藤茶双氢杨梅树皮素对Hela细胞及A2780细胞增殖的抑制作用

目的探讨藤茶双氢杨梅树皮素（ampelopsin,APS）的抗肿瘤作用。方法以四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）、克隆形成法观察APS对Hela细胞及A2780细胞的体外抑制作用。结果APS均能明显抑制体外培养的Hela细胞及A2780细胞的生长,MTT法的半数抑制浓度（IC50）分别为24．6μg／mL和1．2μg／mL,集落形成法中APS质量浓度在4．4～22．2μg／mL时抑制率均为100％。结论藤茶APS对体外培养的Hela细胞及A2780细胞均有明显的抑制作用。     

藤茶蛇葡萄素抗人胃癌细胞作用的实验研究

目的:探讨藤茶蛇葡萄素的体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法、生长曲线法、细胞集落形成法观察蛇葡萄素对人胃癌SGC-7901细胞的抑制作用。结果:蛇葡萄素能明显抑制体外培养的SGC-7901细胞的生长,MTT法IC50为11.19μg/mL;细胞生长曲线法提示其对SGC-7901细胞的生长也有明显的抑制作用;集落形成法,当药物浓度在9.90μg/mL以上时抑制率为100%,当药物浓度为6.60μg/mL时抑制率为72.3%,当药物浓度为4.40μg/mL时抑制率为36.0%。结论:蛇葡萄素对体外SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用。     

藤茶双氢杨梅树皮素诱导人肺癌A549细胞凋亡及其机制研究

目的：探讨藤茶双氢杨梅树皮素（ampelopsin,APS）抗人肺癌A549细胞的作用。方法：以MTT法和集落形成法观察APS对人肺癌A549细胞的体外抑制作用;采用RT-PCR技术测定APS对人肺癌细胞株A549抑瘤基因p53表达的影响。结果：APS能明显抑制体外培养的A549细胞的生长,MTT法中IC50为9.8μg·mL^-1;细胞生长曲线法提示其对A549细胞的生长也有明显的抑制作用;集落形成试验中,当药物浓度为14.84,9.90,6.60,4.40μg·mL^-1时,抑制率分别为100%,91.6%,64.5%和23.4%;当浓度为25μg·mL^-1时,APS能显著增强p53基因的表达水平。结论：APS对体外培养的人肺癌A549细胞的生长有明显的抑制作用,对抑癌基因p53表达的影响是其抗肿瘤的作用机制之一。     

猫儿眼植物酸对人SGC-7901细胞的抑制作用

目的 分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人胃癌（SGC-7901）细胞抑制作用机制。方法 采用色-质联用仪、流式细胞仪、MTT法和克隆形成法对猫儿眼植物酸组分及其对SGC-7901细胞的抑制作用进行分析检测。结果 分别给予猫儿眼植物酸（浓度分别为10．0，1．0和0．1μg／mL）48h，用MTT法测定其对SGC-7901细胞的抑制率分别为86．9％，77．9％和70．6％；克隆形成抑制率分别为67．8％，55．7％和30．9％；凋亡率分别为39．4％，31．2％和20．2％。结论 猫儿眼植物酸对SGC-7901细胞具有显著抑制作用，其效果随给药浓度的增加而递增。     

藤茶总黄酮体外抗人肝癌细胞作用研究

目的:研究藤茶总黄酮体外抗人肝癌细胞的作用。方法:以MTT法、细胞生长曲线法、集落形成法观察藤茶提取物对人肝癌BEL7404细胞的体外抑制作用。结果:藤茶总黄酮能显著抑制体外培养的BEL7404细胞的生长。MTT法测得的半数抑制浓度(IC50)为28·59μg·mL-1;细胞生长曲线法提示藤茶总黄酮对BEL7404细胞的生长有显著的抑制作用;集落形成法提示当药物浓度在22·22μg·mL-1以上时IC50为100%,当药物浓度在14·81μg·mL-1时IC50为58·05%。结论:藤茶总黄酮对体外培养的BEL7404细胞有显著的抑制作用。     

玉郎伞提取物的抗肝癌作用研究

目的:研究玉郎伞提取物的抗肝癌作用。方法:应用MTT法研究玉郎伞提取物对大鼠血清肝癌细胞7404(BEL-7404)的生长抑制作用;玉郎伞提取物作用于细胞不同时段后,通过免疫组化法检测其对BEL-7404细胞凋亡的影响。结果:在一定浓度(5%～20%)和时间(18～36h)范围内玉郎伞提取物抑制率与作用浓度和时间呈正相关。同浓度的玉郎伞提取物对BEL-7404的抑制率于培养36h时达高峰,其后未见改变。免疫组化法结果表明,BEL-7404凋亡指数与作用时间(16～22h内)呈正相关。结论:玉郎伞大鼠血清在体外能抑制BEL-7404细胞的生长,其部分作用机制为促进其凋亡。     

姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的：探讨姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其机制。方法：以细胞培养，镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线；用^3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响，以MTT比色法检测给药后HeLa细胞的增殖抑制情况。结果：姜黄素作用HeLa细胞后，癌细胞生长延缓并萎缩，胞质粗糙，有大量颗粒状物堆积，而且药物浓度越大，形态学改变越明显；生长曲线测定、^3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示，姜黄素对HeLa细胞的增殖和生长有显著的抑制作用并呈明显的时间一剂量依赖关系，当姜黄素浓度为20μg／ml以上时，其对HeLa细胞的掺入抑制率高于5-Fu 20μg/ml对该细胞的掺入抑制率。结论：姜黄素对HeLa细胞具有直接杀伤作用，其机制可能通过干扰细胞代谢，改变细胞外膜的性质抑制肿瘤细胞增殖。     

姜黄素抑制子宫颈癌HeLa细胞的作用

目的：探讨姜黄素抑制子宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制。方法以细胞培养，镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线；用3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响，以MTT比色法检测给药后HeLa细胞的增殖抑制情况。结果姜黄素作用HeLa细胞后，癌细胞生长延缓并萎缩，胞质粗糙，有大量颗粒状物堆积，而且药物浓度越大，形态学改变越明显；生长曲线测定、3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示，姜黄素对HeLa细胞的增殖和生长有显著的抑制作用并呈明显的时间一剂量依赖关系，当姜黄素浓度为20μg／ml以上时，其对HeLa细胞的掺入抑制率高于5一Fu20μg／ml对该细胞的掺入抑制率。结论姜黄素对HeLa细胞具有直接杀伤作用，其机制可能通过干扰细胞代谢，改变细胞外暌的性质抑制肿瘤细胞增值。     

苦参碱对人肝癌细胞及正常肝细胞增殖和粘附功能影响的比较

目的观察苦参碱对人肝癌细胞BEL-7404及正常肝细胞QSG-7701增殖和粘附能力的影响。方法采用MTT法测定苦参碱对BEL-7404和QSG-7701的增殖;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;粘附实验检测细胞粘附率。结果苦参碱1.0～4.0g/L能有效抑制BEL-7404细胞的增殖。0.5～1.0g/L浓度的苦参碱能有效地诱导BEL-7404分化。当苦参碱的浓度低于0.5g/L时,其对QSG-7701细胞的增殖有一定的促进作用。0.25、0.5、0.75、1.0g/L苦参碱处理72h后,BEL-7404细胞黏附抑制率分别为18.6%、24.4%、30.3%、44.7%,与对照组比较差异均有显著性（P〈0.01）;而QSG-7701细胞黏附抑制率分别为1.7%、3.5%、6.1%、37.8%,只有1.0g/L浓度的苦参碱与对照组比较有差异显著性（P〈0.01）。结论苦参碱能有效抑制肝癌细胞BEL-7404的增殖,且抑制作用具有时间、剂量依赖性;低浓度能有效地诱导肝癌细胞分化;高浓度的苦参碱有较强的抑制人正常肝细胞增殖作用,低浓度具有一定的生长刺激作用;苦参碱抑制BEL-7404细胞粘附。     

头花蓼对胃黏膜上皮细胞GES-1细胞毒性的研究

目的：探讨头花蓼对胃黏膜上皮细胞株GES‐1增殖的影响。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞株GES‐1,采用MTT法连续监测7d,以存活细胞数OD值对培养时间（h）作图,即得生长曲线。不同浓度头花蓼（1024μg／mL、512μg／mL、256μg／mL、128μg／mL、64μg／mL、32μg／mL、16μg／mL、8μg／mL,）与对数期GES‐1细胞共同培养48h,采用MTT法检测细胞增殖。结果（1）体外培养胃黏膜上皮细胞株GES‐1,生长曲线显示：细胞于培养的48h进入对数生长期,120h进入平台期。本实验选96h加药进行后续实验;（2）MTT实验表明：低于128μg／mL时,活细胞数量没有明显变化,细胞增殖无影响。结论头花蓼浓度高于128μg／mL时,对胃黏膜上皮细胞株GES‐1的生长有明显的抑制作用,头花蓼因细胞毒性较低具有潜在的临床应用前景,为头花蓼对H．pylori相关性胃炎的抗菌、抗炎机制奠定了实验基础。     

半边旗提取物5F-Na盐溶液的制备及体外抑癌作用研究

目的:制备5F-Na盐,并观察其对肺癌细胞株NCL-H460和肝癌细胞株BEL-7402的杀伤作用。方法:加入0.5mol·L-1NaOH使半边旗提取物5F完全溶解,稀HCl调节pH值为7.4,加入磷酸盐缓冲液使其pH值稳定,高效液相色谱法测定5F-Na盐溶液中5F的含量。通过MTT法检测所制备5F-Na盐溶液对肺癌细胞株NCL-H460和肝癌细胞株BEL-7402的杀伤作用。结果:所制备5F-Na盐溶液中5F为标示量的(100.51±2.18)%,其对NCl-H460细胞株24、48、72h的IC50分别为23.7、14.2、7.0μg·mL-1,对BEL-7402细胞株24、48、72h的IC50分别为157.3、41.5、21.0μg·mL-1。结论:本研究制备的5F-Na盐溶液能有效抑制癌细胞株生长增殖。     

Corosolic acid analogue,a natural triterpenoid saponin,induces apoptosis on human hepatocarcinoma cells through mitochondrial pathway in vitro

Context 2a,-3a,-24-Trihydroxyurs-12-en-28-oic acid (TEO, a corosolic acid analogue) is a triterpenoid saponin isolated from Actinidia valvata Dunn (Actinidiaceae), a well-known traditional Chinese medicine.

Objective This study investigated the anti-proliferation and inducing apoptosis effects of TEO in three human hepatocellular carcinoma (HCC) cell lines.

Materials and methods Cytotoxic activity of TEO was determined by the MTT assay at various concentrations from 2.5 to 40?μg/mL in BEL-7402, BEL-7404 and SMMC-7721 cell lines. Cell morphology was assessed by acridine orange/ethidium bromide and 4′-6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride staining and fluorescence microscopy. Cell-cycle distribution and DNA damage were determined by flow cytometry and comet assay. Mitochondrial dysfunction was assessed by JC-1 staining and transmission electron microscopy. Apoptosis changes were explored by Western blot, TNF-α and caspase-3, -8, -9 assays.

Results TEO exhibited inhibition effects on BEL-7402, BEL-7404 and SMMC-7721 cells treated for 24?h, the IC₅₀ values were 34.6, 30.8 and 30.5?μg/mL, respectively. TEO (40?μg/mL)-treated three cell lines increased by more than 21% in the G1 phase and presented the morphological change and DNA damage. TEO also declined the mitochondrial membrane potential and altered mitochondrial ultra-structure. Furthermore, caspase-3, caspase-8, caspase-9 and TNF-α were also activated. Mechanism investigation showed that TEO could decrease anti-apoptotic Bcl-2 protein expression, increase proapoptotic Bax and Bid proteins expressions and increase Bax/Bcl-2 ratio.

Conclusion Our results demonstrate for the first time that TEO inhibited growth of HCC cell lines and induced G1 phase arrest. Moreover, proapoptotic effects of TEO were mediated through the activation of TNF-α, caspases and mitochondrial pathway.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的体内体外抗人肝细胞癌的作用

目的：研究Bcl-2蛋白的过表达对Trail诱导肝癌细胞凋亡的影响,以及Trail蛋白体内和体外对人肝癌细胞的杀伤作用。方法：克隆Trail基因并在大肠杆菌中表达Trail重组蛋白。检测Trail重组蛋白在体内和体外对肿瘤的杀伤作用。用台盼蓝拒染法检测细胞的凋亡率。将真核细胞表达质粒pcDNA3-Bcl-2转染到人肝癌细胞BEL－7404细胞中,并通过G418 400mg/L筛选得到Bcl-2蛋白稳定表达的细胞株。结果：重组蛋白Trail能够有效地杀死人肝癌细胞（包括BEL－7404,SMMC－7721,和BEL－7402等细胞）。在体外,过量表达的Bcl-2蛋白能抑制Trail重组蛋白对人肝癌细胞BEL－7404的杀伤作用。重组蛋白Trail能够有效地抑制人肝癌细胞BEL－7404在裸鼠中形成实体瘤。结论：在体内和体外,Trail重组蛋白能够杀死肝癌细胞,Bcl-2蛋白过表达可以抑制Trail重组蛋白对肝癌细胞BEL－7404的杀伤作用。Trail蛋白是一种潜在的肝癌治疗剂。     

茶多酚对人肝癌BEL- 7404细胞端粒酶的抑制作用及诱导细胞凋亡的能力(英文)

目的　探讨茶多酚诱导肝癌BEL 740 4细胞凋亡作用和在体外对端粒酶活性的影响。方法　MTT法和活细胞计数法测定茶多酚对人肝癌细胞的生长抑制作用 ,PCR ELISA试剂盒测定细胞的端粒酶活性。细胞形态学变化和DNA凝胶电泳观察细胞凋亡现象。结果　茶多酚体外对肝癌BEL 740 4细胞有明显的抑制作用 ,且这种抑制作用呈浓度和时间依赖性。采用浓度为 0 2和 0 1g·L- 1 的茶多酚作用 48h后的细胞出现DNA梯度条带和典型的凋亡形态学变化如核固缩、胞膜皱缩、胞核碎裂 ,凋亡小体形成等。茶多酚作用后 ,肝癌BEL 740 4细胞中端粒酶活性明显下降。结论　茶多酚在一定浓度下能诱导肝癌BEL 740 4细胞凋亡 ,其抗癌机制与抑制端粒酶活性有关。     

吡唑啉酮铜配合物通过内外信号途径诱导人肝癌细胞BEL-7404凋亡

目的探讨新型吡唑啉酮铜配合物(P-FAH-Cu-bpy)对人肝癌细胞BEL-7404的诱导凋亡机制。方法通过溶液法制备得到吡唑啉酮铜配合物P-FAH-Cu-bpy。X-射线单晶衍射实验测定晶体结构。MTT法检测P-FAH-Cu-bpy体外对BEL-7404细胞活性的影响。倒置显微镜和Hoechst 33258染色法观察细胞及核形态变化。流式细胞术检测P-FAHCu-bpy对BEL-7404细胞凋亡、周期、ROS、线粒体膜电位的影响。划痕实验检测细胞迁移。Western blot检测P-FAHCu-bpy对BEL-7404细胞凋亡、迁移及侵袭相关蛋白表达的影响。结果 P-FAH-Cu-bpy是一个具有扭曲的四方锥构型的五配位铜(Ⅱ)配合物;呈浓度和时间依赖性地抑制了BEL-7404细胞增殖,诱导了细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G2/M期,降低了细胞线粒体膜电位,增加了胞内ROS水平;上调了细胞Bax、细胞色素C、Cleaved-caspase-3/9/8和Cleaved-PARP表达量,而下调了caspase-7、Bcl-2表达水平;抑制了细胞的迁移和侵袭。结论 P-FAH-Cu-bpy通过内外凋亡信号途径抑制了人肝癌细胞BEL-7404生长。