党参皂苷L1对抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠星形胶质细胞损伤的作用

目的：观察扶正固本、益气类中药党参皂苷L1对缺氧缺糖再给氧所致大鼠大脑星形胶质细胞损伤是否有保护作用。 方法：实验于2004-08／2005-05在北京中医药大学东直门医院中医脑病研究室完成。①选用出生1d的Wistar大鼠40只，雌雄不拘。②分离大脑星形胶质细胞进行原代培养。加入含连二亚硫酸钠10mmol／L的无糖Earle液，置37℃体积分数0．05CO2孵箱中孵育90min进行缺氧缺糖处理。然后吸弃Earle液，加入不含连二亚硫酸钠的无血清DMEM培养液，继续置37℃体积分数0．05CO2孵箱中孵育90min进行再给氧处理。③将在相同或不同细胞培养板中的不同培养孔中细胞按随机抽签法分为6组（每10孔或8孔细胞为1组）;正常对照组（正常细胞培养），模型组（进行缺氧缺糖再给氧处理），尼莫地平组[在无糖Earle液和无血清DMEM培养液加入终浓度0．5mg／L尼莫地平[购自山东新华制药股份有限公司，生产批号：0211048，10mL（2mg）／支1，其余处理同模型组]，缺氧缺糖再给氧＋党参皂苷L1高、中、低浓度组[在无糖Earle液和无血清DMEM培养液分别加入质量浓度1．3，0．13和0.013mg／L党参皂苷L1（由北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室采用高效液相色谱法制备法分离得到，含量为96．2％），其余处理同模型组]。测定乳酸脱氢酶漏出率时缺氧缺糖处理后直接测定，而不做再给氧处理。④四唑盐比色法测定细胞存活率，Hoechst33342和碘化丙啶原位双染法荧光显微镜观察细胞形态学变化和细胞坏死率、细胞凋亡率，比色法测定乳酸脱氢酶漏出率。 结果：①荧光显微镜观察细胞形态：尼莫地平组和党参皂苷L1各浓度组与模型组比较均可见红染的坏死细胞数量明显减少，尼莫地平、党参皂苷L1各浓度组与模型组比较凋亡细胞数量无明显变化。②星形胶质细胞存活率：模型组明显低于正常组、尼莫地平组和党参皂甙L1中、低浓度组（F=42．464，P〈0．01）。③细胞坏死率和乳酸脱氢酶漏出率：模型组明显高于其他5组（F=69．344，24．994，P〈0．01）。④细胞凋亡率：模型组明显高于正常组（F=3．311，P〈0．05），与尼莫地平组和党参皂苷L1各浓度组比较，差异不明显（P〉0．05）。 结论：中药党参皂苷L1对缺糖缺氧再给氧造成的星形胶质细胞损伤具有保护作用，可抑制细胞坏死，但对凋亡过程无保护作用。     

党参皂苷L1对抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠星形胶质细胞损伤的作用

目的:观察扶正固本、益气类中药党参皂苷L1对缺氧缺糖再给氧所致大鼠大脑星形胶质细胞损伤是否有保护作用。方法:实验于2004-08/2005-05在北京中医药大学东直门医院中医脑病研究室完成。①选用出生1d的Wistar大鼠40只,雌雄不拘。②分离大脑星形胶质细胞进行原代培养。加入含连二亚硫酸钠10mmol/L的无糖Earle液,置37℃体积分数0.05CO2孵箱中孵育90min进行缺氧缺糖处理。然后吸弃Earle液,加入不含连二亚硫酸钠的无血清DMEM培养液,继续置37℃体积分数0.05CO2孵箱中孵育90min进行再给氧处理。③将在相同或不同细胞培养板中的不同培养孔中细胞按随机抽签法分为6组(每10孔或8孔细胞为1组):正常对照组(正常细胞培养),模型组(进行缺氧缺糖再给氧处理),尼莫地平组[在无糖Earle液和无血清DMEM培养液加入终浓度0.5mg/L尼莫地平[购自山东新华制药股份有限公司,生产批号:0211048,10mL(2mg)/支],其余处理同模型组],缺氧缺糖再给氧 党参皂苷L1高、中、低浓度组[在无糖Earle液和无血清DMEM培养液分别加入质量浓度1.3,0.13和0.013mg/L党参皂苷L1(由北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室采用高效液相色谱法制备法分离得到,含量为96.2%),其余处理同模型组]。测定乳酸脱氢酶漏出率时缺氧缺糖处理后直接测定,而不做再给氧处理。④四唑盐比色法测定细胞存活率,Hoechst33342和碘化丙啶原位双染法荧光显微镜观察细胞形态学变化和细胞坏死率、细胞凋亡率,比色法测定乳酸脱氢酶漏出率。结果:①荧光显微镜观察细胞形态:尼莫地平组和党参皂苷L1各浓度组与模型组比较均可见红染的坏死细胞数量明显减少,尼莫地平、党参皂苷L1各浓度组与模型组比较凋亡细胞数量无明显变化。②星形胶质细胞存活率:模型组明显低于正常组、尼莫地平组和党参皂甙L1中、低浓度组(F=42.464,P<0.01)。③细胞坏死率和乳酸脱氢酶漏出率:模型组明显高于其他5组(F=69.344,24.994,P<0.01)。④细胞凋亡率:模型组明显高于正常组(F=3.311,P<0.05),与尼莫地平组和党参皂苷L1各浓度组比较,差异不明显(P>0.05)。结论:中药党参皂苷L1对缺糖缺氧再给氧造成的星形胶质细胞损伤具有保护作用,可抑制细胞坏死,但对凋亡过程无保护作用。     

星形胶质细胞与雌激素的脑保护作用

目的：认识星形胶质细胞在雌激素脑保护机制中的重要作用。 资料来源：应用计算机检索PubMed数据库1994—06／2005—07期间的相关文章，检索词“estrogen，astrocyte，brain”，并限定文章语言种类为英文。同时计算机检索数据库万方数据库2001-01／2005—10期间的相关文章，检索词“雌激素，星形胶质细胞，脑”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：对资料进行初审，选取试验研究查找全文。纳入标准：①研究原著。②设有对照的动物试验和体外组织细胞培养试验。排除标准：综述文献、重复研究、Meta分析类文章。 资料提炼：共收集到87篇文献，有22篇符合纳入标准。 资料综合：反应性星形胶质细胞可合成雌激素。雌激素可引起胶质源性神经营养生长因子表达的上调，可以使胰岛素样生长因子1及其胰岛素样生长因子1结合蛋白2在脑组织内表达增加，可以上调星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白tRNA、mRNA表达而发挥神经保护和修复作用。雌激素不仅具有雌激素受体介导的基因转录通路，还能够通过增加细胞内Ca^2＋水平等非基因途径快速激活细胞，促进星形胶质细胞对谷氨酸的摄取，影响星形胶质细胞和小胶质细胞在神经炎症反应和神经元退行性疾病中免疫神经递质的表达，影响神经胶质介导的炎症通路而起保护作用。 结论：雌激素与星形胶质细胞在诸多方面存在交互对话，星形胶质细胞在雌激素脑保护机制中发挥重要作用，这将有助于更好地明确和诠释雌激素广泛神经保护的确切机制，而不局限于以往依赖于脑内神经元有限的雌激素受体介导的保护机制，最终更好的指导其临床应用。     

川芎嗪对大鼠星形胶质细胞在氧糖剥夺损伤中的保护作用

目的　探讨川芎嗪对培养大鼠星形胶质细胞在氧糖剥夺损伤中的保护作用及可能机制。方法　利用氧糖剥夺 (OGD)建立星形胶质细胞缺血再灌损伤模型后 ,分别测定细胞培养上清中一氧化氮 (NO)、乳酸脱氢酶 (LDH)浓度。四甲基偶氮唑盐 (MTT)代谢率测定星形胶质细胞活力。免疫组化检测核转录因子 -κB(NF -κB)活化程度。结果　川芎嗪干预组与模型组比较 ,NO分泌量、LDH漏出、细胞活力下降均明显减少 (P <0 0 1) ;P6 5胞核移位明显减少 (P <0 0 1)。结论　川芎嗪对培养大鼠星形胶质细胞在氧糖剥夺损伤中具有保护作用 ,其作用机制之一可能是通过抑制NF -κB活化 ,减少NO分泌来实现的。     

星形胶质细胞在脊髓损伤中的作用及机制

脊髓损伤的治疗是医学领域亟待解决的困难之一。星形胶质细胞在中枢神经系统中发挥着非常关键的作用,可为神经元提供结构支持和营养物质,参与突触形成,维持内环境稳态。脊髓损伤后星形胶质细胞变为反应性星形胶质细胞,而反应性星形胶质细胞增生和迁移可限制脊髓损伤后炎症反应,防止神经功能进一步受损。同时,反应性星形胶质细胞增生是胶质瘢痕形成的关键步骤,而胶质瘢痕作为物理及化学屏障可限制轴突再生。因此,充分了解脊髓损伤后反应性星形胶质细胞的生物学过程和分子机制,对于寻找靶向神经再生的特定分子具有重要意义。     

星形胶质细胞在癫痫发病机制中的作用研究进展

星形胶质细胞（astrocyte,AST）是中枢神经系统主要的大胶质细胞,不仅对神经元起支持、保护、分隔和营养等作用,而且与神经元的功能活动以及损伤与修复过程有密切联系。近年来研究表明AST在癫痫的发病机制中起重要作用,有关AST和癫痫发病之间联系的研究取得了较大进展。本文就癫痫发作后AST的一般生物学特性、细胞形态学、神经递质和细胞因子及其受体、氨基酸代谢和生物化学变化等方面的研究进展综述如下。     

星形胶质细胞连接蛋白在阿尔茨海默病中的作用研究进展

胶质细胞活化是阿尔茨海默病（AD）的一个显著特征,主要表现为星形胶质细胞和小胶质细胞的形态 和功能变化。这种活化与在胶质细胞广泛表达的跨膜蛋白--连接蛋白（Cx）的表达和功能变化有关。在AD 患者的脑组织中,接触淀粉样斑块的星形胶质细胞Cx表达明显增加;在AD小鼠模型APPswe/PS1dE9中也 有同样发现。Cx可以形成半通道（HC）和全通道缝隙连接（GJ）,分别介导细胞内外和细胞之间的小分子物 质交流。在APPswe/PS1dE9小鼠模型中,星形胶质细胞中Cx作为GJ的功能并未改变,但其作为HC可被激活 开放,并介导胶质递质（如ATP和谷氨酸）释放和星形胶质细胞内Ca2+ 浓度升高,从而导致神经元损伤。靶 向星形胶质细胞Cx HC,包括特异性敲除APPswe/PS1dE9小鼠脑中星形胶质细胞的Cx43或使用不同种类 的抑制性药物阻断HC的开放,可减少胶质递质的释放、减轻神经元损伤。本文主要概述近年来星形胶质细 胞Cx在AD发病过程中作用的研究进展,并探讨阻断星形胶质细胞HC开放是否可作为治疗AD的新策略。     

星形胶质细胞的生物学功能与神经元修复

目的：综述星形胶质细胞活化的机制及功能变化特点，为通过活化星形胶质细胞的功能变化来改善神经元修复提供有益的提示。资料来源：用计算机检索Medline，Pubmed，Springer和PML．数据库1995-01／2004-04与星形胶质细胞的生物学功能与神经元修复相关的文章，检索词“astrocyte function／acting，neuron rehabilitation／plerosis”．并限定文章语言种类为English。同时计算机检索“中国全文期刊数据库”1995-01／2004-04与星形胶质细胞活化的机制及功能变化特点相关的文章，限定文章语言种类为中文，检索词“星形胶质细胞生物学功能／活化，神经元发育／营养／修复／损伤”。资料选择：对资料进行初审，纳入标准：选择与“星形胶质细胞生物学功能、活化，神经元发育、营养、修复及损伤”有关文章，在1995年以后发表的文章。排除标准：综述类文章，重复文章。资料提炼：共搜集到201篇相关文章，入选17篇，因为这些文章能包含其他文章的内容，且发表时间为1996／2004期间。资料综合：对检索到的文章的相关信息综合加以概括综述，其中星形胶质细胞生物学功能、活化13篇，星形胶质细胞生物学功能与神经元损伤修复的17篇。结论：星形胶质细胞生物学功能复杂，多途径影响神经元的修复；但对神经元的影响有双重性，有望利用活化后星形胶质细胞功能变化来扬长避短，加速神经元的修复。     

鞘内注射胶质细胞抑制剂对CCD大鼠脊髓星形胶质细胞的影响

[目的]研究鞘内注射氟代柠檬酸(fluorocirrate FC)和米诺四环素(minocychine MC)对背根节慢性压迫模型(the experiment model for chronic compression of dorsal root ganglion,CCD)大鼠脊髓背角星形胶质细胞活化增殖的影响.[方法]采用大鼠脊髓背根节慢性压迫实验模型,96只鞘内1管SD大鼠分为第7天组(A组)和第14天组(B组),每组随机分为六个亚组组,每小组(n=8)包括:假手术(sham)组,CCD组,溶荆磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)组(0.01mmol/L PBS20μL i.t.),FC组(lμmol/LFC 20μL i.t.),MC组(5g/LMC20μL i.t.),MC FC组(lμmol/L FC和5g/L MC混合演20μL i.t.).术后每天给药一次.分别于术后d7和d14运用免疫荧光化学方法观察脊缱背角胶原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.[结果]脊髓背角GFAP阳性表达CCD、PBS、FC组在Ⅰ～Ⅳ层都表达明显.在数目上没有差异性,而MC、MC FC组主要集中在Ⅰ～Ⅱ层,Ⅲ、Ⅳ层在数目上有明显减少.CCD组和PBS组胞体比其余各组明显肥大.[结论]鞘内给药后,慢性神经痛大鼠脊髓背角星形胶质细胞GFAP表达减少,提示小胶质细胞抑制刑MC能很好的抑制星形胶质细胞的活化,小肢质细胞在星形胶质细胞活化的形成和维持中可能起重要作用.     

体外培养大鼠星形胶质细胞缺营养损伤模型的制作

目的制作理想的大鼠星形胶质细胞的损伤模型,观察形态变化。方法使用牛后3d内的SD乳鼠大脑皮质制成细胞悬液后,采用含15％的胎牛血清的DMEM／F12培养基培养,通过差速贴肇和不同速度的摇床及逐渐传代纯化星形胶质细胞。采用PBS缓冲液代替培养基模拟缺营养模型,缺营养3h后恢复营养,观察细胞缺营养前后形态变化。同时使用RT-PCR检测损伤后晕形胶质细胞GFAP mRNA表达的变化来明确缺营养损伤模型中晕形胶质细胞对缺营养损伤的反应。结果缺营养3h后部分细胞胞体变小,胞突变短,个别细胞呈网形,复营养后大多数细胞胞体变大,胞突变长并相互交错,基本恢复缺营养前形态,仍然可见少数细胞死亡漂浮在贴肇细胞层面上。RT-PCR检洲发现损伤后星形胶质细胞GFAPmRNA表达较正常组明显增强,且有统计学意义。结论通过上述方法培养后可获得高纯度的星形胶质细胞,原代星形胶质细胞可耐受一定的缺营养损伤．恢复营养后可基本恢复至损伤前的形态。     

右美托咪啶对大鼠缺氧缺糖海马神经元凋亡的影响

目的:探讨右旋美托咪啶(DEX)在大鼠海马神经元细胞中对缺氧缺糖(OGD)损伤导致的细胞凋亡的影响。方法:取培养8 d的原代新生大鼠海马神经元细胞随机分为4组:正常对照组、OGD模型组、DEX对照组和DEX处理组。建立大鼠原代海马神经元缺氧缺糖/复氧复糖损伤模型,JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(MMP)变化,DCFH-DA染色检测细胞内活性氧(ROS)水平变化。结果:与对照组相比,OGD损伤可明显降低细胞内MMP水平,而右旋美托咪啶预处理可抑制MMP的降低,并可抑制OGD介导的ROS生成。结论:右美托咪啶对大鼠海马神经元OGD损伤具有保护作用,其机制与抑制ROS生成和抑制MMP下降相关。     

人参皂甙Rg1对大鼠海马神经元缺糖氧/复糖氧后氧化损伤的保护作用

目的观察人参皂甙Rg1 对大鼠海马神经元缺糖氧/复糖氧后谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的影响。方法海马神经元培养8~10 d,随机分为正常对照组、模型组、人参皂甙Rg1 低、中、高剂量组(5 μmol/L, 20 μmol/L, 60 μmol/L)。建立大鼠海马神经元缺糖氧/复糖氧模型,复糖氧后6 h 以生物化学法观察各组海马神经元GSH含量和GPx活性的变化;复糖氧后24 h 以Hochest 染色法检测细胞凋亡,并检测各组海马神经元四甲基偶氮唑盐(MTT)代谢率。结果与模型组相比,人参皂甙Rg1中、高剂量组海马神经元GSH含量、GPx活性显著升高,凋亡显著减少,MTT代谢率显著提高(P<0.001),人参皂甙Rg1 低剂量组变化不明显(P>0.05)。结论人参皂甙Rg1 可通过提高缺糖氧神经元GSH含量和GPx活性,发挥脑保护作用。     

细胞周期抑制剂对糖氧剥夺诱导神经元凋亡的保护机制研究

目的:探讨细胞周期抑制剂Roscovitine(Ros)对糖氧剥夺(OGD)诱导的鼠大脑皮质神经元凋亡的保护作用及可能机制。方法:体外培养大鼠皮质神经元,随机分为对照组、OGD1h后恢复糖氧供给(OGD/R)3h、6h、12h、24h组及Ros(100μM)组。Western Blot检测各组神经元磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白(p-Rb)和E2F1的表达情况;免疫荧光细胞化学染色观察OGD/R12h组及Ros组神经元p-Rb表达;TUNEL法检测OGD/R12h组及Ros组神经元凋亡情况。结果:OGD/R各组神经元p-Rb及E2F1的表达均较对照组增高(P<0.05),12h达最高;Ros组p-Rb及E2F1的表达减少,少于OGD/R12h组(P<0.05);Ros组p-Rb和TUNEL阳性细胞率均低于OGD/R 12h组(P<0.01),两组中大部分TUNEL阳性细胞与p-Rb表达共定位。结论:Ros可能通过抑制Rb磷酸化及E2F1介导的凋亡机制来减少缺血缺氧后的神经元凋亡。     

奥硝唑对脂多糖诱导的人牙周膜细胞炎症的抑制作用

【目的】探讨奥硝唑对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(hPDLCs)炎症的抑制作用。【方法】采用酶消化法培养原代 hPDLCs,分为5组：正常组,模型组(10μg/mL LPS),奥硝唑低、中、高剂量组(2,5,10 mg/mL);MTT法检测各组细胞活力;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β),IL-6,基质金属蛋白酶2(MMP2)及 MMP9含量;western blot检测 Toll 样受体(TLR)蛋白表达情况。【结果】与正常组比较,模型组中 hPDLCs 细胞活力下降,细胞上清液中 TNF-α,IL-1β,IL-6, MMP2及 MMP9含量显著提高,TLR4蛋白表达量显著升高,差异均具有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,奥硝唑低、中、高剂量组能提高 hPDLCs 细胞活力,抑制细胞上清液中 TNF-α,IL-1β,IL-6,MMP2及MMP9的分泌,并下调TLR4表达,差异均具有统计学意义(P <0.05)。【结论】奥硝唑能通过 TLR4信号通路抑制 LPS诱导的 hPDLCs炎症。     

葛根素对腹膜透析液诱导的体外培养人腹膜间皮细胞损伤的保护作用

【目的】了解葛根素对腹膜透析液干预下的体外培养的人腹膜间皮细胞增殖活性及转化生长因子β1（TGF-β1）分泌的影响。【方法】体外培养的人腹膜间皮细胞,分对照组、PDS组、A组（葛根素终浓度为50μg／mL）、B组（葛根素终浓度为100μg／mL）、C组（葛根素终浓度为200μg／mL）五组观察。检测各组上清液中TGF-β1的含量以及间皮细胞的增殖活性并比较。【结果】腹膜间皮细胞在PDS干预下,TGF-β1分泌显著增加,添加葛根素再干预的A、B、C组TGF-β1分泌与PDS组比较有显著下降。与PDS组比较,A、B、c纽间皮细胞增殖活性显著升高。【结论】葛根素可以抑制腹膜间皮细胞TGF-β1分泌,拮抗腹膜透析液对腹膜间皮细胞增殖活性的抑制作用。     

罗格列酮对高糖时人肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

【目的】探讨高糖对人肾小球系膜细胞（HRMC）单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响，以及过氧化物酶增殖体激动剂罗格列酮对其影响及作用机制。【方法】将HRMC分为三组处理：①正常对照组（糖浓度5．5mmol／L）；②高糖（30mmol／L）组；③高糖加罗格列酮（5μmol／L，10μmol／L）组。用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测MCP-1mRNA表达，用EIISA方法测定细胞上清MCP-1蛋白浓度。【结果】高糖刺激系膜细胞后MCP-1mRNA表达明显升高，蛋白浓度增加，加入罗格列酮后MCP-1表达明显下降。且随罗格列酮浓度增大，作用更明显。【结论】高糖刺激HRMC，其MCP-1表达增强，可能是糖尿病肾病（DN）发病机制中的一个重要途径。罗格列酮能抑制MCp-1mRNA表达及蛋白合成，说明其具有抑制炎症的作用，在预防DN的发生发展中可能有重要意义。     

急性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞Ca2＋及L型钙电流的影响

【目的】研究急性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞Ca2＋及ICa-L（L-型电压门控钙通道电流）的影响,以探讨钙通道活性改变在急性低氧性肺血管收缩（HPV）反应中所起的作用。【方法】应用全细胞膜片钳技术,于急性酶分离的大鼠单个肺动脉平滑肌细胞上,并用常氧和低氧的细胞浴液持续灌流肺动脉平滑肌细胞,以观察其对大鼠肺动脉平滑肌细胞Ca2＋及ICa-L的影响。【结果】用低氧的细胞浴液灌流肺动脉平滑肌细胞能显著增加肺动脉平滑肌细胞内Ca2＋荧光强度（P〈O．01）,降低相应电压下的ICa-L峰值（P〈0．01）,使电流一电压曲线相对上移。【结论】急性低氧可通过对ICa-L通道的抑制作用,使肺动脉平滑肌细胞膜发生去极化,肺动脉收缩而导致急性肺血管阻力增加,进而产生肺动脉高压。这可能在低氧性肺血管收缩反应中起着重要的作用。     

法舒地尔对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺后突触损伤的影响

目的:探讨法舒地尔(Fasudil)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧糖剥夺(OGD)后突触损伤的影响。方法:培养SH-SY5Y细胞,分为空白对照组、OGD组、OGD+法舒地尔组,各3皿。相差光学显微镜下观察细胞突触损伤及修复的细胞形态;Western-Blot检测ROCKⅡ、磷酸化肌球蛋白磷酸酶(p-MYPT1)、突触后致密物-95(PSD-95)、突触素(Synaptophysin)等蛋白的表达情况。结果:形态学显示法舒地尔可有效修复OGD诱导的神经突触损伤。OGD组ROCKⅡ及p-MYPT1的表达明显高于空白对照组(P0.05),突触素及PSD-95的表达明显低于空白对照组(P0.01)。OGD+法舒地尔组ROCKⅡ及p-MYPT1表达水平低于OGD组(P0.05),而与对照组差异无统计学意义(P0.05);突触素和PSD-95表达水平高于OGD组(P0.01);PSD-95表达水平高于空白对照组(P0.05),突触素的表达与空白对照组差异无统计学意义(P0.05),结论:法舒地尔可有效修复OGD诱导的神经突触损伤,增加PSD-95、突触素的表达,抑制ROCKⅡ及p-MYPT1的表达。     

纤维连接蛋白诱导人胚肺成纤维细胞增殖信号转导机制探讨

【目的】探讨纤维连接蛋白（FN）诱导人胚肺成纤维细胞（HFL1）增殖的细胞外信号调节激酶（ERK）信号转导通路。【方法】用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖情况。采用不同浓度FN刺激HFL1并观察不同浓度下细胞ERK信号转导通路阻断剂PD98059对FN诱导HFL1增殖作用的影响;并用蛋白免疫印记法（Western Blot）观察FN浓度为50ng／mL时,PD98059对HFL1中磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）表达的影响。[结果]FN对HFL1诱导增殖作用呈剂量依赖性升高趋势,在50ng／mL时作用显著;ERK抑制剂PD98059可抑制FN诱导的HFL1细胞增殖。【结论】FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过ERK信号转导途径实现。     

他莫昔芬对小胶质细胞氧糖剥夺后迁移和增殖的影响

目的:观察他莫昔芬(TAM)对氧糖剥夺(OGD)模型中小胶质细胞BV-2增殖和迁移的影响。方法:将BV-2细胞分为对照组(常规正常氧浓度+高葡萄糖+无胎牛血清培养基)、OGD组(1%氧浓度+无糖+无血清培养基)、OGD+TAM组(1%氧浓度+无糖+无血清培养基+TAM),采用划痕试验,通过免疫荧光技术检测小胶质细胞BV-2在不同氧浓度下的增殖和迁移情况。同时观察TAM对小胶质细胞活化的调节作用。结果:与对照组相比,BV-2在OGD后细胞迁移加快(P<0.05);OGD+TAM组迁移较OGD组下降(P<0.05);OGD组Ki67阳性率的BV-2明显高于对照组(P<0.05);OGD+TAM组Ki67阳性率则明显低于OGD组(P<0.05)。结论:缺氧可诱导小胶质细胞活化,雌激素受体拮抗剂TAM能有效抑制这种活化。