缺氧对人肺腺癌细胞A549细胞周期阻滞和HIF-1α表达的影响

目的　探讨缺氧导致肿瘤细胞周期阻滞的作用及机制。方法　人肺腺癌细胞A5 4 9分成 3组 :缺氧 12h组、缺氧 2 4h组及对照组。缺氧组分别在缺氧条件下 (37℃ ,5 %CO2 、 2 0 %O2 饱和度 )培养 12h和 2 4h ,对照组置于正常氧浓度条件下 (37℃ ,5 %CO2 、 2 1%O2 饱和度 )培养 2 4h。流式细胞仪分别测定 3组细胞周期分布 ,免疫组织化学S P法分别测定 3组细胞缺氧诱导因子 1α (HIF 1α)表达。结果　①缺氧 12h组、缺氧 2 4h组的G0 /G1期比例 (70 2 0± 3 33) %、 (82 85± 1 75 ) %显著高于对照组 (5 0 36± 4 0 9) % ,差异有显著性意义 ,F =2 0 2 34,P <0 0 1。②缺氧 12h组、 2 4h组及对照组HIF 1α表达为 0 16 4± 0 0 18、 0 2 5 6± 0 0 5 3、 0 0 12± 0 0 0 3,其差异有显著性意义 (F =10 5 2 8,P <0 0 1)。③缺氧组HIF 1α表达与G0 /G1期比例呈明显正相关性 (r =0 815 ,P <0 0 1)。结论　缺氧使人肺腺癌细胞A5 4 9发生G0 /G1期阻滞 ,HIF 1α在缺氧导致的人肺腺癌细胞A5 4 9G0 /G1期阻滞中可能起重要作用。     

盐酸埃克替尼治疗终末期非小细胞肺癌的临床观察

目的探讨盐酸埃克替尼对终末期（PS评分≥3分）非小细胞肺癌的疗效。方法回顾性分析终末期非小细胞肺癌患者50例,27例接受盐酸埃克替尼治疗,23例不接受盐酸埃克替尼治疗和其他放化疗。结果疾病控制率：治疗组是85．2％,对照组是26．1％（P〈0．001）。治疗组中位生存期为102天,对照组中位生存期为65天（P=0．008）。结论盐酸埃克替尼可延长终末期非小细胞肺癌患者的生存期,提高疾病控制率。     

基于PI3K/AKT/HIF-1α信号通路研究易层敷贴缓解TGF-β1诱导的膝骨关节炎大鼠滑膜纤维化的机制

目的 探讨易层敷贴对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜纤维化TGF-β1、α-SMA、COL1A1表达的影响以及对PI3K/AKT/HIF-1α信号通路的调控作用。方法 将30只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组和易层组,膝关节腔注射200 ng转化生长因子-β1重组蛋白(TGF-β1)建立膝关节滑膜纤维化动物模型,2 d 1次,持续3次,造模14 d后给予易层敷贴外用治疗28 d后取滑膜组织。HE和Masson染色观察滑膜病理变化;免疫组化检测滑膜p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1的表达水平。提取雄性SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(FLSs),以10 ng·mL^-1 TGF-β1诱导24 h建立KOA滑膜纤维化细胞模型,易层冻干粉干预24 h, Western blot检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1的蛋白表达,qPCR检测HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达。结果 与空白组相比,模型组HE染色滑膜炎加重(P<0.01...     

二甲双胍通过PI3K/AKT/GSK3β信号通路对肺癌A549细胞增殖的影响

目的:探讨二甲双胍对非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响,并阐明其可能的作用机制.方法:将肺癌A549细胞分为对照组和不同浓度(1、2、4、8、16和32 mmol·L-1)二甲双胍组,MTT法检测作用24、48和72 h后各组A549细胞增殖率,克隆形成实验检测各组A549细胞克隆形成数,细胞划痕实验检测各组A549细...     

盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的 观察和评价表皮细胞生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）类药物盐酸埃克替尼单药治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效及毒副反应,并分析影响疗效的相关因素。方法分析72例ⅢB期及Ⅳ期NSCLC患者,所有患者均口服盐酸埃克替尼125mg,3次/d,分析患者临床特点及其与客观有效率（ORR）、疾病控制率（DCR）、无进展生存期（PFS）、总生存期（OS）的关系,以及症状缓解、毒副反应情况。结果72例患者中有4例因毒副反应或其他原因而停药。余下68例患者中,部分缓解30例（44.1%）,疾病稳定19例（27.9%）,疾病进展19例（27.9%）。ORR为44.1%,DCR为72.0%,中位PFS6.0个月。ORR及DCR在不同性别、不同美国东部肿瘤协作组（ECOG）评分、不同病理类型、不同EGFR突变状态及不同皮疹状态之间的比较差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）。Kaplan-Meier法生存分析显示PFS在不同TNM分期、病理类型、EGFR突变状态以及皮疹状态患者间的比较差异有统计学意义（P＜0.05）。全组有42例（61.8%）患者在治疗后有不同程度的症状缓解。治疗相关毒副反应主要为皮疹34例（50.0%）,腹泻16例（23.5%）,其他毒副反应包括转氨酶升高、食欲不振、乏力、恶心、呕吐、头晕等。结论盐酸埃克替尼单药治疗晚期NSCLC疗效肯定,对于EGFR突变患者有效率更高,治疗相关毒副反应较轻,患者耐受性好,为晚期NSCLC患者治疗带来新希望。     

姜黄素对HL60细胞PI3K/AKT信号传导通路的影响

目的研究姜黄素诱导白血病HL-60细胞凋亡与PI3K/AKT信号传导通路的相关性,为AML的靶向治疗提供新思路。方法 MTT实验检测姜黄素对HL-60细胞增殖的抑制作用;经姜黄素处理后,用倒置显微镜进行细胞形态学观察,并用Western blot检测CAV-1、AKT、p-AKT蛋白水平。结果 MTT实验证明了姜黄素对HL60细胞增殖具有抑制作用,且随作用浓度的增强而增强;姜黄素作用HL-60细胞,用倒置显微镜观察细胞出现了凋亡形态学改变;并且Western blot检测显示CAV-1蛋白水平增高,而AKT、p-AKT蛋白水平降低。结论姜黄素可通过上调HL-60细胞中CAV-1的表达,而抑制PI3K/AKT信号通路,进而抑制HL-60细胞增殖并促进其凋亡。     

塞来昔布对埃克替尼诱导肺腺癌细胞A549凋亡作用的影响

目的 研究埃克替尼与塞来昔布联合应用对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响以及对EGFR、COX-2表达的影响。方法 埃克替尼、塞来昔布单独或联合干预细胞48h后,倒置相差显微镜观察药物干预后细胞形态学变化;四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定细胞抑制率;HOECHEST33258荧光染色法和流式细胞术检测细胞凋亡和药物作用周期;免疫荧光检测EGFR和COX-2蛋白表达情况。结果 埃克替尼联合塞来昔布,相比单药组明显出现大量颗粒和空泡,细胞变圆开始脱落;埃克替尼与塞来昔布对A549细胞增殖有明显抑制作用,并呈浓度及时间依赖性,二者联合作用时抑制作用更强（P〈0.05）;埃克替尼与塞来昔布均能诱导细胞凋亡,联合作用后细胞凋亡率更高（P〈0.05）;联合用药与单独用药相比,可使细胞发生明显的G1期阻滞（P〈0.05）,进一步下调了EGFR和COX-2蛋白的表达（P〈0.05）。结论 埃克替尼与塞来昔布联合应用具有协同作用,机制可能与介导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期及阻滞EGFR和COX-2信号途径有关。     

NOTCH1调控 PTEN/PI3K/AKT信号通路促进肾透明细胞癌发病

研究NOTCH1在肾透明细胞癌中的表达及其对PTEN/PI3K/AKT信号通路的调控。 方法 收集36对肾透明细胞癌及其邻近非肿瘤肾组织,Western blotting和qrt-PCR检测NOTCH1、HES1、PTEN、AKT(p-S473)蛋白及其mRNA的表达,分析NOTCH1表达与肿瘤临床特征之间的关系。在肾透明细胞癌细胞系786-O及人肾小管上皮细胞系HKC中沉默或过表达NOTCH1,Western blotting和qrt-PCR检测HES1、PTEN、AKT(p-S473)蛋白及其mRNA变化,MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测其对细胞周期及凋亡的影响。 结果 肾透明细胞癌组织中NOTCH1的表达明显高于癌旁组织,其表达与患者年龄、肿瘤大小、核分级及肿瘤TNM分期无明显关系（P>0.05）。在两株细胞中,沉默NOTCH1均能抑制细胞生长,引起HES1与AKT(p-S473)蛋白下降,PTEN的蛋白及mRNA水平明显升高。过表达NOTCH1则促进细胞生长,HES1、AKT(p-S473)及PTEN的变化方向同转染siRNA相反。沉默或过表达NOTCH1均对细胞的凋亡无明显影响。 结论 在肾透明细胞癌中,过度活化的NOTCH1信号通路起促癌作用,其机制可能通过调节PTEN/PI3K/AKT信号通路参与发病过程,这为肾透明细胞癌的治疗提供了新思路。     

盐酸埃克替尼联合化疗对比盐酸埃克替尼单药治疗晚期非小细胞肺癌的回顾性分析

目的：探讨盐酸埃克替尼同步联合含铂两药化疗及盐酸埃克替尼单药对晚期非小细胞肺癌（non?small cell lung cancer,NSCLC）的疗效及安全性。方法：分析2012年8月—2018年11月本院收治的144例晚期NSCLC患者的临床资料,研究组（n=64）一线接受盐酸埃克替尼同步联合铂类为基础的两药化疗,对照组（n=80）一线接受盐酸埃克替尼单药治疗。对比两组近期及远期疗效及不良反应情况。结果：两组治疗1周期后客观缓解率（objective response rate,ORR）及疾病控制率（disease control rate,DCR）差异均无统计学意义（P > 0.05）。研究组中位无进展生存期（progression?free survival,PFS）较对照组延长了9个月（中位PFS：19.0个月vs.10.0个月,P < 0.001）,中位总生存期（overall survival,OS）较对照组延长了21个月（中位OS：40.0个月vs.19.0个月,P < 0.001）。对照组不良事件发生率低,程度轻,主要为皮疹（17.50 %）,无需特殊处理。研究组患者皮疹发生率并未增加,骨髓抑制、消化道反应、肝功能异常发生率明显升高（P < 0.001）,经治疗后均有好转。结论：对于表皮生长因子受体突变的晚期NSCLC患者,盐酸埃克替尼同步联合化疗推荐作为一线治疗的较优选择,可给患者带来更长的生存获益。     

盐酸埃克替尼与厄洛替尼治疗化疗失败的晚期肺癌的临床观察

目的观察和比较盐酸埃克替尼与厄洛替尼在化疗失败的晚期非小细胞肺癌患者中的疗效和安全性。方法选择26例晚期化疗失败的非小细胞肺癌患者,随机分人埃克替尼组和厄洛替尼组。其中埃克替尼组13例,厄洛替尼组13例,观察比较两组近期疗效及毒副反应。结果埃克替尼组完全缓解0例,部分缓解3例,稳定5例,有效率为23．1％,疾病控制率61．6％。厄洛替尼组完全缓解0例,部分缓解2例,稳定7例,有效率为15．4％,疾病控制率69．2％。两组有效率及疾病控制率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。两组患者毒副反应类似,主要为皮疹,均可耐受。结论埃克替尼在化疗失败的晚期非小细胞肺癌患者中的疗效及不良反应与厄洛替尼相似,是该类患者的新选择。     

厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的:探讨厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549的作用.方法:survivin siRNA转染、厄洛替尼单独或联合应用于人肺腺癌细胞A549,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察对A549细胞的增殖抑制作用,免疫组化染色法观察A549细胞Survivin蛋白的表达情况.结果:survivin ...     

基于PI3K/AKT信号通路探讨中医药治疗肺癌研究进展

磷脂酰肌3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路是生物体内重要的信号转导系统之一,具有调节细胞生长、分化、凋亡等多种功能,与肺癌细胞的增殖、凋亡、自噬、侵袭转移、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation, EMT)等细胞活动密切相关。中医药可以通过干预PI3K/AKT通路及其相关靶点蛋白调节细胞周期蛋白与凋亡相关蛋白的表达,从而抑制增殖、诱导凋亡;通过上调自噬相关蛋白的表达,促进肺癌细胞自噬;通过下调基质金属蛋白酶(matrix-metalloproteinase, MMP)的表达,降低肺癌细胞侵袭转移能力;通过多靶点、多机制逆转EMT和耐药。但是,中医药基于PI3K/AKT信号通路治疗肺癌的研究也存在许多不足：(1)PI3K/AKT信号通路与多条通路纵横交错,许多研究发现,中医药可以同时影响多条信号通路的表达,但各条通路之间的相互影响与相互作用尚未阐明。(2)PI3K/AKT信号通路作用广泛,多数研究仅证实中医药的抗肺癌作用与通路...     

PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2信号通路对胰腺癌PANC-1细胞VEGF表达的影响

目的:探讨PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2信号通路对人胰腺癌PANC-1血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:抑制剂LY294002和PD98095分别处理人胰腺癌PANC-1细胞,Western blotting检测细胞VEGF蛋白表达。结果:分析表明LY294002和PD98095处理后的PANC-1细胞的磷酸化AKT、磷酸化ERK1/2及VEGF蛋白表达水平均明显低于对照组VEGF(P<0.05)。结论:抑制PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2细胞信号通路能够下调VEGF蛋白表达,进而抑制肿瘤新生血管的生成及浸润转移能力。     

盐酸埃克替尼联合1α,25-二羟基维生素D3对人肺腺癌A549细胞增殖及EGFR表达的影响

目的:研究盐酸埃克替尼和1α,25-二羟基维生素D3单药及联合用药对人肺腺癌A549细胞增殖及表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响?方法:盐酸埃克替尼和1α,25-二羟基维生素D3单药及联合用药处理A549细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率的变化;用Western blot法及RT-PCR法分别检测细胞EGFR蛋白及EGFR mRNA表达的变化?结果:与单药盐酸埃克替尼组和1α,25-二羟基维生素D3组相比,联合用药组具有更强的细胞增殖抑制作用(P均< 0.05);联合用药组及1α,25-二羟基维生素D3单药组EGFR蛋白及EGFR mRNA表达水平较阴性对照组及盐酸埃克替尼单药组有明显升高(P均< 0.05)?结论:盐酸埃克替尼与1α,25-二羟基维生素D3联合用药对人肺腺癌A549细胞具有协同抗增殖作用;其机制可能与1α,25-二羟基维生素D3升高了EGFR mRNA及EGFR蛋白的表达,从而更有利于盐酸埃克替尼发挥抗肿瘤作用有关?     

PI3K/AKT/mTOR信号通路调控Th17细胞的研究进展

CD4⁺ T细胞是一类在免疫反应中发挥重要作用的免疫细胞,它在激活后可分化为Th1、Th2、Th17和Treg等细胞亚群。其中Th17细胞是一类新型CD4⁺ 效应T细胞,在宿主防御各种病原体和炎症发病机制中发挥重要作用。PI3K/AKT/mTOR信号通路可以调控细胞的新陈代谢、增殖、分化和生存等生命过程,并参与肿瘤、自身免疫性疾病等的发生。本文针对PI3K/AKT/mTOR信号通路调控Th17细胞的研究进展进行综述。     

基于PI3K/AKT信号通路的中药单体治疗肺癌的研究进展

肺癌是一种发病率较高的恶性肿瘤,是威胁人类生命健康的重大疾病.中药单体是从中药材中提取出的主要有效成分.近年来,有多篇文献报道中药单体通过调控PI3K/AKT信号通路抑制肺癌细胞增殖、侵袭和迁移,并诱导肺癌细胞凋亡.PI3K/AKT信号通路在肺癌发生和发展的过程中扮演着一个重要的角色,PI3K/AKT信号通路的异常激活...