NAC调控HIF-1α抑制胶质瘤细胞生长的作用研究

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)通过抑制低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达,进而抑制SHG-44胶质瘤细胞生长的作用研究。方法对照组为常规培养的SHG-44胶质瘤细胞,NAC组为常规培养基础上加入N-乙酰半胱氨酸,两组培养48 h后实时荧光定量逆转录酶聚合酶联反应(RTPCR)检测HIF-1αmRNA的表达,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测SHG-44胶质瘤细胞增殖情况,流式细胞仪检测SHG-44胶质瘤细胞凋亡情况。结果 NAC组HIF-1αmRNA的表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。MTT检测SHG-44胶质瘤细胞增殖情况,NAC组明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。NAC组早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 N-乙酰半胱氨酸具有下调低氧诱导因子-1α表达,进而抑制SHG-44胶质瘤细胞生长,加速凋亡的作用。     

HIF-1α和hTERT shRNA双基因抑制脑胶质瘤生长的实验研究

目的 研究靶向缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)的短发夹RNA(shRNA),对裸鼠皮下人脑胶质瘤中HIF-1α、hTERT基因表达的抑制作用,及其对肿瘤增殖和细胞凋亡的影响.方法 体外培养人脑胶质瘤U251细胞;建立人脑胶质瘤裸鼠皮下接种模型;将HIF-1α shRNA、hTERT shRNA质粒转染入移植瘤中,观察肿瘤生长情况;HE染色法观察肿瘤组织的病理改变;Western blot检测HIF-1α、hTERT蛋白表达;Annexin V+PI双染流式细胞仪检测凋亡情况.结果 成功建立稳定的裸鼠U251皮下移植瘤模型;治疗5周后HIF-1α shRNA、hTERT shRNA组双基因干扰组肿瘤体积较单基因干扰组及对照组明显减小,抑瘤率为84.2%;病理结果显示双基因干扰组肿瘤生长受到抑制,微血管散在稀疏,大量肿瘤细胞坏死及凋亡;Western blot显示治疗组相应蛋白表达受抑制,双基因干扰组影响二者表达;流式细胞仪检测双基因干扰组肿瘤细胞凋亡率明显高于其他组(P＜0.01).结论 HIF-1α shRNA和hTERT shRNA均可在裸鼠移植瘤体内抑制相应蛋白表达及胶质瘤增殖生长,促进细胞凋亡,而双基因干扰作用更强.     

脑出血灶周缺氧诱导因子-1α的表达及其神经细胞凋亡的实验研究

目的探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxiainduciblefactor-1α,HIF-1α)在脑出血灶周中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法分别应用免疫组织化学技术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的X-dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测37例脑出血灶周脑组织中HIF-1α的表达与神经细胞凋亡。结果37例脑出血灶周脑组织中HIF-1α阳性率为40.6%,HIF-1α在出血量>60ml时高表达,其阳性率为88.9%,与其它出血量(30～45ml、45～60ml)阳性率的表达比较有显著意义(P<0.05)。HIF-1α表达与手术时间明显相关,随着手术时间的推迟而增加,差别有显著性意义(P<0.05)。HIF-1α表达与AI呈正相关(n=15,r=0.56)(P<0.01)。结论脑出血后HIF-1α的表达与出血量及手术时间相关,为判断脑出血灶周缺血半暗带的存在提供了依据;对神经细胞凋亡有促进作用。     

胶质瘤中PKCα表达及与细胞增殖和凋亡的关系

目的探讨人脑胶质瘤中 PKCα的表达情况,以及与细胞增殖和凋亡的关系.方法 37例人脑胶质瘤标本,星形细胞瘤25例和胶质母细胞瘤12例,正常脑组织10例作为对照.PKCα和Ki-67的检测用免疫组化,细胞凋亡用TUNEL.用Ki-67 LI和AI对增殖和凋亡进行评估.结果 PKCα在胶质瘤及正常组织中均有表达,前者为67.6%,后者为30.0%,二者有显著性差异,星形细胞瘤阳性率为60%,胶质母细胞瘤为83.3%,不同肿瘤分型中PKCα表达有差异,PKCα表达与细胞增殖和生长显著相关,与凋亡无明显相关.结论人脑胶质瘤中PKCα过度表达,与肿瘤发生和生长关系密切.     

血清GFAP、HIF-1α、VEGF水平与脑胶质瘤患者预后的关系

目的探讨血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)水平与脑胶质瘤患者预后的关系。方法选取75例脑胶质瘤患者为观察组,50例健康体检者为对照组,对比两组血清中GFAP、HIF-1α、VEGF水平差异,根据治疗效果和3年生存情况进行分组,观察不同临床疗效及预后患者血清GFAP、HIF-1α、VEGF水平检测结果。结果观察组血清GFAP、HIF-1α、VEGF水平显著高于对照组(P0.05);观察组中病理分级Ⅲ-Ⅳ级患者血清GFAP、HIF-1α、VEGF水平高于Ⅰ-Ⅱ级患者(P0.05)。不同疗效等级患者血清GFAP、HIF-1α、VEGF水平存在显著差异(P0.05);死亡组患者血清GFAP、HIF-1α、VEGF水平明显高于生存组(P0.05)。血清GFAP、HIF-1α、VEGF高表达患者生存率均小于低表达患者(P0.05)。结论脑胶质瘤患者血清GFAP、HIF-1α、VEGF水平明显升高,其表达量与肿瘤病理学分级、临床治疗效果以及患者预后均存在密切联系。     

HIF-1α、VEGF在脑出血灶周的表达意义

目的 观察血肿周边脑组织中HIF-1α与VEGF蛋白的表达情况并探讨二者表达的相关性.方法 SD大鼠35只,随机分为对照组、假手术组、脑出血组,脑出血组又分为6h、24h、72h、7d和21d 5个亚组,每组5只.采用自体血脑内注射法建立脑出血动物模型,应用免疫组化的方法检测脑出血后不同时间血肿周边脑组织中HIF-1α与VEGF蛋白的表达情况.结果 脑出血后,HIF-1α和VEGF蛋白的表达均随时间呈进行性增加,并于出血后24～72h达到高峰且维持到第7天.与对照组和假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).脑出血后,HIF-1α和VEGF蛋白的表达呈正相关.结论 HIF-1α与VEGF蛋白在血肿周边脑组织中均有表达,并具有一致性,可能与脑出血后微循环的重建有关.     

伽玛刀治疗大鼠脑胶质瘤前后VEGF、PCNA表达及细胞凋亡研究

目的:通过应用伽玛刀对C6大鼠脑胶质瘤的治疗,检测治疗前后反映血管生成情况的血管内皮生长因子(VEGF)、反映细胞增殖情况的增殖细胞核抗原(PCNA)等的动态变化规律以及它们与凋亡的关系,探讨这些治疗效应在放射外科中的意义。方法:应用免疫组化及细胞凋亡方法进行统计学分析。结果:治疗后VEGF和PCNA表达降低,凋亡率明显高于对照组。结论:伽玛刀对于大鼠脑胶质瘤有明显的治疗作用。     

脑胶质瘤中细胞凋亡及相关基因Fas、Survivin表达研究

目的探讨脑胶质瘤中细胞凋亡及Fas、Survivin在凋亡中的意义.方法应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated-deoxy uridine-5'- triphosphate-X nick end labeling, TUNEL)检测细胞凋亡,免疫组化链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物 (strept avidin-biotin peroxidase complex, SABC)法检测Fas、Survivin和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA).结果凋亡指数(apoptosis index, AI)随胶质瘤的恶性程度增高而增高(P<0.001).AI/PI则随着胶质瘤级别增高而减小(P<0.001).Fas阳性组的AI较Fas阴性组显著增高(P<0.01).Survivin阳性组的AI较Survivin阴性组显著减低(P<0.05).低AI(<0.94)组与高AI(>0.94)组的术后1年生存率的差异有显著意义(P<0.05).死亡组与存活组的AI差异无显著意义(P=0.34),而两组的AI/PI有显著差异(P<0.001).多因素Logistic回归模型分析显示,病理、Fas、Survivin、AI、AI/PI和手术与预后相关(P<0.01).结论 AI可作提示预后的指标,对脑胶质瘤的生物学行为及肿瘤分级有指导意义.肿瘤级别较低、Fas 阳性、Survivin阴性、AI<0.94%、AI/PI较大、手术全切的患者预后较好.     

缺氧诱导因子-1α在胶质瘤中的研究进展

缺氧诱导因子1(Hypoxiainduciblefactor1,HIF1)是调节细胞缺氧反应的主要转录因子,HIF1α为其活性调节亚单位。HIF1α在胶质瘤中表达显著增加,并与胶质瘤的恶性进展密切相关。HIF1为异二聚体结构,调控多种与细胞缺氧反应相关基因的表达;氧水平、相关癌基因与抑癌基因及细胞因子等均可调节HIF1α蛋白的表达;HIF1α和肿瘤内新生血管形成、细胞代谢、细胞凋亡及细胞坏死之间均存在密切关系,并可影响放化疗对肿瘤的疗效;以HIF1α为靶点的药物或基因治疗正在成为胶质瘤基础和临床研究关注的热点。     

复方丹参片对慢性脑缺血大鼠脑内HIF-1α表达的影响

目的研究中药复方丹参对慢性脑缺血大鼠脑内HIF-1α表达的影响,探讨复方丹参治疗慢性脑缺血的作用机制。方法采用永久性双侧大鼠颈总动脉结扎术(2VO)制备大鼠慢性脑缺血模型。术后每日给予复方丹参0·75g/kg灌胃,对照组给予同等量蒸馏水,1次/d,共8周。用免疫组化法观察2VO大鼠脑内HIF-1α。结果治疗组大鼠脑内HIF-1α表达明显增强。结论复方丹参片可显著增加2VO大鼠脑内HIF-1α表达,促进慢性脑缺血的代偿修复。     

恶性胶质瘤与缺氧

人脑胶质瘤是脑肿瘤中发病率最高的肿瘤,患者生存期短,易复发、死亡率高,手术及放化疗效果均不理想。胶质瘤肿瘤中微环境的变化,尤其是肿瘤组织中的缺氧是导致肿瘤异形性增加、易发生浸润和远处转移,及对放、化疗不敏感的一个重要原因。高压氧能够纠正恶性胶质瘤的缺氧环境,配合放化疗,将是一种有效、安全的治疗人恶性胶质瘤的途径。     

缺氧诱导因子-1在胶质瘤中的表达及意义

缺氧诱导因子-1是近几年研究较多的转录因子，它可使肿瘤存生长侵袭过程中适应缺氧应激，也为肿瘤治疗提供了新思路，本文就缺氧诱导因子-1在胶质瘤中的表达及意义作一综述。     

缺氧预处理对颅脑损伤大鼠脑组织HIF-1α及其HO-1表达的影响

目的探讨缺氧预处理对颅脑损伤大鼠脑组织缺氧诱导因子（HIF-1α）及血红素氧合酶-1（HO-1）表达的影响。方法 Sprague-Dawley大鼠102只,随机分为对照组（n=6）、创伤组（n=48）和预处理组（n=48）。创伤组按照改进的Feeney自由落体撞击法建立大鼠颅脑损伤模型,预处理组给予缺氧预处理后,同法造模。采用RT-PCR和Western blotting观察伤后1 h、4 h、8 h、12 h和1 d、3 d、7 d、14 d挫伤周围脑组织HIF-1α、HO-1表达变化。结果创伤组与对照组比较,HIF-1α和HO-1在伤后4 h、8 h、12 h和1、3 d表达上调（P〈0.05）。预处理组与创伤组比较,HIF-1α和HO-1在伤后1 h逐渐上调,伤后4 h、8 h、12 h和1、3 d表达显著上调,直至伤后7 d（P〈0.05）。结论缺氧预处理可增加颅脑损伤后挫伤区周围脑组织HIF-1α的表达,进而促进HO-1 m RNA及蛋白表达。其机制可能是缺氧预处理提高颅脑损伤对缺氧的适应性,减轻挫伤周围脑组织氧自由基对神经细胞伤害。     

缺氧幼鼠脑组织和血清中HIF-1α的表达及意义探讨

目的 探讨缺氧幼鼠脑组织和血清中缺氧诱导因子-1α的表达,及HIF-1α与缺氧性脑损伤的关系.方法 建立缺氧幼鼠模型,取40只幼鼠依照随机数字表法分为缺氧组和正常对照组,于缺氧8 h取缺氧组和正常对照组幼鼠各10只测脑组织HIF-1α mRNA和血清HIF-1α的表达水平.结果 缺氧组幼鼠脑组织HIF-1α mRNA 含量和血清HIF-1α含量明显高于对照组检测值,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 缺氧幼鼠脑组织和血清中HIF-1α表达水平明显升高.     

缺氧诱导因子-lα和血管内皮生长因子在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)在人脑胶质瘤中的表达情况,分析三者的关系及其意义。方法:应用免疫组化方法分析62例人脑胶质瘤中HIF-1α、VEGF、和MVD的表达情况。结果:本组HIF-1α的总阳性表达率是66.1%,它们在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ肿瘤组织的阳性率分别为0%、39.3%、81.8%、100%与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)。HIF-1α表达水平与胶质瘤恶性度存在相关性(P<0.01)。VEGF在HIF-1α阳性组中的阳性率(95.1%)明显高于HIF-1α阴性组中的VEGF的阳性率47.6%(P<0.01)。结论:HIF-1α和VEGF的表达与MVD存在正相关关系;VEGF与HIF-1α表达呈正相关性,二者与人脑胶质瘤的病理分级呈正相关,与脑胶质瘤新生血管生成有关。     

HIF-1α与垂体腺瘤血管生成和细胞凋亡研究进展

实体肿瘤的生长依赖足够的氧供应，垂体腺瘤也不例外。充足的血供能使实体肿瘤细胞不断增殖，维持其生存所必需的内稳态。但是当其生长到一定程度时，肿瘤细胞增殖的速度超过肿瘤血管生成的速度，细胞对氧和营养物质的消耗，可导致肿瘤微环境为低氧分压、低糖和酸性。这种情况激活缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor，HIF），从而诱导血管生成、促进糖酵解，加速葡萄糖的转运及氧化亚氮的合成，同时调节局部的pH并抑制细胞凋亡，增强肿瘤细胞适应低氧的微环境。     

胶质瘤Polo样激酶1的表达与肿瘤细胞增殖活性及预后的关系

目的探讨Polo样激酶1(PLK1)在人脑胶质瘤组织上的表达及其与胶质瘤细胞增殖活性、临床病理和预后的关系。方法应用免疫组化法检测47例胶质瘤和8例正常脑组织中的PLK1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并随访病人。结果正常脑组织未见PLK1明显表达。Ⅰ～Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级脑胶质瘤中PLK1表达阳性率分别为64.3%、93.8%和100%,Ⅲ和Ⅳ级分别与Ⅰ～Ⅱ级比较差异有显著性意义(P<0.05)。PLK1表达与胶质瘤病理级别和PCNA表达均呈正相关(r=0.424,P<0.05;r=0.745,P<0.01)。PLK1高表达组和低表达组患者两年生存率分别为41.4%(12/29)和72.2%(13/18),差异显著(P<0.05)。结论PLK1在胶质瘤的发生发展和增殖中起重要作用,与肿瘤分化程度和患者预后密切相关。     

NF-κB、EGFR、PCNA在人脑胶质瘤细胞中的表达及其相关性研究

目的 探讨NF-κB在人脑胶质瘤中的表达及其与EGFR、PCNA的关系。方法 应用免疫组化方法对56例脑胶质细胞瘤、8例正常脑组织标本中NF-κB、EGFR、PCNA蛋白进行检测。结果 NF-κB在正常脑组织中未见表达，在脑胶质细胞瘤标本中的阳性率为67．9％，在病理级别较高的胶质瘤中的表达明显高于在较低级别胶质瘤中的表达。EGFR、PCNA蛋白在胶质瘤中均有异常高表达，且表达强度与胶质瘤病理级别有关。NF-κB与EGFR表达、PCNA LI呈明显正相关。结论 NF-κB在胶质细胞瘤组织中有异常高表达，其表达与胶质瘤EGFR、PCNA呈正相关。     

增殖细胞核抗原及其在脑胶质瘤中的研究进展

增殖细胞核抗原(PCNA)是DNA多聚酶δ的辅助因子,是DNA合成过程中的必需物质。作为细胞增殖期标志物可评价肿瘤的恶性程度和增殖潜能。本文就PCNA的分子生物学特点、功能和在脑胶质瘤中的研究进展作一综述。