氧化修饰低密度脂蛋白对血管内皮依赖性舒张的影响

目的：探讨氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）中溶血性卵磷脂（ＬＰＣ）与血管效应的关系。方法：采用Ｃｕ＾２＋对低密度脂蛋白进行了氧化修饰,测定Ｏｘ－ＬＤＬ的磷脂含量及其对血管舒张的影响,结果：Ｏｘ－ＬＤＬ中的ＬＰＣ量增加,卵磷脂（ＰＣ）量减少,Ｏｘ－ＬＤＬ明显抑制血管内皮依赖性舒张,且抑制强度与ＬＰＣ量呈正相关,结论：Ｏｘ－ＬＤＬ对血管舒张的抑制作用与ＬＰＣ有关。     

氧化修饰低密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞周期及增殖细胞核抗原的影响

应用流式细胞仪对氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）刺激动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖、细胞周期及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、Ｐ５３、Ｐ２７及ｃ－ｅｒｂＢ蛋白表达的影响进行了观察。结果发现：Ｏｘ－ＬＤＬ和天然低密度脂蛋白（Ｎ－ＬＤＬ）刺激培养人动脉ＳＭＣ细胞增殖时其Ｓ期细胞百分率增加，且Ｏｘ－ＬＤＬ的作用比Ｎ－ＬＤＬ强，表明Ｏｘ－ＬＤＬ和Ｎ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ细胞增殖时与Ｓ期细胞的增加有关；Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ增殖的同时ＰＣＮＡ蛋白阳性率增加，而与Ｐ５３、Ｐ２７和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的表达无关。提示ＰＣＮＡ可能参与了Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ的细胞增殖作用；特异性蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂ＧＦ１０９２０３Ｘ能降低Ｏｘ－ＬＤＬ刺激ＳＭＣ增殖过程中ＰＣＮＡ的阳性率，表明该细胞增殖过程中ＰＣＮＡ表达的抑制可能与ＰＫＣ信号传递通路有关。     

氧化低密度脂蛋白对体外培养的肾小球系膜细胞的影响

我们观察了经氯化铜氧化修饰所形成的氧化低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）对体外培养的人肾小球系膜细胞生长、释放肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的作用。结果发现，Ｏｘ－ＬＤＬ刺激肾小球系膜细胞４８ｈ、７２ｈ以及１０６ｈ，均有抑制该细胞生长的作用。刺激４８ｈ时，细胞对ＭＴＴ的摄入量（以Ａ５７０表示），与Ｏｘ－ＬＤＬ的浓度成反比（ｒ＝－０．９９５，Ｐ＜０．０１）。刺激１８ｈ的细胞上清对Ｌ９２９细胞（ＴＮＦ敏感株）的杀伤能力有所增强，上清中的ＬＤＨ含量明显升高。与未修饰的低密度脂蛋白相比，Ｏｘ－ＬＤＬ对系膜细胞表现出明显的毒性，在高脂血症肾损伤时具有重要意义     

云芝多糖对氧化修饰LDL抑制巨噬细胞一氧化氮产生的保护作用

通过测定巨噬细胞培养上清液中亚硝酸盐的含量和观察细胞内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）ｍＲＮＡ含量的变化，研究了云芝多糖（ＰＳＫ）对氧化修饰ＬＤＬ抑制脂多糖（ＬＰＳ）诱导的巨噬细胞ＮＯ产生的保护作用。结果显示：Ｏｘ－ＬＤＬ可抑制ＬＰＳ诱导的巨噬细胞ＮＯ产生，而正常（Ｎ－ＬＤＬ）和乙酰化ＬＤＬ（ＡＣ－ＬＤＬ）则没有抑制作用，非特异性免疫调节剂ＰＳＫ处理小鼠对Ｏｘ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞ＮＯ产生量下降具有保护作用     

氧化修饰低密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞周期及增殖 …

应用流式细胞仪对氧化修饰低密度脂蛋白刺激动脉平滑肌细胞增殖，细胞周期及增细胞核原、Ｐ５３、Ｐ２７及ｃ－ｅｒｂＢ蛋白表达的影响进行了观察。结果发现：Ｏｘ－ＬＤＬ和天然低密度脂蛋白刺激培养人动脉ＳＭＣ细胞增殖时其Ｓ期细胞百分率增加，且Ｏｘ－ＬＤＬ的作用比Ｎ－ＬＤＬ强。     

氧化修饰低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡

通过观察凋亡细胞的核形态及特征ＤＮＡ梯形图谱（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ），研究了氧化修饰和低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）诱导的巨噬细胞凋亡。结果显示：Ｏｘ－ＬＤＬ可引起明显的巨噬细胞凋亡，表现在Ｏｘ－ＬＤＬ处理的细胞核发生固缩，染色体ＤＮＡ断裂的的凝胶电泳图谱呈典型的梯形，正常和乙酰化的ＬＤＬ（Ｎ－ＬＤＬ和ＡＣ－ＬＤＬ）未引起明显的巨噬细胞凋亡。Ｏｘ－ＬＤＬ引起的巨噬细胞雕凋亡具有浓度和时间效应且与其修饰     

氧化修饰LDL及VLDL对兔主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的作用

单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）是一种强的单核细胞趋化因子，在体外可由多种细胞分泌，包括血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）。本研究采用斑点杂交方法检测了氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及氧化修饰极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）对培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达的作用。结果表明，培养的ＳＭＣ可表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ，而且ＳＭＣ暴露于ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ后，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达水平明显增高，分别增高约１１倍、６倍和２０倍。因此我们认为ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ可以刺激培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ的表达。     

天然和氧化修饰型脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞形态的影响

在建立人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）体外培养方法的基础上，观察了各种天然和氧化修饰型脂蛋白对培养人ＳＭＣ形态以及表型的影响。在氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ），氧化修饰高密度脂蛋白（Ｏｘ－ＨＤＬ）和氧化修饰极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）的作用下，ＳＭＣ形态发生以下变化：胞体变大，由梭形变为不规则多边形，突起细而长，而且“谷”、“峰”样生长方式也发生改变；ＬＤＬ和ｖＬＤＬ对ＳＭＣ的形态亦有影响，但不如氧化修饰脂蛋白明显；ＨＤＬ则无影响。电镜下观察，在ＯＸ－ＬＤＬ的诱导下，ＳＭＣ胞浆中的肌丝较对照组明显减少，而高氏器，内质网和线粒体则明显增多。上述结果说明，ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、ＯＸ－ＬＤＬ、ＯＸ－ＶＬＤＬ和ＯＸ－ＨＤＬ的致动脉粥样硬化作用可能与刺激ＳＭＣ表型由“收缩”型向“合成”型转化有关。     

当归对氧化低密度脂蛋白所致血管内皮细胞损伤的保护作用

通过培养人脐静脉内皮细胞,观察当归对氧化低密度脂蛋白（ｏｘ ＬＤＬ）损伤的内皮细胞（ＥＣ）乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的漏出量及扫描电镜下ＥＣ形态结构的影响,并观察当归在体外对Ｃｕ２＋诱导的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的作用。结果显示：在作用２４ｈ后,ｏｘ ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出明显增加,超微结构明显受损。当归＋ｏｘ ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出显著减少,超微结构基本正常。在体外,当归能明显抑制Ｃｕ２＋介导的ＬＤＬ氧化,且随着当归浓度的增高显示抑制作用增强。结果表明：当归对ｏｘ ＬＤＬ所致血管ＥＣ损伤具有保护作用,其机制可能与当归抗氧化作用有关。     

血液透析患者氧化修饰低密度脂蛋白水平检测与分析

近年来研究发现,氧化修饰低密度脂蛋白（ＯｘｉｄｉｚｅｄＬｏｗＤｅｎｓｉｔｙＬｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｏｘ－ＬＤＬ）是ＬＤＬ致动脉粥样硬化（ＡＳ）的重要机制［１］,故检测ＯＸ－ＬＤＬ将有助于对动脉粥样硬化性心血管疾病（ＡＳＣＶＤ）的预测［２］。慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）血液透析（ＨＤ）患者主要死于心脑血管疾病［３］。为探讨ＣＲＦ血透患者体内Ｏｘ－ＬＤＬ及其它脂蛋白成分的水平,我们检测了ＣＲＦ２１例ＨＤ患者血浆Ｏｘ－ＬＤＬ及血清总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、载脂蛋白Ａ１（ＡｐｏＡ１）、载脂蛋白Ｂ…     

高脂血症患者氧化修饰低密度脂蛋白对内皮依赖性血管舒张的影响

目的：探讨氧化修饰低密度脂蛋白（Ox-LDL）对血管舒张的影响及高脂血症男性患者易患动脉粥样硬化（AS）的机制。方法：采用Cu^2＊ 对13例健康自愿者及29例高脂血症患者的低密度脂蛋白(LDL)进行氧化修饰，硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量，Bartlett法测定溶血卵磷脂(LPC)含量，乙酰胆碱诱发血管舒张。结果：健康人和高脂血症患者血浆LDL被氧化修饰后与修饰前比较MDA含量显著增高（P<0.01）；两组Ox-LDL中的LPC水平均 明显高于各自天然低密度脂蛋白(N-LDL)中的LPC水平（P<0.05）；且健康人及高脂血症男性患者N- LDL中的LPC含量与女性基本相同，但两组男性Ox-LDL中的LPC含量高于女性（P<0.05）,男性高脂血症患 者Ox-LDL的LPC含量最高；两组Ox-LDL均明显抑制血管内皮依赖性舒张，与女性相比，健康男性Ox-LDL抑制血管舒张程度略强，但高脂血症男性患者Ox-LDL抑制血管舒张程度明显增强。高脂血症男性及女性患者Ox-LDL的抑制血管舒张效应与LPC量呈正相关（r ＝0.592，P<0.05；r＝0.816，P<0.05)。结论：男性高脂血症患者易患AS可能与Ox-LDL增加LPC含量及抑制内皮依赖性血管舒张有关。     

糖基化终产物对兔股动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响

目的 研究不同浓度的糖基化终产物(AGEs)对兔股动脉内皮依赖及非内皮依赖的血管舒张功能的影响。方法 采用家兔股动脉恒流灌注模型，在兔股动脉远心端连接压力换能器，测定兔股动脉灌注压；从而间接反映兔股动脉远心端血管舒张功能。记录AGEs阻断前后不同浓度的乙酰胆碱(Ach)及不同浓度的硝普钠(SNP)灌注兔股动脉的压力曲线，观察AGEs对不同浓度Ach所引起的内皮依赖性血管舒张及SNP引起的内皮非依赖性血管舒张的影响，以及L-精氨酸(L-arginine)对这种影响的作用。结果 Ach及SNP均引起浓度依赖的血管舒张，AGEs抑制Ach产生的血管舒张作用并呈浓度依赖性，L-arginine不能改善AGEs对Ach引起的血管舒张的抑制作用。AGEs对SNP引起的血管舒张作用没有影响。结论AGEs通过减少NO的合成抑制内皮依赖性血管舒张，NO前体物L-arginine对AGEs的作用无明显影响。     

氧化低密度脂蛋白循环免疫复合物诱导巨噬细胞胆固醇酯蓄积

目的:探讨氧化、天然低密度脂蛋白循环免疫复合物(Ox -LDL- IC)致动脉粥样硬化作用。　方法:采用人源的氧化、天然LDL与异源的抗载脂蛋白B(apoB)结合制备IC,观察不同浓度的Ox- LDL -IC对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯蓄积和泡沫细胞形成的影响。　结果:氧化、天然LDL- IC均可引起巨噬细胞内胆固醇酯大量堆积,其效果强于Ox -LDL(P<0. 001),而且随剂量的增加而升高,并转化为泡沫细胞;而天然LDL、抗apoB处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的堆积。　结论:LDL- IC可导致巨噬细胞转化为泡沫细胞,参与动脉粥样硬化的形成。     

槲皮素,异鼠李素对Cu^2＋介导的LDL氧化修饰的抑制作用

目的：观察槲皮素（Ｑｕｅ）、异鼠李素（Ｉｓｏ）对Ｃｕ＾２＋介导的低密脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的影响。方法：采用一次性密度梯度离心法分离正常人血浆脂蛋白,用Ｃｕ＾２＋进行体外氧化修饰,温育前加不同浓度的Ｑｕｅ及Ｉｓｏ。检测脂蛋白中脂质过氧化物（ＬＰＯ）、维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）含量及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果：在Ｃｕ＾２＋与ＬＤＬ温育前加入Ｑｕｅ、Ｉｓｏ可使ＬＤＬ中ＬＰＯ生成减少,明显延缓 ,Ｖ     

DA1受体激动剂对大鼠离体肺动脉内皮依赖性舒张反应的影响

目的 :探讨多巴胺 1(DA1)受体激动剂非诺多泮 (FODA)对大鼠离体肺动脉内皮依赖性舒张反应的反应机制。方法 :利用离体血管微量生物反应检测技术 ,分别观察FODA对离体肺动脉内皮依赖性舒张反应以及N L 精氨酸甲硝基酯 (L NAME)、甲烯兰 (MB)、优降糖、左旋精氨酸 (L arg)对FODA引起肺动脉内皮依赖性舒张反应的影响。结果 :①L NAME明显降低完整内皮的肺动脉环对FODA的舒张反应 ;②L NAME对FODA引起肺动脉内皮依赖性舒张反应的抑制反应能够被L arg翻转 ;③MB亦可明显减弱FODA对肺动脉的舒张反应 ;④ATP钾离子通道阻滞剂优降糖则不影响FODA引起肺动脉内皮依赖性舒张反应。结论 :DA1受体激动剂对肺血管的内皮依赖性舒张反应主要是通过内皮舒张因子 (EDRF)NO引起的 ,而内皮超极化因子 (EDHF)不参与这一过程。     

左旋精氨酸与维生素B6对低密度脂蛋白抑制兔胸主动脉内皮舒张功能的影响

目的观察正常人的低密度脂蛋白(native low density lipoprotein,nLDL),人工氧化的低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)及非胰岛素依赖型糖尿病(Non-insulin dependent diabetes mellitus,MDDM)患者的低密度脂蛋白(diabetic low density lipoprotein,dLDL)对兔胸主动脉环内皮的损伤作用及左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg),维生素B6(pyridoxine,VB6)的拮抗效应.方法采用离体动脉环灌流的方法,观察兔胸主动脉环对乙酰胆碱(acetycholine,Ach),钙离子载体A23187的舒张反应.结果3种LDL均抑制动脉环对Ach及A23187的舒张,损伤强度为ox-LDL＞dLDL＞nLDL,并具有浓度依赖性;L-Arg、VB6能明显拮抗LDL的抑制作用,但并不能完全逆转.以SOD作为保护药对照,250 U/ml的浓度能够显著抑制dLDL对内皮的损伤.结论3种低密度脂蛋白主要可能通过降低NO生物活性损伤内皮,L-Arg、VB6具有内皮保护作用.     

普罗布考与氧化型低密度脂蛋白相关研究进展

近年来,大量的药理及临床试验发现调脂药普罗布考可稳定和消退动脉粥样硬化斑块,改善血管内皮功能,具有较好的抗动脉粥样硬化作用。氧化型低密度脂蛋白是引起动脉粥样硬化的主要危险因素。普罗布考可作用于氧化型低密度脂蛋白抑制其进一步氧化修饰,发挥抗氧化作用;也可通过抑制氧化型低密度脂蛋白诱导单核巨噬细胞产生的各种重要炎性细胞因子的表达而发挥抗炎作用;还可改善血管平滑肌的增殖,维持凝血、纤溶系统平衡等。普罗布考可通过多个靶点作用于氧化型低密度脂蛋白发挥抗氧化、抗炎、保护血管内皮、抗动脉粥样硬化作用。     

小凹介导氧化低密度脂蛋白跨内皮细胞转运

目的探讨小凹在氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）逆向转运中的作用机制。方法用40μg／mLox—LDL处理人脐静脉内皮细胞（hUVEC）不同时间（0、6、12、24h）,高效液相色谱法观察细胞内脂质含量变化。用nocodazole阻滞cavolae运动后,荧光倒置显微镜观察FITC标记的氧化低密度脂蛋白受体（Lox-1）在细胞内的定位。将人脐静脉内皮细胞种植于transwell培养系统套3i／1．上层,分别用3种小凹阻滞剂carrageenan、filipin、no—codazole预处理细胞1h后加入40岬l／mLDiI荧光标记的ox—LDL（DiI—ox—LDL）于套皿上层孵育24h,取套皿下层液体用荧光分光光度计测荧光强度值。结果人脐静脉内皮细胞与ox—LDL孵育时,细胞荷脂呈时间依赖性增加。同时ox—LDL导致Lox-1向胞浆聚集,而nocodazole可阻止Lox-1向胞浆的聚集。小凹阻滞剂明显阻滞ox—LDL的跨内皮细胞转运分别达49％、72％和80％。结论内皮细胞可摄取ox—LDL而荷脂,其摄取ox—LDL的受体Lox-1定位于小凹中,小凹在介导ox—LDL的跨内皮细胞转运过程中起运载工具的作用。     

氧化低密度脂蛋白通过激活内皮细胞受体诱发一氧化氮的产生

目的：探讨氧化低密度脂蛋白内皮受体LOX1在氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein, ox-LDL）对内皮细胞产生一氧化氮（nitric oxide, NO）影响中的作用。方法：反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测LOX1mRNA的表达,酶法检测NO含量。结果：ox-LDL可上调内皮细胞LOX1mRNA的表达,同时诱发内皮细胞产生NO,且呈浓度依赖效应,应用LOX1抑制剂可抑制这一作用。结论：ox-LDL可诱发内皮细胞NO的产生,呈浓度依赖效应,LOX1介导了这一作用。     

The relationship between LDL oxidation and macrophage myeloperoxidase activity

Objective To explore low density lipoprotein (LDL) oxidation by macrophage myeloperoxidase(MPO) at molecular level.Methods Using a mouse macrophage model, we examined the relationship between LDL oxidation and macrophage MPO by measuring macrophage MPO activity, LDL oxidation products, MPO gene expression and cellular orientation of LDL oxidation.Results MPO gene expression increased to its maximum gradually when the concentration of LDL was increased, and then maintained at that level. NaN3 inhibied the elevation of MPO activity and LDL oxidation, which was LDL concentration-dependent. After the composition of macrophage membrane was roughly analyzed, it was determined that the contents of MPO and LDL in 5% sucrose were 7. 667 and 21 times higher than those in 10% sucrose, respectively.Conclusion LDL is attached to the “microdomain” of the macrophage membrane in which LDL is oxidized by MPO.