去甲斑蝥素对人未分化甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭影响及机制研究

目的探讨去甲斑蝥素对人未分化甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭能力及机制研究。方法取对数生长期的人未分化甲状腺癌FRO细胞,加入不同浓度的去甲斑蝥素(2.5,5,10,20,40,80μg/mL)处理12 h、24 h和48 h,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况。取对数生长期的人未分化甲状腺癌FRO细胞,分为空白组、10μg/mL去甲斑蝥素组、20μg/mL去甲斑蝥素组、40μg/mL去甲斑蝥素组,各组培养24 h后,采用划痕实验和Transwell实验检测FRO细胞的迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期,TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blot法检测转移相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平。结果 2.5,5,10,20,40,80μg/mL的去甲斑蝥素对FRO细胞均有明显的增殖抑制作用,呈剂量时间依赖性。10μg/mL去甲斑蝥素组、20μg/mL去甲斑蝥素组、40μg/mL去甲斑蝥素组FRO细胞的迁移和侵袭能力均逐渐减弱,G2/M期细胞逐渐增多,细胞凋亡率逐渐增高,E-cadherin表达量逐渐增高,MMP-9表达量逐渐降低,各组间两两比较差异均有统计学意义(P均0.05)。结论去甲斑蝥素能够抑制人未分化甲状腺癌FRO细胞的增殖、迁移和侵袭,并可诱导细胞周期阻滞,促进细胞凋亡,其机制可能与上调E-cadherin和下调MMP-9蛋白表达有关。     

二氯乙酸钠对人骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的:观察二氯乙酸钠(sodium dichloroacetate,DCA-Na)对人骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法:将对数生长期的MG63细胞随机分为对照组和低、中、高浓度DCA-Na组,对照组不加DCA-Na,低、中、高DCA-Na组加入DCA-Na(终浓度分别为50μg·m L-1、100μg·m L-1、200μg·m L-1),并设1个只加等量培养基不加细胞和DCA-Na的空白组。分别在干预24 h、48 h、72 h后,采用Cell Counting Kit-8细胞活性检测试剂盒分光光度法检测MG63细胞增殖情况,测定光密度(optical density,OD),计算低、中、高DCA-Na组细胞增殖抑制率,细胞增殖抑制率=[1-(DCA-Na组OD值-空白组OD值)/(对照组OD值-空白组OD值)]×100%;分别采用Caspase-3活性检测试剂盒分光光度法和Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒流式细胞法检测MG63细胞Caspase-3酶活性情况和细胞凋亡情况;并在干预48 h后采用Transwell实验检测MG63细胞迁移情况。结果:1细胞增殖检测结果。干预后,低、中、高DCA-Na组MG63细胞增殖抑制明显,且随干预时间的延长,3组细胞增殖抑制率均呈上升趋势。各时间点间MG63细胞增殖抑制率差异有统计学意义(F=847.080,P=0.000),存在时间效应;干预24 h、48 h、72 h后,低、中、高DCA-Na组MG63细胞增殖抑制率的组间差异均有统计学意义,且低DCA-Na组中DCA-Na组高DCA-Na组[(10.802±3.000)%,(18.792±2.261)%,(27.080±3.133)%,F=2.795,P=0.000;(13.098±1.299)%,(25.215±2.676)%,(44.382±2.397)%,F=4.362,P=0.000;(14.728±1.177)%,(35.297±4.757)%,(64.227±4.549)%,F=5.896,P=0.000];3组间MG63细胞增殖抑制率总体比较,差异有统计学意义,存在分组效应(F=296.412,P=0.000);时间因素与分组因素之间存在交互效应(F=75.678,P=0.000)。2Caspase-3酶活性检测结果。对照组MG63细胞Caspase-3酶活性无明显变化,干预后低、中、高DCA-Na组MG63细胞Caspase-3酶活性均呈上升趋势。各时间点间MG63细胞Caspase-3酶活性的差异有统计学意义(F=1 480.792,P=0.000),存在时间效应;干预24 h、48 h、72 h后,4组间MG63细胞Caspase-3酶活性的差异均有统计学意义,且对照组低DCA-Na组中DCA-Na组高DCA-Na组(0.027±0.003,0.143±0.005,0.153±0.008,0.161±0.003,F=2.320,P=0.000;0.035±0.003,0.174±0.004,0.184±0.007,0.253±0.001,F=1.014,P=0.000;0.031±0.004,0.246±0.006,0.275±0.003,0.371±0.004,F=1.000,P=0.000);4组间MG63细胞Caspase-3酶活性总体比较,差异有统计学意义,存在分组效应(F=624.975,P=0.000);时间因素与分组因素之间存在交互效应(F=94.579,P=0.000)。3流式细胞法细胞凋亡检测结果。对照组MG63细胞凋亡率无明显变化,干预后低、中、高浓度DCA-Na组MG63细胞凋亡率均呈上升趋势。各时间点间MG63细胞凋亡率的差异有统计学意义(F=359.645,P=0.000),存在时间效应;干预24 h、48 h、72 h后,各组间MG63细胞凋亡率的差异均有统计学意义,且对照组低DCA-Na组中DCA-Na组高DCA-Na组[(2.554±0.427)%,(10.708±2.012)%,(20.857±2.531)%,(27.312±2.140)%,F=6.733,P=0.000;(1.748±0.202)%,(18.604±2.721)%,(29.471±1.605)%,(36.873±2.734)%,F=9.292,P=0.000;(1.944±0.112)%,(24.071±3.921)%,(30.050±3.921)%,(38.211±1.721)%,F=8.237,P=0.000];4组间MG63细胞凋亡率总体比较,差异有统计学意义,存在分组效应(F=46.627,P=0.000);时间因素与分组因素之间存在交互效应(F=7.012,P=0.000)。4细胞迁移检测结果。干预48 h后,4组迁移细胞数[显微镜每个视野下(×200)]的组间差异有统计学意义[(84.45±10.45)个,(74.56±9.45)个,(65.41±5.21)个,(40.21±4.52)个,F=148.243,P=0.000)];低、中、高DCA-Na组迁移细胞数均少于对照组(P=0.017,P=0.001,P=0.000),且低DCA-Na组中DCA-Na组高DCA-Na组(P=0.012,P=0.001,P=0.000)。结论:DCA-Na可抑制人骨肉瘤MG63细胞的增殖,增强MG63细胞Caspase-3酶活性,诱导和促进MG63细胞凋亡,抑制MG63细胞的迁移;且浓度越高、干预时间越长,其影响越明显。     

不同浓度丹皮酚影响膀胱癌5637细胞增殖、迁移能力和侵袭能力的实验研究

目的：观察不同浓度丹皮酚对膀胱癌5637细胞增殖、迁移能力和侵袭能力的影响及对环氧化酶-2 (COX-2)、前列腺素E2 (PGE2)的调控作用。方法：通过观察不同浓度丹皮酚作用于膀胱癌5637细胞24 h、48 h、72 h后的细胞存活率,计算半数抑制浓度（IC50）,探讨不同浓度丹皮酚对膀胱癌5637细胞增殖的影响。采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验观察不同浓度丹皮酚对膀胱癌5637细胞迁移能力和侵袭能力的影响。通过酶联免疫吸附试验法测定不同浓度丹皮酚的含药培养基处理膀胱癌5637细胞24 h后对环氧化酶-2(COX-2)、前列腺素E2 (PGE2)含量及COX-2活性的影响。结果：膀胱癌5637细胞的存活率随丹皮酚浓度的增加而逐渐下降。在72 h、200μg/mL条件下,丹皮酚对细胞增殖的抑制作用最为明显。处理24 h、48 h、72 h,25μg/mL组、50μg/mL组、100μg/mL组、200μg/mL组的膀胱癌5637细胞存活率均低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。处理24h,50μg/mL组、100μg/mL组、200μg/mL组的细胞存活...     

粗叶悬钩子总生物碱对人肝癌细胞增殖的影响

目的探讨粗叶悬钩子总生物碱对人肝癌细胞(HepG2)增殖的影响。方法分别用不同剂量总生物碱干预体外培养的HepG2,观察细胞形态,并用MTT法检测该总生物碱对HepG2细胞活力的影响及其对HepG2的抑制作用。结果粗叶悬钩子总生物碱干预24h后,浓度达1000μg/mL对肝癌细胞才有抑制作用,作用48h和72h后,各组呈现明显的剂量和时间依赖;MTT法结果显示生物碱作用HepG248h和72h后,有显著抑制作用。结论粗叶悬钩子总生物碱能有效地抑制HepG2细胞的增殖。     

基于MAPK信号通路探讨荔枝核总黄酮对HSC-T6细胞的作用

目的 观察荔枝核总黄酮对HSC-T6细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达的影响,探讨荔枝核总黄酮是否可通过调控MAPK信号通路影响肝纤维化的进程。方法 设置荔枝核总黄酮20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL、320μg/mL组和细胞对照组、空白组,CCK-8法检测各组细胞吸光度,计算细胞增殖抑制率,选择最佳的荔枝核总黄酮浓度进行后续实验。后续实验设置荔枝核总黄酮组、秋水仙碱组、细胞对照组及空白组,加入相应培养基培养24 h、48 h、72 h后,CCK-8法检测各组细胞吸光度,计算细胞增殖抑制率;各组细胞培养72 h后,透射电镜观察细胞的超微结构,ELISA法检测细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)水平,RT-PCR法检测细胞中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38 mRNA表达情况,免疫组化法检测细胞中JNK、ERK、p38蛋白及其相应磷酸化蛋白(p-JNK、p-ERK、p-p38)表达情况。结果 荔枝核总黄酮的最佳实验浓度为160μg/mL,最佳干预时间为...     

MTT法检测香叶木苷对脐静脉内皮细胞增殖抑制的影响

目的:测定香叶木苷对脐静脉内皮细胞的影响,优化出最佳加药浓度和最优加药时间。方法:1)将细胞分为对照组和实验组(终浓度10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL、60μg/mL),MTT法检测细胞活性,根据抑制率和抑制率曲线确定了最佳加药浓度。2)将细胞分为A组(24h)、B组(48h)、C组(72h),每组设置对照,加药(20μg/mL)后分别按照各组时间用MTT法检测细胞活性,根据抑制率和抑制率曲线确定了最优加药时间。结论:经实验选择出的最佳加药浓度为20μg/mL,最优加药时间为48h,其IC50为254.8μg/mL。     

人参皂苷Rg3对卵巢癌原代细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的:探讨人参皂苷Rg3对卵巢癌细胞增殖、迁移及凋亡变化情况。方法:分离人卵巢癌原代细胞,通过Rg3(0、50、100、200μg/ml)浓度干预,分别处理0、12、24h后,CCK8法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:CCK8和细胞划痕结果显示Rg3能显著抑制卵巢癌细胞增殖和迁移能力,流式细胞术实验结果显示Rg3能显著诱导卵巢癌细胞凋亡。结论:Rg3能抑制卵巢癌细胞增殖和迁移,诱导细胞凋亡,此研究结果为Rg3新药开发及卵巢癌临床应用提供依据。     

藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的通过研究藏药波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对大鼠肝星状HSC-T6细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡的作用,进一步探讨TLHPS抗肝纤维化的作用机制。方法实验分为对照组,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组,阳性药秋水仙碱0.1μg/mL组。用加入各组药物的培养基分别培养HSC-T6细胞24、48、72 h,采用CCK8法检测各组细胞24、48、72 h的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,Western blotting法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、核转录因子-κB(NF-κB)的表达水平。结果与对照组相比,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组对HSC-T6细胞24、48、72 h时的增殖抑制率明显增高(P0.01),且各组HSC-T6细胞早期凋亡率与晚期凋亡率明显升高(P0.05,0.01),G0/G1期细胞数明显增多(P0.01),G2/M期细胞数无明显差异(P0.05),S期细胞数明显减少(P0.01)。Western blotting结果显示,与对照组相比,TLHPS10、20、30、40μg/mL组Bcl-2蛋白表达明显降低(P0.05,0.01),TLHPS 40μg/mL组Bax蛋白表达明显升高(P0.01),TLHPS 20、30、40μg/mL组NF-κB表达明显降低(P0.01)。结论 TLHPS抗肝纤维化的作用机制可能是通过降低Bcl-2、NF-κB的表达抑制肝星状细胞增殖并诱导其凋亡。     

紫白膏促进创面修复的作用及机制研究

目的 探究紫白膏促进大鼠创面修复的作用及可能机制。方法 (1)动物实验：采用外科创面结合金黄色葡萄球菌感染建立大鼠红肿创面模型。将造模成功的大鼠随机分为空白组、凡士林组和紫白膏组,每组7只。凡士林组外用凡士林,紫白膏组外用紫白膏,涂抹量均为3 g;空白组不做处理。创面清洁包扎防治感染,每天进行换药至创面完全愈合。观察3组大鼠创面色泽、质地,测量创面面积。待创面完全恢复后将大鼠脱颈处死,剥离新生的组织。RT-qPCR检测大鼠创面组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）和血管生成素-1(Ang-1)mRNA相对表达水平。(2)细胞实验：将HUVEC细胞分为DMSO组、1 mg/mL组、5 mg/mL组和10 mg/mL组,DMSO组用DMSO溶液干预,1、5、10 mg/mL组分别用1、5、10 mg/mL紫白膏混悬液干预,均干预48 h。MTT法检测干预12、24、48 h后细胞活力;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;Transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;RT-qPCR检测HUVEC细胞VEGF和Ang-1 mRNA相对表达水平。结果 (1)动物实验：与空白组和凡士林组比较,紫...     

新疆阿魏乙酸乙酯分离部位对HCT116细胞迁移和侵袭能力的影响

目的观察新疆阿魏乙酸乙酯分离部位对人结肠癌细胞HCT116迁移和侵袭能力的影响,探讨其相关作用机制。方法将体外不同浓度阿魏乙酸乙酯分离部位作用于人结肠癌HCT116细胞24 h,CCK-8法检测细胞增殖,计算细胞生长抑制率和IC50,细胞划痕实验和Transwell小室实验观察HCT116细胞迁移和侵袭能力。结果新疆阿魏组与顺铂组随着药物浓度的增加,OD值逐渐变小,抑制率呈药物浓度依赖性,新疆阿魏组IC50为43.98μg/m L,顺铂组IC50为36.77μg/m L。与空白组比较,经新疆阿魏树脂乙酸乙酯分离部位作用后,HCT116细胞迁移和侵袭能力明显减弱(P0.01)。结论新疆阿魏树脂乙酸乙酯分离部位对人结肠癌细胞HCT116的增殖、迁移和侵袭能力具有一定的抑制作用。     

淫羊藿苷抗肝癌细胞HepG2迁移机制的研究

目的 探讨淫羊藿苷抑制肝癌细胞系HepG2粘附和移动的作用及机制.方法 不同浓度淫羊藿苷作用HepG2细胞24 h后,粘附实验检测细胞粘附率,划痕损伤实验检测迁移速度.结果 2,4,8,12和16μg/ml淫羊藿苷处理24 h后,HepG2细胞粘附率分别为77.42%,45.68%,42.39%,40.46%和20.57%,总体呈下降趋势,4 μg/ml组与2μg/ml和16μg/ml组比较差异有显著性(P <0.01);与8 μLg/ml组和12 μg/ml组比较差异无显著性(P > 0.05).4μg/ml淫羊藿苷处理24 h后HepG2细胞迁移速度明显降低(P<0.01).结论 淫羊霍藿苷抑制HepG2细胞粘附和运动,发挥了抑制肿瘤转移作用.     

天花粉蛋白对黑色素瘤细胞黏附、迁移及侵袭能力的影响

目的:研究天花粉蛋白对小鼠黑色素细胞株B16黏附、迁移及侵袭能力的影响。方法:B16细胞体外培养,经10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL天花粉蛋白分别处理细胞,通过细胞黏附实验、划痕实验、侵袭实验检测细胞黏附、迁移及侵袭能力。结果:与对照组相比,各实验组黏附细胞OD值均明显降低(P<0.01),细胞运动距离均明显缩短(P<0.05),侵袭细胞数目均明显减少(P<0.05),与低剂量组相比,高剂量组黏附细胞OD值、侵袭细胞数目明显降低(P<0.05)。结论:天花粉蛋白能够从黏附、迁移及侵袭多个环节抑制B16细胞,提示在抑制肿瘤转移方面可能具有应用前景。     

辣椒素对前列腺癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的：观察辣椒素对前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法：MTT法检测辣椒素对前列腺癌细胞活力的影响;显微镜下观察辣椒素干预对PC-3细胞数量及形态的影响;细胞划痕法观察不同浓度(1、5、10μmol/L)辣椒素在不同时间段(24、48 h)对前列腺癌PC-3细胞迁移的影响;Hoechst 33258荧光染色法检测前列腺癌细胞凋亡水平;Western Blot和实时荧光定量PCR法检测辣椒素干预对前列腺癌细胞增殖、凋亡及迁移相关mRNA及蛋白表达的影响。结果：MTT法检测结果显示,辣椒素可显著抑制前列腺癌细胞的活力(P<0.05或P<0.01);显微镜下观察到辣椒素干预可显著降低前列腺癌细胞的存活数量及细胞活力(P<0.05或P<0.01);细胞划痕实验结果显示,与对照组比较,1、5、10μmol/L辣椒素处理组细胞划痕愈合率显著降低(P<0.01);Hoechst染色实验结果显示,辣椒素各组前列腺癌细胞的细胞核染色质浓缩现象增加,细胞凋亡增多;Western Blot结果显示辣椒素可显著下调PC-3细胞CyclinD1、PCNA、Bcl-2、N...     

石见穿多糖通过Wnt/β-catenin信号通路调控骨肉瘤细胞的迁移和侵袭

目的探讨石见穿多糖通过Wnt/β-catenin信号通路调控骨肉瘤细胞的迁移和侵袭。方法不同浓度石见穿多糖(0、0.25、0.5、1 mg/mL)处理人OS MG63细胞24 h,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,RT-PCR检测人OS细胞β-catenin mRNA表达,Western blot检测人OS MG63细胞Vimentin、E-cadherin蛋白表达。结果石见穿多糖抑制细胞迁移、侵袭(P0.01),降低β-catenin mRNA及Vimentin蛋白表达(P0.05,P0.01),促进E-cadherin蛋白表达(P0.01),且上述作用呈现剂量依赖性。结论石见穿多糖能抑制人OS MG63细胞的迁移和侵袭能力,这种作用可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而阻断EMT过程而引起的。     

β-榄香烯对人乳腺癌细胞侵袭和迁移作用的研究

目的:研究β-榄香烯对不同分子亚型人乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的作用。方法:以不同转移潜能MCF-7、MDAMB-231乳腺癌细胞作为研究对象,设空白对照组及药物组,药物组以不同浓度β-榄香烯溶液作用细胞24h与48h后,CCK8法检测其对细胞活力的影响。应用细胞克隆形成实验进一步检测β-榄香烯对两种细胞增殖和克隆形成能力的影响。此外,Transwell实验和划痕实验检测β-榄香烯对高转移性细胞株MDA-MB-231细胞侵袭和迁移能力的作用。结果:β-榄香烯对MCF-7、MDA-MB-231乳腺癌细胞的活力均有抑制作用,且对高转移细胞MDA-MB-231抑制作用更强,对于MCF-7细胞24h,48h的半数抑制浓度(IC50)分别为(43.45±0.43),(43.05±0.56)μg/ml,对MDA-MB-231细胞24h,48h的半数抑制浓度(IC50)分别为(12.20±0.61),(8.30±0.27)μg/ml。克隆形成实验结果表明β-榄香烯能够抑制乳腺癌细胞的克隆形成率,与空白对照组相比具有显著性差异。当β-榄香烯浓度为25μg/ml时,对MDA-MB-231细胞的抑制率达到49.2%,对MCF-7只有15.5%。此外,Transwell实验和划痕实验结果显示当β-榄香烯浓度达到10μg/ml时就能抑制高转移性细胞株MDA-MB-231的侵袭和迁移能力。结论:β-榄香烯能够抑制MCF-7、MDA-MB-231的细胞活力、增殖和克隆形成,且对高转移性细胞株MDA-MB-231的侵袭和迁移能力显示出很强的抑制作用,其具体作用机制有待进一步研究。     

千金藤素对骨肉瘤MG-63细胞迁移、侵袭能力影响的体外研究

目的探讨千金藤素对骨肉瘤MG-63细胞迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法将培养的MG-63细胞分为10μmol/L千金藤素组、40μmol/L千金藤素组和对照组,观察3组划痕迁移试验、Transwell小室侵袭试验骨肉瘤MG-63细胞迁移、侵袭能力,用酶联免疫吸附试验检测3组基质金属蛋白酶-2(MMP-2)浓度。结果 10μmol/L千金藤素组、40μmol/L千金藤素组细胞向划痕处迁移明显减少,且随着千金藤素浓度的增加,细胞向划痕处迁移明显减少。10μmol/L千金藤素组、40μmol/L千金藤素组穿膜细胞数明显少于对照组(P均0.05),且40μmol/L千金藤素组明显少于10μmol/L千金藤素组。骨肉瘤MG-63细胞培养液中MMP-2浓度随着作用时间的延长而降低,10μmol/L千金藤素组、40μmol/L千金藤素组培养24 h、48 h、72 h的MMP-2浓度均明显低于对照组,且40μmol/L千金藤素组均明显低于10μmol/L千金藤素组,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论千金藤素可抑制骨肉瘤MG-63细胞迁移和侵袭能力,这种抑制效应可能是通过抑制肿瘤细胞MMP-2的表达来实现的。     

山仙颗粒对Hepa1-6肝癌细胞迁移与侵袭及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 观察山仙颗粒含药血清对Hepa1-6肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并基于上皮-间充质转化(EMT)和Wnt/β-catenin信号通路探讨其可能的分子机制。方法 采用SD大鼠制备山仙颗粒低、中、高剂量含药血清和空白血清。体外培养Hepa1-6肝癌细胞,设空白血清组、KYA1797K组及山仙颗粒低、中、高剂量含药血清组。取各组干预12 h、24 h、36 h后的Hepa1-6肝癌细胞,通过划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot法检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、β-catenin和磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)蛋白表达情况。结果 与空白血清组比较,山仙颗粒中、高含药血清组及KYA1797K组干预12 h后的细胞迁移距离和山仙颗粒各组及KYA1797K组干预24 h、36 h后的细胞迁移距离均明显缩短(P均<0.05);山仙颗粒各组及KYA1797K组干预12 h、24 h、36 h后的穿膜细胞数量均明显减少(P均<0.05),...     

芍药苷对大鼠颈椎间盘纤维环细胞炎症模型IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响

目的:观察芍药苷对体外培养的大鼠颈椎间盘纤维环细胞炎症模型IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。方法:分离3周龄SD大鼠颈椎间盘纤维环细胞,培养至取第三代进行甲苯胺蓝染色及II型胶原免疫组织化学染色鉴定。鉴定成功后,随机分为空白组、模型组和芍药苷组,其中模型组与芍药苷组均采用脂多糖(LPS)诱导,建立体外纤维环细胞的炎症模型,并确定干预的最佳浓度和时间;于造模成功后,芍药苷组分别用不同浓度芍药苷进行干预,其余各组不进行干预,24h后,收集各组细胞上清液,通过ELISA法检测IL-1β、IL-6和TNF-α的表达量。结果:与空白组比较,24h时,LPS10ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL组细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著高于空白组(P0.01)。其中,LPS浓度为10ng/mL时,IL-1β、IL-6和TNF-α表达高于其余各组,差异具有统计学意义(P0.01);10ng/mL LPS分别干预纤维环细胞4h、8h、12h、24h、48h,细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均高于空白组,且24h时细胞上清中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均高于其余各组。芍药苷组采用浓度为20μg/mL、200μg/mL、2 000μg/mL芍药苷溶液干预纤维环细胞的炎症细胞24h,细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均低于空白组,差异具有统计学意义(P0.01),且芍药苷浓度为200μg/mL时IL-1β、IL-6和TNF-α均低于20μg/mL、2 000μg/mL时,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:LPS浓度为10ng/mL时,干预24h时,可成功建立体外纤维环细胞炎症模型;芍药苷浓度为200μg/mL时可有效抑制纤维环细胞炎症模型IL-1β、IL-6和TNF-α的表达。     

淫羊藿素对人卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的 观察淫羊藿素对人上皮性卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响，并探讨淫羊藿素通过调控A2780细胞上皮间质转化（EMT）相关分子表达抑制细胞侵袭迁移。方法 设置空白组，淫羊藿素低、中、高剂量组（5，10，20 μmol·L^-1）分别作用于人卵巢癌A2780细胞48 h。采用细胞增殖与活性检测CCK-8）法，流式细胞术检测各组细胞增殖抑制率及凋亡率；划痕实验及transwell迁移实验观察细胞迁移情况并计算划痕愈合率与迁移率；transwell侵袭实验观察细胞侵袭情况并计算侵袭率；蛋白免疫印迹法（Western blot）与实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测EMT相关分子E-钙黏蛋白（E-cadherin），N-钙黏蛋白（N-cadherin），波形蛋白（Vimentin）和肿瘤侵袭迁移相关分子基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白及mRNA表达情况。结果 CCK-8与流式细胞术结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组细胞抑制率显著上升（P<0.01），细胞总凋亡率上升（P<0.05）；划痕实验及transwell侵袭迁移实验结果显示，与空白组比较，淫羊藿素组的侵袭迁移能力减弱，细胞侵袭迁移数量和侵袭迁移率明显减少（P<0.05）；Western blot与PCR结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组中N-cadherin，MMP-9，Vimentin蛋白和mRNA表达总体呈下降趋势，E-cadherin的表达呈上升趋势。结论 淫羊藿素对人卵巢癌A2780细胞具有抑制增殖、促进凋亡的作用，可能通过调控EMT相关分子表达抑制A2780细胞的侵袭迁移。     

赤芍总苷对人肝癌SMMC-7721细胞迁移的影响及作用机制探讨

目的:探讨赤芍总苷对肝癌细胞SMMC-7721细胞迁移能力的影响及对血管内皮生长因子(VEGF),环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。方法:体外培养SMMC-7721细胞,随机分组,不加药物作用的为空白组,其他各组为赤芍总苷低、中、高剂量组,将不同质量浓度(200,400,600 mg·L-1)的赤芍总苷作用于细胞24 h后,采用MTT法检测赤芍总苷对细胞抑制作用,细胞划痕实验测定迁移能力,RT-PCR检测COX-2 mRNA表达,Western blot检测VEGF蛋白的表达。结果:与空白组比较,赤芍总苷能够明显的抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖,且呈现量效关系(P<0.01),并能够抑制细胞的迁移(P<0.01),RTPCR及Western blot结果显示,赤芍总苷作用细胞24 h后,可使COX-2 mRNA和VEGF蛋白的表达明显下降(P<0.01)。结论:赤芍总苷能够抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长、迁移,其机制可能是通过下调COX-2,VEGF的表达来实现,从而为赤芍总苷治疗肝癌的发展及其临床应用提供理论和实验依据。