皮质醇在妊娠期糖尿病发病机制中的研究

目的:探讨皮质醇与妊娠期糖尿病(GDM)胰岛素抵抗(IR)的关系及其在GDM发病机制中的作用。方法:应用放射免疫法测量32例GDM妇女、30例正常糖耐量妊娠妇女(NGT)的空腹皮质醇、C肽水平及空腹胰岛素和75g葡萄糖耐量试验(OGTT)后2h的胰岛素水平。应用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛分泌功能指数(HBCI),比较两组HOMA-IR及HBCI的差异,分析两组空腹皮质醇与IR之间的关系。结果:(1)GDM组HOMA-IR(2.3±0.3)高于NGT组(1.4±0.4),有显著差异(P<0.01);两组间HBCI比较差异不显著(P>0.05)。(2)GDM组血清皮质醇水平(21.1±3.6)μg/dl与NGT组(20.4±3.4)μg/dl比较无显著性差异(P>0.05)。(3)相关分析表明,GDM组和NGT组皮质醇均与胰岛素抵抗指数呈正相关,相关系数分别为rGDM=0.389(P<0.05),rNGT=0.352(P<0.05)。结论:妊娠期IR程度增加可能是GDM的主要发病机制之一,血清皮质醇与妊娠期IR密切相关。     

胰岛素抵抗在妊娠期糖尿病发病机制中的作用

目的: 探讨胰岛素抵抗(IR) 在妊娠期糖尿病(GDM) 发病机制中的作用。方法: 应用放射免疫法测量32例GDM妇女、30例正常糖耐量妊娠妇女(NGT) 的空腹胰岛素及C肽水平和75g葡萄糖耐量试验(OGTT) 后2h的胰岛素水平。应用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR) 及胰岛分泌功能指数(HBCI), 比较两组HOMA-IR及HBCI的差异。结果: GDM组HOMA-IR (2. 3±0. 3) 高于NGT组(1. 4±0 .4), 有显著差异(P<0 .01); 两组间HBCI比较差异不显著(P>0. 05)。结论: 妊娠期存在生理性IR, 妊娠期IR程度增加, 可能是GDM主要的发病机制之一。     

妊娠期糖尿病孕妇OGTT时胰岛素值测定及意义

目的:探讨妊娠期糖尿病(Gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇行葡萄糖耐量试验(Glucose tolerancetest,OGTT)时胰岛素测定值的变化及其意义。方法:用化学发光法和酶测定法分别测定55例GDM组和50例正常孕妇在孕24～28周间行OGTT时的空腹胰岛素、甘油三酯(Triglyceride,TG)和胆固醇(Total Cholesterole,TC)、以及服用葡萄糖后1 h、2 h和3 h胰岛素值,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:GDM组与正常孕妇组空腹胰岛素值分别为(14.7±5.1)mU/L和(18.1±6.4)mU/L,差异无统计学意义(P>0.05);服用葡萄糖后1 h和2 h胰岛素测定值GDM组为(123.5±34.1)mU/L和(78.8±23.6)mU/L,正常孕妇组为(48.6±11.2)mU/L和(27.5±8.4)mU/L,分别两两比较差异有统计学意义(P均<0.01)。GDM组血TC和TG均显著高于正常孕妇组,分别为(6.9±2.1)mmol/L、(5.8±1.4)mmol/L和(4.6±1.7)mmol/L、(2.7±0.7)mmol/L(P均<0.05)。GDM组HOMA-IR与TG和TC均有相关性,相关系数r分别为0.67和0.78(P均<0.05),而正常孕妇组HOMA-IR与TG和TC均无相关。结论:GDM孕妇胰岛素分泌相对不足与高血糖有关,因此GDM孕妇合理平衡膳食,控制血糖水平改善胰岛素不足状态,以利于改善母儿预后。     

慢性酒精摄入对大鼠脂肪组织胰岛素敏感性影响

目的观察不同剂量酒精对雄性大鼠脂肪组织胰岛素敏感性的影响,并研究其可能的分子机制。方法用不同浓度(v/v)的酒精灌胃19 w,检测大鼠血清中胰岛素、葡萄糖含量,计算胰岛素抵抗程度;采用RT-PCR检测脂肪组织中磷脂酰肌醇-3-磷酸激酶(PI3K)mRNA、葡萄糖转运体4(GLUT4)mRNA表达水平。结果与对照组相比,中、高剂量组空腹葡萄糖浓度升高有统计学意义(P<0.05),低、中剂量组胰岛素浓度升高有统计学意义(P<0.05);各剂量组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的升高均有统计学意义(P<0.05)。各剂量组的PI3K mRNA和GLUT4 mRNA表达均升高。结论长期过量酒精摄入引起胰岛素抵抗,引起脂肪组织胰岛素信号转导途径中磷PI3K mRNA和GLUT4 mRNA的表达升高。     

白细胞介素18及白细胞介素1β与妊娠期糖尿病发病的相关性研究

目的:探讨血清炎症因子白细胞介素18(L-18)及白细胞介素1β(L-1β)与妊娠期糖尿病(GDM)发病的关系。方法:选择2006～2009年在该院门诊产检孕妇90例,分为3组,GDM胰岛素抵抗组30例,GDM非胰岛素抵抗组30例,对照组30例。检测血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS);酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清L-18、L-1β。结果:GDM胰岛素抵抗组L-18为(243.16±64.23)ng/L,L-1β为(157.49±29.60)ng/L;非胰岛素抵抗组血清L-18为(174.27±66.78)ng/L,L-1β为(83.58±28.20)ng/L,均明显高于对照组〔(121.44±41.15)ng/L,(45.24±25.64)ng/L〕,差异有统计学意义(P<0.05);GDM胰岛素抵抗组血清L-18、L-1β明显高于GDM非胰岛素抵抗组(P<0.05)。GDM组血清L-18、L-1β与胰岛素抵抗指数Homa IR呈显著正相关(P<0.05)。结论:炎症因子L-18、L-1β在妊娠期糖尿病患者血清中明显升高,慢性炎症可能与妊娠期糖尿病的发病有关。     

妊娠糖尿病患者超敏C反应蛋白与胰岛素抵抗相关性的初步探讨

目的:探讨妊娠糖尿病(GDM)患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:选择41例妊娠糖尿病孕妇(GDM组)、40例糖耐量正常(NGT)的孕妇作对照(NC组),用ELISA方法测定hs-CRP水平,同时计算稳态模式胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:①GDM组的hs-CRP、HOMA-IR分别为(10.80±3.57)mg/L、(3.96±2.16)mg/L,NC组分别为(5.96±2.56)mg/L、(2.59±0.71)mg/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);②多元线性逐步回归分析显示,HOMA-IR是影响hs-CRP最为显著的因素。结论:GDM患者的血清hs-CRP水平明显升高与IR密切相关,hs-CRP与GDM的发病有关。     

妊娠期糖尿病与患者血硒水平及谷胱甘肽过氧化物酶活性的关系

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)与血硒水平及谷胱甘肽过氧化物酶活性之间的关系。方法:检测GDM患者30例(GDM组)和正常妊娠者30例(对照组)血硒水平及全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果:①GDM组血硒水平为(0.0620±0.0224)mg/L,GSH-PX活性为(68.20±15.91)活力单位;对照组血硒水平为(0.0783±0.0209)mg/L,GSH-PX活性为(80.36±12.68)活力单位,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。②孕妇血硒水平与GSH-PX活性呈显著正相关(r=0.714,P<0.001)。结论:妊娠期糖尿病患者血硒水平与GSH-PX活性下降可能与妊娠期糖尿病的发病有关。     

GDM IRS-1酪氨酸磷酸化水平与其1223丝氨酸位点碱基突变的相关性

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者脂肪组织中胰岛素受体底物1(IRS-1)蛋白质酪氨酸磷酸化程度,及与其1223丝氨酸位点碱基突变的相关性。方法:采用放射免疫法及葡萄糖氧化酶法检测对照组及GDM组空腹胰岛素(FINS)及空腹血糖(FPG)水平,采用稳态模型法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用免疫沉淀、western blot及增强化学发光法检测脂肪组织中IRS-1蛋白酪氨酸磷酸化程度;采用PCR扩增及其产物直接测序法检测IRS-11223丝氨酸位点基因突变。结果:①GDM组HOMA-IR为6.11±0.78,对照组为2.25±0.38,差异有统计学意义;②IRS-1蛋白质酪氨酸磷酸化程度GDM组为0.31±0.14,对照组为0.63±0.09,GDM组显著下降;③所有样本均扩增出目的片段,但未发现1例IRS-11223丝氨酸位点的基因突变。结论:GDM患者存在不同程度的胰岛素抵抗;脂肪组织IRS-1蛋白质的酪氨酸磷酸化程度降低是GDM胰岛素受体后信号传导障碍分子机制之一,参与了GDM的发病;IRS-11223丝氨酸位点的基因突变可能不是该区域GDM患者IRS-1酪氨酸磷酸化程度降低的主要机制。     

共轭亚油酸对胰岛素抵抗大鼠葡萄糖运载体4蛋白表达影响的研究

目的通过研究共轭亚油酸（conjugated linoleic acid,CLA）对饮食诱导胰岛素抵抗大鼠葡萄糖运载体4（glucose transporter4,GLUT4）蛋白表达的影响,探讨CLA抗糖尿病作用的机制。方法选用雄性Wistar大鼠,用随机数字表法按体重随机分为对照组、高脂组、高脂＋CLA组（每100g饲料含CLA分别为0．75g、1．50g．3．00g）,每组动物10只,观察CLA对胰岛素抵抗大鼠胰岛素、血糖水平的影响,并应用Western blot方法检测大鼠骨骼肌GLUT4蛋白的表达水平。结果高脂组大鼠血清胰岛素和糖血水平分别为（11．11±2．73）μU／ml、（5．09±0．66）mmol／L,CLA可降低肥胖大鼠的高胰岛素、高糖血症,低、中、高剂量组胰岛素水平分别为（6．99±1．77）μU／ml、（7．36±1．48）μU／ml、（7．85±1．60）μU／ml,血糖水平分别为（4．28±0．72）mmol／L、（4．18±0．55）mmol／L、（4．06±0．63）mmol／L,且高脂组大鼠骨骼肌GLUT4蛋白的表达水平较基础组降低,CLA可增加高脂组大鼠骨骼肌GLUT4蛋白的表达水平。结论CLA可通过增加胰岛素抵抗大鼠骨骼肌GLUT4蛋白的表达水平,改善胰岛素抵抗。     

明日叶查尔酮对胰岛素抵抗细胞PI3K-Akt-GLUT4信号通路的影响

目的研究明日叶查尔酮(Angelica keiskei chalcones,AC)对胰岛素抵抗L6细胞磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶-葡萄糖转运体4(PI3K-Akt-GLUT4)信号通路的影响。方法采用高浓度胰岛素诱导的胰岛素抵抗L6细胞,分别加入5、10、20μmol/L终浓度的明日叶查尔酮共同培养24 h,葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖含量,逆转录聚合酶链式反应方法检测细胞PI3K和Akt的mRNA表达水平,蛋白印迹法检测GLUT4和Akt的蛋白表达水平。结果胰岛素抵抗组细胞培养液的葡萄糖含量显著高于空白对照组(P0.05),而PI3K mRNA、Akt mRNA和GLUT4、Akt蛋白表达水平则降低(P0.05);中、高剂量AC组细胞培养液葡萄糖含量均低于胰岛素抵抗组(P0.05),而PI3K mRNA、Akt mRNA和GLUT4、Akt蛋白表达水平则升高(P0.05)。结论明日叶查尔酮可上调L6细胞胰岛素抵抗模型PI3K-AktGLUT4信号通路的表达水平,增强其对葡萄糖的摄取利用,改善胰岛素抵抗。     

罗格列酮及饮食干预对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌GLUT4转位的影响

目的　探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白 4(GLUT4)转位的影响。方法　利用高脂饲料喂养 ,使Sprague -Dawley(SD)大鼠产生胰岛素抵抗 ,用罗格列酮及饮食干预治疗 4周后 ,取骨骼肌组织 ,应用Western -bloting印迹法分析骨骼细胞膜GLUT4表达量。结果　在胰岛素刺激下 ,胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞膜GLUT4表达较正常大鼠下降 5 2 72 %(P <0 0 0 1) ,罗格列酮及饮食干预组 ,细胞膜GLUT4表达较未干预胰岛素抵抗大鼠分别增加 49 5 3 %、5 0 3 4%(P <0 0 0 1)。结论　罗格列酮可促进胰岛素刺激的GLUT4转位 ,从而改善高脂喂养所引起的骨骼肌组织胰岛素抵抗     

长期酒精摄入对大鼠骨骼肌组织IR、IRS-1和PI-3K基因表达的影响

目的研究酒精长期作用下对大鼠骨骼肌胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇3-激酶p85亚单位(PI-3K)mRNA表达的影响,探讨酒精与胰岛素抵抗的关系及相关分子机制。方法清洁级Wistar大鼠80只(雌雄各半),按体重随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别给予蒸馏水以及10%、20%和33%酒精溶液,灌胃剂量为每天10ml/kgbw。第19周末,断头处死大鼠,测定空腹血糖和血胰岛素,计算HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。提取骨骼肌总RNA,通过RT-PCR测定IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达水平。结果雄性大鼠,与对照组比较高剂量组空腹血糖,低、中剂量组空腹胰岛素水平升高,各酒精剂量组HOMA-IR指数均升高。IRmRNA的表达在中、高剂量组降低,而IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达水平表现为随着酒精剂量的增加先升高后降低,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);与对照组比较,雌性大鼠高剂量组空腹血糖升高、空腹血胰岛素下降,IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA的表达在中、高剂量组降低(P<0.05)。各剂量组HOMA-IR指数与对照组比较差异无显著性。结论长期摄入过量酒精可以造成骨骼肌组织IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达的降低,这可能是酒精降低胰岛素敏感性,引起胰岛素抵抗的分子机制。     

长期酒精作用对大鼠骨骼肌PI-3K表达的影响

目的:研究酒精长期作用下对大鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI-3K)调节亚基p85αmRNA及蛋白水平表达的影响,探讨酒精引起胰岛素抵抗的相关分子机制。方法:清洁级Wistar大鼠80只(雌雄各半),按体重随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别给予蒸馏水以及10%、20%、33%酒精溶液,灌胃剂量为10ml/(kg·bw·d)。第19周末,断头处死大鼠,测定空腹血糖和血胰岛素,计算HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。分离骨骼肌,通过RT-PCR和Westernblot方法测定p85αmRNA和蛋白表达水平。结果:雄性大鼠高剂量组空腹血糖,低、中剂量组空腹胰岛素水平升高,各酒精剂量组HOMA-IR指数均升高。p85αmRNA及蛋白表达水平表现为随着酒精剂量的增加先升高后降低;雌性大鼠高剂量组空腹血糖升高、空腹血胰岛素下降,p85αmRNA及蛋白的表达在中、高剂量组降低。各剂量组HOMA-IR指数与对照组比较差异无显著性。结论:长期摄入过量酒精可以造成骨骼肌组织p85α表达的改变,这可能是酒精降低胰岛素敏感性,引起胰岛素抵抗的分子机制。     

4-Hydroxyisoleucine stimulates glucose uptake by increasing surface GLUT4 level in skeletal muscle cells via phosphatidylinositol-3-kinase-dependent pathway

Purpose

To determine the effect of 4-Hydroxyisoleucine (4-HIL), an unusual amino acid isolated from the seeds of Trigonella foenum-graecum, on glucose uptake and the translocation of glucose transporter 4 (GLUT4) to plasma membrane in skeletal muscle cells and to investigate the underlying mechanisms of action.

Methods

Rat skeletal muscle cells (L6-GLUT4myc) were treated with 4-HIL, and the effect on glucose uptake was determined by measuring the incorporation of radio-labeled 2-deoxy-[³H]-d-glucose (2-DG) into the cell. Translocation of GLUT4myc to plasma membrane was measured by an antibody-coupled colorimetric assay.

Results

The prolonged exposure (16?h) of L6-GLUT4myc myotubes to 4-HIL caused a substantial increase in the 2-DG uptake and GLUT4 translocation to the cell surface, without changing the total amount of GLUT4 and GLUT1. Cycloheximide treatment reversed the effect of 4-HIL on GLUT4 translocation to the basal level suggesting the requirement of new protein synthesis. The 4-HIL-induced increase in GLUT4 translocation was completely abolished by wortmannin, and 4-HIL significantly increased the basal phosphorylation of AKT (Ser-473), but did not change the mRNA expression of AKT, IRS-1, GLUT4, and GSK3β.

Conclusion

Results suggest that 4-HIL stimulates glucose uptake in L6-GLUT4myc myotubes by enhancing translocation of GLUT4 to the cell surface in a PI-3-kinase/AKT-dependent mechanism.     

明日叶查尔酮对2型糖尿病大鼠肝脏和骨骼肌葡萄糖转运体表达的影响

目的研究明日叶查尔酮对2型糖尿病大鼠肝脏葡萄糖转运体2(Glut2)和骨骼肌葡萄糖转运体4(Glut4)蛋白表达的影响。方法制造2型糖尿病大鼠模型,随机分成高、中、低剂量组和糖尿病对照组,分别每日灌胃给予30、10、5和0mg/kg BW明日叶查尔酮。各组以高脂饲料喂养4周后,用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖;放射免疫法检测血清胰岛素含量;免疫组化法检测葡萄糖转运体蛋白表达水平。结果经图像分析,高剂量组肝脏和骨骼肌葡萄糖转运体蛋白表达平均光密度值分别为(0.036±0.0030)和(0.063±0.0139),均较糖尿病对照组显著升高(P<0.05)。高剂量组空腹血糖和胰岛素水平分别为(12.3±1.64)mmol/L和(25.65±3.34)μIU/ml,均较糖尿病对照组显著性降低(P<0.05)。结论明日叶查尔酮可上调2型糖尿病大鼠肝脏葡萄糖转运体2和骨骼肌葡萄糖转运体4蛋白表达水平,降低空腹血糖和胰岛素水平,改善糖尿病胰岛素抵抗状况。     

三种食物多酚对化学诱导DM大鼠糖脂代谢的影响

目的探讨膳食多酚[绿原酸、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、槲皮素]对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠血糖、血脂、肝脏中葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-pase)和骨胳肌组织中葡萄糖转运体4(GLUT4)表达的影响。方法单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35 mg/kg)结合高脂饮食建立糖尿病大鼠模型,将成模大鼠分成5组[糖尿病模型组(DM)、糖尿病模型+二甲双胍组(S)、糖尿病模型+绿原酸组(CA)、糖尿病模型+EGCG组(E)、糖尿病模型+槲皮素组(Q)],另设正常对照组(NC),分别灌喂二甲双胍、绿原酸、EGCG和槲皮素4w后,测定其糖耐量、空腹胰岛素、甘油三酯、胆固醇、G-6-pase和GLUT4 mRNA的表达。结果绿原酸、EGCG、槲皮素均表现出改善STZ诱导的糖尿病大鼠血糖、甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)的含量,并能改善糖尿病模型大鼠的胰岛素敏感性,抑制肝脏G-6-pase mRNA的表达,且提高了骨胳肌GLUT4 mRNA的表达,其中以绿原酸效果最佳。仅仅其糖耐量改善弱于槲皮素作用,但均弱于阳性对照组二甲双胍的作用。结论绿原酸、EGCG、槲皮素均能有效改善STZ诱导的SD糖尿病大鼠的糖代射、脂代射、胰岛素敏感生及肝脏G-6-pase mRNA和骨胳肌GLUT4 mRNA的表达,绿原酸的效果最佳。[营养学报,2012,34(6):572-575,581]