前列腺癌MDR－PGP170与突变P53表达

应用单克隆抗体（ＭＤＲ－Ｃ２１９、ＰＡｂ－ＤＯ－１）免疫组化技术对３８例石蜡包埋的前列腺癌与１５例良性前列腺增生（ＢＰＨ）组织切片中的ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３的表达进行了比较研究。结果显示：在３８例前列腺癌切片中ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３蛋白的阳性表达率为７１．０％和６０．５％，１５例ＢＰＨ组织中仅３例（２０．０％）显示ＭＤＲ－ＰＧＰ阳性染色，突变Ｐ５３在所有ＢＰＨ中未见阳性染色。在高分化、中等分化和低分化前列腺癌中ＭＤＲ－ＰＧＰ的阳性表达率为５３．８％、７８．５％和８１．１％。突变Ｐ５３的阳性表达率为３０．８％、７１．４％和７２．７％。结果提示：（１）ＭＤＲ－ＰＧＰ的过度表达是前列腺癌产生抗药的主要机制；（２）ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３的过度表达可能是前列腺癌细胞适存、转化、增殖与进展的重要方式；（３）突变Ｐ５３的过度表达对ＭＤＲ－１基因可能具有调节与增强效应。     

前列腺癌MDR—PGP170与突变P53表达

应用单克隆抗体（ＭＤＲ－Ｃ２１９，ＰＡｂ－ＤＯ－１）免疫组化技术对３８例石蜡包埋的前列腺癌与１５例良性前列腺增生（ＢＰＨ）组织切片中的ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３的表达进行了比较研究。结果显示：在３８例前列腺癌切片中ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３蛋白的阳性表达率７１．０％和６０．５％，１５例ＢＰＨ组织中仅３例（２０．０％）显示ＭＤＲ－ＰＧＰ阳性染色，突变Ｐ５３在所有ＢＰＨ中未见阳性染色。在高分化，中等分     

一例前列腺癌P53基因第6外显子中的移码突变

以ＰＣＲ单链构象多态（ＰＣＲＳＳＣＰ）分析及ＰＣＲ直接测序技术，结合免疫组织化学方法，对１例前列腺癌患者治疗前的前列腺穿刺组织及内分泌治疗后复发的手术切除标本中不同部位随机取材的肿瘤组织进行Ｐ５３基因第５，６外显子及Ｐ５３蛋白表达的检测，发现在第６外显子的第２０８密码子存在碱基插入突变（ＧＡＣ→ＧＡＴ），免疫组织化学检测中未发现Ｐ５３蛋白的过量表达。前列腺癌中尚未见有此种Ｐ５３基因突变的文献报道。     

抑癌基因P16蛋白在人前列腺癌中的表达及意义

目的：研究前列腺癌中抑癌基因ＭＴＳ１蛋白产物Ｐ１６表达的情况及临床意义。方法：用免疫组织化学方法（ＳＰ法）检测了６４例前列腺癌和１２例正常前列腺组织中Ｐ１６蛋白的表达情况。结果：３８例前列腺癌Ｐ１６蛋白表达表达阳性（５９．４％）,其中高分化癌阳性率为９０．０％（１８／２０）,中分化癌为７２．２％（１３／１８）低分化癌为２６．９％（７／２６）,随着前列腺癌恶性程度的增加Ｐ１６蛋白表达阳性率显著降低,     

MTS1基因在人BPH中突变缺失的初步研究

目的探讨ＭＴＳ１基因在人前列腺增生症（ＢＰＨ）发病机制中的作用和变异情况。方法用ＰＣＲ银染ＳＳＣＰ技术检测１８例正常前列腺和３８例ＢＰＨ中抑癌基因ＭＴＳ１各外显子的纯合性缺失和突变。结果１２例ＢＰＨ出现ＭＴＳ１基因缺失,总缺失率为３２％;正常前列腺组织中有１例出现ＭＴＳ１基因缺失,缺失率为６％,两者之间差异有显著性（Ｐ＜００５）;无１例有ＭＴＳ１基因的突变。结论ＢＰＨ的发病机制可能与ＭＴＳ１的纯合性缺失有关,未见有突变发生。应对ＭＴＳ１基因在人ＢＰＨ中的作用作更深入的研究     

Ki-67、p16在胃肠道平滑肌肿瘤中表达的相互关系

目的　探讨胃肠道平滑肌肿瘤（ Ｇ Ｉ Ｓ Ｍ Ｔ） 人抗增殖细胞核抗原 Ｋｉ６７ 、抑癌基因ｐ１６ 表达的临床病理意义及其相互关系。方法　采用微波修复抗原及免疫组化 Ｓ Ｐ 法检测人抗增殖细胞核抗原 Ｋｉ６７ ，免疫组化 Ｓ Ｐ 法检测抑癌基因ｐ１６ 在８６ 例 Ｇ Ｉ Ｓ Ｍ Ｔ 中的表达情况。结果　 Ｋｉ６７ 表达按平滑肌瘤，平滑肌肉瘤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的顺序依次明显上升（ Ｐ ＜ ０ ．０１） ，而ｐ１６ 的表达却依次明显下降（ Ｐ ＜０ ．０５） 。同时， Ｋｉ６７ 、ｐ１６ 的表达与肿瘤的良恶性生长方式、肿瘤大小、中心有无坏死亦有明显的关系（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。 Ｋｉ６７ 低表达组的５ 年生存率明显高于高表达组（ Ｐ ＜ ０ ．０５） ，ｐ１６ 阳性表达组的５ 年生存率明显高于阴性表达组（ Ｐ ＜ ０ ．０５） 。结论　 Ｋｉ６７ 、ｐ１６ 在 Ｇ Ｉ Ｓ Ｍ Ｔ 中表达呈相反趋势， Ｋｉ６７ 、ｐ１６ 可作为判断 Ｇ Ｉ Ｓ Ｍ Ｔ 良恶性、恶性程度、转换及预后的客观指标。     

大肠癌患者粪便中C-erbB-2扩增和p53突变的检测及临床意义

目的　建立大肠癌患者粪便 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变的检测方法,探讨大肠癌的基因诊断的临床意义。 方法　以差异聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 、 Ｐ Ｃ Ｒ单链构象多态性分析（ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ） 银染技术,分别检测大肠癌患者粪便 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变。 结果　１４ 例中查出 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增７ 例（５０ ％ ） ,ｐ５３ 突变８ 例（５７ ％ ） ,二基因联合检出１１ 例（７９ ％ ） 。２ 例粪便潜血试验（ Ｆ Ｏ Ｂ Ｔ） 阴性中,１ 例 Ｃｅｒｂ Ｂ２扩增及ｐ５３ 突变均阳性,另１ 例ｐ５３ 突变阳性。 结论　联合多基因检测能对大肠癌的基因诊断提供更多的帮助,粪便 Ｄ Ｎ Ａ 标本的 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变分析可为筛查尚无出血或 Ｆ Ｏ Ｂ Ｔ 假阴性的大肠癌及大肠癌高危个体的一种新的有效手段。     

p53和c—myc异常表达与胃癌细胞多药耐药性关系的研究

应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法研究６７例胃标本中ｐ５３和ｃｍｙｃ的表达与多药耐药性（ＭＤＲ）的关系。结果显示：本组胃癌中ｐ５３阳性３２例，阳性率４７８％；ｃｍｙｃ阳性３７例，阳性率５５２％；Ｐｇｐ阳性３９例，阳性率５８２％。ｐ５３的异常表达与ｍｄｒ１基因表达呈显著正相关（ｒ＝０６３，Ｐ＜００５），而ｃｍｙｃ和ｍｄｒ１的表达无明显相关。提示ｐ５３异常表达可增加ｍｄｒ１基因的表达，从而使胃癌细胞获得ＭＤＲ表型。     

原发性膀胱癌多肿瘤抑制基因1改变及其意义

为探讨多肿瘤抑制基因１（ＭＴＳ１）在原发性膀胱癌发生发展中的作用，采用ＰＣＲＳＳＣＰ和ＤＮＡ直接测序方法，对１８例膀胱移行细胞癌进行ＭＴＳ１分析。结果１８例原发性膀胱癌中没有发现ＭＴＳ１纯合性缺失，但发现２例点突变。表明原发性膀胱癌的发生与ＭＴＳ１的失活相关     

前列腺癌中P53基因突变及蛋白表达的研究

运用免疫组织化学ＬＳＡＢ法（链菌素－生物素标记法），结合ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（ＰＣＲ限制性片段长度多态）、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（ＰＣＲ单链结构多态）技术，探讨了３４例前列腺癌穿刺标本中Ｐ５３蛋白表达及基因（５～８外显子）突变情况，发现３４例前列腺场中７例有Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率为２０．６％。２０例前列腺良性增生及１０例正常前列腺组织中Ｐ５３蛋白表达均为阴性（Ｐ＜０．０５），在前列腺癌高、中分化组及前列腺癌低、未分化组Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为５．３％及４０％（Ｐ＜０．０５），在ＰＣＲ－ＲＦＬＰ中提示１例前列腺癌中有Ｐ５３突变，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ中提示３例Ｐ５３基因突变（５～６外显子），一例无Ｐ５３基因扩增产物，高度怀疑为Ｐ５３基因的缺失，３４例前列腺癌中，ＣＴ及骨扫描提示有转移者为１０例，其中５例为Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率５０％，与非转移组阳性率比较Ｐ＜０．０５。本研究表明Ｐ５３基因突变参与前列腺癌的发生发展过程，与其转移的生物学行为关系密切。分析了以上不同方法在检测Ｐ５３基因突变中的价值。     

经颅磁刺激运动诱发电位在脊柱脊髓损伤的临床应用研究

目的评价经颅磁刺激运动诱发电位（ＴＭＳＭＥＰ）在脊柱脊髓损伤诊断中的作用。方法测定２１例完全性脊髓损伤患者、３５例不完全性脊髓损伤患者双侧胫前肌与腓肠肌的ＴＭＳＭＥＰ,随访６个月～２年,以２０例正常成人ＴＭＳＭＥＰ作对照。结果２１例完全性脊髓损伤患者中,１９例双侧胫前肌及腓肠肌ＴＭＳＭＥＰ消失,随访截瘫无恢复;２例圆锥损伤有异常ＴＭＳＭＥＰ,截瘫及ＴＭＳＭＥＰ基本恢复。３５例不完全性脊髓损伤患者中,每例均可记录到１块以上靶肌的ＴＭＳＭＥＰ,随访３３例,截瘫及ＴＭＳＭＥＰ均有不同程度的恢复,其中术前２５块靶肌肌力０级而有异常ＴＭＳＭＥＰ,术后肌力除２块无恢复外,其余均有明显恢复或正常。术后ＴＭＳＭＥＰ的恢复时间和程度均较体检所见早且明显。结论ＴＭＳＭＥＰ测定对于脊髓损伤的诊断和预后的估计,有重要的临床应用价值     

P21、P185、P53蛋白表达及ras、P53基因突变与膀胱癌的关系

为探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为的关系，采用免疫组织化学方法及分子生物学技术，检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例ｒａｓ、Ｐ５３基因突变。结果表明：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性分别为５１例（６２．２％）、４８例（５８．５％）、２６例（３１．７％）。Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期呈正相关（Ｐ＜０．０１）；Ｐ１８５蛋白阳性率与膀胱移行细胞癌分级、分期呈负相关（Ｐ＜０．０５）。膀胱移行细胞癌组织中１５例（３９．５％）有Ｈａｒａｓ癌基因第１２位密码子突变；１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变，其中全部有第２８０位密码子ＧＣ突变；３例合并有２４８密码子突变；１例有２４９密码子点突变。Ｈａｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因点突变与膀胱癌病理分级和临床分期呈显著正相关（Ｐ＜０．０５）；与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）；且死亡率高于点突变阴性者。６例既有Ｈａｒａｓ基因突变，又有Ｐ５３基因突变的病例中４例死亡。     

抑癌基因p16在胃肠道平滑肌肿瘤的表达临床病理意义

目的 探讨抑癌基因Ｐ１６表达与胃肠道平滑肌肿瘤（ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｔｕｍｏｒｓ,ＧＩＳＭＴ）良恶性、恶性程度、转移及预后的关系。方法 采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测了８６例ＧＩＳＭＴ患者中抑癌基因Ｐ１６的表达情况。结果 Ｐ１６表达率的差异采用Ｘ＾２检测。患者生存率分析采用Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ法及Ｌｏｇ－ｒａｋ检验。Ｐ１６的表达率按平滑肌瘤１、２、３级依     

肾上腺肿瘤P53及c—myc癌基因表达研究

为探讨肾上腺肿瘤发病机理，为鉴别肿瘤良恶性及其分级分期提供依据，收集３４例肾上腺恶性肿瘤应用ＳＰ法作Ｐ５３及ｃｍｙｃ免疫组化检测，并与２５例肾上腺良性瘤及１２例非瘤肾上腺组织对比。结果显示：肾上腺恶性瘤Ｐ５３阳性率４７１％，良性瘤８０％，非瘤组织无表达；肾上腺恶性肿瘤ｃｍｙｃ阳性率３８２％，良性瘤及非瘤组织无表达；Ｐ５３表达与肾上腺恶性瘤临床分期相关，ｃｍｙｃ与其临床分期不相关，均可用于良恶性瘤鉴别。     

抗前列腺特异膜抗原单克隆抗体的前列腺癌免疫病理研究

目的 观察前列腺特异膜抗原（ＰＳＭ）在前列腺癌（ＰＣａ）中的表达情况,探讨其与前列腺癌病理组织学分级及与内分泌治疗效果的关系,方法 采用ＥｎＶｉｓｉｏｎ＾ＴＭ两步法免疫组织化学染色方法,用ＰＳＭ单克隆抗体Ｅｄ－５对３６例前列腺癌（Ｐｃａ）、１０例正常前列腺组织、１０例前列腺良性增生、６是性前列腺炎、３８例非前列腺肿瘤（包括膀胱癌、肾透明细胞癌、睾丸肿瘤等）进行染色。结果 ＰＳＭ在正常前列腺组织、慢     

PCR-SSCP银染色法检测膀胱癌患者尿脱落细胞P53基因突变

采用ＰＣＲＳＳＣＰ银染色法检测５８例膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞Ｐ５３基因５８外显子突变。结果发现健康者和非膀胱癌患者的尿脱落细胞均无Ｐ５３基因突变，１９例膀胱癌患者尿脱落细胞存在Ｐ５３基因突变，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱癌分别为０％（０／１６），２５％（７／２８）和８６％（１２／１４），Ｐ＜００１；表浅性（ＰＴｉｓ～Ｔ１）和浸润性膀胱癌（ＰＴ２Ｔ４）分别为１１％（４／３６）和６８％（１５／２２），Ｐ＜００１；初发和复发膀胱癌分别为９％（２／２２）和４７％（１７／３６），Ｐ＜００１；单发和多发膀胱癌分别为３１％（１２／３９）和３７％（７／１９），Ｐ＞００５。结论：ＰＣＲＳＳＣＰ银染色法是一种可靠、快速、实用的Ｐ５３基因突变检测方法。Ｐ５３基因突变主要发生在高级、期的膀胱癌，与膀胱癌的早期复发有密切关系，而与其多灶性无关。Ｐ５３基因突变的检测对预测膀胱癌的进展，复发的早期诊断具有重要的临床意义     

肿瘤标记物的表达与前列腺癌侵袭和转移的关系研究

为探讨肿瘤标记物的表达与前列腺癌侵袭和转移的关系。本文用免疫组化方法测定前列腺癌３９ 例和前列腺增生１５ 例标本的 Ｂ Ｃ Ｌ２ 蛋白、 Ｋｉ６７ 、 Ｅ Ｃａｄｈｅｒｉｎ 、 Ｍ Ｍ Ｐ１ 、 Ｍ Ｍ Ｐ２ 、 Ｍ Ｍ Ｐ３ 表达,分析肿瘤标记物的表达与前列腺癌分期和分级的关系。结果 Ｋｉ６７ 、 Ｂ Ｃ Ｌ２ 、 Ｅ Ｃａｄｈｅｒｉｎ 及 Ｍ Ｍ Ｐ２ 的实验组和对照组的表达比较统计学上有显著性差异; Ｂ Ｃ Ｌ２ 、 Ｅ Ｃａｄｈｅｒｉｎ 及 Ｍ Ｍ Ｐ２ 的表达与前列腺癌的分级相关;而 Ｅ Ｃａｄｈｅｒｉｎ 及 Ｍ Ｍ Ｐ２ 的表达与肿瘤的分期相关。结论认为 Ｂ Ｃ Ｌ２、 Ｅ Ｃａｄｈｅｒｉｎ 及 Ｍ Ｍ Ｐ２ 可以作为判断前列腺癌的侵袭和转移的参考指标。     

MMP2及MMP9在膀胱癌中的表达及在侵袭转移中的作用

目的探讨ＭＭＰ２及ＭＭＰ９在膀胱癌中的表达及在侵袭转移中的作用。方法采用原位杂交方法观察人膀胱移行细胞癌（ＴＣＣＢ）ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＴＭＭＰ１、ＴｉＭＰ１、ＴｉＭＰ２ｍＲＮＡ表达。结果ＴＣＣＢ组织中ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＴＭＭＰ１、ＴｉＭＰ１及ＴｉＭＰ２表达显著高于正常膀胱上皮,其中ＭＭＰ２及ＭＭＰ９表达增加较ＴｉＭＰ２及ＴｉＭＰ１更显著。阳性表达细胞在肿瘤间质界面较多。随分级升高,ＭＭＰ２、ＭＭＰ９及ＭＴＭＭＰ１表达呈增加趋势,而ＴｉＭＰ１及ＴｉＭＰ２表达呈下降趋势。死亡患者ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＴＭＭＰ１表达有显著升高,而ＴｉＭＰ１及ＴｉＭＰ２有显著下降。结论ＭＭＰ２及ＭＭＰ９参与ＴＣＣＢ侵袭和转移,具有较高的预后价值。     

前体药物甲氨喋呤—α—肽对前列腺癌细胞的细胞毒作用

研究前列腺癌的导向酶前体药物疗法（ＡＤＥＰＴ），在体外观察前体药物甲氨喋呤α肽对前列腺癌细胞生长、凋亡的影响。用固相合成法合成了前体药物甲氨喋呤α苯丙氨酸（ＭＴＸαＰｈｅ）和甲氨喋呤α精氨酸（ＭＴＸαＡｒｇ），并对前列腺癌细胞ＰＣ３、ＰＣ３ｍ进行了细胞毒性及周期动力学分析。用高效液相色谱及质谱分析，ＭＴＸαＰｈｅ可被羧肽酶Ａ（ＣＰＡ）水解并且完全释放出ＭＴＸ。经体外对前列腺癌细胞的毒性试验，前体药物基本上对细胞无毒，经ＣＰＡ水解后其活性ＭＴＸ细胞毒性大于前体药物１００倍以上。对前列腺癌细胞具有显著抑制作用，Ｓ期比率明显低于对照组，Ｇ０／Ｇ１期比率高于对照组，细胞增殖指数明显减低，细胞并发生凋亡。认为ＭＴＸαＰｈｅ是一较理想的前体药物。     

多药耐药基因在泌尿系统肿瘤细胞系中的表达

目的检测泌尿系统肿瘤多药耐药基因及其产物的表达。方法对肾颗粒细胞癌细胞系ＧＲＣ１，肾透明细胞癌细胞系ＲＣＣ９４９，膀胱移行细胞癌细胞系ＢＩＵ８７、Ｔ２４、ＥＪ，前列腺癌细胞系ＰＣ３ｍ和对照的白血病细胞系ＨＬ６０进行免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测。结果只有ＧＲＣ１同时表达Ｐ糖蛋白（ＰＧＰ）和ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ，其他肿瘤细胞系均无表达。结论泌尿系肿瘤细胞系多数无ＰＧＰ也没有ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ水平的表达，只有ＧＲＣ１例外