运动诱导骨骼肌PGC-1α亚型的表达及其生物学功能差异研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)具有多种生物学功能,它是当前研究运动促进健康机制的热点之一。近年来发现,运动可以诱导骨骼肌表达不同PGC-1α亚型(包括:FL-PGC-1α-a、FL-PGC-1α-b、FL-PGC-1α-c、NT-PGC-1α-a、NT-PGC-1α-b、NT-PGC-1α-c、PGC-1α2和PGC-1α3),并且不同PGC-1α亚型的生物学功能存在一定的差异。探讨不同PGC-1α亚型的生物学功能差异及不同强度、不同方式运动诱导骨骼肌PGC-1α亚型的表达,将有利于明确不同运动产生的不同健康效益的生物学机制,对于个性化运动处方的制定,"运动药丸"治疗靶点的选择具有重要的指导意义。本文综述了PGC-1α亚型的类型、生物学功能,以及不同强度、不同方式运动对骨骼肌PGC-1α亚型表达影响的研究现状。     

白藜芦醇对不同受体亚型MCF-7细胞增殖的影响

目的观察0.1μmol/L白藜芦醇作用不同受体亚型(ERα+/ERβ+)MCF-7细胞的增殖情况,并探讨其作用机制。方法采用MTT法和流式细胞术检测白藜芦醇对细胞增殖及周期的影响;Western-blot法检测白藜芦醇与不同受体亚型结合后对细胞信号通路的影响。结果白藜芦醇作用后,细胞增殖活性ERα-ERβ+-MCF-7相似文献   

肾上腺素β受体在大鼠逼尿肌中的表达及功能

为研究β肾上腺素能受体（β-AR）亚型在大鼠膀胱逼尿肌中的表达及介导逼尿肌舒张功能的情况，采用离体逼尿肌条拉力实验观察β-AR亚型特异性激动剂和拮抗剂对逼尿肌舒张功能的影响，以RT-PCR方法观察逼尿肌β受体亚型的分布。结果发现，选择性β1、β2、β3-AR激动剂T-0509、沙丁胺醇与BRL37344A均呈浓度依赖性地抑制KCl诱导的逼尿肌条收缩；低浓度β3-AR拮抗剂和较高浓度的β1、β2-AR拮抗剂能抑制异丙肾上腺素的舒张作用；采用RT-PCR在大鼠逼尿肌可以检测到β1、β2、β3-ARmRNA表达，其中β3-ARmRNA的密度约占总β-AR密度的70％。提示大鼠膀胱逼尿肌上有β1、β2、β3-AR三种亚型存在，可介导大鼠逼尿肌舒张，其中β3-AR起主要作用。     

不同亚基组成的N型钙离子通道电学特性研究

目的:建立不同辅助亚基与功能亚基重组体瞬时表达的N型钙离子通道细胞模型,观察不同亚基组成的N型钙离子通道的电学特征,揭示不同辅助亚基对功能亚基的调节作用.方法:将N型钙离子通道亚基α1B/α2δ/β1b的cDNA分别体外转录为cRNA后,注射至去除滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞中,表达48 h后使用双电极电压钳技术记录其电流.结果:向注射N型钙通道cRNA的细胞以一系列去极化刺激可诱发90%的细胞记录到内向电流.其电流可被N型钙离子通道特异性拮抗剂ω-CTX MVⅡA (1 μmol/L)完全阻断.α1B单独表达时可形成功能性N型钙离子通道,通过记录到电流后而得出电流-电压曲线(I-V曲线),可知产生电流峰值的膜电压约为20 mV(21.17±1.44)mV(n=7);α1B/β1b共表达时I-V曲线方向为超极化,电流达到峰值的电压为(12.35±0.88) mV(n=7,P＜0.01);功能亚基与α2δ亚基共表达时,I-V曲线稍向正电位方向,电流达到峰值的电压为(23.25±1.25) mV(n=7,P＜0.01);在α1B/α2δ/β1b共表达时,尽管有α2δ亚基存在时,β1b亚基仍显著地使I-V曲线向超级化方向(17.08±1.86) mV(n=7).本实验也观察了不同重组体电流的稳态失活电压,其中α1B表达电流的半数失活电压为-12.0 mV,α1B/α2δ表达电流的半数失活电压为-13.5 mV,α1B/β1b表达电流的半数失活电压为-51.4 mV,而α1B/α2δ/β1b共表达时电流半数失活电压为-54.9 mV.结论:成功地建立不同亚基组成的N型钙离子通道在爪蟾卵母细胞的功能性表达,不同的辅助亚基与功能亚基组合体现了通道不同的动力学特性,表明N型钙通道在体内可能具有功能的多样性.这些结果为今后深入研究N型钙通道奠定了基础.     

PPARγ在脂肪细胞分化中的作用及对运动的反应相关研究

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)家族是影响脂肪细胞分化和脂质代谢的主要核内转录受体,根据其结构及功能可将PPARs分为PPARα、PPARβ(亦称PPARδ)及PPARγ3种亚型。其家族成员PPARγ是目前所知唯一在脂肪组织中高水平表达的转录因子,对脂肪细胞的分化有重要调节作用。而运动时机体发生很多变化,包括激素反应、能量代谢和酸碱平衡等方面的变化,这些都可能影响PPARs家族的基因表达,甚至影响其对脂肪代谢的调节作用。通过对PPARγ和脂肪细胞分化之间关系的研究,可以深入了解其作用的分子机制,为运动防治肥胖的机理研究提供…     

蛋白激酶C亚型与胃癌关系的实验研究

目的研究蛋白激酶C(PKC)各亚型与胃癌的关系。方法选取60例胃癌组织标本和120例慢性胃炎标本,采用兔抗人多克隆抗体及SABC免疫组织化学染色法对PKC亚型进行比较。结果 PKCα在胃癌组织中的表达阳性率为76.7%,在慢性胃炎组织中的表达阳性率为47.5%(P<0.05)。PKCγ在胃癌组织中的表达阳性率为81.7%,在慢性胃炎组织中的表达阳性率为50.0%(P<0.05)。PKCβⅠPKCβⅡ在胃癌及慢性胃炎组织中均无表达。不同病理类型及不同临床分期的胃癌组织间的PKCα、PKCγ的表达阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。PKCα、PKCγ在各型慢性胃炎中的表达阳性率差异也无统计学意义(P>0.05)。结论 PKCα及PKCγ在胃癌组织中有较高表达,其阳性率明显高于慢性胃炎组织,但与胃癌病理类型及临床分期无关。PKC可能在胃癌的发生发展中起重要作用。     

HDAC1对ERα和ERβ蛋白水平的调控

目的：构建带编码HA标签的hdac1基因真核表达载体，研究组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）对雌激素受体α和β（ERα和ERβ）蛋白水平的影响。方法：用提取的RNA产物进行逆转录合成cDNA，利用PCR技术扩增出hdac1基因完整编码区序列，通过DNA重组技术构建含编码hdac1 DNA片段的真核表达载体pcDNA3-HA—hdac1；利用GST沉降（pull-down）实验观察HDAC1是否能特异结合ERα或ERβ；又将pcDNA3—HA—hdac1重组质粒分别和ERα表达载体或ERβ表达载体质粒共转染293T细胞，观察HDAC1对ERα和ERβ蛋白水平的影响。结果：转染pcDNA3—HA—hdac1重组质粒的哺乳动物细胞表达了与预期相对分子质量大小一致的HDAC1蛋白；GST沉降实验表明，HDAC1蛋白与ERα和ERβ均结合；共转染实验观察到HDAC1可使ERα蛋白水平降低，而对ERβ没有影响。结论：HDAC1与ERα和ERβ均结合，但其对ERs的作用具有亚型特异性，ERα和ERβ蛋白水平可能受不同类型的组蛋白去乙酰化酶（HDACs）的调控。     

PPARγ在慢性免疫性炎症疾病中的作用

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（peroxisome proliferator activated receptorsγ,PPARγ）是一类由配体激活的核转录因子,属Ⅱ型核受体超家族成员,活化后可以调控多种核内靶基因的表达,具有多种生物学效应。近年来研究发现,作为PPARs的亚型之一,     

血管内皮细胞上嘌呤受体新亚型对血管张力的调节作用

目的 研究血管内皮细胞上嘌呤受体新亚型对血管张力调节的作用特点.方法 大鼠离体主动脉环实验.结果与结论 在NO释放的前提下激活血管内皮细胞上嘌呤受体新亚型可介导血管收缩反应,该受体可同时被P1受体激动剂腺苷、CPA、CPCA和P2受体激动剂ATP、ADP、UTP、2-MeSATP所激活;该受体与PTX敏感型G蛋白偶联;产生的缩血管效应与花生四烯酸的代谢密切相关,由前列腺素类缩血管物质介导,引起细胞内钙储库的释放,胞内钙升高,诱发血管收缩.     

99Tcm标记RGD环肽二聚体人神经胶质瘤显像及重组人血管内皮细胞抑制素对其影响的实验研究

目的 研究新型含RGD的环肽二聚体探针99Tcm-HYNIC-2聚乙二醇(PEG)4-Dimer { Dimer:E-[c(RGDfK)2]}作为整合素αvβ3受体显像剂的可行性,并观察重组人血管内皮细胞抑制素注射液(恩度)对标记探针在荷瘤裸鼠体内生物学分布及γ显像的影响.方法 选取整合素αvβ3受体表达阳性的人神经胶质瘤细胞株U87MG,免疫荧光检测U87MG经恩度处理后的整合素αvβ3受体表达情况.制备99Tcm-HYNIC-2PEG4-Dimer.建立荷U87MG神经胶质瘤裸鼠模型,并按简单随机法将其分为2组,恩度组给予200μl(1 mg)恩度,对照组给予同等体积的生理盐水,6h后注射99Tcm-HYNIC-2PEG4-Dimer,评价探针在2组荷瘤裸鼠体内的生物学分布.另取荷瘤裸鼠16只,分为恩度处理组和生理盐水组,分别按体质量给予20 mg/kg恩度和同等体积的生理盐水,给药后行γ显像.采用两样本t检验对实验数据进行统计分析.结果 99 Tcm-HYNIC-2PEG4-Dimer的放化纯大于95％.U87MG细胞高表达整合素αvβ3受体,经恩度处理后整合素αvβ3受体表达逐渐减低,恩度质量浓度为400 μg/ml时,表达程度最低.荷瘤裸鼠注射99Tcm-HYNIC-2PEG4-Dimer后90 min,肿瘤组织有较高摄取,给予恩度后肿瘤摄取减低,恩度组和对照组肿瘤摄取分别为(1.50±0.08) ％ID/g和(6.27±0.33) ％ID/g(t=40.23,P＜0.05);γ显像示2组T/NT比值分别为1.02±0.11和2.58±0.36(t=10.25,P＜0.05);免疫组织化学检查结果显示2组整合素αvβ3受体阳性表达率分别为(33.1±2.7)％与(81.5±3.2)％(t=32.60,P＜0.05).结论 99Tcm-HYNIC-2PEG4-Dimer可用于整合素αvβ3受体阳性肿瘤的显像,并可用于监测恩度疗效,有望用于筛选恩度治疗病例.