实时荧光定量检验对于结核病患者的诊断价值

目的:探究实时荧光定量检验对于结核病患者的诊断价值。方法:选取824例疑似肺结核患者,取其痰液标本用实时荧光定量检验及涂片抗酸染色法进行检验,对比两种方案的检验结果。结果:824例疑似肺结核患者的病例中,最终确诊652例,其中实时荧光定量检验的阳性检出例数510例,阳性检出率78.2%;涂片抗酸染色法检出阳性例数158例,阳性检出率24.2%;两组方案的检测结果比较,具有显著差异(P<0.05)。结论:实时荧光定量检验用于肺结核患者的检验,具有良好的阳性检出率,且敏感性及特异性较好,在结核病实验室辅助诊断上具有重要的临床价值。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测对结核病的诊断价值

目的 探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)(Gene-xpert)检测对结核病的诊断价值.方法 随机选取我中心在2019年4月至2020年2月就诊的结核病患者共100例作为研究对象,将给予涂片抗酸染色法视为对照组,将给予实时荧光定量PCR检测视为研究组,研究观察2组患者的检出率、灵敏度和特异度、实时荧光定量PCR检测...     

实时荧光定量PCR技术诊断肺结核的meta分析

目的系统评价实时荧光定量PCR技术对肺结核的诊断价值并作meta分析。方法检索Pubmed,EMBASE,BIOSIS,Web of Science以及维普、万方、中国知网、中国医学生物文献数据库。按照Cochrane协作网推荐的诊断试验纳入标准筛选文献,纳入的文献采用QUADAS进行质量评价,用MetaDisc 1.4进行meta分析。结果符合标准的共有21个研究,各研究间存在异质性,但不存在阈值效应。合并后的诊断优势比为105.32,敏感度为0.64,特异度为0.96,阳性似然比为19.79,阴性似然比为0.31。SROC曲线的AUC面积为0.9816,Q＊指数为0.9402。结论荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌有着较高的敏感性和很强的特异性,可作为临床肺结核诊断的重要辅助手段,但并不能完全取代痰涂片检查。     

荧光实时定量PCR的研究进展

生物机体的生长、发育、衰老和病变通常由基因在不同阶段和部位的差异表达来决定。基因表达差异最终表现为蛋白质合成量上的差异，并在一定程度上决定细胞的激活、增殖、分化、病变和凋亡。定量mRNA表达是了解机体生长发育调控和病理病变机理的一个重要方面，因此准确定量mRNA表达成为了生物医学研究中的一个重要内容。     

实时荧光定量PCR技术研究进展及应用

实时荧光定量PCR(rea-l time fluorescent quantitative polymerase chain react ion,FQ-PCR)是是20世纪90年代中期发展起来的一种新型核酸定量技术。,它具有特异性强、PCR污染少、自动化程度高等特点。作者就实时荧光定量PCR技术的研究进展及目前肿瘤诊断、细胞因子分析及病毒感染的监测等方面进行了概述。     

实时荧光定量PCR法在结核性脑膜炎诊断中的应用

结核性脑膜炎（以下简称结脑）是最常见和最严重的肺外结核病之一,由于结核杆菌（TB）的变异和耐药菌的增多,本病的临床表现可不典型,导致诊断难度加大。     

实时荧光定量PCR应用及实验条件优化

实时荧光定量PCR是在普通PCR基础上发展起来的新技术,在保持了PCR技术灵敏、快速、特异特点的基础上增加了定量的特点.在检测微小残留病变,肿瘤标志性基因及病毒负荷量等方面为临床医生判断病情,了解预后发挥着不可替代的作用.荧光定量PCR为科学发挥着巨大作用的同时,人们也不断对其实验条件进行优化,保证定量结果的准确.     

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用

随着PCR(聚合酶链反应)技术的飞速发展,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)技术以其特异性强、灵敏度高、自动化和重复性好、定量准确、污染少等优点,成为分子生物学和其它领域的重要技术工具,并广泛应用于遗传病、病原体和肿瘤等方面的检测和诊断.本文就实时荧光定量PCR技术的主要原理、定量方法及目前在研究领域中主要的应用进行了概述.     

HCV-RNA实时荧光定量的临床价值

目的评价实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-RT-PCR)检测丙型肝炎病毒(HCV-RNA)在临床中的应用价值。方法用RFQ-RT-PCR检测325例肝炎病人标本,并同时采用ELISA检测抗-HCV,了解样本中HCV-RNA含量与抗-HCV的相关性。结果325份标本中有15例HCV-RNA含量高于1000拷贝/ml,18例抗-HCV阳性。经统计分析,两者有明显的相关性。结论RFQ-RT-PCR技术检测HCV-RNA特异性强,灵敏度高,具有良好的应用价值。     

实时荧光定量PCR对社区暴露腹泻样本CA-CDI的诊断价值

目的评估实时荧光定量PCR检测技术对社区获得性艰难梭菌感染(CA-CDI)的诊断价值。方法选取具有社区暴露史的有效非重复腹泻标本329例,分别以实时荧光定量PCR粪便标本直接检测法与产毒培养+细胞毒性酶免疫分析法(EIA)对CA-CDI进行诊断,并以产毒培养+EIA为“金标准”,评估实时荧光定量PCR检测的效能。结果CA-CDI“金标准”检测阳性率为5.17%(17/329).艰难梭菌荧光PCR检测试剂盒诊断结果与“金标准”差异无统计学意义(P>0.05),检测一致性为0.831,灵敏度与特异度分为76.47%、99.68%。艰难梭菌荧光PCR检测试剂盒对tcd-B的检测结果与“金标准”差异无统计学意义(P>0.05),检测一致性为0.860,灵敏度与特异度为81.25%、99.68%。结论实时荧光定量PCR检测技术以快速、高敏感度、高特异度等特点,可对社区暴露腹泻样本CA-CDI进行独立检测。     

实时荧光定量PCR标准品的制备及应用

目的探讨并建立快速而准确用于实时荧光定量PCR标准品的方法.方法通过培养细胞,提取总RNA并逆转录为cDNA后做PCR,电泳,胶回收,T-A克隆,测序后,大量提取质粒,送公司定量.结果获得了预期希望的质粒.结论该方法能大量制备质粒标准品,在实验中取得较满意的效果.     

实时荧光定量PCR在肝炎检测中的应用

目的:探讨实时荧光定量PCR在肝炎尤其是乙型肝炎(乙肝)检测中的应用。方法:对450例急、慢性乙肝患者,采用经酶联免疫吸附试验检测血清,并按血清学标志分为三组,并对所用患者血清实时荧光定量PCR检测。结果:不同血清学标志模式的实时荧光定量PCR检测阳性率分别为95.95%、31.47%、52.20%,三组之间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:实时荧光栋梁PCR检测可以为乙肝病毒感染诊断、治疗及预后判断提供客观依据。但对于病毒非复制感染不能有效检测,不可在肝炎检测中完全替代血清标志物检测。     

实时荧光定量PCR法分析苦参对大鼠胃肠道大肠杆菌数量的影响

目的:应用实时荧光定量PCR技术分析口服苦参对大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠部位以及粪便内大肠杆菌数量的影响,探索苦参对胃肠道中大肠杆菌菌群调节作用。方法:常规饲养大鼠150只,苦参水煎液分高、中、低剂量灌胃,另设空白对照组与抗生素组各10只。分别在第一、二、三周时采集大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠各段(含内容物)以及粪便,提取细菌基因组DNA,采用实时荧光定量PCR法(绝对定量方法)检测各样本不同给药时间点大肠杆菌的数量。结果:(1)与空白对照组相比较:各给药组十二指肠部位在第一、二、三周时,大肠杆菌数量显著降低(P0.01);在不同剂量组不同给药时间点,胃部、空肠、回肠部位以及粪便中大肠杆菌数量均有不同程度降低(P0.05)。(2)与抗生素组比较:低、中、高剂量组给药二周后,十二指肠、空肠、回肠部位大肠杆菌数量明显偏低(P0.05),而结肠及粪便部位在给药一周后高剂量组大肠杆菌数量明显偏高(P0.01)。结论:苦参水煎液灌胃可造成大鼠十二指肠、空肠、回肠部位大肠杆菌菌群数量降低,其中对十二指肠部位大肠杆菌数量的影响随时间推移呈递减趋势,与抗生素的作用基本一致。     

实时荧光定量RT-PCR鉴定溶血对血清microRNA测定的影响

目的监测miR-16基因受溶血的影响程度,确定miR-16作为可靠内参用于分析的溶血范围。方法建立红细胞体积比为0、0.040%、0.012%、0.037%和0.110%的溶血标本体系;运用全波长光谱分析确定关于溶血的特征性吸收波长;建立定量测定miR-16的标准曲线;运用实时荧光定量RT-PCR法测定溶血体系中miR-16的表达量。结果与溶血相关的特征性吸收峰位于414 nm;miR-16测定的标准曲线公式为:y=-1.21x+34.635,决定系数R2为0.9988。在溶解红细胞体积小于0.012%的血清标本中,miR-16作为血清micro RNA(miRNA)的内参是可靠的。此时,血清的A414测定值为0.19。结论建立了监测血清标本中miR-16可作为可靠内参基因的溶血范围,确保了标本的可靠性和实验结果的准确性。     

实时荧光定量PCR法检测淋病奈瑟菌感染的效果

①目的 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术准确定量检测临床标本中淋病奈瑟菌基因，同时与金标准—细菌培养法比较其灵敏度和特异度，为临床淋病的诊疗提供依据。②方法 采集l73例病人临床标本，以PE5700全自动PCR扩增分析仪和淋病奈瑟菌实时荧光定量PCR检测试剂盒进行核酸检测。同时，用含PolyViteX的巧克力板对淋病奈瑟菌进行分离，用ATB Expression自动细菌鉴定仪及配套的APINH进行鉴定。③结果 173份临床标本中，荧光定量PCR法示47例淋病奈瑟菌阳性，阳性率为27．2％；细菌培养法示41例淋病奈瑟菌阳性，阳性率为23．7％。与细菌培养法相比，荧光定量PCR法的灵敏度为100％，特异度为95．5％，两者的符合率为96．5％。④结论 荧光定量PCR技术具有简便、快捷、灵敏度高、特异度高、定量准确等优点，在临床检测淋病奈瑟菌中具有良好的应用前景。     

血性标本对实时荧光定量PCR检测的影响

目的探讨血性标本在PCR-DNA-Tb检测中影响。方法用23例非血性标本和37例血性标本同时直接法和预处理法进行实时荧光定量PCR-DNA-Tb检测。结果23例非血性标本两法检测结果差异无显著性(P>0.05),37例血性标本预处理法与直接法检测结果差异显著(P<0.01)。结论血性标本预处理后进行PCR-DNA-Tb检测可提高检出阳性率,减少假阴性。     

实时荧光定量PCR在高危型HPV感染检测中的应用价值

目的分析实时荧光定量PCR检验在高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染检测中的应用价值。方法选取2018年2月至2019年12月新野县人民医院收治的198例高危型HPV感染患者,均行实时荧光定量PCR检验、第二代杂交捕获试验(HC-Ⅱ)检测,比较实时荧光定量PCR检验、HC-Ⅱ检测阳性检出率和符合率,统计不同病变类型检出情况。结果实时荧光定量PCR检验HPV阳性检出率[75.25%(149/198)]较HC-Ⅱ检测[62.63%(124/198)]高,差异有统计学意义(P<0.05);实时荧光定量PCR检验、HC-Ⅱ检测符合率为83.33%(165/198)(Kappa值=0.618,P<0.001);实时荧光定量PCR检验鳞状上皮病变和慢性宫颈炎检出率[62.50%(40/64)]较HC-Ⅱ检测[32.81%(21/64)]高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实时荧光定量PCR检验、HC-Ⅱ检测应用于高危型HPV感染患者中一致性较好,但实时荧光定量PCR检验HPV阳性、鳞状上皮病变和慢性宫颈炎检出率较高,对促使临床制定针对性的治疗方案,改善患者预后有积极意义。     

分析实时荧光定量检验在结核病患者中的诊断价值

目的分析实时荧光定量检验在结核病患者中的诊断价值。方法选取我院及市结核病防治所于2017年3月至2018年3月收治的疑似结核病患者420例,对所有患者使用两种检验方式检验,比较两种方法的检出率情况。结果 420例疑似患者中病理检查确诊患者为340例,其中实时荧光定量检验出患者281例,检出率为82.6%远高于使用涂片抗酸染色法检验出的85例,检出率25.0%,并且两组数据间差异显著(P0.05)。结论使用实时荧光定量检验对疑似结核病患者进行检查,能够更为准确地进行检查,有助于对于患者的早期诊断,提升治疗效果,值得临床推广。