4种抗原用于斑点免疫金银染色试验诊断日本血吸虫病的比较

采用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)试验对4种日本血吸虫抗原的敏感性及特异性进行比较。结果显示粗提成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA)检测40例日本血吸虫病人血清抗体的敏感性均达100.0％,40例正常人血清的可疑阳性反应分别为2.5％、0、2.5％和0,40例肝吸虫病人血清的可疑交叉率分别为2.5％、0、2.5％和0,表明在高敏感的IGSS检测系统中,粗提成虫抗原的敏感性和特异性与部分纯化者和虫卵抗原无显著性差异(P>0.05)。     

日本血吸虫抗原的纯化及其应用价值的研究 Ⅰ.虫卵抗原提纯的方法及其敏感性和特异性的初步比较

本文介绍了日本血吸虫卵四种抗原组分的提纯方法,并比较其敏感性和特异性。这四种抗原组分是:1.超速离心(100,000g,90分钟)可溶性虫卵抗原(U-SEA);2.超速离心沉淀后经高氯酸沉淀的可溶性虫卵抗原(U-C-SEA);3.U-C-SEA再经SephadexG-100柱层析的第1蛋白峰(U-C-SEA_1));4.将上述1项经100,000g超速离心沉淀后,其沉淀物再经尿素溶解的非水溶性虫卵抗原,即尿素溶解性虫卵抗原(JEU)。上述四种虫卵抗原组分经ELISA-OT些检测,敏感性方面,它们无显著差异(P>0.05)。但由于U-SEA方法简便。故值得进一步研究。JEU特异性比其它三种抗原为优。但因试验例数不多,尚需通过现场考核,始能评价。高速离心虫卵抗原H-SEA(12,000rpm,30分钟)与其经SephadexG-100往层析的第1蛋白峰H-SEA_1比较。后者敏感性优于前者(P<0.05)。     

日本血吸虫抗原的纯化及其应用价值的研究——Ⅱ.虫卵抗原五种提取液圆盘电泳的初步比较

用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分析血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)五种提取液:H-SEA、U-SEA、H-SEA_1、U-C-SEA_1、JEU.其显示的电泳区带分别为8、6、1、1、1条。其中 H-SEA_1显有1条区带,具有纯度较高,糖蛋白性质的抗原组分。用 ELISA 法检测血吸虫特异性抗体,它有较高的敏感性与特异性.其纯化方法简便有效,操作过程主要是经高速离心后用高氯酸处理,沉淀除去非糖蛋白物质,然后经葡萄糖凝胶柱层析。尿素溶解性虫卯抗原(JEU)亦显示1条电泳区带.     

不同抗原在酶标记免疫吸附试验(ELISA)检测曼氏血吸虫病中的应用

<正> 作者用七种不同的曼氏血吸虫抗原,对曼氏血吸虫病人的特异抗体进行试验,以达到对 ELISA 有效抗原成份进行研究。制备下列七种不同的曼氏血吸虫抗原。①成虫抗原(AWA)②超速离心的成虫抗原(AWA-UC)③成虫膜抗原(TAA)④三氯醋酸提取的成虫多糖类循环抗原(AWA-TCA)⑤可溶性虫卵抗原(SEA)⑥(?)球蛋白 A 纯化的可溶性卵抗原,其成     

日本血吸虫微粒体抗原的研究——Ⅰ、成虫微粒体的制备及其抗原性质的初步报告

血吸虫病的血清诊断通常用成虫或虫卵的可溶性抗原。鉴于宿主对寄生虫的免疫反应不仅是对可溶性抗原产生抗体,曾用高浓度尿素溶液对血吸虫卵匀浆的离心沉淀物进行再提取,得到的尿素溶解性抗原在与宿主抗体的反应中显示的活力较常用的水溶性虫卵抗原(SEA)高。这种尿素溶解性抗原是大分子量蛋白质的复杂混合物,来自细胞的各种颗粒成分,为进一步阐明颗粒性抗原的性质,我们从日本血吸虫成虫中分离出微粒体部分。以此作为抗原,用ELISA法测定宿主的抗体,效果良好。     

血吸虫病间接红细胞凝集试验的标准化研究——抗原的筛选及标准化

分别用日本血吸虫的虫卵可溶性抗原(SEA)、成虫尿素提取抗原(AUA)、成虫表皮膜抗原(ATA)以及SEA与AUA、SEA与ATA的混合抗原致敏绵羊红细胞,并用于检测198例日本血吸虫病人血清,IHA的阳性符合率分别为95.45％、84.67％、90.23％、98.08％、96.25％;检测100例健康人血清,结果全部阴性;检测191例肺吸虫病,旋毛虫病、华枝睾吸虫病和囊虫病患者血清,其总交叉反应率分别为13.61％(SEA)、3.14％(AUA)、4.71％(ATA)、8.37％(SEA+ATA)和3.66％(SEA+AUA)。结果表明:SEA+AUA的制备方法简单,并具有较高的敏感性和特异性。     

应用日本血吸虫成虫31/32KD抗原诊断血吸虫病

采用IHA和ELISA对纯化的日本血吸虫成虫31/32KD抗原与虫卵可溶性抗原的诊断特异性和敏感性进行比较。结果表明,前者的特异性高,检测正常人血清未见假阳性反应,与肝吸虫或肺吸虫病人血清无交叉反应;治后一年的阴转率达70％,故疗效考核价值较高。二种抗原的敏感性无显著差异。     

斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗原血清学特性

采用高浓度尿素并以简化方法,从斯氏狸殖吸虫成虫水溶性抗原(PsAWA)制备后的离心沉渣中,已分离、提取出尿素溶解性抗原(PsAWU),效果较满意。本工作用ELISA和对流免疫电泳对PsAWU与PsAWA血清学特性进行了比较分析。 敏感性 用ELISA(间接法)以两种抗原不同浓度(80～0.312 μg/ml)检测阳     

血吸虫病免疫诊断研究某些进展

在经过反复治疗后,人群感染率和感染度均较低的血吸虫病流行区,粪便毛蚴孵化阳性率常明显下降。因此,免疫学诊断方法在防治工作中发挥越来越重要的作用。近年来国内外对血吸虫病免疫学诊断进行了大量研究,取得一些重要进展,现综述如下。一、检测特异性IgE抗体近年来有人尝试检测血吸虫病人血清特异性IgE抗体帮助诊断和临床分期。0 f fesen〔'〕用放射免疫法证明,慢性曼氏血吸虫病人对可溶性尾坳抗原、成虫抗原和虫卵抗原均可产生IgE抗体,但急性病人只对虫卵抗原产生IgE抗体。Lunde〔"〕用ELlsA在13例急性曼氏血吸虫病人中,n例测出抗可溶性虫卵抗原(SEA)的特异性IgE抗休,滴度]:8~     

广西本地华支睾吸虫饱和硫酸铵纯化抗原的应用研究

目前,华支睾吸虫病的确诊一般靠粪检查找虫卵,费时费工常误诊、漏诊.虽然近年来有人采用未经纯化的成虫粗抗原作ELISA,敏感性和特异性有所提高,但效果不太理想,我们参照张夏英等(1)用饱和硫酸铵纯化成虫抗原,所得硫酸铵纯化抗原(AW)与成虫粗抗原作ELISA比较,检测血清中特异性抗体,现将结果报告如下.     

成虫抗原致敏红细胞间接血凝试验诊断血吸虫病的初步观察

间接血凝试验是诊断血吸虫病的一种简便、快速、微量、敏感的方法。其特异性往往取决于抗原的质量。过去国内外学者在以虫卵抗原致敏经醛化固定和鞣酸处理过的红细胞(以下简称常规法)方面作了成功的改进。近年来,国内所应用的致敏抗原多系虫卵冷浸抗原,但虫卵收获量有限,抗原制备手续较繁,抗原的敏感性和特异性往往有批间的较大差异。因此我们仿用Hoshino(1970)方法,并参照北京19175部     

犬钩虫成虫精制抗原皮内试验对钩虫病诊断价值的初步研究

用钩虫浸出液提取抗原皮内试验诊断钩虫病,文献曾有不少报道。Stumberg等所得结果不甚满意,Noda报道的阳性率为81.7%。改进抗原制备方法以提高其特异性和敏感性,是值得研究的一个课题。为此,我们于1980年1～3月试用犬钩虫成虫精制抗原皮内反应诊断钩虫病,获得满意效果。     

华支睾吸虫重组蛋白应用于ABC-ELISA检测特异性循环抗体的研究

目的 评价重组蛋白在华支睾吸虫病诊断上的价值，探索以重组蛋白替代天然抗原用于ELISA等血清学方法诊断华支睾吸虫感染的可能性。方法 分别使用重组华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CysB)与华支睾吸虫成虫可溶性抗原(CAA)，以ABC-ELISA检测华支睾吸虫病、其它寄生虫感染及健康人血清特异性IgG．比较两种抗原用于检测的敏感性与特异性。结果 共检测了112份华支睾吸虫感染血清，使用重组抗原CysB与成虫粗抗原CAA的阳性检出率分别为92．9％(104／112)及94．6％(106／112)；分别检测健康人血清56例、日本血吸虫病血清20例及肺吸虫病血清10例．对于两种抗原，华支睾吸虫特异性IgG检测阴性率均相同．上述三类血清的阴性率分别为96．5％(54／56)、95％(19／20)及90％(9／10)。结论 华支睾吸虫重组蛋白CysB用于血清特异性抗体检测具有较高的敏感性及特异性，与成虫可溶性抗原(CAA)的诊断应用价值相近，有望成为应用于华支睾吸虫病诊断的替代抗原之一。     

肺吸虫抗原應用于皮內試驗的临床診斷的觀察

皮内试验是诊断肺吸虫病的一种简易迅速的辅助方法,而抗原的选择对皮内试验的结果有重要影响。一般常用的是成虫抗原,石垣氏等(1951)报告用患者阳性喀痰浸液作抗原,效果较好。为了观察皮内试验的诊断价值及不同材料制备的抗原效果的比较,我们于1956年9月至1957年5月,在101例经虫卵检查已确诊为肺吸虫病患者身上,分别对几种不同抗原的效果作了对比试验。现将结果报告如下:材料与方法一、抗原的制备1.成虫抗原:干粉抗原和盐水浸液抗     

诊断日本血吸虫病双特异性抗体的制备和应用

目的 制备抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)/辣根过氧化物酶(HRP)双特异性抗体,并应用于日本血吸虫病的诊断.方法杂交瘤方法制备抗SEA和抗HRP单克隆抗体,分别用化学交联剂DTNB和SPDP将IgG1亚类的两种单克隆抗体经消化、还原氧化获得杂合抗体片段F(ab')2,应用于Dot-ELISA检测日本血吸虫患者血清中的循环抗原.结果杂合抗体片段F(ab')2具有同时识别SEA和HRP的双特异性,在Dot-ELISA试验中检测急性日本血吸虫患者,慢性日本血吸虫患者和晚期日本血吸虫患者血清中循环抗原的结果与同株二价抗SEA单克隆抗体的检测结果经统计学处理显示差异无显著性(P＞0.05).结论 IgG1亚类的单克隆抗体可用化学交联法制备出相应的双特异性抗体片段,应用于Dot-ELISA检测日本血吸虫患者血清中的循环抗原,显示了较好的特异性和敏感性;并可减少实验步骤,节约实验时间,为诊断日本血吸虫病提供了快捷的手段.     

广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原分析及其诊断价值的探讨

目的分析广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原,探讨其诊断价值。方法广州管圆线虫成虫匀浆后沉渣经尿素溶解,与成虫水溶解性抗原同时进行SDS-PAGE和Western-blot,分析蛋白谱与抗原谱;用ELISA检测不同样本中相应抗体。结果SDS-PAGE结果显示尿素抗原蛋白条带少于水溶解性抗原;尿素抗原与感染大鼠血清、免疫兔血清和广州管圆线虫病患者血清在32000Mr处均出现强反应带,尿素抗原的反应带条数较水溶性抗原少。两种抗原包被ELISA检测广州管圆线虫病疑似病人血清和感染大鼠血清的阳性率相同;尿素抗原用于检测血吸虫感染小鼠血清的交叉阳性率明显低于水溶性抗原,检测正常大鼠血清、献血员血清及其他非广州管圆线虫感染血清时,假阳性数较水溶性抗原少。结论广州管圆线虫成虫尿素抗原含有32000Mr抗原;广州管圆线虫尿素抗原用于诊断时,与水溶性抗原有同样的敏感性,而特异性高于水溶解性抗原。     

抗华支睾吸虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其初步应用

本文用华支睾吸虫成虫可溶性抗原免疫的BALB/c小鼠与SP_2/o骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆化后获得4株抗华支睾吸虫单克隆抗体杂交瘤细胞。该4株荜克隆抗体与华支睾吸虫成虫抗原作ELISA,结果均为阳性。经交叉试验(ELISA法)证明与日本血吸虫成虫抗原,虫卵抗原和卫氏并殖吸虫成虫抗原均呈阴性反应。4株单克隆抗体免疫球蛋白亚类鉴定除3F_7株为IgG_1外,其余3株均属IgM。初步试用3F_7株单克隆抗体作ELISA双抗体法检测人体华支睾吸虫循环抗原。     

斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗原蛋白组成及活性成份

采用8M尿素和简化方法分离、提取斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗 原(PsAWU),并对该抗原和水溶性抗原(PsAWA)的血清学特性进行了分析比较,结果表明PsAIVU的敏感性高于PsAWA,初步证明具一定的特异性,是一种可实际应用的新型抗原。为进一步分析两种抗原,对其蛋白组成及活性成份进行了初步研究。 氨基酸组成的分析 两种抗原浓度均为1 mg/ml,用稀盐酸加热处理后,以氨基酸分析仪(Beckman公司)进行测定。结果表明两种抗原的氨基酸种类基本一致,但绝大     

日本血吸虫天然抗原分子的柱层析分离纯化与鉴定

目的分离纯化日本血吸虫成虫(AWA)和未成熟虫卵(SIEA)可溶性抗原中的单一蛋白,为血吸虫病免疫诊断、预防提供新的抗原分子。方法柱层析分离纯化成虫和未成熟虫卵可溶性抗原,SDS—PAGE及银染色进行分析鉴定。结果得到了三种不同大小血吸虫分子抗原AwA18000u,SIEA42000u,SIEA130000u。结论实验证明柱层析法是一种快速分离纯化血吸虫单一组分抗原简单而有效的方法。     

日本本血吸虫患者尿液中32kD循环抗原的免疫生物学特征

目的研究日本血吸虫感染者尿液中特异性的诊断抗原，以尿液为样本诊断日本血吸虫病。方法用IgG的亲和层析柱分离和纯化抗日本血吸虫循环抗原抗体并用生物素标记分离纯化的IgG抗体；Western blot检测日本血吸虫虫卵可溶性抗原和日本血吸虫感染者尿液中存在的日本血吸虫主要的循环抗原分子。结果日本血吸虫患者尿液中存在日本血吸虫的特异性循环抗原，Western blot显示其尿液中主要循环抗原分子与虫卵可溶性32kD抗原分子相同。结论日本血吸虫感染者尿液中的32kD循环抗原分子可能来自日本血吸虫虫卵可溶性抗原，可作为血吸虫感染的诊断。