慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞IFN-α和IL-12的表达及临床意义

目的检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)α干扰素(IFN-α)的诱导表达及白细胞介素12(IL-12)表达,评价慢性乙肝患者PBMC的细胞免疫功能。方法poly IC体外刺激正常对照组和慢性乙肝病人PBMC,取培养上清利用病毒保护试验测定干扰素治疗前后病人PBMC表达的干扰素抗病毒生物学活性。同时在IFN-α治疗前后,用RT-PCR检测慢性乙肝患者不同干扰素应答组病人PBMC IL-12表达的变化。结果干扰素治疗前应答组病人(n=4)和无应答组病人(n=12)PBMC分泌的干扰素生物学活性显著低于正常对照组(n=10)(P<0.01)。应答组病人PBMC分泌的干扰素活性随治疗时间延长而增加,1个月时已显著高于无应答组病人(P<0.01);无应答组病人PBMC分泌的干扰素活性始终处于低水平。治疗前,应答组和无应答组病人PBMC的IL-12 mRNA水平都显著高于正常对照组(P<0.01);治疗后,应答组病人IL-12水平随治疗时间延长而降低,1个月时已显著低于无应答组病人(P<0.05),无应答组病人IL-12水平始终处于较高水平。结论慢性乙型肝炎病人的细胞免疫功能受损,PBMC不能正常表达IFN-α,但应答组病人经干扰素治疗后IFN-α表达能力逐渐恢复。慢性乙肝患者PBMC IL-12表达与肝脏炎症活动有关。慢性乙肝患者PBMC IFN-α活性检测结果也许可以作为干扰素治疗效果的预测指标。     

重组人白细胞介素12对健康人外周血单个核细胞产生γ干扰素影响的研究

目的建立重组人白细胞介素12（rhIL-12）的生物活性检测方法,观察rhIL-12诱导健康人外周血单个核细胞（PBMC）产生γ干扰素（IFN-γ）的水平与剂量和时间之间的关系,揭示其变化规律。方法rhIL-12供试品刺激健康人PBMC分泌IFN-γ,经国际标准品校正,建立rhIL-12生物活性测定方法。以1ng／mL浓度rhIL-12诱导健康人PBMC,分别于24、48、72、96和120h5个时间点用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定培养上清的IFN-γ水平。测定0．1、0．5和2．5ng／mL3个浓度rhIL-12诱导人PBMC72h后培养上清的IFN-γ水平,用Prism5．0统计软件的重复测量方差分析法对所得数据进行统计学处理。结果rhIL-12供试品的生物活性曲线呈典型S型,IFN-γ含量为最大浓度-半时的供试品浓度（ED50）为（1．008±0．238）ng／mL,供试品rhIL-12效价为7938IU／mL。测定1ng／mL浓度rhIL-12刺激健康人PBMC后5个时间点培养上清中IFN-γ显示,不同个体高峰出现时间有所不同,在高峰出现前均呈现递增趋势。高、中、低3个浓度rhIL-12分别诱导健康人PBMC产生的IFN-γ水平与浓度之间呈显著量效关系,且在0．1ng／mL的极低浓度即可诱生高水平IFN-γ。结论rhIL-12供试品生物活性良好,与国际标准品比对基本一致,不同人群对rhIL-12的应答高峰存在个体差异,以诱生IFN-γ作为评价rhIL-12生物活性的指标具有明显的量效关系。     

重组人白细胞介素12对健康人外周血单个核细胞产生γ干扰素影响的研究

目的建立重组人白细胞介素12(rhIL-12)的生物活性检测方法,观察rhIL-12诱导健康人外周血单个核细胞(PBMC)产生γ干扰素(IFN-γ)的水平与剂量和时间之间的关系,揭示其变化规律。方法rhIL-12供试品刺激健康人PBMC分泌IFN-γ,经国际标准品校正,建立rhIL-12生物活性测定方法。以1 ng/mL浓度rhIL-12诱导健康人PBMC,分别于24、48、72、96和120 h 5个时间点用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清的IFN-γ水平。测定0.1、0.5和2.5 ng/mL 3个浓度rhIL-12诱导人PBMC 72 h后培养上清的IFN-γ水平,用Prism 5.0统计软件的重复测量方差分析法对所得数据进行统计学处理。结果rhIL-12供试品的生物活性曲线呈典型S型,IFN-γ含量为最大浓度一半时的供试品浓度(ED50)为(1.008±0.238)ng/mL,供试品rhIL-12效价为7 938 IU/mL。测定1ng/mL浓度rhIL-12刺激健康人PBMC后5个时间点培养上清中IFN-γ显示,不同个体高峰出现时间有所不同,在高峰出现前均呈现递增趋势。高、中、低3个浓度r...     

尖锐湿疣患者外周血IL-2、IL-12、IFN-γ、IL-4因子水平检测及临床意义

目的探讨尖锐湿疣患者外周血白细胞介素-2(IL-2)、IL-12、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4因子水平的表达及临床意义。方法选取2017年8月至2018年8月该院收治的尖锐湿疣患者50例作为研究组,另选取同期在该院进行体检的健康者50例作为对照组。采用流式细胞仪对两组研究对象外周血IL-2、IL-12、IFN-γ、IL-4及CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+T细胞亚群水平进行检测。结果研究组IL-2、IL-12、IFN-γ、Th1/Th2水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组IL-4水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);研究组CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+水平均高于对照组,CD8^+水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论尖锐湿疣患者外周血IL-2、IL-12、IFN-γ、IL-4因子水平存在明显异常。     

溃疡性结肠炎患者PBMC体外白细胞介素12诱生水平研究

目的探讨白细胞介素12(IL-12)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达水平。方法以外周血单个核细胞(PBMC)体外培养诱生IL-12。以放射免疫法分析检测IL-12的水平,将健康人(HC)与溃结患者进行比较研究。其中HC组55例,UC组45例(静止期与轻、中、重组例数分别为9、18、11、7)。结果UC组与HC组IL-12水平分别为(301.22±82.01)ng/L和(110.00±53.95)ng/L,P<0.001。UC组静止期与轻、中、重三组比较IL-12水平依次为:(142.01±47.05)ng/L、(248.73±60.63)ng/L、(295.08±80.40)ng/L、(335.20±119.95)ng/L,P值分别小于0.02、0.02、0.001。而静止期与HC组相比P>0.05。按病变累及范围,全结肠组与左半结肠组IL-12水平分别为:(312.83±106.25)ng/L、(264.85±67.97)ng/L(P>0.05)。结论UC活动期患者IL-12活性明显高于对照与静止期患者,且随病情加重呈上升趋势。IL-12活性与病变累及范围无关。     

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞特异产生γ-干扰素的研究

目的:研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血单个核细胞(PBMC)经HBV表面抗原(HBsAg)刺激后产生γ-干扰素(IFN-γ)的免疫反应.方法:选择免疫清除期、免疫耐受期慢性乙肝患者和HBsAb阳性健康体检者各10例,Ficoll分离液法分离PBMC,用HBsAg刺激培养.利用ELISA方法检测细胞培养上清液中IFN-γ的含量;用酶联免疫斑点实验(ELISPot)检测PBMC中IFN-γ产生细胞的频率;用流式细胞术检测PBMC中IFN-γ+的细胞亚群.结果:经HBsAg刺激培养后,免疫耐受组PBMC产生IFN-γ含量、IFN-γ产生细胞的频率明显低于正常对照组、免疫清除组(均P<0.05),免疫清除组则明显高于正常对照组(P<0.05).免疫清除组、正常对照组PBMC中IFN-γ+的细胞亚群以CD4-CD8+、CD4-CD8-细胞为主,且免疫清除组高于正常对照组;免疫耐受组仅CD4-CD8-表达IFN-γ,且低于另两组.结论:免疫清除期与免疫耐受期慢性乙肝患者PBMCs经HBsAg刺激后产生IFN-γ的免疫反应不同.     

患者血清IL-12、IFN-γ及LDH在急性髓细胞性白血病化疗中的意义

目的探讨急性髓细胞性白血病（AML）患者化疗前、后血清白细胞介素-12（IL-12）、γ干扰素（IFN-γ）及乳酸脱氢酶（LDH）的变化及其意义。方法按照化疗后是否完全缓解分为完全缓解组（CR）和未完全缓解组（UCR）。采用酶联免疫吸附试法（ELISA）法和全自动生化分析仪酶法,分别测定并比较AML患者化疗前、后血清IL-12、IFN-γ及LDH的变化。结果初诊患者化疗前血清IL-12、IFN-γ含量显著低于正常,LDH高于正常;血清IL-12、IFN-γ、LDH含量与化疗的疗效相关,化疗过程中IL-12、IFN-γ持续降低和LDH持续升高者预后不良。化疗后CR组血清IL-12、IFN-γ含量较化疗前明显增高,LDH明显降低;化疗后UCR组血清IL-12和IFN-γ没有明显增高,LDH无明显下降;而化疗后CR组与UCR组比较,血清IL-12、IFN-γ、LDH差异有显著性（P＜0.05）。结论（1）化疗效果与化疗后血清IL-12、IFN-γ和LDH的含量相关。（2）血清IL-12、IFN-γ等细胞因子的免疫学失衡可能是AML发病的重要因素,也为急性白血病对化疗的原发性耐药研究提供了一条新的途径。（3）血清IL-12IFN-γ和LDH在一定程度上反映了AML的预后。     

体外培养人单个核细胞分泌IFN-γ水平的观察

目的对体外培养的人脐带血和外周血单个核细胞(MNC)以植物血凝素(PHA)刺激,观察培养上清中IFNγ含量变化。方法常规Ficoll离心法分离人MNC,接种24孔培养板,同时加入PHA,体外培养5d,计数不同培养时间的细胞总数;ELISA法测定不同培养时间上清中的IFNγ含量。结果经PHA刺激后,脐血MNC数量约扩增了12倍,单位细胞量所分泌的IFNγ是健康人血浆水平的30倍。而健康人外周血MNC数量约扩增了5倍。单位细胞量所分泌的IFNγ是健康人血浆水平的15倍。结论与人外周血MNC相比,人脐带血MNC对PHA刺激具有良好的反应性,经PHA刺激后可分泌更高水平的IFNγ,表明其在移植物抗白血病(GVL)效应中起一定作用。     

抗病毒治疗对Ⅰb型慢性丙肝患者PBMC IL-10、IL-12水平变化影响的研究

目的研究派罗欣联合利巴韦林抗病毒治疗对Ⅰb型慢性丙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10、IL-12水平的影响,分析IL-10、IL-12水平变化与病毒学应答结果之间的相关程度,探讨IL-10、IL-12作为抗病毒疗效评价指标的可能性。方法选取血清HCV-RNA阳性的Ib型慢性丙肝患者60例,依据病毒载量将其分为3组,低病毒载量组(1.0×103IU/ml     

拉米夫定对慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ、IL-4的影响

目的观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)等细胞因子的动态变化。方法用酶联免疫吸附(ELISA)方法分别检测117例慢性乙型肝炎患者在拉米夫定治疗前,治疗后第13、26、39、52周时的血清IFN-γ和IL-4水平。结果拉米夫定治疗后完全应答组IFN-γ/IL-4水平接近或高于对照组;部分应答组和无应答组IFN-γ/IL-4水平则低于对照组。结论拉来夫定治疗慢性乙型肝炎过程中,随着治疗时间的延长,乙型肝炎患者Th1类细胞因子IFN-γ水平逐渐增高;Th2类细胞因子IL-4水平逐渐降低,提示拉米夫定治疗慢性乙型肝炎不但抑制病毒繁殖,而且长时间治疗可增强Th1类细胞优势应答,抑制Th2类细胞功能。     

rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究

摘要本研究旨在初步观察重组人白介素-12（rhIL-12）对急性辐射损伤猴造血系统的防护和治疗作用,为同类型病人的临床救治提供实验依据。在体外实验中,观察了不同浓度rhIL-12（0、1、5、25、125和625ng/ml）对来自人和健康成年猴骨髓造血祖细胞集落形成能力的影响。在体内实验中,用11只经3．0Gy全身照射后90d活存猴再经致死剂量^60Coγ（6．0Gy）射线全身1次照射以建立重度骨髓型急性放射病动物模型。模型动物被随机分为照射对照组（n=4）、单次给药组（n=3）和分次给药组（n=4）。单次给药组于照射后2h皮下注射rhIL-124μg／kg,分次给药组分别于照射后2h和3、6、9d皮下注射rhIL-121μg/kg,对照组于皮下注射同样体积的PBS。观察照射后动物活存情况和外周血象变化。体外培养结果显示,不同浓度rhIL-12可明显促进正常猴和人骨髓单个核细胞形成各系造血祖细胞集落,特别是CFU-E和CFU-GM最为明显。照射对照组动物于照射后22d内全部死亡,死亡动物平均活存时间为（20．3±1．2）d;rhIL-12单次给药组3只动物全部存活,rhIL-12分次给药组1只动物于照射后17d因贫血死亡。与对照组比较,rhIL-12治疗能明显提高动物存活（P=0．018）,并促进外周血白细胞数、血红蛋白水平、血小板以及网织红细胞数的恢复（P〈0．05）。结论：rhIL-12可明显促进灵长类骨髓造血祖细胞体外集落形成,并明显促进重度骨髓型急性放射病猴的造血功能恢复,提高动物存活率。     

哮喘患者血清中IL-4，IL-12，IL-13，IFN-γ，IgE水平的测定及其临床意义

目的 探讨哮喘发作期和缓解期血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-13(IL-13)和干扰素(IFN-γ)与免疫球蛋白E(IgE)的浓度变化及其意义.方法 采用生物素亲合素双抗体夹心和间接ELISA法分别对60例哮喘急性发作期和缓解期患者进行血清IL-4,IL-12,IL-13,IFN-γ和IgE水平的测定.结果 60例哮喘急性发作期和哮喘缓解期患者血清IL-4,IL-13水平均高于正常对照组(P<0.01);而血清IFN-γ,IL-12水平均较对照组(40例)显著下降(P<0.01);哮喘急性发作期患者血清IL-4,IL-13水平高于哮喘缓解期患者(P<0.01),而IFN-γ,IL-12水平均较缓解组显著下降(P<0.01);在哮喘发作期患者血清中IL-4,IL-13水平与IgE含量呈显著正相关,而IL-12,IFN-γ水平与IgE呈显著负相关.结论 细胞因子分泌紊乱、网络失衡是哮喘病急性发作的重要因素,而细胞因子IL-4,IFN-γ,IL-12,IL-13等在其发生、发展中起着重要的调控作用.     

血清IL-10、IL-12和IFN-γ水平对急性白血病的诊断价值

目的研究急性白血病(AL)患者血清中白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ(IFN-γ)水平变化,探讨其在AL诊疗中的价值。方法选取2010年5月至2016年9月该院初治白血病患者39例,其中急性髓性白血病(ALL)28例,急性淋巴细胞性白血病(AML)11例,收集患者性别、年龄、外周血白血病细胞总数以及骨髓和外周血白血病细胞比例等临床指标。同时选取30例正常血液样本作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中IL-10、IL-12和IFN-γ的含量。结果 39例AL患者血清IL-10、IL-12和IFN-γ水平分别为(28.45±8.07)、(24.77±9.63)和(21.34±8.76)ng/L,与对照组相比,AL患者血清IL-10水平显著升高(P0.01),而IL-12和IFN-γ水平则明显降低,差异有统计学意义(P0.01)。经化疗后27例完全缓解(CR)患者血清IL-10较AL组明显下降(P0.01),且IL-12和IFN-γ水平与之相比显著升高(P0.01),而12例未缓解(NR)患者与化疗前相比均无明显差异(P0.05)。此外,除患者年龄外,不同性别及病理类型间的血清IL-10、IL-12和IFN-γ水平均无明显差异(P0.05),且IL-10与IL-12和IFN-γ水平均显著负相关(P0.01),IL-12和IFN-γ水平显著正相关(P0.01)。结论急性白血病患者化疗前血清IL-10与对照组相比显著升高,而IL-12和IFN-γ水平均显著下降,且与化疗疗效存在一定关联,提示其可能对急性白血病的早期诊断具有意义。     

慢性丙型肝炎患者血清HCV RNA含量与IFN-γ及IL-4的变化关系

IFN-γ、IL-4分别属于TH1和TH2型细胞因子,它们在慢性丙型肝炎（CHC）的发病机制中起重要作用。HCV RNA含量一定程度上代表了患者HCV的载量。我们通过对CHC患者外周血清中HCV RNA含量、外周血单个核细胞（PBMC）中IFN-γ、IL-4含量的检测,探讨其间的关系,了解机体的免疫状态,为CHC治疗提供理论依据。结果报道如下。     

慢性乙型肝炎患者T细胞亚群、IL-18、IFN-γ变化与血清HBV DNA水平分析

目的研究慢性病毒性乙型肝炎患者T细胞亚群、IL-18、IFN-γ变化与其血清HBV DNA的水平,探讨病毒复制程度与机体免疫功能的关系。方法应用流式细胞仪直接免疫荧光法检测60例乙型肝炎病毒感染者、25例健康对照外周血T细胞亚群百分率;用ELISA法检测血清中IL-18、IFN-γ水平;用荧光定量PCR法检测乙型肝炎感染者血清HBV DNA。结果根据HBV感染者血清中HBV DVA载量的高低,将它们分为低拷贝组[(103～104)copy/mL]、高拷贝组[(>104～108)copy/mL]以及DNA阴性组(<103copy/mL)。HBV感染者外周血CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值较健康对照组明显减低,且随着HBV DNA载量的增加,CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值降低更明显。CD8+T细胞百分率较健康对照组明显升高,乙型肝炎患者IL-18、IFN-γ表达水平明显高于健康对照组,且随着HBV DNA载量的增加,IL-18、IFN-γ增加更明显。结论慢性病毒性乙型肝炎患者存在免疫调节紊乱,HBV DNA复制增加,进一步加重乙型肝炎病毒感染者T细胞亚群和细胞因子的失衡,CD4+/CD8+比值、血清IL-18、IFN-γ的动态变化可及时提示HBV感染者机体免疫功能的变化。     

IL—2单独或联合IL—12增强G—CSF动员的人外周血单个核细胞抗肿瘤活性的研究

为了探讨IL-2单独或联合IL-12体外处理后,G-CSF动员的人外周血单个核细胞（G-PBMC）抗肿瘤活性的变化,以NK细胞敏感的K562细胞和NK细胞抵抗的Raji细胞为靶细胞,采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法测定IL-2单独或联合IL-12诱导后G-PBMC的抗肿瘤活性,同时采用流式细胞术分析诱导前后G-PBMC的细胞表型,研究结果表明：（1）未经处理的G-PBMC的抗肿瘤活性很低;单独应用IL-2诱导24小时即可以增强G-PBMC的抗肿瘤活性,当诱导72小时后G-PBMC的抗肿瘤活性进一步增强;（2）IL-2联合IL-12诱导后的G-PBMC抗肿瘤活性显高于单用IL-2诱导后;（3）IL-2单独或联合IL-12诱导后G-PBMC中CD3,CD8抗原表达增加,而CD56抗原表达仅在IL-2联合IL-12诱导7天后增加,结论提示：IL-2激活的G-PBMC具有显的抗肿瘤活性,联合IL——12诱导后其抗肿瘤活性进一步增强。     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞IL-12和α干扰素受体1的检测及意义

全球约有3．5亿人血清中携带乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原,中国的HBV感染情况尤其严重,携带率高达109,6以上。目前临床治疗慢性乙型肝炎的主要方法依然是干扰素（IFN）结合核苷类药物,虽然重组干扰素的应答率经过多年来不断的技术改进而有所增强,但患者的反应率还是不能令人满意。慢性乙型肝炎患者对干扰素治疗应答出现差异的原因还不十分清楚,为此我们试图从机体自身的外周血单个核细胞（PBMC）研究出现这种差异的机制,这里我们对用IFN-α治疗的不同慢性乙型肝炎患者PBMC分泌的IL-12和α干扰素受体1的表达作了检测和分析。     

IL-21单独或联合IL-15／IL-2对G-CSF动员人外周血单个核细胞体外增殖和抗肿瘤活性作用研究

本研究探讨IL-21单独或联合IL-15／IL-2对G—CSF动员的人外周血单个核细胞（G-PBMNC）体外增殖和抗瘤活性的影响，评价IL-21及相关细胞因子组合在肿瘤免疫治疗方面的可行性。应用IL-21单独或联合IL-15／IL-2体外培养G—PBMNC，用CCK-8法进行细胞增殖分析；以白血病细胞株K562为靶细胞。用CFSE／PI流式双染法检测其对肿瘤的杀伤作用；用流式细胞术分析免疫细胞表型。结果显示：培养72小时后单独IL-21因子组对靶细胞杀伤活性与IL-2结果相近；当效靶比为25：1时IL21＋IL15／IL21＋IL15＋IL2组与IL21＋IL2组相比杀伤能力有显著增强（P〈0．05）；效靶比50：1时，细胞因子联合应用组均显著高于细胞因子单独应用组（P〈0．05），以IL21＋IL15＋IL2诱导效果最佳。复苏冻存的G-PBMNC处理结果与新鲜的G—PBMNC结果基本-致。细胞因子组和对照组相比CD3、CD4和CD8抗原表达有所增加，以IL21＋IL15组的CD4、CD3^- 56^＋和CD3^＋56^＋抗原表达增加最为显著（P〈0．05）。结论：IL-21可增强G—PBMNC的体外杀伤活性，联合IL-15可更显著提高G—PBMNC的抗瘤活性。     

心力衰竭患者血浆白细胞介素-12、白细胞介素-18和γ-干扰素水平变化及意义

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-18(IL-18)及γ-干扰素(IFN-γ)在心力衰竭发生与发展中的作用及相互关系。方法应用酶联免疫吸附法测定36例心力衰竭患者和20例正常人血浆IL-12、IL-18和IFN-γ水平,并分析他们之间的相互关系以及与心力衰竭病情程度的关系。结果心力衰竭患者血浆IL-12、IL-18及IFN-γ水平分别为(181.5±38.5)ng/L、(378.4±185.3)ng/L及(1.86±0.52)ng/L,均显著高于正常人水平[(22.4±4.5)ng/L、(228.5±77.5)ng/L、(0.08±0.03)ng/L](P<0.01),而三者相互呈密切正相关(P<0.05或P<0.01),且3种细胞因子水平在不同心功能的心力衰竭患者间亦有显著性差异(P<0.05或P<0.01),并随心功能的恶化而升高(P<0.05或P<0.01)。结论IL-12、IL-18和IFN-γ可能共同构成一局部网络,并可能参与心力衰竭的发生及发展过程。监测三者的血浆水平可能对判断心力衰竭病情有一定的参考价值。     

外周血单个核细胞Blimp1、IFN-γ、IL-10水平与重症肺结核患者预后的相关性分析

目的 探讨外周血单个核细胞(PBMC)Blimp1、干扰素γ(IFN-γ)、白介素10(IL-10)水平与重症肺结核患者预后的相关性.方法 收集2017年8月-2019年8月本院的重症肺结核患者92例的临床资料进行回顾性分析,根据临床预后的不同将其分为存活组(n=60)与死亡组(n=32),比较两组一般资料情况,观察临...