液相色谱-质谱-质谱联用法测定人血浆中阿德福韦的浓度

目的:建立快速、灵敏的液相色谱-质谱-质谱联用(LC-MS-MS)法测定人血浆中阿德福韦的浓度,并研究其在中国男性健康志愿者人体内的药动学。方法:以乙腈-0.1%甲酸为流动相,采用梯度洗脱,以5-溴尿嘧啶为内标。血浆样品经乙腈沉淀蛋白后用二氯甲烷提取,经ZorbaxXDB-C8柱分离后,通过电喷雾离子化三重四极杆串联质谱仪,以多反应检测(MRM)方式进行测定。结果:阿德福韦的线性范围为0.167～83.3μg.L-1(r=0.9989),平均相对回收率在88.3%～110.0%之间,日内、日间精密度的RSD均小于12%,阿德福韦的定量下限为0.167μg.L-1。结论:该方法具有快速、准确、灵敏等优点,适用于阿德福韦的药动学研究。     

滇南地区华法林代谢相关基因罕见突变3例报道

<正>华法林是抗凝治疗的主要药物,用于治疗血栓栓塞性疾病(如房颤、深静脉血栓形成、人工瓣膜置换术后等)。其治疗靶点是抑制维生素K环氧化物还原酶复合物-1亚基(vitamin K epoxide reductase complex subunit 1,VKORC1),使肝脏对维生素K的重吸收减少,维生素K依赖性凝血因子合成减少,达到抗凝作用。     

高效液相色谱-质谱联用测定人体尼索地平血浆浓度及其药代动力学研究

目的 :进行高效液相色谱 质谱联用测定人血浆中尼索地平浓度的方法学及其不同制剂的药代动力学研究。方法 :采用高效液相分离系统 ,流动相为甲醇 水 醋酸 ,流速为 1ml·min-1,分流比 2 :1,固定相为HypersilC18柱。采用质谱检测系统 ,AP ESI正离子模式 ,雾化压力 0 .0 5 4Pa(40 0psi) ,保护气N210L·min-1,毛细管电压 4 0 0 0V ,离子源温度10 0℃ ,碎片电压为 2 2 0V ,离子采集方式为选择性离子检测 ,尼索地平采集质荷比为 4 11(M Na) ,尼莫地平为 4 41(M Na)。以尼莫地平为内标 ,测定尼索地平血浆浓度 ,计算其药动学参数。结果 :在 0 .2～ 5 0 μg·L-1范围内 ,尼索地平血浓度呈线性关系 ,最低检测浓度为 0 .15 μg·L-1,回收率在 72 .6 %以上 ,日内、日间的RSD均小于 9.8%。单剂量给药 ,尼索地平缓释片、缓释胶囊和普通片半衰期 (t1 2 ,h)分别为 6 .0 8± 1.4 8、7.0 6± 1.80、3.70± 0 .2 5 ;血浓度峰值 (Cmax,μg·L-1)分别为 3.4 3± 0 .5 5、3.71±0 .2 4、9.18± 3.78;达峰时间 (Tmax,h)分别为 5 .4 1±0 .72、5 .83± 0 .4 4、2 .0 2± 0 .2 3;时间曲线下面积(AUC0 -t,μg·h-1·L-1)分别为 31.11± 5 .0 0、33.6 3±7.16、32 .72± 5 .0 9;缓释片与缓释胶囊的相对生物利用度 (F)分别为 95     

基因指导新疆维吾尔族患者华法林日稳定剂量预测模型的建立及验证

目的：评价新疆维吾尔族患者临床特征及基因型分布,建立华法林日稳定剂量预测模型并验证准确性。方法：按照纳入排除标准选取接受华法林抗凝治疗并达稳定剂量的患者120例,分为建模组（90例）和验证组（30例）,应用PCR直接测序法检测VKORC1、CYP2C9基因多态性,记录华法林日稳定剂量、人口学资料、个人史、合并用药、合并疾病,采用多元线性回归方法建立华法林稳定剂量预测模型并进行准确性验证。结果：新疆维吾尔族患者华法林日稳定剂量预测公式为：Dose=3.642+0.910×VKORC1-1 173TC+1.774×VKORC1-1 173CC-2.660×CYP2C9CC+0.991×吸烟×0.02年龄（yr）;该预测模型在验证组患者中的预测剂量与实际剂量无统计学差异（P>0.05）;IWPC预测模型在验证组患者中预测剂量低于实际剂量比例为46.7%;Huang等预测模型在验证组患者中的预测剂量与实际剂量无统计学差异（P>0.05）,其中40%的患者为理想预测剂量;本预测模型在心脏瓣膜置换术后患者中预测剂量为理想预测剂量的百分比为70%。结论：本预测模型可预测新疆维吾尔族患者的华法林日稳定剂量,但样本量较少,该预测模型需要进一步的验证。     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的方法。方法血浆样品中加入内标,用乙醚提取,浓缩后采用高效液相色谱-质谱联用进行测定。结果血浆样品中辛伐他汀线性范围为0.1～20ng·mL-1(r=0.9999);萃取回收率为94.3%。结论本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确,可用于辛伐他汀片人体药动学及生物等效性研究。     

基因分型指导肺栓塞患者的华法林个体化药物治疗

目的探讨如何利用基因检测的结果指导华法林的个体化给药。方法参与2例初次使用华法林的肺栓塞患者治疗,通过基因分型计算华法林使用剂量。结果通过基因检测,指导华法林个体化给药,优化给药方案。结论临床药师利用药物基因检测的工具,指导华法林个体化给药,实现药物个体化治疗的目标。     

验证并比较华法林稳定剂量预测模型对中国心脏瓣膜置换术后患者预测准确性

目的:验证并比较12个华法林稳定剂量预测模型及目前国内常用固定剂量给药方案(2.5 mg/d)对本院心脏瓣膜置换术后患者的预测准确性.方法:收集已达华法林稳定剂量的804例人工心脏瓣膜置换术后患者完整临床资料,采集每位患者外周血2 mL,焦磷酸测序法检测其VKORC1-1639G＞A和CYP2C9*3基因型.Pubmed检索出符合筛选条件的12个华法林稳定剂量预测模型.采用绝对误差均值(MAE)和预测百分比两个指标评价并比较各模型预测准确性.结果:共有9个预测模型及固定剂量方案计算的MAE小于±1.0 mg/d,其中MAE最低的三个模型分别为Gage、Wen和Ohno.共有8个模型及固定剂量方案计算理想预测百分比大于40％,其中理想预测百分比最高的三个模型分别为Wen、Huang和Gage.敏感性分析表明预测模型对中剂量(稳定剂量＞1.88,且＜ 4.38 mg/d)和高剂量(稳定剂量≥4.38 mg/d)患者预测准确性较好,但对低剂量患者(稳定剂量≤1.88 mg/d)预测较差;固定剂量方案对高、低剂量患者预测准确性均为0.结论:基因导向的华法林稳定剂量预测模型可以较好预测大部分患者,具有临床应用价值.     

皖南地区汉族人群华法林稳定剂量模型预测准确性的评价与建立

目的:比较并评价4种华法林稳定剂量预测模型的预测准确性并建立华法林剂量预测模型。方法:收集483名服用华法林患者的临床资料,检测患者CYP2C9*3和VKORC1基因型,以预测百分比和平均绝对误差分析4种华法林稳定剂量预测模型的准确性;将纳入影响华法林稳定剂量的相关因素进行多元线性回归分析,得到相应的剂量预测模型。结果:CYP2C9*3/*3型患者华法林稳定剂量为(0.83±0.19) mg·d^-1,显著低于*1/*1型和*1/*3型患者(P<0.05),VKORC1 GG型患者华法林稳定剂量为(4.17±1.49) mg·d^-1,显著高于AA型和GA型患者(P<0.05);4种华法林剂量预测模型的预测剂量与实际剂量差异均显著相关(P<0.01),IWPC模型的相关性最好,r=0.519;MAE最低的是TAN模型,为(0.70±0.53) mg·d^-1,指南模型的MAE最高,为(0.86±0.60) mg·d^-1;华法林稳定剂量模型建立结果D(mg·d^-1)=...     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中华法林对映体浓度及其临床应用

目的:建立HPLC-MS/MS法测定深静脉血栓患者血浆中华法林对映异构体的浓度。方法:以华法林-d5为内标,经甲醇沉淀蛋白后,采用CHIRALPAK?AS-3R手性色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm)分离样品,流动相为甲醇-含0.1%甲酸的醋酸铵水溶液(95∶5)。采用质谱检测系统,电喷雾离子源(ESI源),负离子扫描,多反应监测模式(MRM)监测m/z 307.0→160.8(华法林)及m/z 313.0→160.8(华法林-d5)。采集77名深静脉血栓患者稳态血样后,以HPLC-MS/MS法测定血浆中华法林对映异构体的浓度,并计算S-华法林与R-华法林浓度的比值(CS/R)。结果:华法林的2个对映异构体质量浓度在5~1 500 ng·mL-1内线性关系良好,定量下限为5 ng·mL-1。R-华法林批内和批间精密度的RSD为5.0%~8.1%和8.3%~13.4%,提取回收率85.9%~97.7%;S-华法林批内和批间精密度的RSD为6.2%~7.0%和6.8%~15.0%,提取回收率82.4%~93.9%。2个异构体均无基质效应影响,不同条件下的稳定性试验均满足要求。77名患者体内R-华法林与S-华法林稳态血浆药物质量浓度分别为(458.52±226.55)ng·mL-1和(239.63±152.83)ng·mL-1,其血浆药物浓度比值的平均值约为0.53±0.34。结论:本方法快速、简便、可靠,适用于深静脉血栓患者体内华法林对映异构体血药浓度的检测,能够指导临床合理用药。     

液-质联用法测定人血浆中卢非酰胺的浓度及其在药动学研究中的应用

目的:建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定人血浆中卢非酰胺浓度的方法。方法:40名健康受试者随机分成4组,分别单剂量口服给药卢非酰胺片200,400,800,1200 mg。血浆样品经乙腈沉淀蛋白提取分离,色谱柱为Ultimate^® AQ-C₁₈(100 mm×2.1 mm,5 μm,Welch Material Inc.);流动相为乙腈-5 mmol·L^-1乙酸胺水溶液(含0.1%甲酸)=32:68;流速为0.30 mL·min^-1;内标为埃索美拉唑。采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:卢非酰胺的血浆浓度在40~5000 ng·mL^-1范围内线性良好,定量下限为40 ng·mL^-1,日内精密度(RSD)均≤8.20%,日间精密度(RSD)均≤6.35%,提取回收率为91.94%~96.48%。卢非酰胺呈非线性药动学特征,单剂量空腹口服给药卢非酰胺片200,400,800,1200 mg后,C_max分别为1803.50±528.06, 2485.00±562.71, 3710.00±965.50和4158.00±1181.91 μg·L^-1。AUC_0-t分别为34522.13±9525.00, 56138.53±18021.98, 88848.53±23348.14和107058.03±34420.08 μg·h·L^-1。结论:该法操作简单,灵敏,准确,重复性好,适用于卢非酰胺片临床药动学研究。从药动学研究可知,卢非酰胺在中国健康受试者中呈非线性药动学特征。     

HPLC-MS法测定人血浆中米氮平的浓度

目的 :建立一种用高效液相色谱 -电喷雾离子化质谱 (HPLC -MS)联用技术测定米氮平血药浓度的方法。方法 :以0 0 1mol·L-1乙酸铵水溶液∶甲醇 (2 7∶73,V/V)为流动相 ,盐酸地尔硫 艹卓 为内标 ,血浆样品经乙酸乙酯萃取后上样 ,经C18柱分离后 ,以质谱为检测器 ,采用选择性离子检测 (SIM)测定人体血浆中米氮平的浓度。结果 :米氮平的线性范围 0 2 0～ 15 0 μg·L-1(r=0 9995 ) ,平均相对回收率在 90 %～ 110 %之间 ,日内和日间RSD均 <5 % ,米氮平的最低定量限为 0 2 0 μg·L-1,提取回收率 >85 %。结论 :该方法快速、准确、灵敏 ,可用于米氮平的药动学研究     

华法林药物基因组学和个体化用药

华法林是临床使用最广泛的口服抗凝药,其治疗窗窄,剂量个体差异大,容易发生出血或栓塞的风险。CYP2C9和VKORC1基因多态性明显影响华法林剂量。其他参与维生素摄入和循环,华法林转运的基因变异,以及microRNA也可能影响华法林剂量。该文结合国内外各种华法林稳定剂量预测模型研究,总结影响华法林剂量相关基因的最新研究进展,旨在为华法林个体化治疗提供参考和指导依据。     

高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中非那雄胺的浓度

目的:建立一种用高效液相色谱-电喷雾离子化质谱(HPLC-MS)联用技术测定非那雄胺血药浓度的方法.方法:以0.01 mol·L-1醋酸铵水溶液-甲醇(25:75)为流动相,烯酮二醇为内标.血浆样品经用醋酸乙酯萃取后上样,经C18柱分离后,以质谱为检测器,采用选择性离子检测(SIM)测定人体血浆中非那雄胺的浓度.结果:非那雄胺的线性范围0.491～98.2μg·L-1(r=0.9999),平均相对回收率在90%～110%之间,日内和日间RSD均＜5%,非那雄胺的最低定量限为0.49μg·L-1,提取回收率＞90%.结论:该方法快速、准确、灵敏,可用于非那雄胺的药动学研究.     

HPLC-MS法同时测定人血浆中依那普利及其代谢物依那普利拉的浓度

目的建立一种可同时检测人血浆中依那普利及其代谢物依那普利拉的浓度HPLC-MS方法。方法采用HPLC-MS法，色谱柱为Thermo Hypersil-HyPURITY C18 （150mm×2．1mm，5μm），流动相为20mmol·L^-1醋酸铵（pH3．0，0．15％TFA）-甲醇＝47：53（v／v），流速为0．25mL·min^-1；正离子检测，电喷雾电离，喷雾电压4．5kV，选择性离子监测，分别监测m／z377（依那普利）、m／z349（依那普利拉）和m/z425（贝那普利）。结果依那普利和依那普利拉的定量下限均为1．56ng·mL^-1；线性范围均为1．6～400ng·mL^-1（n＝9，r1＝0．9997，r2＝O．9998）；提取回收率均〉80％，日内、日间变异均〈8．5％。结论该方法灵敏、快速、重现性好，可用于依那普利人体生物利用度和药物动力学研究。     

HPLC-MS测定人血浆中盐酸羟嗪及其在健康人体药动学研究中的应用

目的:建立人血浆中盐酸羟嗪的高效液相色谱-质谱测定方法,用于研究盐酸羟嗪片的健康人体药动学。方法:血浆样品0.25 mL,用乙酸乙酯萃取,以50 mmol·L~(-1)醋酸铵溶液(pH=4.0)-甲醇-乙腈(45:36:19)为流动相,流速为0.22 mL·min~(-1),用 Thermo C_(18)柱分离,采用高效液相色谱-质谱电喷雾电离法,选择离子监测(SIM)。测定12名健康男性志愿者单剂量口服50 mg 盐酸羟嗪片后的血药浓度经时过程。由 DAS2.0药学与统计程序处理计算药动学参数。结果:盐酸羟嗪的线性范围为1.56～200 ng·mL~(-1)(r=0.9995),平均回收率为102.5%,日内 RSD≤8.0%,日间 RSD≤7.1%。结论:分析方法准确、灵敏度高,适用于盐酸羟嗪的药动学及生物利用度研究。     

液质联用测定人血浆中泮托拉唑的血药浓度

目的建立液质联用测定人血浆泮托拉唑药物浓度的方法。方法采用WatersAtlantisTMC18柱(2.1mm×100mm,3.0μm),流动相:0.1%甲酸溶液-乙腈(40∶60),流速0.2mL·mL-1,柱温30℃,进样量5μL,电喷雾电离源(ESI),MRM法检测,泮托拉唑母离子[M+H]m/z384.2,子离子m/z200.5,内标盐酸帕罗西汀母离子[M+H]m/z330.1,子离子m/z192.1。结果线性范围为10~5000ng·mL-1,最低检测浓度为1.0ng·mL-1,三种浓度的平均回收率均在90%以上,日内RSD为1.8%~4.0%(n=5),日间RSD为1.2%~1.7%(n=5)。结论该法操作简便,灵敏度高,分析快速,适用于临床上人血浆中泮托拉唑浓度测定。     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中单硝酸异山梨酯

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中单硝酸异山梨酯浓度.方法:应用Zorbax DB-C18柱(5 μm,2.1 mm×150 mm),流动相A为3 mmol·L-1醋酸铵溶液(含冰醋酸0.022%),流速0.17 mL·min-1,流动相B为甲醇-乙腈(85∶15),流速0.03 mL·min-1.采用四极杆质谱检测器大气压电喷雾离子源(ESI),负离子检测.结果:线性范围为6.25～1 200 μg·L-1,相对回收率接近100%,日内、日间RSD均小于6%.结论:方法灵敏、快速、重现性好,可用于临床血药浓度监测和药动学研究.     

基于CYP2C9和VKORC1基因检测指导华法林剂量的临床研究

目的：研究回顾性探讨CYP2C9和VKORC1基因检测能否为华法林抗凝治疗患者带来临床获益,为临床应用华法林基因检测提供参考。方法：在这项回顾性研究中,收集了昆明市某三甲医院2016年1月至2017年9月间服用华法林抗凝治疗的住院患者信息。根据CYP2C9和VKORC1基因检测指导分为华法林个体化用药组（试验组）和传统给药组（对照组）,对比分析2组患者的临床结局。结果：试验组患者国际标准化比值（INR）>4例数、维生素K使用例数以及INR平均检测数均显著小于对照组。两组患者平均住院时间、华法林相关出血例数、出院时的INR值差异均无显著性意义。结论：采用CYP2C9和VKORC1基因检测指导华法林用药代替传统给药可以降低患者不良事件的发生风险,同时也可以减少患者监测INR的次数,具有良好的临床效果。因此,推荐临床上在应用华法林之前进行CYP2C9和VKORC1基因检测。