外周血树突状细胞中HCV复制的证据

HCV肝外复制导致机体抗病毒免疫力低下 ,可能是丙型肝炎慢性化原因之一。树突状细胞 (DCs)作为专职抗原提呈细胞 ,能够诱发特异性免疫反应 ,DCs 是病毒的最好靶位。选择HCV阳性患者 2 4例 ,分离其外周血树突状细胞 (PBDCs) ,应用RT PCR技术检测其中的HCV基因序列 ,2 4份样品中检测到 6份阳性 ,并且 ,2 4份样品中检测到 3份复制链HCVRNA。选择1例 ,分析其HCV准种在PBDC分布 ,结果显示 ,主要的氨基酸序列和高变区 1和糖蛋白E2 的理化特性均不同于血清中的病毒株。通过这些资料提示 ,在HCV的自然感染过程中 ,PBDCs成为一个HC…     

商陆抗病毒蛋白对感染细胞模型中HCV复制的影响

目的探讨商陆抗病毒蛋白(PAP)对丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞模型中 HCV 的抑制作用。方法用 HCV 阳性血清感染人肝癌细胞株 HepG2细胞.制成 HCV感染细胞模型,用不同浓度的 PAP 干预该模型;利用荧光定量 PCR 法分别于药物干预后48h、96h、144h 检测培养细胞及上清液中 HCV RNA 含量,同时以不同浓度干扰素(IFN)处理该模型作为对照。结果 PAP 处理 HepG2感染 HCV细胞模型后,细胞内 HCV RNA 含量在48h、96h、144h 各组间与对照组相比有显著差异(P<0.01)。在第48h,HCVRNA 含量100μg/ml 组和10μg/ml 组<1μg/ml 组<0.1μg/ml 组<0.01μg/ml 组及对照组;在第96h,HCV RNA含量100μg/ml 组和10μg/ml 组<1μg/ml 组<0.1μg/ml 组和0.01μg/ml 组<对照组;在第144h,HCVRNA含量100μg/ml 组及10μg/ml 组<1μml 组<0.1μg/ml 组、0.01μg/ml组及对照组。培养上清液中 HCV RNA 含量各组间在48h时与对照组相比差异无显著性(P>0.05),第96h,培养上清液中 HCV RNA 含量各组间差异显著(P<0.05)。100μg/ml组及10μg/ml 组<1μg/ml 组<0.1μg/ml 组、0.01μg/ml 组及对照组;第144h 时,培养上清液中 HCV RNA 含量各组间差异显著(P<0.01),100μg/ml 组、10μg/ml 组及1μg/ml 组<0.1μg/ml 组、0.01μg/ml 组及对照组。PAP 对 HCV 的抑制作用随 PAP 浓度的增加而增强,以100μg/ml 组对 HCV的抑制作用最强。IFN 干预该模型亦得出相似结果,以3.0×10~4IU/ml 组对 HCV 抑制作用最强。PAP 与 IFN 均以第48h 的抑制效果最好,在48h、96h 及144h时,PAP 对 HCV的抑制作用显著高于 IFN(P<0.01)。实验浓度的 PAP 未引起细胞死亡或脱壁,对细胞的形态、生长也无明显影响。结论 PAP 对 HCV 复制有明显的抑制作用,且作用强于IFN。实验浓度的 PAP 对细胞形态及生长无明显影响。     

调节性T细胞与持续性HCV感染

急性丙型肝炎患者容易转变为持续性HCV感染.近年来的研究表明,在慢性HCV感染中存在具有调节功能的T细胞亚群,它们在HCV感染的发病机制中起重要作用.此文就目前有关调节性T细胞的分化和功能,及其在持续性HCV感染中的意义和作用机制等研究进展作一综述.     

调节性T细胞与持续性HCV感染

急性丙型肝炎患者容易转变为持续性HCV感染。近年来的研究表明,在慢性HCV感染中存在具有调节功能的T细胞亚群,它们在HCV感染的发病机制中起重要作用。此文就目前有关调节性T细胞的分化和功能,及其在持续性HCV感染中的意义和作用机制等研究进展作一综述。     

末梢血单个核细胞被HCV感染

我们调查了丙型肝炎患者末稍血单个核细胞(PBMC)被HCV感染的情况。用逆转录——套式PCR法检测了HCV RNA正、负链。22例受试者的PBMC中检出HCV RNA正链12例(54.5％),其中5例(22.7％)负链也阳性。结果提示,在丙肝患者的PBMC中存在着HCV的活动性感染和复制,表明了HCV的肝细胞外感染。     

HIV/HCV混合感染者与HCV感染者感染HCV基因型分析*

目的 使用二代测序技术检测广州地区人类免疫缺陷病毒（HIV）/丙型肝炎病毒（HCV）混合感染者和HCV感染者HCV基因型,了解本地区HCV基因型的流行特点。方法 在233例HCV感染者中,包括95例HIV/HCV混合感染者和138例HCV感染者,使用Illumina Miseq平台PE300模式对HCV Core和NS5B片段进行测序,采用生物信息学分析确定HCV基因型,对测序结果提示混合基因型感染的样本,使用NS5A基因型特异引物进行验证。结果 HIV/HCV混合感染者静脉吸毒感染构成比显著高于HCV感染者（77.7%对19.6% P<0.001）,HCV感染者输血感染的构成比显著高于HIV/HCV混合感染者（48.6%对3.2% P<0.001）;HIV/HCV混合感染者HCV Core基因片段平均数据量为（15456±6689） reads,HCV感染者为（14323±5321） reads,两组无显著差异（P>0.05）;HIV/HCV混合感染者HCV NS5B基因片段平均数据量为（16432±3467） reads,HCV感染者为（17611±5632） reads,也无显著差异（P>0.05）;本组228例（97.9%）HCV感染者为单一HCV基因型感染,HIV/HCV混合感染者HCV 6a型和3b型感染率显著高于HCV感染者（分别为47.4%对26.8%,P=0.001和13.7%对3.6%,P=0.005）,HCV 1b型感染率显著低于HCV感染者（20.0%对59.4%,P<0.001）;在233例入组的HCV感染者中,发现5例（2.1%）为混合基因型感染,其中4例为HIV/HCV混合感染者,1例为HCV感染者。结论 广州地区HIV/HCV混合感染者与HCV感染者感染HCV基因型构成比存在差异,其临床意义还需要探讨。     

β细胞复制的分子机制

β细胞复制是维持β细胞量的重要形式.本文从Cyclin(细胞周期蛋白)、PDK(磷脂酰肌醇-3-激酶,phosphatidylinositol-3-kinase)、AKT(蛋白激酶B,protein kinase B)、GSK3(糖原合成酶激酶3,glycogen synthase kinase 3)和Wnt信号转导通路,以及抑癌蛋白menin因子等角度讨论β细胞复制的分子机制.     

外源HCV核心基因表达载体在HepG2中蛋白表达的亚细胞定位

目的研究HCV全长（天然）核心蛋白（C蛋白）和成熟C蛋白在HepG2细胞内的亚细胞定位，为进一步研究C蛋白与宿主细胞蛋白因子相互作用提供实验依据。方法设计HCV全长和成熟核心基因引物，以pBRTM／HCV1-3011为真核表达载体为模版行PCR；将PCR扩增产物酶切纯化后定向插入pEGFP-C1的BeglⅡ和EcoRⅠ位点，得到能表达全长HCV核心蛋白（C191aa．）和成熟核心蛋白（C173aa．）的真核表达载体pEGFP-C1-C191、pEGFP-C1-C173；将扩增pEGFP-C1-C191、pEGFP-C1-C173质粒转染到HepG2细胞中，28h、5d在荧光显微镜下观察两种C蛋白的亚细胞定位。5d后再用免疫细胞化学法观察两种C蛋白在HepG2细胞中着色现象。结果HCV核心基因PCR产物和构建的pEGFP-C1-C191、pEGFP-C1-C173经扩增测序证实。pEGDP-C1-C191转染HepG2细胞28h后融合荧光全长C蛋白C191主要出现在核膜和胞质中，少部分出现在胞核及其膜中；而pEGDP-C1-C173转染HepG2细胞28h后主要定位在核中和核膜上。但pEGDP-C1-C191转染HepG2细胞5d后，其表达的融合荧光蛋白主要出现在核内和核膜上，少量在胞质中；而成熟C蛋白C173则仍然在胞核内及核膜上。pEGDP-C1-C转染HepG2细胞5d后进行免疫细胞化学显示，C191蛋白和C173蛋白主要在核中、核膜着色，胞质有少量着色。结论HCV全长C蛋白的亚细胞定位是一动态过程，先出现在胞质中和核膜上，最后定位在核中和核膜上；成熟C蛋白主要定位在核中和核膜上。这种现象为解释瞬时转染HCV不同长度C基因对p53／p21通路作用出现相反结果奠定基础。     

丙型肝炎合并弥漫大B细胞淋巴瘤1例报告

<正>HCV是一种嗜肝及嗜淋巴病毒,多项流行病学研究^[1-4]表明,HCV阳性患者弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)患病率高于HCV阴性患者。本文报道1例丙型肝炎合并DLBCL病例,以提高临床医生对该合并症的早期发现、早期诊断及治疗。     

Safety of interferon β treatment for chronic HCV hepatitis

Hepatitis C is a major cause of liver-related morbidity and mortality worldwide. In fact, chronic hepatitis C is considered as one of the primary causes of chronic liver disease, cirrhosis and hepatocellular carcinoma, and is the most common reason for liver transplantation. The primary objectives for the treatment of HCV-related chronic hepatitis is to eradicat einfection and prevent progression of the disease. The treatment has evolved from the use of m-interferon (IFNα) alone to the combination of IFNα plus ribavirin, with a significant improvement in the overall efficacy, and to the newer PEG-IFNs which have further increased the virological response, used either alone or in combination with ribavirin. Despite these positive results, in terms of efficacy, concerns are related to the safety and adverse events. Many patients must reduce the dose of PEG-IFN or ribavirin, others must stop the treatment and a variable percentage of subjectsare not suitable owing to intolerance toward drugs. IFNβ represents a potential therapeutic alternative for the treatment of chronic viral hepatitis and in some countries it plays an important role in therapeutic protocols. Aim of the present paper was to review available data on the safety ofIFNβ treatment in HCV-related chronic hepatitis. The rates of treatment discontinuation and/or dose modification due to the appearance of severe side effects during IFNβ are generally low and in several clinical studies no requirements for treatment discontinuation and/or dose modifications have been reported. The most frequent side effects experienced during IFNβ treatment are flu-like syndromes, fever, fatigue and injection-site reactions. No differences in terms of side-effect frequency and severity between responders and non-responders have been reported.A more recent study, performed to compare IFNβ alone or in combination with ribavirin, confirmed the good safety profile of both treatments. Similar trends of adverse event frequency have been observed in subpopulations such as patients with genotype-lb HCV hepatitis unresponsive to IFNα treatment or with HCV-related cirrhosis and patients with acute viral hepatitis. If further studies will confirm the efficacy of combined IFNβ and ribavirin treatment, this regimen could represent a safe and alternative therapeutic option in selected patients.     

糖尿病治疗的革新-β细胞的复制

1型糖尿病和2型糖尿病的共同特征都是β细胞量的减少及其分泌功能紊乱.通过促进β细胞复制来增加β细胞量可能将成为糖尿病治疗领域的革新.本文着重探讨调控β细胞复制药物的最新进展.     

外源抗病毒基因沉默补偿性提高Huh-7细胞克隆HCV复制容许性

HCV在野生型人肝细胞瘤Huh-7细胞中复制效率低,但能在某些Huh-7细胞亚克隆中大量复制。我们在前面的研究中证明抑制HCV复制的细胞转录因子cAMP应答原件结合蛋白3样因子1的沉默允许HCV在Huh7细胞亚克隆HRP1细胞中的复制。干扰素诱导抗病毒基因MX1沉默可以使另一个Huh-7亚克隆HRP4     

肥胖与HCV治疗失败有关

据Medscape．com6月15日报道（原载Hepatology2006；43：1177-1186），肥胖病人合并慢性丙型肝炎时，当由脂肪组织增多导致的病态被纠正后，其预后较好。     

载脂蛋白B基因多态性及血脂水平与慢性丙型肝炎的相关性

目的:探讨载脂蛋白B(Apo B)基因Xba Ⅰ位点多态性和血脂水平与慢性丙型肝炎之间的关系．方法:通过病例对照研究设计,采用聚合酶链式反应- 限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术观察77例慢性丙型肝炎患者和62例健康对照者的Apo B基因Xba Ⅰ位点的多态性,采用全自动生化分析仪进行肝功、血脂水平的分析比较．结果:慢性丙型肝炎组和对照组Apo B基因Xba Ⅰ位点 X X-,X-X-基因型构成不等,慢性丙型肝炎组X 等位基因频率低于对照组(0．071 vs 0．121,P=0．136),且病例组中肝硬化组X 等位基因频率低于慢性肝炎组,但未显示统计学的显著差异．病例组中不同病毒载量组间 Apo B基因Xba Ⅰ位点基因型分布存在显著差异,HCV RNA≥80 000 copies／L组X 等位基因频率低于HCV RNA<80 000 copies／L组(0．048 vs 0．179,P=0．035)．病例组中X X-基因型的血清胆固醇(CHO)水平、低密度脂蛋白(LDL)水平及Apo B水平均高于X-X-组,而且 Apo B水平的差异具统计学显著性(P=0．019);血清高密度脂蛋白(HDL)水平低于X-X-组,但无统计学差异．慢性丙型肝炎患者血清Apo B水平和LDL水平与血清HCV RNA水平之间均呈直线负相关关系(分别为r= -0．538,P=0．005;r=-0．460,P=0．016),但与谷丙转氨酶(ALT)水平无相关性．结论:Apo B基因Xba Ⅰ位点的多态性与我国人群对 HCV的易感性没有直接联系,但与慢性丙型肝炎患者的病毒载量有关．X 等位基因频率可影响慢性丙型肝炎患者Apo B水平．慢性丙型肝炎患者血清LDL水平和 Apo B水平与血清HCV RNA水平显著相关．     

HCV感染的免疫应答

病毒感染引起的初次免疫反应是非特异反应,如NK细胞活力增强、IFN分泌增多等。初次感染几天后,获得性免疫反应变为主要反应。它有3种有效“武器”:CTL的杀伤作用、CD~(4 )辅助作用、抗体的中和或杀伤作用。每种“武器”识别病毒的抗原有所不同,3种“武器”在被感染者体内均有不同程度的激活。①CD~(8 )细胞在清除病变细胞方面起重要作用。被感染的细胞通过MHC-Ⅰ类分子和β-2微球蛋白组成的复合物在细胞表面递呈抗原,CD~(8-)、CTL能特异性地识别这类内源性抗原。但是,     

丙型肝炎病毒对人B淋巴细胞系的感染及其形态学研究

目的：研究HCV对人B淋巴细胞的感染,建立HCV感染的丙型肝炎患者B淋巴细胞模型（CBCL）,并进行HCV的形态研究,方法：用EB病毒转化B细胞建立B细胞系,以逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）,免疫组织化,原位杂交方法检测B细胞系上清液及细胞内的HCV抗原及HCVRNA,并通过电镜对HCV进行形态研究,结果：细胞系上清液中HCVRNA呈阳性,细胞内HCV抗原及HCVRNA均呈均呈阳性,电镜观察结果发现细胞内存在65nm和100nm圆形球病毒颗粒,并可见病毒芽生形成现象,结论：HCV可感染人B淋巴细胞并在其中复制,病毒在感染细胞胸质空泡部位合成和组装,以芽生方式进入胸质空泡形成病毒颗粒。     

慢性丙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的特征及临床意义

目的 探讨外周血淋巴细胞亚群在慢性丙型肝炎患者中变化的特征及其临床意义。方法 选取2018年1月至2022年7月入院诊治慢性丙型肝炎患者138例,同期健康体检者72例。根据临床表现将患者分为单纯慢性丙型肝炎组58例,丙型肝炎肝硬化失代偿组31例和丙型肝炎早期肝硬化组49例,比较患者和健康对照组临床特征、淋巴细胞计数以及多种亚群所占的百分比。结果 慢性丙型肝炎组ALT、AST和总胆红素水平分别29.6(18.2,47.8)U/L、33.6(24.4,50.1)U/L和25.5(18.5,63.6)μmol/L,显著高于对照组的21.5(16.8,26.5)U/L、23.5(15.7,30.2)U/L和16.6(13.6,26.1)μmol/L,而Hb水平为78.2(64.2,105.3)g/L,显著低于对照组的97.3(78.1,118.9)g/L,(均P<0.05)。单纯慢性丙型肝炎组CD45⁺CD3⁺CD4⁺细胞的绝对值、CD45⁺CD3⁺CD8⁺...     

老年人输血后HCV感染状况的调查

老年人各器官功能减退,免疫功能低下,易发生感染,为探讨老年人输血(浆)后丙型肝炎病毒感染状况,采用EIA法检测有输血史半月以上的老年人30例,现报告如下。资料与方法: 一、病例选择 30例为本院内外科1990年至1992年4月住院,曾有输血(浆)半月以上的老年人及本科现症老年病人。既往均无肝炎病史,年龄60～74岁,平均66岁,另选10例正常健康人为对照组。根据采血时是否已发生输血后肝炎,分成发病、未发病2组。