阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者体内氧自由基代谢的作用

研究持续正压通气后阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）患者体内超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化酶（GSH PX）活力和丙二醛（MDA）含量的变化，探讨OSAS患者多器官功能损害，衰老加速的机理。方法：选择OSAS患者63例行SOD、GSH PX活性和血清MDA含量检测；对OSAS患者行持续正压通气(CPAP)治疗3个月后，重新检测SOD、GSH PX活性和血清MDA含量，并选择60例健康人作为正常对照。结果：SOD、GSH PX活性和血清MDA含量，正常对照组分别为(139.6±36.6)?nmol/L、(78.6±8.0)?U/ml、(1.48±0.59)?mmol/L；OSAS患者含量分别为(104.5±39.3 )?nmol/L、(61.5±6.7)?U/ml、(5.87±1.67)?mmol/L；持续正压通气(CPAP)治疗3个月后，SOD、GSH PX活性和血清MDA含量分别为(134.5±36.1)?nmol/L、(74.6±6.6)?U/ml、(1.62±0.58)?mmol/L，与正常对照组相比，OSAS患者MDA明显升高，SOD、GSH PX活性显著降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）；CPAP治疗3个月后，SOD、GSH PX活性、MDA含量与正常对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：OSAS患者体内存在严重的氧自由基代谢失衡，CPAP治疗3个月后，氧自由基代谢可基本恢复正常，OSAS患者多器官功能损害，衰老加速可能与体内存在严重的氧自由基代谢失衡有关。     

银杏叶提取物对小鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响

目的 探讨银杏叶提取物(ginkgo biloba extract, EGb)对缺氧/复氧所致心肌细胞氧化应激损伤的保护作用.方法 将原代大鼠心肌细胞分为空白对照组(Con组)、高剂量EGb对照组(C160组)、缺氧/复氧组(H/R组)、低剂量EGb组(EGb40组)、中剂量EGb组(EGb80组)、高剂量EGb组(EGb160组).采用四唑盐(MTT)法检测各组细胞活力,采用酶联免疫吸附法检测各组细胞的MDA含量、SOD活力、GSH与GSSG含量,并计算GSH/GSSG比值以及GSH/GSSG氧化还原电势(Eh(GSH/GSSG)).结果 与Con组相比,H/R组的MDA含量、Eh(GSH/GSSG)升高(P<0.01),细胞活力、GSH/GSSG值及SOD活力降低(P<0.01).EGb40、EGb80和EGb160组的MDA含量、Eh(GSH/GSSG)较H/R组降低(P<0.01),细胞活力、GSH/GSSG值及SOD活力升高(P<0.01),且呈浓度依赖性(P<0.01).结论 EGb具有明显的抗氧化应激能力,EGb预处理可明显衰减H/R心肌细胞所受的氧化损伤.     

谷胱甘肽对KLE与HEC 1 b子宫内膜癌细胞生长的影响

目的比较还原型谷胱甘肽（GSH）对KLE和HEC 1 b子宫内膜癌细胞生长的影响,并探讨其机制。方法①用GSH处理KLE和HEC 1 b子宫内膜癌细胞,噻唑蓝（MTT）法检测两型细胞的增殖水平;②用5 mmol/L GSH处理KLE和HEC 1 b子宫内膜癌细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平,酶标仪检测细胞内GSH和氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH Px）活性。结果在不进行处理的情况下,KLE子宫内膜癌细胞较HEC 1 b子宫内膜癌细胞的ROS水平及CAT活性较低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GSH Px活性较高（P＜0.01）。用GSH处理后,KLE子宫内膜癌细胞生长加快,细胞内ROS和GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD、CAT和GSH Px活性降低（P＜0.01）;HEC 1 b子宫内膜癌细胞生长被抑制,细胞内ROS、GSH及GSSG水平下降,GSH/GSSG比值明显升高,CAT和GSH Px活性降低（P＜0.01）。结论GSH对两种子宫内膜癌细胞生长有明显不同的影响,与两种细胞内ROS水平和抗氧化系统活性有密切的关系。     

围体外循环期脂质过氧化损伤的临床研究

目的探讨血清超氧化物歧化酶(superoide dismutase,SOD)和脂质过氧化产物丙二醛(malonyldialdehyde,MDA)在围手术期心肌再灌注损伤中的浓度变化、相关性及临床意义.方法心脏手术组30例,分别在术前1 d,主动脉开放后 10 min,术后 1 d 和 7 d采血,化学比色法测定血清SOD和MDA.结果心脏手术组SOD术前(143.7±22)μU/L,再灌注 10 min(113.5±23.5)μU/L(P＜0.01),术后1 d(141.3±23.2)μU/L,术后 7 d(143.5±24.2)μU/L,MDA术前(5.26±2.19) μmol/L,再灌注10 min(9.97±3.68)μmol/L(P＜0.01),术后1 d (7.17±2.16) μmol/L,术后7 d (5.75±2.87) μmol/L,并且血清SOD和MDA呈现负相关(r=-0.563,P＜0.05).结论 CPB患者血清SOD活性下降,MDA水平增高,大量氧自由基的产生是造成心肌再灌注损伤的重要原因.     

Ⅰ型与Ⅱ型子宫内膜癌细胞抗氧化能力的比较

 目的 比较Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞对氧化应激的抵抗并探讨其机制。  方法  ① H₂O₂处理Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞,噻唑蓝（MTT）法检测两型细胞的增殖水平;② 120μmol H₂O₂和800μmol H₂O₂分别处理Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平,酶标仪检测细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性 结果 在不进行处理的情况下,Ⅰ型子宫内膜癌细胞较Ⅱ型子宫内膜癌细胞ROS水平及CAT活性较低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GPx活性较高（P＜0.01）。在氧化应激条件下,Ⅰ型子宫内膜癌细胞GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD和CAT活性降低（P＜0.01）;Ⅱ型子宫内膜癌细胞GSH、GSSG水平明显升高,GSH/GSSG比值略有升高,SOD、CAT和GPx活性升高（P＜0.01）。  结论  Ⅱ型子宫内膜癌细胞与Ⅰ型子宫内膜癌细胞相比较,其本身ROS水平较高,细胞内抗氧化系统及抗氧化酶系统对氧化刺激可进行有效应答,细胞不易受到氧化损伤。     

大鼠实验性溃疡性结肠炎中NO、MDA、SOD的变化

目的建立大鼠实验性溃疡性结肠炎的模型,观察结肠组织中NO、MDA、SOD的变化.方法30只Wistar大鼠,随机分为对照组、实验组、治疗组各10只,实验组和治疗组用乙酸灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎的模型后,分别给予生理盐水、SASP(80mg/kg/d)1ml/d灌肠,采用组织病理学进行损伤指数评分;生化法检测组织中NO、MDA、SOD值.结果实验组NO(518.7±45.3μmol/g)、MDA(30.6±2.18nmol/g)均显著增高于对照组(196.5±29.1μmol/g,6.82±0.81μmol/g,P＜0.01)、治疗组(298.2±27.15μmol/g,14.79±1.92μmol/g,P＜0.01);实验组SOD(11.06±1.82u/g)显著降低于对照组(22.2±1.62u/g,P＜0.01)、治疗组(17.7±1.76u/g,P＜0.01),实验组的损伤指数(3.89±0.78)显著高于治疗组(1.3±0.48,P＜0.01).治疗组与对照组各值比较也有显著性差异(P＜0.01).结论自由基参与溃疡性结肠炎的病理过程并降低自由基水平,可以为治疗溃疡性结肠炎提供新的途径.     

下调泛素样含PHD和环指域1基因的表达对喉癌Hep-2细胞增殖侵袭能力的影响

目的 探讨下调泛素样含PHD和环指域1(ubiquitin-like protein containing PHD and RING finger domains 1,UHRF1)基因在喉癌Hep-2细胞中的表达后对其增殖,凋亡,侵袭迁移能力的影响.方法 实验分为空白组,阴性对照组和干扰组.利用UHRFl-siRNA干扰UHRF1在喉癌Hep-2细胞中的表达,采用qRT-PCR、Western blot检测UHRF1的表达变化.采用MTT法、流式细胞术、Transwell实验检测下调UHRF1表达后Hep-2细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的变化.Western blot检测下调UHRF1表达后Hep-2细胞内Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达的变化情况.结果 与空白组和阴性对照组相比干扰组下调UHRF1的表达后可明显抑制喉癌Hep-2细胞的增殖能力(P ＜0.001).空白组,阴性对照组,干扰组凋亡率分别为(5.47±2.77)％,(3.95±0.66)％,(18.95±1.10)％,干扰组凋亡率明显提高(P ＜0.001).空白组,阴性对照,干扰组每视野侵袭细胞数分别为(213.7 ±13.1),(221.3±10.3),(97.7±7.5),干扰组侵袭细胞数明显降低(P＜0.001).空白组,阴性对照,干扰组每视野迁移细胞数分别为(230.7±5.5),(222.7±11.2),(111.7±7.6),干扰组迁移细胞数明显降低(P ＜0.001).干扰组细胞Bax蛋白表达上调(P ＜0.001),Bcl-2蛋白表达下调(P ＜0.001),MMP-2蛋白、MMP-9蛋白表达下调(P ＜0.001).结论 在喉癌Hep-2细胞中下调UHRF1的表达后可明显抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞的侵袭迁移能力.     

子宫颈鳞癌及腺癌细胞抗氧化能力的比较

目的比较子宫颈鳞癌及腺癌细胞对氧化应激的抵抗并探讨其机制。方法①H2O2处理子宫颈鳞癌(Siha、SW756)及腺癌(Hela、GH329)细胞,噻唑蓝(MTT)法检测两型细胞的增殖水平;②用250、250、650及800μmol/L H2O2分别处理子宫颈鳞癌(Siha、SW756)及腺癌(Hela、GH329)细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶标仪检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性。结果在不进行处理的情况下,子宫颈鳞癌(Siha、SW756)细胞较子宫颈腺癌(Hela、GH329)细胞有较低的ROS水平、GSH含量及GSH/GSSG比值,较高的GSSG水平及SOD和GPx活性。在氧化应激条件下,子宫颈鳞癌(Siha、SW756)细胞的GSH水平及GSH/GSSG比值明显下降,SOD、CAT和GPx活性升高;子宫颈腺癌(Hela、GH329)细胞的GSH水平及GSH/GSSG比值略有下降,SOD、CAT和GPx活性升高。结论子宫颈鳞癌及腺癌细胞处于不同的氧化还原状态,子宫颈鳞癌细胞较子宫颈腺癌细胞抗氧化能力弱,这可能与H2O2处理后鳞癌细胞ROS较腺癌细胞增多明显及两型细胞抗氧化系统有不同的应答有关。     

老年白内障患者房水与泪液中氧化应激因子水平变化及临床意义

目的探讨老年白内障患者房水、泪液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等氧化应激因子水平变化及意义。方法选取2016年1月至2017年2月在我院治疗的白内障患者78例(观察组),同时选取健康志愿者78例作为对照组,检测房水、泪液中SOD、MDA、还原型谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)和总抗氧化能力(TAC)水平。结果观察组泪液中SOD、GSH和TAC分别为(24.15±3.44)g/L、(35.33±8.24)mg/L和(1.87±0.63)kU/L,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而MDA和NO分别为(1.44±0.42)mol/mL和(7.93±1.04)mol/L,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组过熟期房水、泪液SOD、GSH和TAC明显低于初发期、未成熟期和成熟期,差异有统计学意义(P<0.05),而MDA和NO明显高于初发期、未成熟期和成熟期,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白内障患者泪液中SOD、GSH和TAC明显降低,而MDA和NO明显升高,且房水、泪液中的氧化应激指标水平与白内障分期有一定关系。     

神经纤毛蛋白2促进胰腺神经内分泌肿瘤血管生成作用的研究

目的 探讨神经纤毛蛋白2(NRP2)调控胰腺神经内分泌肿瘤(PNETs)血管生成的作用及意义.方法 干扰胰腺神经内分泌肿瘤BON-1细胞系NRP2表达,分别用对照组和干扰组的BON-1细胞培养上清液处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),CCK-8检测其细胞增殖,Tanswell检测迁移,小管形成实验检测其促血管生成.结果 CCK-8检测显示对照组和干扰组培养上清液处理的HUVEC细胞组间增殖差异无统计学意义(P>0.05):对照组吸光度为0.35±0.04,干扰组为0.32±0.04.Transwell实验显示干扰组细胞培养上清液处理的HUVEC细胞侵袭能力较对照组减弱,对照组(203±13)个/孔,干扰组(100±10)个/孔(P＜0.01);小管形成实验显示干扰组细胞培养上清液处理的HUVEC细胞小管形成减少,对照组为40±5,干扰组为24±3(P＜0.01).结论 干扰BON-1细胞NRP2表达可抑制与其共培养的HUVEC细胞的成管能力,提示NRP2可能具有促进PNETs相关血管生成的作用,是PNETs新的潜在治疗靶点.     

熊果酸对喉癌 Hep-2细胞侵袭的影响及机制研究

目的：探讨熊果酸对人喉癌 Hep‐2细胞侵袭能力的影响及机制。方法不同浓度熊果酸处理人喉癌 Hep‐2细胞不同时间后,采用 M TT 法检测细胞的增殖活性,Boyden chamber 检测细胞的侵袭能力,Western blot 检测周期相关基因 NF‐κB蛋白表达的变化。明胶酶谱检测细胞培养上清液基质金属蛋白酶（MM P）‐9和 MMP‐2活性的变化。结果熊果酸对人喉癌Hep‐2细胞的生长具有明显的增殖抑制作用,其作用表现为剂量依赖性和时间依赖性（P＜0．01）。 Boyden chamber 结果显示以熊果酸处理 Hep‐2细胞后,侵袭能力呈浓度依赖性下降（P ＜0．01）。 Western blot 结果显示熊果酸对人喉癌 Hep‐2细胞 NF‐κB蛋白表达呈浓度依赖性下调（P＜0．01）。明胶酶谱结果显示熊果酸对人喉癌 Hep‐2细胞 MM P‐9和 MMP‐2活性呈浓度依赖性下调（P＜0．01）。结论熊果酸通过降低 MMP‐9和 MMP‐2活性及 NF‐κB 蛋白表达来抑制人喉癌 Hep‐2细胞的增殖和侵袭。     

阿魏酸钠对高糖诱导肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的观察阿魏酸钠（sodiumferulate,SF）对高糖培养的人近端肾小管上皮细胞（humanproximaltubularepithelialcells,HKC）增殖和凋亡的影响。方法选用对数期生长的肾小管上皮细胞,分为对照组、高糖组、高糖加阿魏酸钠组。四甲基偶氮唑盐（microculturetetrazolium,MTT）法观察细胞增殖能力的变化,测定细胞培养液中的乳酸脱氢酶（1actatedehydrogenase,LDH）的含量以判断细胞损伤情况,Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡。结果与对照组比较,高糖组MTT吸光度值（OD值）随培养时间延长明显降低,而高糖加阿魏酸钠组OD值与高糖组比较有明显升高（P〈O．05）。随培养时间的延长,高糖组培养基中LDH水平明显升高,在12h和24h分别为（17．55±2．45）和（28．72±3．11）U／L,而高糖加阿魏酸钠组12h和24hLDH水平降至（11．84±2．18）和（19．984-3．67）U／L,和同时间点高糖组比较均有明显降低（P〈0．05）。高糖处理组培养液中的丙二醛（malondiadehycle,MDA）水平较对照组明显增加（P〈0．01）,超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）活性明显降低（P〈0．01）,阿魏酸钠组培养液中MDA水平明显降低（P〈0．01）,SOD活性明显增加（P〈0．05,P〈0．01）。Hoechst33258荧光染色显示,对照组和高糖加阿魏酸钠组仅见个别凋亡形态细胞,高糖组典型凋亡形态细胞明显增多,细胞凋亡率为34．17％,显著高于正常对照组（5．20％）和高糖加阿魏酸钠组（7．39％,P〈0．01）。结论高糖培养可诱导人近端肾小管上皮细胞的损伤和凋亡,并抑制其增殖。阿魏酸钠对人肾小管上皮细胞系（humankidneycell,HKC）的保护作用可能是通过抑制HKC的损伤和凋亡,以及提高增殖能力实现的。     

聚乳酸-聚乙醇酸-聚乙二醇血管支架置入对兔动脉粥样硬化模型血清基质金属蛋白酶2，9的影响

目的：探讨生物可降解聚乳酸-聚乙醇酸-聚乙二醇（PLGA-PEG）血管支架置入对兔动脉粥样硬化模型的血清基质金属蛋白酶2，9(MMP-2、MMP-9)的影响。方法：成年健康白兔30只,经球囊血管内膜剥脱法制成髂动脉动脉粥样硬化动物模型，喂养6周后，随机分为两组，实验组(PLGA-PEG组，n=15)，给予血管支架（PLGA-PEG）置入,对照组(n=15)常规喂养。两组动物在支架置入前、置入后7及30 d分别收集耳缘静脉血1 mL, 以SDS-PAGE Zymography法检测MMP-2、MMP-9）及相应酶原（pro MMP-2和pro MMP-9）。结果：实验组支架置入前所测的MMP-2、MMP-9和proMMP-2（11 568±2 219）、(10 364±1 429和（13 649±1 894)INT·mm²）明显高于对照组（6 128±1 562)、(8 519±2 167）和（8 413±2 156）INT·mm²(P<0.05)；但proMMP-2两组比较，差异无显著性(P>0.05)。实验组支架置入后7 d与置入前相比，MMP-2及MMP-9以及相应酶原虽有增高趋势，但差异无显著性（P>0.05）；支架置入30 d后MMP-2及酶原高于置入前（13 935±2 167）、(15 628±1 739）INT·mm² vs （11 568±2 219）、（13 649±1 894）INT·mm²(P<0.01)，MMP-9及酶原亦增高，但差异无显著性（P>0.05）。结论：血清MMP-2及酶原在动脉硬化动物模型中明显增高,血管支架置入后MMP-2增高。     

膀胱癌组织中MMP-2和MMP-9的表达和意义

目的 研究基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)在膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinoma,TCC)中的表达 及其与膀胱癌侵润转移的关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对43例膀胱癌手术切除标本 (癌组织及癌旁组织)中的MMP-2,9基因表达进行半定量检测。结果 MMP-2 mRNA在77％(33／43)的膀胱癌组 织、21％(9／43)的癌旁组织中表达;MMP-9 mRNA在53％(23／43)的膀胱癌组织、26％(11／43)的癌旁组织中表达。 癌组织中MMP-2,MMP-9的表达水平(0．929 1±0．294 5,0．760 2±0．323)均高于癌旁组织(0．587 8±0．110 3, 0．527 5±0．113 8),差异有显著性。癌组织中MMP-2,9的表达水平和膀胱癌的分级分期有关。癌组织中的 MMP-2表达阳性率高于MMP-9(P<0．05)。癌组织中MMP-2的表达和MMP-9的表达相关(rs=0．919,P< 0．001)。结论 MMP-2,MMP-9基因在膀胱癌和癌周组织均有差异性表达,表达水平与膀胱癌侵袭相关,可能为反 映膀胱癌侵润转移的生物学指标。     

罗伊氏乳杆菌对坏死性小肠结肠炎氧化应激的保护机制

目的探讨罗伊氏乳杆菌（L. reuteri）DSM17938菌株对坏死性小肠结肠炎（NEC）新生小鼠模型氧化应激的保护作用及可 能机制。方法将96只10日龄C57BL/6J新生小鼠随机分为3组（n=32）：对照组、NEC组、NEC+L. reuteri组。通过HE染色观察 回盲部肠组织病理变化并行双盲病理评分。采用实时荧光定量PCR检测肠组织中TNF-α、IL-1β的基因表达水平。通过ELISA 检测肠组织TNF-α、IL-1β的蛋白表达水平。采用比色法检测SOD活力及抑制率、MDA、GSH、GSSG、GSSG/GSH比值。结果 与对照组相比，NEC组小鼠体质量下降（P<0.05），肠道损伤加重，病理评分增加（P<0.05），TNF-α、IL-1β在基因及蛋白水平均表 达升高（P<0.05），SOD活力及抑制率、GSH降低，MDA、GSSG、GSSG/GSH比值显著升高（P<0.05）。与NEC组相比，NEC+L. reuteri 组病理评分降低，TNF-α、IL-1β在基因及蛋白水平均表达降低（P<0.05），SOD活力及抑制率、GSH 增加，MDA、GSSG、 GSSG/GSH比值明显降低（P<0.05），两组生存率差异无统计学意义（P>0.05）。结论L. reuteri DSM17938可能通过减少肠道 氧化应激、增加其抗氧化能力，从而减轻肠道炎症反应，发挥对NEC新生小鼠肠道保护作用。     

类风湿合并颈动脉硬化患者血清氧化应激状态与MMPs相关性分析

目的 探讨类风湿合并血清颈动脉硬化患者血清氧化应激状态与MMPs水平及临床意义.方法 选择缓解期类风湿患者92例,分为无颈动脉硬化组（A组）45例,合并颈动脉组（B组）47例,同时选择健康人群40例作为对照组（C组）.分别检测MMP-3、MMP-9、TIMP-1、MDA、SOD、GSH.结果 A组MMP-9、TIMP-1较C组均差异有统计学意义（P＜0.05）,B组MMP-3、MMP-9、TIMP-1较A组、C组差异有统计学意义（P＜0.05）.A组SOD、GSH较C组均存在下降（P＜0.05）,B组SOD、GSH较A组、C组79差异有统计学意义（P＜0.05）,MDA较A组有升高（P＜0.05）.SOD与MMP-9、TIMP-1有相关（P＜0.05）,与MMP-3未见相关性（P＞0.05）.GSH与MMP-3、MMP-9有负相关（P＜0.05）,与TIMP-1正相关（P＜0.05）.结论 稳定期类风湿合并颈动脉硬化患者MMPs与氧化应激的紊乱密切相关,共同促进颈动脉硬化的发生.