感染治疗的新免疫学途径

对感染的化学治疗有赖于免疫功能的辅助.研究表明,白细胞介素4(IL-4)促使TH2细胞产生;IL-12诱导TH1细胞产生.前者支持体液免疫应答;后者支持细胞免疫应答.因此,通过IL-4、IL-12或TH1细胞分泌的γ干扰素(IFN-γ)可调节对病原体的免疫应答,从而对感染治疗产生重大影响.     

用重组病毒表达细胞因子——开发疫苗的新策略

免疫系统可被各种细胞因子活化和调节.白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)能增强细胞介导免疫力,抑制淋巴细胞TH_2亚群的免疫应答:而IL-4、IL-5、IL-6和IL-10能诱导体液免疫应答,但抑制淋巴细胞TH1亚群应答.带有IL-2和IFN-γ编码基因的重组痘苗病毒感染裸鼠实验证明,可以改变痘苗病毒的致病力,增加其安全性。编码IL-2和流感病毒血凝素(HA)的重组痘苗病毒可诱导抗流感的保护性免疫力.鼻内接种编码IL-5和HA的痘菌病毒,可选择性增加分泌IgA的细胞数和IgA滴度.而给小鼠注射编码IL-6和HA的疲苗病毒时,选择性提高抗HA的IgG1水平.用共表达细胞因子和人类免疫缺陷症病毒(HIV)基因的痘苗病毒作疫苗不仅安全,而且可以克服HIN感染所造成的免疫缺陷,使免疫应答更有利于疾病的控制.     

抗实验性利什曼病的ISCOM疫苗

疫苗接种产生的保护性免疫力取决于疫苗诱导能控制或清除病原体的免疫应答的能力。研究证实纯化的利什曼原虫抗原组分可明显保护小鼠免受实验性感染。利什曼原虫表面抗原gp63蛋白酶是一种侯选疫苗,可产生Th1 CD4~+细胞应答。作者以小鼠为模型,对gp63与免疫刺激复合物（ISCOM）构成的疫苗的免疫原性及保护效果进行了研究。     

左旋精氨酸通过上调Th1应答介导抗疟保护性免疫

目的探讨左旋精氨酸(L-Arginine,L-Arg)对致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.y17XL)感染BALB/c小鼠Th1免疫应答的调节效应。方法于P.y17XL感染前7天,连续每日给予BALB/c小鼠L-Arg(1.5 g.kg-1体质量)灌胃预处理;动态观察各组感染小鼠原虫血症水平和生存率;于感染后d 0、d 3和d 5分别提取小鼠脾细胞,流式细胞术检测BALB/c小鼠CD4+CD69+T细胞、F4/80+CD36+巨噬细胞数量;ELISA法检测脾细胞培养上清中IFN-γ的分泌水平,Griess反应检测脾细胞培养上清中NO含量。结果与NC组比较,L-Arg能够降低感染小鼠的原虫血症水平,延长生存时间。L-Arg组CD4+CD69+T细胞数量出现有意义的增加,IFN-γ分泌水平明显提高,F4/80+CD36+巨噬细胞数量出现明显升高,NO的分泌也明显增加。结论在感染早期L-Arg处理可诱导Th1免疫应答的有效建立,明显遏制P.y17XL感染早期红内期疟原虫的感染进程。     

紫花牡荆素对佐剂性关节炎小鼠足肿胀度和细胞因子的影响

目的研究紫花牡荆素对佐剂性关节炎小鼠血浆炎症相关细胞因子的作用及其与足跖肿胀度的相关性。方法 36只Bal b/c小鼠,随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药物组、紫花牡荆素12.5,25.0和50.0mg·kg~(-1)剂量组;小鼠右足垫皮内注射弗氏完全佐剂后连续灌胃给药12d,每日1次。第13天测量小鼠后足爪的肿胀度,第14天采血,用流式细胞仪的微球阵列(CBA)法检测佐剂性关节炎小鼠外周血中的致炎性细胞因子(IL-2、IFN-γ和TNF-α)和抗炎性细胞因子(IL-4和IL-5)的水平。结果紫花牡荆素可剂量依赖性地抑制Bal b/c小鼠后足爪的肿胀度;明显降低致炎性Th1细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平,显著提高抗炎性Th2细胞因子IL-4和IL-5的水平;小鼠后足爪肿胀度与血清细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平呈正相关,与IL-4和IL-5的水平呈负相关。结论紫花牡荆素改善佐剂性关节炎小鼠足跖肿胀度,可能是通过增加血液IL-4和IL-5含量,降低IL-2、IFN-γ和TNF-α含量,调节细胞因子平衡的结果。     

地塞米松与吡格列酮对哮喘T_H1/T_H2细胞因子作用机制的比较

目的初步探讨地塞米松(DXM)和过氧化物酶增殖活化受体γ(PPARγ)激动剂吡格列酮对哮喘模型TH1/TH2细胞因子表达的影响及其机制,并比较二者的异同。方法24只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、地塞米松组和吡格列酮组,每组各6只。采用W estern b lot方法检测各组小鼠肺组织T-bet和GATA3的表达,同时运用流式细胞仪检测小鼠脾细胞胞内白介素4(IL-4)和干扰素γ(IFNγ)的表达。结果哮喘模型鼠脾细胞内IL-4/IFNγ比值与正常组相比明显升高(P<0.01),经DXM治疗后,IL-4/IFNγ比值明显降低,肺组织GATA 3和T-bet的表达均减低(P<0.01),但GATA 3比T-bet减低更明显;而经吡格列酮治疗后,不仅IL-4/IFNγ比值明显降低(P<0.01),同时肺组织T-bet的表达也明显增高(P<0.01),但GATA3无变化(P>0.05)。结论地塞米松与吡格列酮对哮喘TH1/TH2细胞因子的调节及机制有所不同,地塞米松同时抑制GATA3和T-bet的表达,从而扭转了IL-4和IFNγ的比值;而吡格列酮可能通过参与调控TH1细胞转化过程中重要转录因子T-bet的表达,改变IL-4/IFNγ比值,从而改善相应的炎性症状。     

特异性p38蛋白激酶抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Th1/Th2类细胞因子变化的影响

目的:探讨特异性p38蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Th1／Th2类细胞因子(IFN-γ／IL-4)变化的影响。方法:BALB／c小鼠30只随机分成3组:正常对照组、哮喘模型组和SB203580干预组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4和IFN-γ含量,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。结果:与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4水平升高而IFN-γ水平降低(P<0.01);与哮喘模型组比较,SB203580干预组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4水平明显降低,IFN-γ水平明显上升(P<0.01),肺组织病理学改变显著减轻。结论:SB203580能抑制哮喘小鼠的气道炎症反应,纠正IFN-γ／IL-4平衡的失调。     

轻度CHB患者树突状细胞疫苗治疗后的免疫功能变化

目的探讨树突状细胞疫苗治疗轻度慢性乙型肝炎患者后血清IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的变化。方法乙肝疫苗冲击的树突状细胞(106),1次/月,共12次,用于36例轻度慢性乙型肝炎患者。血清中IL-2、IL-4、IL-10及IFN-γ水平测定用双抗体夹心酶联免疫法。比较治疗后应答组、未应答组患者血清中这些因子量的改变。结果应答组在树突状细胞疫苗治疗后IL-2、IFN-γ明显升高,而IL-4、IL-10降低不明显。结论树突状细胞疫苗治疗能够改善轻度慢性乙型肝炎患者的Th1/Th2平衡和细胞免疫功能。树突状细胞疫苗有可能对人类慢性乙型肝炎治疗有效。     

青藤碱对小鼠复发性自然流产妊娠结局的影响及其相关机制研究

目的研究青藤碱对复发性自然流产模型小鼠妊娠结局的影响及相关机制。方法雌性CBA/J小鼠60只,雄性DBA/2小鼠20只、Balb/c小鼠10只,按雌雄比例2∶1合笼,检出阴栓者计为妊娠第1天。分为正常组:雌性CBA/J小鼠×雄性Balb/c小鼠,正常饮食,9只孕鼠;模型组:雌性CBA/J小鼠×雄性DBA/2小鼠,正常饮食,10只孕鼠;治疗组:雌性CBA/J小鼠×雄性DBA/2小鼠,自检出阴栓日开始改用含有0.5%青藤碱的饲料,10只孕鼠。计数存活胚胎数和丢失胚胎数,并计算胚胎丢失率。使用ELISA法检测血清中细胞因子IFN-γ和IL-4的水平;real-time PCR检测IL-4、INF-γ、GATA-3、T-bet基因的表达水平;Western blot测IL-4、INF-γ、GATA-3、T-bet蛋白的表达水平。结果胚胎丢失率结果表明:与模型组比较,正常组和治疗组的胚胎丢失率显著降低(P<0.01)。ELISA结果显示:与正常组相比较,模型组和治疗组中血清IFN-γ和IFN-γ/IL-4的水平均显著升高(P<0.01),IL-4水平均显著降低(P<0.01);与模型组相比较,治疗组中血清中IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值均显著降低(P<0.01),而IL-4水平变化不大。Real-time PCR和Western blot的结果均显示:与正常组相比较,模型组和治疗组中IL-4、GATA-3基因的表达水平均显著降低(P<0.01);IFN-γ、T-bet基因的表达水平以及IFN-γ/IL-4比值、T-bet/GATA-3比值均显著升高(P<0.01)。与模型组相比,治疗组中IFN-γ、T-bet基因的表达水平以及IFN-γ/IL-4比值、T-bet/GATA-3比值显著降低(P<0.01)。结论青藤碱可以减少复发性自然流产的发生,其中RSA与Th1/Th2平衡漂移至Th1型有关;青藤碱治疗复发性自然流产的可能机制为降低体内Th1型细胞因子IFN-γ及转录因子T-bet的水平,从而调节Th1/Th2平衡。     

Lewis肺癌小鼠Th1/Th2免疫应答状态的观察

目的研究Lewis肺癌小鼠Th1/Th2免疫应答状态及其意义。方法C57BL/6小鼠16只按随机数字法分为肺癌模型组(A组)与正常对照组(B组),每组8只。A组采用Lewis肺癌单细胞悬液接种于C57BL/6小鼠右腋部皮下建立肺癌模型;B组则正常饲养未予处理。两组实验动物于实验末取血,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中Th1细胞因子IFN-γ、Th2细胞因子IL-4浓度,并进行组间相关比较。结果A组小鼠血清中Th1相关细胞因子IFN-浓度明显低于B组小鼠,A组小鼠Th2相关细胞因子IL-4浓度明显高于B组小鼠,差异均有统计学意义(P<0.05);而FN-γ/IL-4比值A组小鼠相应低于B组小鼠,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论Lewis肺癌小鼠Th1/Th2免疫应答状态呈现明显Th1向Th2漂移,使肺癌细胞逃避机体免疫监视,并削弱机体的细胞免疫功能,这应是肿瘤发生发展的主要原因之一。     

子宫内膜异位症患者TH细胞活性状态的研究

目的 探讨子宫内膜异位症患者TH细胞活性状态;方法 应用细胞因子体外诱生培养及 ELISA技术对子宫内膜异位患者及健康生育年龄妇女外周血单个核细胞(PBMC)培养诱生上清及血浆中TH1类因子(IL-2,IFN-γ)TH2类因子IL-4的含量进行测定。结果 (1)EM患者血浆中IL-2的水平比对照组明显升高,差异有显著性(P<0.01)。(2)在PBMC诱生培养上清中,除了轻度异位症病人的IL-4水平与正常对照组比较差异无显著性外,其余各组IL-2,IL-4,IFN-γ的诱生水平与正常对照组相比差异均有统计学意义。结论 子宫内膜异位症患者体内TH细胞活性发生改变,在疾病早期以TH1细胞为主,随着病情加重,逐渐以TH2细胞占优势、IL-2在异位症致不孕中起了一定作用。测定TH1、TH2因子,对深入了解异位症的发病机理有重要意义。     

丹参凝胶对特应性皮炎小鼠的作用研究

目的研究丹参凝胶对特应性皮炎小鼠治疗作用并探讨其机制。方法用DNCB制备BALB/c小鼠特应性皮炎模型,观察丹参凝胶对皮炎小鼠的胸腺指数和脾指数、血清IgE、IgG2a及体外培养脾细胞中IL-4、IL-12、IFN-γ的含量差异。结果丹参凝胶能明显改善皮损情况,降低皮炎模型的胸腺指数和脾指数,并能降低血清IgE和脾细胞上清IL-4水平,显著升高血清IgG2a和脾细胞上清的IFN-γ水平(P<0.05)。结论丹参凝胶可以通过降低IgE、IL-4,以及提高IgG2a和IFN-γ的水平而发挥治疗特应性皮炎的作用。     

拉米夫定对慢性乙型肝炎血清IFN-γ和IL-10水平的影响

目的探讨拉米夫定治疗对慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和IL-10水平的影响及临床意义。方法根据患者对拉米夫定治疗12个月后不同应答情况分组进行回顾性研究,利用双抗体夹心ELISA法检测治疗前后不同时相点血清IFN-γ、IL-10水平,以与正常对照校对后的IFN-γ/IL-10比值作为Th1/Th2平衡指标,健康献血员作对照。结果HBeAg阳性完全应答组治疗前IFN-γ水平高于部分应答组,治疗后可见IFN-γ水平升高、IL-10水平降低,Th1/Th2平衡得以恢复并保持Th1优势应答;HBeAg阳性部分应答组和HBeAg阴性组治疗后IFN-γ和IL-10水平变化不大,Th1/Th2平衡仍以Th2为优势;YMDD变异后血清IFN-γ水平降低,血清IL-10水平升高。结论拉米夫定应答程度与治疗前血清IFN-γ水平有关;治疗后Th平衡的恢复是完全应答实现的保证;Th平衡可以作为HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清免疫学应答的评价指标,YMDD变异对机体抗HBV免疫有一定的影响。     

DCC／HBV治疗性疫苗佐剂有效剂量的初步研究

目的考察新型治疗性乙肝疫苗佐剂的有效剂量。方法DC-Chol/HBsAg免疫Balb/c小鼠,ELISA法测血清特异性抗体IgG1和IgG2 a水平,ELISPOT法检测免疫后小鼠脾细胞经HBsAg刺激后产生IFN-γ的细胞数。结果DC-Chol最低有效剂量在0.063～0.125 mg/只小鼠。结论DCC/HBV治疗性疫苗能同时诱导Balb/c小鼠体液和细胞免疫反应,其佐剂最低有效剂量低于文献报道。     

DCC/HBV治疗性疫苗佐剂有效剂量的初步研究

目的 考察新型治疗性乙肝疫苗佐剂的有效剂量.方法 DC-Chol/HBsAg免疫Balb/c小鼠,ELISA法测血清特异性抗体IgG1和IgG2a水平,ELISPOT法检测免疫后小鼠脾细胞经HBsAg刺激后产生IFN-γ的细胞数.结果 DC-Chol最低有效剂量在0.063～0.125 mg/只小鼠.结论 DCC/HBV治疗性疫苗能同时诱导Balb/c小鼠体液和细胞免疫反应,其佐剂最低有效剂量低于文献报道.     

IL-4、IFN-γ和TGF-β1与系统性红斑狼疮的关系

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)与白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、生长转化因子β1(TGF-β1)的关系.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定36例SLE患者和17例健康对照组的外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IL-4、IFN-γ、TGF-β1的含量.结果 Th1/Th2升高组的IFN-γ测值高(P＜0.05),IL-4与健康对照组相比无显著差异(P＞0.05);Th1/Th2降低组的IFN-γ测值低(P＜0.05),IL-4测值高(P＜0.05);Th1/Th2降低组的TGF-β1高于Th1/Th2升高组,但两组相比无显著差异(P＞0.05).结论 Th1和Th2细胞极化增强均参与了SLE的发病,TGF-β1可能与SLE患者的Th1、Th2细胞极化异常有关.     

肌肉注射卵白蛋白/白细胞介素18融合DNA可有效诱导抗原特异性Th1型免疫应答

Th1型细胞可选择性分泌白细胞介素 2( IL- 2 )、γ干扰素 ( IFN- γ)和 β肿瘤坏死因子( TNF- β) ,调节以补体结合和调理抗体 (如Ig G2 a同种型抗体 )产生为特征的细胞介导免疫。作者构建了一种携带卵白蛋白 ( OVA)和 IL - 1 8( IFN-γ诱导因子 ) c DNA融合基因的哺乳动物细胞表达质粒 p OVA/IL- 1 8,并在 C57BL/6小鼠中研究了其是否能有效诱导抗原特异性 Th1型免疫应答。　　作者首先对含 SV4 0复制起点并表达免疫球蛋白基因的哺乳动物细胞表达质粒进行修饰 ,以去除其中绝大部分免疫球蛋白编码区及新霉素抗性基因 ,随后分别…     

rhIL-12联合HBsAg刺激健康人外周血单核细胞对IL-12R的影响

目的确认重组人白细胞介素12(rhIL-12)联合乙型肝炎表面抗原(HBsAg)可增强健康人外周血单核细胞(PBMC)产生特异性细胞免疫应答,并分析其细胞来源,及对IL-12R的影响,探讨hIL-12联合HBsAg作为治疗型乙型肝炎疫苗的应用前景。方法 8名健康人PBMC分别与rhIL-12(1 ng/mL)、rHBsAg(500 ng/mL)和rhIL-12(1ng/mL)+rHBsAg(500 ng/mL)体外孵育,采用流式细胞术检测CD4+IFN-γ(γ-干扰素)+T细胞、CD8+IFN-γ+T细胞及CD56+IFN-γ+NK细胞百分比,并测定表达IL-12Rβ1、IL-12Rβ2的细胞百分比。结果 rhIL-12与rHBsAg联合组CD8+IFN-γ+T细胞及CD56+IFN-γ+NK细胞百分比均较对照组明显升高,且有非常显著差异(P<0.01),联合组CD8+IL-12Rβ1和CD56+IL-12Rβ1与单用rhIL-12或rHBsAg组比较均显著升高。结论提示rhIL-12联合rHBsAg诱生的IFN-γ主要来自CD56+NK细胞、CD8+T细胞,其次是CD4+T细胞;rhIL-12和rHBsAg单独均能上调健康人PBMCs表面IL-12R的表达,rhIL-12与rHBsAg联合具有增强作用。     

腹泻型肠易激综合征患者血清炎性细胞因子分析

目的初步探讨腹泻型肠易激综合征(IBS)患者是否存在辅助性T细胞1(TH1)、辅助性T细胞2(TH2)免疫调节功能紊乱及其在IBS发病中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测31例腹泻型IBS患者(IBS组)及28例同龄、同性别、同期健康者(对照组)血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-4、IL-8、IL-10、IL-12、干扰素(IFN)-γ水平。结果腹泻型IBS患者血清中可测得低浓度TNF-α,对照组血清中未检测到TNF-α;腹泻型IBS患者血清IL-4、IL-10水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);腹泻型IBS患者血清IL-12、IFN-γ、IL-8水平明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);腹泻型IBS患者IFN-γ/IL-4比值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论腹泻型IBS患者体内TH1反应增强,感染影响腹泻型IBS患者发生TH1/TH2漂移,在IBS发病过程中起重要作用。     

中药有效成分Vam3对小鼠气道非特异性炎症模型T_H1/T_H2应答的调节作用

本研究的目的是利用气道炎症小鼠模型来探讨中药有效成分Vam3调节气管炎症的免疫平衡的效果。小鼠用伴清蛋白腹膜内致敏,然后气管内发敏。在首次发敏后24h用中药有效成分Vam3进行治疗。用地塞米松治疗组、生理盐水组及不作处理的空白对照组作为对照。中药有效成分Vam3的评价主要是对抗原特异性抗体的产生及产生细胞因子类型的影响。结果显示,与盐水对照组相比,中药有效成分Vam3可有效减少抗原特异性IgE、IL-4、IL-5和IL-13的水平,而IgG2和IFN-γ合成不受抑制。证实其有抗气道炎症和调节TH1/TH2应答类型的作用,可用于气道炎症的治疗。