廓,将癌症组和正常对照组进行比较,筛选出具有诊断意义的氨基酸,探讨胃癌患者尿液中氨基酸代谢的变化规律和临床意义。方法收集胃癌患者与健康成人晨尿。采用移动反应界面富集法的毛细管电泳质谱联用技术对尿样中游离氨基酸轮廓进行检测,结合氨基酸标准品的定性定量分析,并对所得数据运用SPSS17.0进行统计学处理,得到有意义的氨基酸。结果胃癌患者尿液代谢轮廓较正常组有明显变化。与正常组相比,胃癌组尿液中的异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸水平升高(P﹤0.05),组氨酸、蛋氨酸、天冬氨酸含量降低(P﹤0.05)。主成分胃癌患者尿液代谢较正常组有明显变化;早期或进展期胃癌患者尿液代谢轮廓亦有明显变化。结论毛细管电泳质谱检测方法可以较好的揭示正常组与胃癌的尿液代谢信息,此方法具有可行性,简便,快速。结果表明,毛细管电泳质谱检测胃癌患者尿液中氨基酸代谢对胃癌诊断与筛查具有重要的临床意义。     

同位素内标稀释-液相色谱-串联质谱法同时测定猪组织中4种吩噻嗪类药物及其代谢物

目的 建立快速、准确、灵敏的猪组织(猪肉、猪肝和猪肾)中氯丙嗪、异丙嗪及其代谢产物氯丙嗪亚砜和异丙嗪亚砜的同位素内标稀释-液相色谱-串联质谱分析方法。方法 样品用乙腈提取,MCX固相萃取小柱净化。以0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸为流动相,采用梯度洗脱方式在ACQUITY UFLC?HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm)上进行分离,以电喷雾正离子多反应监测模式进行检测,同位素内标法定量。结果 氯丙嗪和异丙嗪在0.1～20.0μg/L,氯丙嗪亚砜和异丙嗪亚砜在0.5～100.0μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.999,方法的检出限为0.04～0.17μg/kg,定量限为0.12～0.51μg/kg,样品的回收率为90.8%～106.0%,精密度为1.9%～6.2%(n=6)。结论 本方法灵敏度高、结果准确,适用于猪肉、猪肝和猪肾中氯丙嗪、异丙嗪及其代谢产物氯丙嗪亚砜和异丙嗪亚砜残留的监测。     

接触二硫化碳人群肾上腺皮质功能监测研究

目的通过观察长期接触二硫化碳（ＣＳ２）的化纤生产工人血液、唾液及尿液中皮质激素及代谢产物的变化，了解ＣＳ２对肾上腺皮质功能的影响，分析比较不同生物材料对肾上腺皮质功能的生物监测价值。方法采用１２５Ⅰ放射免疫分析法测定血及唾液中的皮质醇，用高压液相色谱法检测尿中皮质醇、可的松，化学法测定代谢产物１７酮类固醇。所得参数采用ＳＰＳＳ软件比较两组人群的差异，与ＣＳ２浓度的相关关系及唾液、尿液无损伤性指标与血中激素的平行性。结果接触超标浓度ＣＳ２的工人表现血、唾液和尿液皮质激素及代谢产物减少，且与ＣＳ２浓度密切相关。血液与尿液指标之间有良好相关性。结论血皮质醇、尿游离皮质醇、可的松和代谢产物１７酮类固醇均不失为反映肾上腺皮质功能状况的良好生物效应指标，尿液皮质激素及代谢产物的检测因其无损伤性的特点更具实用价值。     

人尿中多环芳烃代谢物的液相色谱-质谱测定法

目的 建立用于检测尿液中痕量多环芳烃(PAHs)代谢产物[1-羟基萘酚(1-N)、2-羟基萘酚(2-N)、2-羟基芴(2-F)、1-羟基芘(1-P)]的高灵敏度的液相色谱-串联质谱联用分析方法.方法 尿液经β-葡糖苷酸酶水解、固相萃取处理后,用高效液相色谱-串联质谱联用仪分析.结果 尿液中4种PAHs代谢产物在1～100 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,线性相关系数r均大于0.99;加标回收率80.8%～122.7%;2-F的最低检出浓度为1 μg/L,1-N、2-N、1-P的最低检出浓度为0.5 μg/L;日间精密度为9.59%～21.35%,日内精密度为3.28%～12.34%.结论 该方法回收率稳定、重现性好、检出限低,可以检测人体尿液中PAHs代谢产物的含量.     

尿液中5种邻苯二甲酸酯代谢产物的高效液相色谱-串联质谱测定法

目的建立尿液中5种邻苯二甲酸酯代谢产物的固相萃取-高分辨质谱测定法。方法尿样经β-葡萄糖苷酸酶水解后,以甲酸+水和甲酸+乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用Oasis MAX固相萃取柱净化,Hypersil GOLD C18柱分离,再使用超高压液相色谱-高分辨率质谱仪进行定性和定量分析。结果在1~500μg/L的线性范围内,5种邻苯二甲酸酯代谢产物的回归方程的线性关系良好,r≥0.999 6。该方法对5种邻苯二甲酸酯代谢产物的检出限分别为0.03~0.39μg/L,定量下限分别为0.10~1.17μg/L;平均回收率为71.1%~104.3%,RSD为3.78%~9.64%。结论该方法的准确度和精密度均较好,回收率高,检出限较低,可用于人体尿液中5种邻苯二甲酸酯代谢产物的同时检测。     

人尿中的3-苯氧基苯甲酸的气相色谱-质谱联用测定法

目的建立一种灵敏、可靠的气相色谱-质谱联用（GC-MS）测定方法，以检测人尿中拟除虫菊酯类农药的主要代谢产物3-苯氧基苯甲酸（3-PBA）的浓度。方法尿液中加入内标2-苯氧基苯甲酸（2-PBA），以正己烷为提取溶剂，在酸性条件下采用液一液萃取法提取目标化合物3-PBA，然后在碱性条件下去除溶于有机相的杂质，目标化合物则进入水相，再在酸性条件下以正己烷重新提取水相中的目标化合物，氮吹干正己烷后，用N，（特丁基二甲基硅烷基）-N-甲基三氟乙酰胺（MTBSTFA）对目标化合物进行衍生化处理，利用GC-MS对衍生化产物进行分离检测，以分析尿液中3-PBA的浓度。结果尿液中3-PBA在0．05-30μg几浓度范围内呈良好线性，相关系数为0．9974；最低检测限为0．01μg／L，日内相对标准偏差（RSD）为2．4％-3．8％，日间RSD为8．7％-10．8％；相对回收率为94．3％-120．6％。结论该方法经济、可靠，且灵敏度比其他类似方法高，可以快速准确地检测人尿液中拟除虫菊酯类农药主要代谢产物3-PBA浓度，从而预测该类农药在中国普通人群中的暴露水平，并为拟除虫菊酯类农药的安全性评价提供依据。     

邻苯二甲酸酯代谢研究进展

邻苯二甲酸酯主要用作塑料增塑剂,普遍存在于环境中。动物实验表明邻苯二甲酸酯具有内分泌干扰作用,已在尿液、血液和精液等体液中检测到邻苯二甲酸酯。邻苯二甲酸酯在体内的代谢研究是内暴露评价的基础,该文对邻苯二甲酸酯的代谢研究进展进行了综述,指出了邻苯二甲酸酯主要代谢路径和在尿液中的代谢产物,比较了不同人群尿液中邻苯二甲酸酯代谢物的浓度水平。     

孕妇尿液中五种邻苯二甲酸酯代谢产物的固相萃取-高效液相串联质谱测定法

目的 建立人体尿液中5种邻苯二甲酸酯代谢产物的固相萃取-高效液相串联质谱测定法.方法 尿液中5种邻苯二甲酸酯代谢产物经β-葡萄糖苷酸酶水解后,采用NEXUS固相萃取柱富集,乙腈-乙酸乙酯(体积比1∶2)洗脱,苯基柱分离,在正电离模式下利用质谱的多反应监测模式进行定性和定量分析.结果 该方法在0.3～800 μg/L范围内线性关系良好,标准曲线回归方程相关系数均＞0.99;孕妇尿中邻苯二甲酸单甲酯(MMP)、邻苯二甲酸单乙酯(MEP)、邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单丁苄酯(MBzP)、邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)的最低检出限分别为1.16、1.00、0.53、0.14、0.22 μg/L,加标回收率为95.36％～98.13％,相对标准偏差(RSD)为0.36％～3.75％.结论 该方法精密度和重现性良好,回收率高,检出限较低,可用于人体尿液中多种邻苯二甲酸酯代谢产物的同时检测.     

邻苯二甲酸酯类职业暴露人群尿中化合物及主要代谢产物水平分析

抽取深圳市存在职业病危害因素企业中198名作业人员，按是否接触邻苯二甲酸酯类(phthalic acid esters, PAEs)化合物分为暴露组(119人)和对照组(79人)进行问卷调查，并收集其尿样。应用固相萃取-高效液相色谱串联质谱技术检测尿中PAEs母体化合物及其主要代谢产物水平。结果显示，尿液中检出DMP、DEP、DIBP、DBP、DEEP、DEHP 6种PAEs母体化合物，两组人员尿中DMP、DIBP、DBP、DEEP、DEHP 5种化合物水平差异有统计学意义(P<0.05)。尿液中检出MMP、MEP、MnBP、MiBP、MEHP、MEHHP、MEOHP、MECPP、MCMHP等PAEs代谢产物，两组人员的MnBP、MiBP水平差异有统计学意义(P<0.05)。     

苯丙酮尿症尿液生物标志物的研究进展

苯丙酮尿症属于常染色体隐性遗传病,是最常见的氨基酸代谢病之一,它是由于苯丙氨酸代谢过程中相关酶缺陷,导致苯丙氨酸及其旁路代谢产物在体内堆积并影响人体正常代谢,并表现出一系列的临床症状。苯丙酮尿症是我国新生儿筛查主要病种之一,目前临床上多采用血苯丙氨酸浓度来进行疾病筛查。过多的苯丙氨酸及其旁路代谢产物可经尿液排出,因此苯丙酮尿症患儿尿液生物标志物检测可用于苯丙酮尿症的筛查和监测,其标本采集简便且具有无创性,本文综述了苯丙酮尿症患儿的体内的生物代谢及其尿液中生物标志物检测的研究进展。     

职业接触抗癌药物的环境及生物监测

本文对职业接触抗癌药物的工作环境以及工作人员的生物材料的监测进行了综述。生物监。测中以检测抗癌药物的原形及其代谢产物的特异性最高，其次为鼠伤寒沙门氏菌属ＴＡ９８手尿致突变试验及ＤＮＡ加合物的测定。血红蛋白加合物的检测可能成为烷化剂类抗癌药物生物监测的发展方向。，     

赣南地区非综合征性唇腭裂患者尿液代谢组学的初步研究

目的：通过检测非综合征性唇腭裂（NSCL/P）患者与正常人尿液中代谢物的变化,探讨基于核磁共振（NMR）的代谢组学在此症的临床应用中的可行性。方法：分别收集12个NSCL/P患者和12个正常人对照组的尿液样品。采用NMR分析NSCL/P患者尿液代谢特征,测定1 H-NMR图谱,进而用主成分分析法（PCA）处理NMR数据,研究NSCL/P组和正常对照组尿液中的代谢物差异,获得NSCL/P患者的特异性代谢标志物。结果：NSCL/P组和正常对照组间的尿液代谢产物存在明显差别。结论：采用基于NMR的代谢组学技术能较好地反映NSCL/P患者尿液的代谢变化,获得相应的特征代谢物,在未来的临床应用中具有广阔的前景。     

铅接触对神经行为功能和单胺类神经递质代谢的影响

对接铅工人的血铅、锌卟啉水平，行为功能和尿液中单胺类神经递质及其代谢产物的含量进行了研究。结果显示：血铅、锌卟啉的平均含量分别为３．４０μｍｏｌ／Ｌ和４．７μｍｏｌ／Ｌ，比对照组明显增高；尿液中高香草酸（ＨＶＡ）和肾上腺素（Ｅ）的含量显著高于对照组；工人的行为功能受到一定影响，表现为简单反应时、利手提转捷度、数字译码、视觉保留时间、目标追踪和情感状态的改变。结果提示：运用神经行为核心测试组合以及检测尿中肾上腺素、多巴胺及其代谢产物高香草酸和３，４－双羟苯乙酸的变化，有助于及早发现铅对神经系统的损害，以及探索铅致行为功能改变的生物学基础。     

基于气相色谱-质谱联用技术在妊娠合并糖尿病营养治疗后鉴定尿液生物标志物的研究

目的鉴定营养治疗后妊娠合并糖尿病患者尿液中的生物标志物。方法采用气相色谱-质谱(GC/MS)代谢组学方法,通过对116例妊娠合并糖尿病孕妇均严格控制饮食和运动1周后,其中58例血糖控制不理想者为实验组,另外58例血糖控制理想者为对照组,对2组孕妇均进行尿液代谢组学分析,识别典型的生物标志物。所有数据均采用SPSS 17. 0软件进行检验。结果严格饮食和运动治疗后尿液中α-酮戊二酸、3-羟基丁酸、马尿酸、枸橼酸、脯氨酸、苏氨酸、乳酸、泛酸共8种代谢产物尿液浓度两组间比较差异有统计学意义(P 0. 05)。故这8种代谢产物可作为评价妊娠合并糖尿病营养治疗效果的指标。结论α-酮戊二酸、3-羟基丁酸、马尿酸、枸橼酸、脯氨酸、苏氨酸、乳酸、泛酸这8种代谢产物可作为评价妊娠合并糖尿病营养治疗效果的指标。     

皱叶酸模提取物中大黄素的体内过程及参数测定

目的：对皱叶酸模主要药效成分大黄素在大鼠体内的药代动力学进行研究，以反映皱叶酸模药材在大鼠体内的作用规律。方法：采用高效液相色谱法检测大鼠的血液、心、脾、肾等组织、尿液及粪便中大黄素含量。结果：大黄素的血药浓度-时间曲线呈现双峰形状；灌胃后大黄素在大鼠心、脾、肾等组织均有分布，且24 h后基本消除；大黄素以原形形式排泄较少。结论：皱叶酸膜中大黄素在大鼠体内吸收入血迅速，并快速分布至各组织，且少数以原形排泄，该研究有助于阐明皱叶酸膜药理作用的物质基础及作用规律。     

二硫化碳作业工人尿中皮质激素及代谢产物的检测及生物监测价 …

为了解二硫化碳对肾上腺皮质功能的影响，探讨其作为ＣＳ２暴露生物监测指标的可行性及价值，采用ＨＰＬＣ法检测尿中皮质激素水平，并调查一组长期接触ＣＳ２的化纤生产工人血、尿中皮质激素及代谢产物的变化。结果表明接触超标浓度ＣＳ２的工人出现血，尿液皮质激素及代谢产物的减少。     

尿中马拉硫磷代谢产物测定的气相色谱/质谱联用法

目的 建立一种固相萃取-气相色谱/质谱联用法测定尿样中3种马拉硫磷代谢产物(磷酸二甲酯、二甲基硫代磷酸酯、二甲基二硫代磷酸酯).方法 取1 ml尿液样本经100μl 3 mol/L盐酸去蛋白后,通过SPE法提取目标物质,以二丁基磷酸酯(DBP)作为内标,采用气相色谱/质谱联用法进行检测.结果 3种代谢产物在13.2 min内均得到良好分离,平均回收率均大于77％、最低检出限为0.2μg/ml,相对标准偏差均小于6.2％.结论 该方法无需进行衍生处理,具有灵敏度高、重现性好等优点,适用于职业暴露人群马拉硫磷接触水平的监测.     

色质谱联用技术在临床医学代谢组学中的应用

代谢组学是研究生物体系受外部刺激所产生的所有代谢产物变化的科学,现已成为系统生物学的重要组成部分和组学领域研究热点,其已成功应用于临床疾病诊断、发病机理及进程研究、生物标志物的寻找、药物研发等方面。代谢组学常用的研究手段有色质谱联用、核磁共振（NMR）、生物芯片等。色质谱联用技术具有以下突出优点：对检测样本处理要求不高、灵敏度极高、线性范围宽、对于样本中浓度相差大的代谢化合物亦可达到很好的检测效果,其已作为代谢组学研究技术平台中愈加重要的组成部分。近年来,采用色质谱联用技术在临床医学代谢组学,特别是国内学者在中医症候代谢组学领域取得了一定成果。     

两种气相色谱质谱联用技术在人体尿液代谢组学研究中的应用对比

目的对比研究气相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(GC/QTOF-MS)法与气相色谱-四极杆质谱(GC/Q-MS)法在人体尿液代谢组学研究中的应用。方法将采集到的94份环境镉暴露人群与对照人群尿液样品采用相同的前处理,通过两种气质联用技术采集质谱数据,比较两组人群尿液代谢组谱图差异,并利用质谱数据建立模式识别模型,考察建模效果。结果 GC/QTOF-MS技术采集到的尿液代谢组信息较GC/Q-MS技术更为丰富、全面;基于GC/QTOF-MS的数据建立的偏最小二乘模型(R2Y=0.757,Q2=0.5)效果不及基于GC/Q-MS的数据建立的模型(R2Y=0.875,Q2=0.558)。结论 GC/QTOF-MS法具有超高的分辨率与质量准确度,决定该技术在代谢组学研究中的代谢产物识别与结构鉴定方面有着传统GC/Q-MS法无法比拟的优势;但该技术由于较传统GC/Q-MS技术能够采集更多的碎片离子,而显著加强了碎片子离子之间存在的共线性关系,导致模式识别建模效果有所下降,但在代谢组学研究中仍然充满应用前景。