跨膜糖蛋白和肺耐药相关蛋白在人脑胶质瘤中的表达

目的 :探讨人脑胶质瘤组织中跨膜糖蛋白 (P gp)和肺耐药相关蛋白 (LRP)的表达及其与胶质瘤临床病理因素及多药耐药 (MDR)之间的关系。方法 :应用免疫荧光标记的单克隆抗体 ,通过流式细胞术方法 ,检测 30例新鲜人脑胶质瘤中P gp和LRP表达情况。结果 :P gp和LRP在人脑胶质瘤中有过度表达。二者表达程度与胶质瘤恶性程度有关 ,在低度与中、高度恶性胶质瘤之间P gp和LRP表达阳性率差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ;P gp和LRP在人脑胶质瘤中有共同表达。结论 :P gp和LRP可作为人脑胶质瘤的化疗敏感性及预后的判断指标 ,二者联合检测对胶质瘤患者预后判断有更大价值。     

耐药基因蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达

背景与目的：化疗耐药与肿瘤细胞表达耐药基因有关，本研究检测人脑胶质瘤中耐药基因的蛋白表达，为今后临床制定个体化化疗方案提供依据。方法：采用免疫组织化学二步法，检测53例人脑胶质瘤标本及6例正常脑组织中P-糖蛋白(P-gp)、肺癌耐药蛋白(LRP)、谷胱苷肽转移酶(GST-π)和六氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)的蛋白表达。结果：在正常组织中仅有1例P—gp阳性表达，其余三个基因的蛋白表达为阴性，在人脑胶质瘤标本中，P—gp、LRP、GST-π和MGMT的蛋白表达的阳性率分别是32．1％、43．4％、43．4％和50．9％，LRP和GST-π的蛋白表达率与胶质痫的病理分级之间有相关性。结论：P—gp、LRP、GST-π和MGMT在人脑胶质瘤中均有较高表达率，LRP和GST-π的表达和胶质瘤的恶性程度有关，联合测定多种耐药基因的表达对制定化疗方案和预后判断有参考价值。     

人脑胶质细胞瘤TGF—β1与Ki67表达相关性研究

目的 检测人脑胶质细胞中转化生长因子β1（TGF－β1,transforming growth factor beta-1)与Ki67抗原的表达情况,以期为人脑胶质瘤的基因治疗及其预后判断提供客观指标。方法 采用SP免疫组织化学方法。结果 依组织学类型统计,TGF－β1,Ki67在正常组织与胶质瘤中的表达差别有显著性,P＜0．05 而各种组织学类型胶质瘤间的表达无显著性差别;依恶性程度分级统计,低度恶性Ⅰ-Ⅱ级胶质细胞瘤与高度恶性Ⅲ-Ⅳ级胶质细胞瘤中,TGF－β1与Ki67的表达差别有显著性（P＜0．001）。二者与正常脑组织的差别有显著性（P＜0．05）;TGF－β1在Ki67在脑胶质细胞瘤中的表达呈负相关。结论 TGF－β1,Ki67的表达与脑胶质瘤的发生、发展有关二者的检测可以作为胶质瘤病人的预后指标;TGF－β1是一种潜在的治疗脑胶质瘤的因子。     

碱性成纤维细胞生长因子在不同级别人脑胶质瘤中的表达

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与人脑胶质瘤恶性程度之间的关系。方法：取手术切除人脑胶质瘤标本45例,手术内减压正常脑组织5例,免疫组织化学染色观察bFGF在正常脑组织及不同级别脑胶质瘤组织中的表达水平。结果：正常脑组织无bFGF表达,随胶质瘤级别增加bFGF表达率明显增高,正常脑组织、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤两两之间差异有显著性（P〈0.05）。结论：bFGF在正常脑组织中不表达,其表达与人脑胶质瘤的恶性程度正相关,可成为判断胶质瘤恶性程度和预后的一项指标,并为胶质瘤的治疗提供新的途径。     

卵巢上皮癌组织中LRP和P—gp表达及其临床意义

目的：探讨卵巢上皮癌组织中肺耐药蛋白（lung resistrance protein,LRP)表达的临床意义。方法采用免疫组化S－P法对79例卵巢上皮性肿瘤（恶性54例、交界性5例、良性20例）和18例正常卵巢组织进行LRP和P－gp表达检测,并进行相关临床因素分析。结果LRP在正常卵巢组织、良性、交界性和恶性卵巢上皮性肿瘤组织中的表达阳性率分别为38．9％、30．0％、80．0％和75．9％。LRP的表达与卵巢癌理性类型,腹腔积液相关,化疗对LRP表达阳性和阴性卵巢上皮癌患者的有效率分别为50．0％和84．6％,有显著性差异（P＜0．05）。LRP表达阴性患者的预后优于阳性者（P＜0．05）,LRP与P-gp表达无相关性,两者可协同表达。结论LRP是评价卵巢上皮癌化疗耐药性和预后的可靠指标。     

人脑胶质瘤bFGF及其相关受体FGFR—1的蛋白表达

目的：探讨ｂＦＧＦ及其相关受体ＦＧＦＲ－１的表达与人脑胶质瘤的关系。方法：用免疫组化法，对５７例人脑胶质瘤进行了检测。结果：发现人脑胶质瘤ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ－１表达水平均升高，且随胶质瘤恶性程度增加而升高，它们之间呈正相关。结论：胶质瘤能高表达ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ－１，它们可作为诊断和判定胶质瘤预后的参考。     

急性白血病细胞P-gp LRP的表达及其临床意义

目的：研究急性白血痛细胞P-糖蛋白（P—gp）、肺耐药蛋白（LRP）的表达情况，观察其表达率与临床症状及化疗缓解率的关系。方法：利用P—gp、LRP单克隆抗体，采用流式细胞技术分别测定15例正常对照和79例急性白血病（AL）患者P-gp、LRP的表达率，分析两种蛋白表达的临床意义。结果：初治急性淋巴细胞白血病（ALL）组P—gp、LRP的表达率均高于初治急性髓细胞白血病（AML）组（P〈0．01），复发／难治ALL组P—gp的表达率与复发／难治AML组相比无显著性差异（P〉0．05），而LRP的表达率较复发／难治AML组的表达率高（P〈0．01）。复发／难治组P—gp、LRP的表达率均高于相应的初治组（P〈0．05）。急性白血病患者P—gp、LRP的表达之间无相关性（L=0．0746，P〉0．05）。急性白血病细胞P—gp^＋／LRP^＋组缓解率低于P—gp^＋／LRP^-、P—gp^-／LRP^＋组（P〈0．05），并明显低于P—gp^-／LRP^-组（P〈0．01）。结论：复发／难治组P—gp、LRP的表达率高于初治组，而两者的表达率无相关性。P—gp、LRP表达阳性的患者缓解率低，且易出现髓外浸润。同时检测P—gp、LRP的表达较单独检测一种蛋白更具有临床意义。     

人脑胶质瘤细胞中IL-6mRNA的表达及意义

目的观察白细胞介素－６（ＩＬ－６）ｍＲＮＡ在人脑胶质瘤细胞中的表达。方法采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对２０例新鲜人脑胶质瘤标本进行了检测。结果２０例标本中有１７例表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ，恶性程度高的肿瘤中ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达量明显高于恶性程度低的肿瘤。结论脑胶质瘤细胞中ＩＬ－６基因的表达与脑胶质瘤的发生发展有关。     

干细胞标志物CD133和Nestin在不同恶性程度胶质瘤组织中的表达及其与预后的关系

背景与目的：近来研究表明,胶质瘤中一小群表达干细胞标志的细胞是胶质瘤发生及发展的根源。本文探讨干细胞标志物CD133和Nestin在不同恶性程度人脑胶质瘤组织中的表达情况及其与预后的关系。方法：应用实时荧光定量PCR方法定量检测77例不同恶性程度胶质瘤组织中CD133和Nestin基因的表达情况,并与肿瘤的恶性程度进行相关分析;探讨肿瘤组织中上述基因的表达水平与患者预后的关系。结果：在不同恶性程度胶质瘤组织中,CD133及Nestin的表达存在显著性差异（P〈0.05）,CD133和Nestin的表达情况与肿瘤的恶性程度呈正性相关（P〈0.05）;单因素预后分析显示CD133和Nestin的表达水平与预后相关（P〈0.05）,CD133和Nestin基因的高表达预示一个较短的生存时间;多因素Cox比例风险回归模型分析显示,CD133是独立于病理级别及其他临床变量的预后因子。结论：检测胶质瘤组织中CD133和Nestin的表达水平有助于评价肿瘤的生物学行为和患者的预后。     

VEGF与MMP—9在人脑胶质瘤中的表达及相关性的研究

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）与基质金属蛋白酶－9（MMP－9）在人脑胶质瘤中的表达及与胶质瘤恶性表型的关系。方法：免疫组化和原位杂交方法检测50例胶质瘤标本，10例正常脑组织中VEGF蛋白及MMP－9mRNA的表达。结果：高级别胶质瘤（Ⅲ-Ⅳ）高于低级别胶质瘤1（Ⅰ-Ⅱ），P＜0．05。结论：VEGF蛋白和MMP－9mRNA参与胶质瘤的发生发展且与胶质瘤的恶性表型有关。     

乳腺癌组织p53蛋白与P—耐药糖蛋白表达水平的关系

目的：研究p53蛋白表达与P－糖蛋白（P－gp)的关系。方法：用免疫组织化学法检测50例乳腺癌组织中p53蛋白及P－gp表达,结果：乳腺癌组织中p53阳性表达率为64％,P－gp阳性表达率为50％,p53阳性组的P－gp表达率（65．6％,21／32）显著高于p53阴性组（22．2％,4／18）,（P＜0．005）,p53表达与P-gp有关。结论：p53表达可引起多药耐药基因（MDRI）编码产物P－gp表达增高,从而使乳腺癌细胞获得多药耐药（MDR）表型;P－gp不能作为评判乳腺癌预后和生物学行业的独立指标。     

甲状腺癌组织P—gp表达及相关因素分析

目的分析甲状腺组织多药耐药基因产物P-糖蛋白（P－gp）的表达状况,探讨甲状腺癌组织P－gp表达与病情发展及预后相关因素的关系。方法采用免疫组化sp法,检测P－gp表达水平。结果检测37例甲状腺癌组织;15例癌旁正常组织及17例甲状腺腺瘤组织。P-gp阳性表达率分别是45.9％（17／37）;20％（3／15）及23.5％（4／17）,经统计学处理,甲状腺癌与甲状腺良性组织P－gp表达有显著性差异（P＜0．05）,但良性组织之间无差异性（P＞0.05）。甲状腺癌组织P－gp表达水平与病情发展及预后相关因素（年龄、原发肿瘤、转移淋巴结、病理分类）之间,除与病理分化程度有显著性差异外（P<0．05）,其余各项与P－gp表达无显著性差异（P＞0．05）。结论甲状腺癌MDR与P－gp过度表达有关,并且有其内在的本质特征,不受化疗药物诱导,不受疾病发展的影响。甲状腺癌P－gp的表达有其特殊性。     

肺癌的化疗与多药耐药的研究

目的：检测各种类型肺癌化疗前及化疗后复发病例P－gp蛋白的表达情况,探讨其与肺癌多药耐药及患者预后的关系。方法：采用免疫组化染色方法对66例化疗后复发病例及131例未经化疗的肺癌病例进行耐药基因MDR1表达蛋白P－gp检测,结果：化疗后复发病例P－gp阳性表达率明显高于未经化疗的病例（P＜0．05）,其中,癌,小细胞癌化疗后P－gp阳性表达率均明显高于化疗前（P＜0．05）,而肺腺癌则无明显差异（P＞0．05）,未经化疗组不同病理类型的肺癌P-g[蛋白阳性表达有显著性差异,从高到低依次为腺癌,鳞癌和小细胞癌（P＜0．05）,化疗后复发组各病理类型肺癌中P－gp蛋白阳性表达率无显著性差异（P＞0．1）,P－gp表达阳性的患者3年生存率明显低于阴性者（P＞0．05）。结论;化疗可能诱导各种病理类型肺癌P-gp蛋白表达增加,肺鳞癌和小细胞肺癌可能为获得性MDR1耐药,肺腺癌是原发性MDR1耐药,肺癌患者P－gp表达程度可作为指导化疗用药及预测预后的指标。     

胶质瘤中肿瘤干细胞的分布及与p53、MGMT的关系

目的：探讨胶质瘤中肿瘤干细胞标志物CD133的表达及其与p53、MGMT的关系。方法：采用免疫组化法检测45例不同病理级别胶质瘤标本中CD133和p53、MGMT蛋白的表达。结果：CD133在各病理级别的胶质瘤中均有表达,高恶性度组中CD133表达高于低恶性度组（P〈0.05）。在CD133阳性组中p53、MG-MT的表达明显高于CD133阴性组（P均〈0.05）。结论：不同恶性程度的胶质瘤标本中均存在肿瘤干细胞,肿瘤干细胞可作为判断胶质瘤恶性程度和预后的重要指标。     

EphA2在脑胶质瘤中的表达及意义

目的：探讨酪氨酸蛋白激酶受体EphA2在人脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤微血管生成之间的相关性。方法：用免疫组化方法检测66例人脑胶质瘤组织，2株成胶质细胞瘤细胞系（U251和U87）和10例正常脑组织中EphA2蛋白的表达情况。并用Western blot方法进一步验证高级别成胶质细胞瘤组织和正常脑组织中EphA2的表达情况。通过CD34免疫组化染色方法来计算胶质瘤组织中的微血管数（MVC），探讨EphA2的表达水平与胶质瘤的微血管生成之间可能存在的关系。结果：免疫组化结果表明：在所有检测的66例胶质瘤中，除3例低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ）未检测到EphA2表达外，其余均有不同程度的EphA2表达，阳性率为95．5％（63／66）；而10例正常脑组织中EphA2蛋白表达均为阴性，二者差异显著（P〈0．01）。并且高级别脑胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ）中EphA2强阳性表达率为63％（29／46），明显高于低级别胶质瘤30％（6／20）的阳性表达率，二者差异显著（P〈0．01）。此外，肿瘤组织内微血管内皮细胞也有EphA2蛋白表达。Westernblot结果也进一步证实了成胶质细胞瘤组织和细胞系U251高表达EphA2蛋白，且U87表达水平明显低于U251，正常脑组织中检测不到EphA2蛋白条带。胶质瘤的微血管密度与EphA2蛋白表达水平有显著相关性（r=0．713，P〈0．01），EphA2表达强阳性的肿瘤区域有较高的微血管密度。结论：EphA2特异地表达于高级别胶质瘤中，而正常脑组织中则检测不到EphA2表达，提示EphA2有可能是恶性胶质瘤的一个新的标志物，或可作为分子治疗的靶点，并且EphA2可能参与胶质瘤的血管生成，在胶质瘤的发病和恶性进展中起重要作用。     

Nogo-B在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤病理分级的相关性

目的：探讨Nogo—B基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤病理分级的相关性。方法：收集上海长征医院神经外科2005—2008年手术获得的经病理证实的人脑胶质瘤组织标本36份，另取其他手术切除的正常脑组织标本10份。以免疫组化技术、Real—timePCR和Western blotting等方法检测这些标本中Nogo—B在基因和蛋白质层面的表达水平，结合病理资料分析Nogo—B的表达和病理分级的相关性。结果：Real—timePCR检测发现，恶性程度高的胶质瘤组织中Nogo—B基因表达明显下调，Ⅲ级的胶质瘤组织中Nogo—B基因表达水平与正常脑组织相比下降了90％左右（P〈0．01），Nogo—B基因表达水平与肿瘤的恶性度成相关。Westernblotting检测显示，正常脑组织中Nogo—B蛋白表达相对恒定；在高恶性级别的胶质瘤中No—go—B的蛋白表达显著下调，其下降程度与肿瘤的恶性程度呈负相关。免疫组织化学检测显示，Nogo-B主要在人正常脑组织中弥漫性阳性表达（100％），在人胶质瘤组织中表达显著降低；36例胶质瘤组织中Nogo-B染色阳性程度随着肿瘤恶性程度增加而显著降低（在Ⅰ-Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级中阳性表达分别为88．2％，42．9％，25．0％），各组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：在人脑胶质瘤中Nogo—B在mRNA和蛋白质水平上表达均出现下调，其下调程度与病理分级呈负相关。     

肺癌组织中耐药相关基因的表达及其临床意义

目的：探讨肺癌组织中耐药相关基因的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化技术检测治疗前肺癌组织标本中P-gp、MRP和LRP表达。结果：72例非小细胞肺癌中P-gp、MRP、LRP阳性率分别为61％,49％，65％，并有部分共表达。9例小细胞肺癌中P-gp、MRP、LRP阳性率分别为56％，22％，44％，也有部分共表达。在TNM各分期中P-gp、MRP、LRP阳性表达无明显差异（P＞0．05），随访中化疗有效组P-gp、MRP、LRP阳性表达分别为29％（4／14）、36％（5／14）、21％（3／14），无效组P-gp、MRP、LRP性表达分别为83％（20／24）、67％（16／24）、75％（18／24）。有效组P-gp、LRP表达低于无效组（P＜0．05），随访中死亡16例，P-gp、MRP、LRP阳性表达分别占43％（7／16），31％（5／16），64％（11／16）。LRP阳性组占比例最高，提示LRP阳性表达预后差，其与预后关系密切。结论：肺癌耐药为一多途径多基因参与的过程，联合检测肺癌组织中耐药相关基因的表达有助于判断化疗疗效及预后。     

人脑胶质瘤细胞中IL—6mRNA的表达及意义

目的 观察白细胞介素－６（ＩＬ－６）ｍＲＮＡ在脑胶质瘤细胞中的表达。方法 采用逆转聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对２０例新鲜人脑胶持瘤标本进行了检测。结果 ２０例标本中有１７例表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ，恶性程度高的肿瘤中ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达量明显高于恶性程度低的肿瘤。结论脑胶质瘤细胞中ＩＬ－６基因的表达与脑胶质瘤的发生发展有关。     

PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

背景与目的：PI3K/AKT信号通路可能在人脑恶性胶质瘤的发生发展过程中起重要作用。本研究探讨人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系。方法：采用免疫组化Envision二步法检测PI3K、AKT、PTEN蛋白在42例不同级别脑胶质瘤、10例正常脑组织中的表达,计算阳性细胞百分率,用统计学方法分析人脑胶质瘤中PI3K、AKT、PTEN蛋白表达之间的相关性及其三者与胶质瘤不同分级之间的关系。结果：PI3K在人脑胶质瘤组织的阳性表达率是80.95%,而正常脑组织中表达率为20.00%,两者间差异有统计学意义（P〈0.05）;PI3K蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性率分别是66.67%、95.24%,两者之间差异有统计学意义（P〈0.05）。胶质瘤组织与正常脑组织中AKT蛋白阳性率分别是85.71%与30.00%,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;AKT蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性率分别是76.19%与95.24%,两者之间差异有统计学意义（P〈0.05）;胶质瘤组织与正常脑组织中PTEN蛋白阳性率分别是45.24%、100%,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;PTEN蛋白在低级别胶质瘤中的阳性率52.38%,而高级别胶质瘤表达率为38.10%,两者之间差异有显著性（P〈0.05）;PTEN与PI3K、AKT蛋白在脑胶质瘤中的表达分别呈负相关（P〈0.01）;PI3K与AKT蛋白的阳性表达呈正相关（P〈0.01）。结论：（1）在人脑胶质瘤组织中PI3K、AKT蛋白表达明显增高,且PI3K、AKT蛋白阳性表达与胶质瘤恶性程度正相关,说明了PI3K/AKT信号通路在胶质瘤的恶性转化中发挥着重要作用。（2）胶质瘤组织中PTEN蛋白的阳性表达率明显低于其在正常脑组织中的表达,与胶质瘤的恶性程度负相关,提示了PTEN蛋白的表达下降或缺失导致其抑癌功能减弱甚至丧失,其与胶质瘤的发生发展密切相关。（3）在人脑胶质瘤组织中,PTEN与PI3K、AKT蛋白表达呈负相关,揭示了在胶质瘤的发生发展中PTEN与PI3K、AKT的作用可能互相拮抗,PTEN蛋白的表达下降或缺失与PI3K、AKT的过度表达可能共同促进了胶质瘤的恶性进展。     

神经母细胞瘤P-gp和MRP的表达及预后因素分析

目的：探讨P－糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）和多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-associated protein,MRP）在小儿神经母细胞癌（neuroblastoma,NB）中的表达及临床意义。方法：应用SP免疫组织化学法检测70例例NB组织中P－gp和MRP的表达。结果：P-gp和MRP的阳性率分别为61．4％（43／70）和38．6％（27／70）。P-gp与MRP共表达阳性率为32．9％（23／70）。P－gp与MRP具有相关性（r=0.387,P=0.001)。年龄＞1岁的NB P－gp和MRP的表达阳性率（72．3％，48．9％）均高于＜1岁者（39．1％，17．4％），（P＜0．05）。分化性NB P－gp和MRP表达（93．3％和86．7％），（P＜0．05）。P-gp和MRP表达与性别和分期无关。年龄＞1岁、有转移的NB、MRP阳性及P－gp与MRP共表达者中位生存期和2年累计生存率均降低，（P＜0．05）。P-gp表达与生存期无关。多变量COX回归分析，年龄有预后意义（相对危险度、95％可信区间和P值分别为4．949、1．079－22．694和0．040）。结论：NB原发性耐药与P-gp和MRP共同作用有关，年龄、转移、MRP表达及P－gp与MRP共表达与NB预后有关。