一种改良的布鲁氏菌病抗体微量凝集检测方法的建立与评价

目的 建立一种微量的布鲁氏菌病抗体凝集检测方法,用于布鲁氏菌病高通量检测。方法 依据我国《布鲁氏菌病诊断标准》(WS269-2007)规定的病人诊断标准,用试管凝集试验做诊断标准。通过优化微量凝集试验抗原浓度,对142份疑似病人血清同时做试管凝集和微量凝集试验,进行效果评价。结果 最优的微量凝集抗原浓度为1:10,建立微量凝集法具有较高的敏感度和特异度,分别为98.9%和92.3%;和常规试管凝集法相比,两种方法符合率为96.5%。常规试管凝集检测得到21份阴性样本,22份可疑样本(1:50),99份阳性样本(>1:100)。微量凝集检测得到30份阴性样本、17份可疑样本(1:50)、95份阳性样本(>1:100)。两种试验方法,结果相同的占70.4%(100/142),经统计学检验差异无统计学意义(χ²=0.8,P>0.05)。结论 建立一种可显色的布鲁氏菌病抗体微量凝集检测方法,可以在96孔V型板上同时检测24份标本,且结果易判读,更适宜基层防疫人员现场检测,最终为疫情处置提供强有力的技术支持。     

广西家畜布鲁氏菌病的监测分析

目的 对广西家畜布鲁氏菌病进行监测。方法 采用虎红平板凝集和试管凝集试验对2009-2011年广西14个市的16 143份家畜血清进行布鲁氏菌抗体监测;同时对1 070份家畜脾、胎衣、流产胎儿等样本以及10份布鲁氏菌试管凝集试验抗体阳性家畜的子宫或睾丸进行布鲁氏菌分离和鉴定。结果 2009年有1头种公猪,2010年有1头牛和8头山羊被检出为布鲁氏菌抗体阳性;经生化特性和PCR鉴定有1株从布鲁氏菌试管凝集试验抗体阳性羊内脏分离到的细菌被鉴定为羊种布鲁氏菌。对分离的羊种布鲁氏菌毒力基因VirB8的克隆测序结果显示,VirB8基因在布鲁氏菌种型间高度保守。结论 虽然广西家畜布鲁氏菌防治仍然达到稳定控制标准,但是需加强家畜引种和动物流通检疫工作,防止因引种和动物流通而将布鲁氏菌引入广西。     

江苏省1例布鲁氏菌病的实验室检测及分子分型

目的利用免疫学抗体检测及分子分型,确诊1例临床疑似布鲁氏菌病病例。方法虎红平板凝集试验、试管凝集试验检测血清中抗体,PCR方法及测序技术检测布鲁氏菌特异基因。结果病人血清中抗体阳性,疑似菌株经PCR鉴定为羊种布鲁氏菌。结论此次感染者之病原体为羊种布鲁氏菌。     

公主岭市2002～2004年人间布氏菌病血清学监测结果

对公主岭市 2 0 0 2～ 2 0 0 4年布氏菌病暴发点的病人、周围人群及暴发点发生一年后回顾性调查人群和全市 32个乡镇部分牛、羊养殖户养殖人员进行血清学检测 ,共收集血清 837份 ,阳性 6 2份 ,阳性率 7.4 %。在 6 2例阳性患者中 ,布氏菌病平板试验均阳性 ,布氏菌病试管试验有 2例出现前滞现象 ,即滴度为 1∶2 5～ 1∶5 0时抗原抗体不发生凝集反映 ,当滴度 >1∶10 0时出现凝集反应 ,提示在布氏菌病试管试验时应适当提高稀释倍数 ,增高阳性检出率。 1例患者的流行病学、临床表现均符合布氏菌病 ,试管试验阴性 ,但布氏菌病平板试验凝集时间大约…     

2008～2012年宁夏盐池县布鲁氏菌病监测分析

目的了解宁夏盐池县高危人群布鲁氏菌病感染状况及其危险因素,为布鲁氏菌病防控提供科学指导。方法对2008~2012年高危人群进行监测,采集高危人群血清做虎红平板凝集实验(RBPT)和试管凝集实验(SAT)。结果宁夏盐池县疾病预防控制中心共检测高危人群血清2 879份,检出阳性血清590份,阳性率为20.49%;2008~2012年阳性率依次为1.38%、4.67%、18.21%、19.11%和26.61%;确诊布鲁氏菌病患者590例,隐性感染43例。结论盐池县高危人群布鲁氏菌病感染率呈现上升趋势,需加强畜间执法力度,完善多部门联防联控机制。     

绵羊附睾种布鲁氏菌病流行病学调查

1992年我们对巩乃斯种羊场的澳美及澳美新疆型绵羊进行了绵羊附睾种布鲁氏菌病(布病)的流行病学调查,现将结果报告如下。1　材料与方法1.1　材料:光滑型布氏试管凝集抗原、阳性诊断血清系黑龙江生物制品厂生产。粗糙型布氏试管凝集抗原、阳性诊断血清系北京流研所布病室制备,使用时均在有效期之内。1.2　方法:常规试管凝集试验(SAT)按“部颁规程”、细菌分离按绵羊附睾种布鲁氏菌分离鉴定(刘志文等.石河子科技,1992,增刊)、粗糙型布氏凝集试验(R-SAT)按布鲁氏菌病防治手册介绍的方法进行操作和判定。1.3　判定标准:SAT1∶50以上、R-SA…     

酒泉市肃州区人间布鲁氏菌病重点职业人群血清学监测分析

目的分析2017—2019年甘肃省酒泉市肃州区人间布鲁氏菌病重点职业人群血清学监测结果,预测肃州区布鲁氏菌病流行趋势,掌握疫情动态,为布鲁氏菌病防控提供科学依据。方法采集肃州区辖区内牛羊散养户或规模养殖户、屠宰人员、牛羊交易人员和兽医等布鲁氏菌病重点职业人群血清,先用虎红平板凝集试验初筛,虎红平板凝集试验阳性再以试管凝集试验复检,血清凝集滴度在1∶100++以上为阳性。结果 2017—2019年肃州区共检测血清5 711份,阳性40份,阳性率为0.70%,不同年度阳性率差异无统计学意义(χ~2=1.419,P0.05),阳性率男性(1.10%)高于女性(0.20%),差异有统计学意义(χ~2=16.341,P0.01);不同职业人群阳性率差异有统计学意义(χ~2=144.944,P0.01),从事牛羊交易和屠宰人员及兽医阳性检出率较高。结论肃州区布鲁氏菌病感染与职业有密切关系;应坚持做好疫情监测,开展重点职业人群布鲁氏菌病防治知识健康教育,控制布鲁氏菌病的流行与发展。     

新疆布尔津县人间布鲁氏菌病监测分析

目的应用2010年中央转移支付项目资金,在新疆布尔津县开展人间布鲁氏菌病疫情监测,了解人间布鲁氏菌病疫情形势。方法2011年6月20日-7月20日对重点职业人群进行流行病学调查和分析,用试管凝集试验,检测人群血液中布鲁氏菌抗体效价。结果调查1000人,采集血清515份,阳性63份,阳性率12．2％;患病45例,患病率4．5％;新发患者28例,发病率4．O／万。结论布尔津县人间布鲁氏菌病疫情形势严峻,需加强布鲁氏菌病的宣传、监测和预防控制。     

2013年甘肃省临泽县一起布鲁氏菌病疫情分析

目的对甘肃省临泽县重点人群开展布鲁氏菌病流行病学调查,为进一步控制疫情提供依据。方法根据线索选择与牲畜有密切接触史的7～73岁100人作为重点人群,与重点人群相对应的179只羊作为调查对象;无菌采集静脉血,分离血清进行虎红平板凝集实验（RBPT）和试管凝集试验（SAT）;开展人群和患者的流行病学调查,进行疫情处置。结果100份人血清,RBPT检出阳性5份;SAT检出强阳性血样3份、弱阳性3份,其中1份由北京医科大学网络报告;检测羊血清179份,确诊阳性31份;流行病学调查确诊患者6例,按疫情要求处置病羊31只。结论甘肃省临泽县本次疫情呈点状暴发流行,家庭聚集性明显,多因引进未经检疫的外地羊只传染而致,对重点人群的布鲁氏菌病防控观念及措施亟待加强。     

云南省大理州漾濞县首起布鲁菌病疫情报告

目的总结云南省漾鼻县布鲁菌病(布病)疫情调查处置情况,为以后处置布病等人兽共患病疫情提供经验。方法搜集、整理和分析漾濞县发生人间和羊间布病疫情现场流行病学调查资料、布病病例临床诊疗资料;人血清检验方法采用WS269-2007《布鲁氏菌病诊断标准》规定的试管凝集实验方法,羊血清采用虎红平板凝集试验方法。结果 2015-06漾濞县动物卫生监督所某兽医,先后出现右膝关节、左踝关节疼痛,伴多汗、乏力等症状,该患者对自己采血进行虎红平板试验布病初筛,结果为阳性,到云南省地方病防治所进行布病抗体检测布病抗体为1∶1600++,实验室诊断为急性布病病例。疾病预防控制中心对全县共有各类畜牧从业人员(不包括牧民)148名采集血清进行布病抗体检测,除首例患者病例阳性外,另检出阳性1例;对有母羊流产、羊只死亡现象发生的苍山西镇的白羊村和下街村2村全部羊只(68只)采血进行布病抗体检测,在下街村1户28只羊中检出布病抗体阳性9只。结论此起布病在漾濞县属于首起布病疫情,调查和处置及时,疫情得到有效控制。     

4头猪耶氏菌感染误诊为布氏菌感染

布病与0∶9型耶氏菌的血清学交叉反应,国外早有报告,国内亦有数篇报告。最近我们发现4份猪血清,按布病常规检测方法判定为布病阳性,经过鉴别试验,确认为耶氏菌感染,类似例子不少,特此介绍,以引起重视。 材料和方法 一、标本来源 在莆田调查布病时,使用布病试管凝集试验法检查猪血清,有4份血清抗体滴度达到1∶100～1∶400,按规定应判为布病阳性。 二、检测方法 1.试管凝集抗原为兰州生物制品研究所产品,在有效期内使用。 2.快速酶斑点试验:在前文的基础上,改用0∶3型耶氏菌外膜蛋白为抗原,布氏菌抗原为全菌可溶性抗原。将这两种抗原滴于同一条膜上,自然凉干后封闭。详细方法和判定见之文献。     

两种检测梅毒螺旋体抗体方法的比较

近年来 ,我院以酶联免疫吸附试验 (EL ISA)法及甲苯胺红卡片试验 (TRU ST)分别检测了 34例临床梅毒患者、6例质控梅毒阳性及 6 10 9例术前验血患者血清 ,旨在比较二者梅毒螺旋体的敏感性及特异性 ,现将结果报告如下。一般资料 :检测血清共包括三种 :38份血清为我院 1998～2 0 0 3年 6 10 9例患者输血前检查梅毒螺旋体抗体的阳性标本 ,均经两种以上检测方法验证 ;34份为临床确诊梅毒患者的阳性标本 ;6份为临检部提供的质控阳性血清。方法 :TRUST采用甲苯胺红不加热血清凝集法 ;EL ISA法在包被抗原的微孔中加入 5 0 μl待测血清和 5 0…     

福建省首次发现米克戴德军团菌感染病例

目的 对1例重症肺炎患者进行军团菌病确诊和血清分型,为该血清型军团菌病的诊疗提供科学依据。方法 对病例开展流行病学个案调查和临床病案分析;采集病例标本进行血清抗体检测和常规分离鉴定,对菌株进行生化试验和血清分型;运用PCR技术进行分子诊断。结果 患者2份血清军团菌抗体均为阳性,军团菌培养阳性,生化特性与军团菌相符;菌株与非嗜肺军团菌乳胶凝集阳性,与米克戴德军团菌诊断血清产生凝集。结论 该患者被确诊为感染米克戴德军团菌,为我省首次发现该血清型感染病例;对免疫功能低下且原因不明的肺炎病例应尽早开展军团菌的相关检测,为合理使用抗生素提供依据。     

河北省布鲁氏菌病疫区人群血清学调查

目的了解河北省布鲁氏菌病（布病）疫区高危人群的感染情况。方法分别采集张家口市历史疫区195份血清材料和保定市皮毛加工工人血清样本79份,采用平板凝集反应和试管凝集法常规方法进行。结果河北省高危人群布病阳性率平板凝集为8.0%,试管凝集为8.0%,对照组36人,两法均为阴性。结论河北省布病高危人群的感染率比较高,应采取相应的预防和控制措施。     

贵州省首次从山羊分离到布鲁氏菌及其种型鉴定

目的从贵州布鲁氏菌抗体阳性的山羊血液分离布鲁氏菌病原体并对其进行种型鉴定。方法采用血培养法对经试管凝集试验检测为布鲁氏菌抗体阳性的山羊血血液进行细菌分离培养,并应用传统方法和和分子生物学方法对可疑菌落进行种型鉴定。结果11份（GZB 01—11）抗体阳性的山羊血标本中有4份（GZB03、GZB04、GZB09、GZB11）经血培养瓶培养出布鲁氏菌可疑菌落,可疑菌落经传统方法鉴定为羊种生物3型布鲁氏菌,4株菌进一步采用布鲁氏菌属特异性PCR（BCSP31-PCR）鉴定为布鲁氏菌属细菌,GZB03,GZB04,GZB11经种／型特异性PCR（AMOS-PCR）将其定为羊种布鲁氏菌,而GZB09采用该方法不能定种。结论从11份贵州省布鲁氏菌抗体阳性山羊血样中分离到4株羊种布鲁氏菌,首次证实贵州省存在羊种布鲁氏菌。     

71例复发性布鲁氏菌病的流行病学与临床调查报告

目的对比分析71例复发性布鲁氏菌病病例的首次发病和复发的临床与流行病学特点,总结布鲁氏菌病的临床防治经验。方法采取回顾性调查法,查阅1983年以来布鲁氏菌病病例复发的门诊治疗记录,详细统计复发患者的流行病学与临床症状和体征、实验室血清学和布鲁氏菌血培养病历资料,分析并整理。结果对比分析病例男60例,女11例,男女之比为5.45∶1;有66例发病2次,有5例多次发病;首次发病血培养6份,阳性5份,复发患者血培养4份,阳性1份;临床上首发病情重,复发病情轻,实验室血清学检测首发病例的抗体滴度高,复发的抗体滴度低。结论布鲁氏菌病首发和复发病例都有十分明显的羊只流行病学接触史,临床表现首发与复发病例也有明显的不同,患者出现布鲁氏菌病性脊柱炎时,腰痛症状十分突出,病程延长;新发病例血清学效价高,血培养阳性率也高,复发病例则相反;首次患布鲁氏菌病后,在传染源存在的情况下,可以再次或多次患病,除部分为复发外,不能排除二次感染发病。     

快速免疫酶染色法检测实验家兔弓形体抗体的研究

应用快速免疫酶染色法(IESA)对弓形体感染的家兔进行抗体检测,并以IHA法作对照观察。以在被染成红色或淡红色弓形体虫体周围,形成的蓝色大小均匀的抗原抗体复合物颗粒的有、无、多、寡为判断阳性阴性标准。IESA法检测感染弓形体的家兔血清8份,标准阳性血清1份,均呈阳性反应,血清抗体滴度1:4～1:256,少数以1:1024试验也呈阳性;4份对照血清和1份阴性标准血清,除1份对照血清在1:4滴度出现可疑阳性外,其余均为阴性。IHA法9份阳性血清检测     

1998年石河子地区特殊人群布鲁氏菌病监测报告

布鲁氏菌病（简称布病）监测工作对于及时掌握布病疫情，制订防治措施，控制其爆发和流行极其重要。１９９８年我们对石河子１８个农牧团场特殊（职业）人群进行了布病调查，现将结果报告如下。１调查对象及方法对从事畜牧、兽医、皮毛收购加工人员以团（连）为单位登记注册．统一填写布病流行病学调查一览表。按每人静脉采血２．ｓｍｌ，将分离后的血清送市防疫站做平板凝集、虎红凝集、试管凝集试验，诊断标准以试管凝集１：１００以上为阳性。诊断试剂由新疆地方病防治研究所提供。２结果本次布病调查共采血７６０份，阳性８４份，阳性率…     

应用全自动微孔板法改进TRUST试验检测梅毒抗体

目的:用全自动微孔法代替传统方法检测梅毒抗体,并对改进法进行对比分析和评价.方法:用全自动酶免分析仪法与传统甲苯胺红卡片试验(TRUST)法对比检测了75例梅毒患者和1 061份献血员的血清,不符合者用螺旋体血球凝集试验(TPHA)法验证.对18 000份献血员标本用改进的方法检测,并与传统方法对比,用TPHA法验证.结果:改进方法与传统方法相比,75例梅毒患者血清均呈阳性结果,但改进方法比传统法的凝集颗粒大而均匀,更易判读.在1 061份献血员血清中,用改进的方法检出2份阳性血清,并经TPHA证实,用传统方法则判为可疑血清.用改进方法在18 000份献血员的血清中的7份标本呈阳性,TPHA方法亦为阳性,而传统方法3例呈阳性;2例可疑,2例阴性.结论:改进的全自动微孔板法比传统方法具有敏感性高、特异性好、自动化程度高、易于标准化等优点,适合献血员筛查和临床大批量梅毒患者标本的检验.     

从接触者抗体水平看鼠疫的传染性

目的检测接触者抗体水平看鼠疫的传染性。方法用IHA检测1例败血型鼠疫患者和1例腺鼠疫的密切接触者血清抗体。结果共检出3份阳性血清。结论2例鼠疫患者均有早期肺部感染的症状,推测密切接触者血清抗体的出现系由鼠疫感染所致,提示腺鼠疫和败血型鼠疫具有很高的继发肺鼠疫的倾向,在疫情处理过程中应引起足够重视。