人神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究

目的研究人神经干细胞（hNSCs）移植对大鼠脊髓损伤的修复作用，并初步探讨其作用原理。方法分离、培养和鉴定hNSCs。24例成年SD大鼠分为移植组12例和对照组12例，均采用NYU-Ⅱ型脊髓打击器制作脊髓损伤模型，第9天移植组于损伤脊髓中心分别注入经CM-DiI标记的hNSCs混悬液，对照组注入人DMEM／F12培养液。术后第4、8周取损伤部位脊髓，免疫组织化学染色检测移植细胞的存活和分化；术后每7天行BBB评分，评定大鼠后肢运动功能恢复情况。数据进行成组设计资料的t检验。结果成功建立hNSCs的体外培养体系；移植的hNSCs在大鼠脊髓内存活超过8周，并向脊髓损伤头尾端迁移，免疫组织化学荧光染色示移植细胞可分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞；移植组大鼠BBB评分高于对照组（P〈0．05）。结论移植到大鼠损伤脊髓中的人神经干细胞可分化为神经元和神经胶质细胞，并可促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复。     

神经干细胞移植治疗脊髓损伤临床疗效观察

目的探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的临床疗效。方法对9例脊髓损伤患者进行脊髓探查加损伤局部神经干细胞移植术,术前及术后半年应用ASIA评分系统进行神经功能评定。结果患者在皮肤感觉、运动、二便、排汗等方面均有一定程度的改善;术后ASIA评分与术前比较,两者间有显著差异。结论神经干细胞移植可以改善脊髓损伤患者的感觉、运动、二便及排汗等多方面的神经功能,提高患者生活质量。     

神经干细胞移植在脊髓损伤中应用的研究进展

长期以来,人们一直认为,人体的神经细胞是终生存活的,并且由于神经元细胞缺乏再生修复能力,因此,一旦遇到损伤,这种细胞的失去也是永久的,只能通过胶质细胞增殖充填,导致相应功能损失的不可逆性.但这一传统认识被20世纪最后十几年神经生物学领域的重要进展所打破,这一进展就是发现成年哺乳动物脑组织内广泛存在着具有多向分化潜能的神经干细胞,并发现其在脊髓损伤修复中的应用潜能.神经干细胞(NSC)具有高度增殖、自我更新及分化能力,在一定条件下能不断进行有丝分裂,分化形成神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞.     

神经干细胞移植治疗脊髓损伤的实验性研究进展

脊髓损伤 (spinalcordinjury)后机体历经原发性损伤和继发性损伤的序贯过程 ,造成了灾难性的后果 ,表现为损伤节段平面以下感觉、运动功能的完全丧失和大小便失禁。Grossman[1] 等在脊髓挫伤的动物模型上证实脊髓功能的永久性障碍主要是继发性损伤造成的神经元和神经胶质丧失导致的。因为中枢神经系统自我修复能力有限 ,故而目前唯一可行的方法是通过移植来替代缺失的神经细胞[2 ] 。在急性脊髓损伤的动物模型上 ,通过移植细胞桥接组织 (外周神经、雪旺细胞 )、胚胎中枢神经细胞、分泌神经营养因子 3(NF 3)的成纤维细胞、杂交瘤细胞 (能…     

转基因神经干细胞在脊髓损伤修复中的应用

脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）是神经科学领域致死率、致残率最高的创伤之一,可直接导致神经元坏死、神经轴突中断、脊髓结构严重破坏。损伤后的微环境又有诸多不利于脊髓神经轴突再生的因素,如多种神经营养因子的缺乏以及胶质疤痕和多种抑制再生的物质存在等。近年来,随着对脊髓损伤机制、病理生理及损伤后局部微环境变化研究的不断深入,已将具有自我更新能力和多元分化潜能的神经干细胞（neural stem cells,NSCs）运用于SCI的实验治疗,并取得良好效果,而转基因NSCs能克服神经营养因子水平低,移植后存活时间短等不足,使得人们对攻克SCI越来越充满信心。     

大鼠胚胎神经干细胞异体移植对脊髓损伤的修复

目的 观察胚胎神经干细胞(neural stem cells,NSCs)对成年大鼠脊髓损伤(spianl cord injury,SCI)的修复及对轴突再生的作用.方法 制作20只大鼠SCI(T7)模型,随机分为实验组和对照组.伤后2 d实验组移植经全离培养的Wistar大鼠NSCs;对照组只注入DMEM培养液.移植后第1、2、4、6周经电镜及免疫组化观察移植对脊髓轴突再生的影响.结果 实验组NSCs与宿主融合较好,损伤区可见幼稚的呈束状排列的再生轴突;对照组轴突变性未见再生轴突.结论 NSCs植入异体大鼠打击伤后的脊髓可存活,并产生髓鞘样物质促进宿主脊髓轴突再生.     

神经干细胞在脊髓损伤修复机制中的实验研究进展

以"spinal cord injury AND neural stem cells"为关键词,检索了PubMed数据库、Springer-Link数据库近;以"脊髓损伤和神经干细胞"为关键词检索了CNKI数据库及万方数据库,排除了综述、META分析及相关重复研究。近年来研究者多以神经干细胞作为手段,在脊髓损伤领域进行细胞移植、替代治疗及神经营养因子等实验。以神经干细胞为代表进行细胞移植、促生长药物等多种治疗手段成为近年的实验研究热点,但实验研究中存在体外培养困难,移植的安全性问题及伦理道德问题等,成为延缓甚至治愈脊髓损伤的障碍,仍待进一步研究。     

神经干细胞移植治疗脊髓损伤的护理

目的:对脊髓损伤患者进行神经干细胞移植治疗护理。结果:经过系统化整体护理及规范康复治疗后,患者神经系统症状与体征有不同程度的改善。结论:正确有效的护理可以防止各种并发症的发生,从而提高疗效,改善患者的生活质量。     

重编程脂肪干细胞移植促进脊髓损伤修复的机制

目的探讨重编程脂肪干细胞(ADSCs)移植治疗大鼠脊髓损伤(SCI)的作用和修复机制。方法体外培养、纯化和鉴定大鼠ADSCs,并利用慢病毒包装神经元生成素2(Ngn2)基因转染大鼠第3代ADSCs。建立大鼠SCI模型后,48只雌性SD大鼠随机均分为A(SCI对照)、B(单纯ADSCs移植)和C(Ngn2-ADSCs移植)三组。采用BBB评分评价大鼠运动功能,HE染色、免疫组化和免疫荧光的方法检测脊髓组织学情况和相关蛋白的表达水平。结果重编程ADSCs在神经分化诱导后,神经元标记物(NeuN)阳性表达率达到90%以上。免疫荧光结果显示,细胞移植后4周,在脊髓损伤中心区域可见大量移植的ADSCs细胞表达GFP阳性。C组的BBB评分高于其他组,并且HE染色显示脊髓空洞面积小于其他两组(P<0.05),同时BDNF和VEGF蛋白含量也高于其他两组(P<0.05)。结论重编程ADSCs移植后能有效地存活并分化为神经细胞,减小脊髓损伤空洞,增加BDNF和VEGF表达,促进SCI大鼠的运动功能恢复,较单纯应用ADSCs能更好地促进SCI修复。     

神经干细胞概述及治疗视神经损伤的应用进展

神经干细胞是具有自我更新、多向分化潜能的细胞群,能分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。随着干细胞研究技术的不断发展,通过体外培养神经干细胞,移植整合入视网膜各层并定向诱导分化为目的细胞,有望重建视神经功能。本文就神经干细胞的来源、特性、分化调控机制及移植治疗视神经损伤的应用研究进行综述。     

自体骨髓干细胞移植术治疗脊髓损伤16例的护理体会

目前对于脊髓损伤的临床治疗主要是通过手术稳定受损部位,大剂量的皮质类固醇能够帮助限制继发性损伤和术后的康复训练。随着研究的不断深入,干细胞已经逐步应用到了此类患者的治疗中。我科从2010年8月至今收治对施行移植治疗16例脊髓损伤,均取得了良好的效果,现报告如下。     

大鼠脊髓损伤进行自体神经移植后的光镜观察分析

目的 探讨大鼠脊髓损伤后使用自体腓肠神经组织移植修复后的病理变化.方法 将实验动物分为自体腓肠神经移植组和非移植组各18例.两组利用改良Allen撞击方法建立脊髓损伤模型,损伤4周后移植组利用自体腓肠神经移植修复脊髓损伤段,非移植组仅暴露切口不做处理.分别于术后4、6、8周在光镜下观察脊髓损伤段及移植腓肠神经再生状况.结果 非移植组脊髓损伤段退化、变性,可见囊性空腔及瘢痕.移植组术后4周损伤区脊髓与移植物呈非紧密结合;术后6周融合良好;术后8周见再生神经纤维,通过损伤段与远端脊髓有机融合.与非移植组各组相比的差异有统计学意义(P<0.01).结论 自体神经移植修复大鼠脊髓损伤移植物不仅良好存活,而且促进受损脊髓轴突再生.     

自体骨髓基质细胞源性干细胞治疗脊髓损伤16例分析

目的 观察自体骨髓基质干细胞移植治疗脊髓损伤的疗效及其安全性.方法 16例脊髓损伤患者均经CT或MRI确诊并行手术或非手术治疗,在综合康复治疗的基础上给予自体骨髓基质干细胞(BM-SCs)移植,采集自体骨髓分离提取骨髓基质干细胞,体外诱导分化后经蛛网膜下腔分次注射.于入院当天、治疗后第1、3、12个月进行运动与感觉功能、膀胱功能评定.结果 患者感觉、运动和膀胱功能均有改善,但治疗前后差异无统计学意义;美国脊髓损伤协会分级评定:共有4例患者在12个月评估中分别提高1级;BMNCs移植术后低热2例,经对症处理均于3～5d消失.结论 自体骨髓BMNCs移植治疗脊髓损伤有一定疗效而且安全.     

脐带源性间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究进展

当前,脊髓损伤的治疗仍然是一个世界性的医学难题,新世纪,干细胞的研究引领着一场医学的变革.干细胞生物学性质稳定,能在适宜的体内、外环境下分化为神经元和胶质细胞.合理的选择干细胞移植的方法促进脊髓损伤模型神经功能的恢复极其重要,本文就近年来关于干细胞治疗脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的研究进展综述如下.     

脊髓损(战)伤及其神经干细胞疗法

治疗脊髓损伤是医学界的难题与研究重点,发现神经干细胞为神经损伤的治疗指引了新的方向。许多研究表明神经系统的多个区域存在具有多向分化潜能的神经干细胞,移植外源性神经干细胞可以适应性地与宿主中枢神经整合。本文就脊髓损伤的机制、脊髓战伤特点、干细胞分类、神经干细胞的来源及其作用机制和应用神经干细胞治疗脊髓损伤的相关研究与临床应用做一简介。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓半切损伤的修复作用

目的：观察骨髓间充质千细胞（MSC）移植对脊髓半切损伤大鼠运动功能的修复作用。方法：20只成年D大鼠随机分为移植组（n=10）和对照组（n=10），均进行脊髓半切损伤。伤后1周，移植组于伤处移植大鼠MSC，而对照组仅注射等量PBS。分别于移植后1天、1周、2周、3周、4周用BBB评分观测大鼠的运动功能，并于移植后4周进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测。结果：移植后1周两组动物运动功能恢复无明显差异。移植后2周、3周、4周，与对照组比较，移植组显著提高运动功能。移植后4周，移植组损伤脊髓的结构修复明显优于对照组。结论：脊髓半切损伤大鼠经MSC移植后能明显改善其运动功能和神经形态，MSC移植对脊髓半切损伤大鼠有治疗作用。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后再修复作用的研究

目的探讨间充质干细胞（MSCS）移植对大鼠脊髓损伤后脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响。方法选取SD大鼠4只作骨髓间充质细胞的分离与培养，提取MSCS；制做脊髓横断损伤模型，细胞移植组24只，PBS（磷酸盐缓冲液）液组24只，空白对照组12只。于脊髓损伤后第7天，无菌条件下，细胞移植组以微量注射器缓慢注入含MSCS的培养液5μl，磷酸盐缓冲液组5μl，对照组未加任何干预因素。分别于术后7d、14d、28d麻醉下行心脏灌流固定取T10节段脊髓，细胞移植组与磷酸盐缓冲组取出损伤节段的脊髓，空白对照组于同一节段取出相应脊髓。应用免疫组化法观察MSCS移植后大鼠脊髓损伤区BDNF的表达变化。结果脑源性神经营养因子在正常大鼠脊髓组织中有一定表达，间充质干细胞移植术后7d、14d及28d，细胞移植组脑源性神经营养因子均高水平表达，与缓冲液组相比较差别明显，具有统计学意义。结论间充质干细胞在移植后通过上调脑源性神经营养因子的表达从而促进轴突的再生，可能是治疗脊髓损伤的重要机制。     

外源性bFGF、VEGF对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖分化影响的实验研究

目的制备大鼠脊髓损伤模型,研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)联合移植对内源性神经干细胞(ENSCs)是否具有促增殖分化作用。方法成年Wistar大鼠56只,随机分成四组:A组为生理盐水组(n=14);B组为bFGF组(n=14);C组为VEGF组(n=14);D组为bFGF、VEGF组(n=14)。用Allen法在T10节段制备大鼠脊髓损伤模型,损伤后立即分别给予生理盐水、bFGF、VEGF、bFGF和VEGF。术后各时间点BBB评分系统监测大鼠运动功能的恢复,并在术后21d取材,处死前24h腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),取损伤部位近远端各5mm脊髓组织,行HE染色,免疫组织化学法检测Brdu、巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况。结果 (1)损伤后21d,bFGF、VEGF合用治疗组BBB高于其它三组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)损伤后21d时,bFGF、VEGF治疗组组织形态学基本接近正常脊髓组织。(3)免疫组织化学结果:损伤后21d时,bFGF、VEGF治疗组,神经干细胞数量和神经元数量明显高于其它组(P<0.05)。结论联合移植外源性bFGF、VEGF对ENSCs增殖和向神经元方向分化具有促进作用,且二者具有协同作用。     

神经干细胞抗帕金森病的实验治疗学进展

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)具有高度的自我更新能力、多向分化潜能(包括神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞)和迁移能力.主要来源于哺乳动物胚胎期的大部分脑区以及成体脑组织的两个区域:海马齿状回的颗粒下层和侧脑室的室管膜下区.目前,应用NSCs治疗帕金森病(Parkinson's diseas...     

脊髓损伤的治疗进展

脊髓损伤分为原发性损伤与继发性损伤。原发性损伤包括机械压迫、出血；继发性损伤包括水肿、炎症反应、局部缺血、谷氨酸受体过度激活、脂质过氧化作用、钙离子超载等；疾病最终导致脊髓灰白质缺血、变形、坏死。继发性损伤在原发性损伤后较长一段时间内起作用，是一种细胞和分子水平的主动调节过程，具有可逆性。继发性损伤可加重原发损伤，造成脊髓功能障碍，致机体全瘫或不全瘫。如能阻断此连锁反应中的某一环节，则可明显减轻继发损伤，促进脊髓功能的恢复。到目前为止，对原发性脊髓损伤尚无有效的治疗方法，仅依靠外科手术是不够的；对继发性损伤进行积极的药物控制和基因治疗，