小鼠小肠移植术后排斥反应标志物研究

目的寻找小肠移植排斥反应的标志物,研究排斥反应的分子生物学机制.方法利用显微外科技术建立小鼠节段性小肠移植模型,采用逆转录定量聚合酶链式反应技术检测受体淋巴细胞中白细胞介素2受体(IL-2R)α链编码基因功能区的表达水平,并对反应产物进行DNA序列测定.结果小肠移植术后72h,异系移植组(津白Ⅱ号→BALB/c)受体鼠淋巴细胞IL-2Rα链功能区的转录水平(0.85±0.17)显著高于同系移植组(0.60±0.06)和假手术组(0.57±0.21).DNA序列测定证实PCR反应产物与IL-2Rα链功能区编码基因5'端序列相同.结论小肠移植早期IL-2Rα链编码基因mRNA的高表达是小肠移植排斥反应的主要启动因素和早期标志物,对所获得DNA片段进行的序列测定验证了反应产物的特异性.     

大鼠肝小肠联合移植肠壁酶活性变化的研究

目的探讨肝小肠联合移植后肠壁酶活性的变化及其与移植肠功能和免疫排斥反应之间的关系。方法用封闭群大鼠建立肝小肠联合移植模型,术后定期对移植组织进行病理学、酶组织化学检查。结果单独小肠移植组术后均发生排斥反应,肠壁酶活性消失。肝小肠联合移植组５６％可避免排斥反应,肠壁酶活性和神经成分得以保持和恢复。结论肝小肠联合移植可使供肠避免或推迟被排斥。术后检测肠壁酶活性和神经成分的变化可用于监测排斥反应     

肝小肠联合移植的术式探讨及术后处理一例

目的 总结1例保持门静脉连续性的小肠双造口方式肝小肠联合移植病例的手术操作和术后处理的经验.方法 受者为短肠综合征合并肝功能不良的男性患者,供者为尸体供者.联合切取器官,确保供者肠系膜上静脉和门静脉的连续性.移植肝静脉采用背驼式吻合,受者自体门静脉和供肝门静脉端侧吻合,胆道端端吻合,供者肝动脉和肠系膜上动脉吻合于受者腹主动脉;移植小肠约2 m,两端双造口于腹壁,未作肠道吻合.采用人源化抗CD52单克隆抗体诱导治疗,维持期单用他克莫司.行内镜下黏膜活检监测排斥反应.结果 术后1个月内,患者发生腹腔感染和疑似排斥反应各1次,分别经过手术和甲泼尼龙冲击治疗后痊愈.随访6个月,受者移植肝和小肠功能恢复良好,但仍有腹泻,需补充静脉营养,体重尚未完全恢复.结论 保持门静脉连续性的小肠双造口方式肝小肠联合移植可以简化手术操作,发生外科并发症的风险小,有利于肝脏和小肠功能恢复及术后排斥反应的监测,但是消化液未能进入移植小肠,也影响了受者的恢复.     

人体小肠移植的内窥镜监测

本文报告我国首例小肠移植病例应用内窥镜观察的结果。经末端回肠肠造口行内窥镜检查移植肠粘膜同时取肠粘膜烽检共８次。临床观察和肠粘膜病理检查未发现急性排斥反应。认为内窥镜指导下的肠粘膜组织病理学检查是小肠移植术后的最主要监测手段。     

骨髓细胞胸腺内注射对移植肠CD4、 CD8和CD25的影响

目的 探讨异基因骨髓注射在大鼠小肠移植中的免疫耐受作用和意义.方法 选用近交系大鼠F344/N和Wistar/A进行全小肠异位移植,实验组在异基因移植前7d取供体BMC行受体胸腺内注入,对照单纯同基因及异基因大鼠移植模型了解异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能否减少移植后急性排斥反应的发生,观察其生存时间、病理结果及CD4、CD8、CD25的变化.结果 (1)A组移植大鼠平均存活时间为(7.33±1.03) d;B组为(43.76 ±4.57) d;C组为(55.28±7.48)d.(2)异基因大鼠异位全小肠移植术后3、7、15 d可出现典型的轻、中、重度排斥反应,而同基因组和实验组中未出现排斥反应.(3)异基因移植组术后CD4、CD25+,高于其他组(P＜0.05).而CD8的变化差异无统计学意义(P＞0.05).结论 移植术前7d异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能显著减少小肠移植后急性排斥反应的发生,并可以抑制移植肠CD4、CD25细胞的表达.     

黏附及脱颗粒促进适配蛋白基因缺失联合共刺激通道阻断对移植小肠的保护作用

黏附及脱颗粒促进适配蛋白(adhesion and degranulation promoting adapter protein,ADAP)在T淋巴细胞的激活中具有非常重要的作用.2007年,笔者发表在<移植>(Transplantation)杂志上的研究结果提示,ADAP基因缺失能明显延长小鼠移植心脏的存活时间.而难治性排斥反应是影响移植物存活的主要因素之一.与其他器官相比,小肠移植后的排斥反应程度更为剧烈,且较难抑制.抗CD40单克隆抗体在移植物免疫耐受方面发挥着重要的作用,但在小肠移植中单独应用抗CD40单克隆抗体不能延长移植小肠的存活时间.因此,我们试图探索ADAP基因缺失联合抗CD40单克隆抗体阻断共刺激通道在抑制小鼠小肠移植后排斥反应中的协同作用.     

输血诱导免疫耐受对大鼠小肠移植急性排斥反应的影响

目的 观察供体特异性输血(DST)诱导免疫耐受对大鼠小肠移植后急性排斥反应的影响.方法 采用SD至Wistar大鼠异位小肠移植模型,实验组分别予以DST,环孢素(CsA)及DST联合CsA干预,Wistar大鼠同系间移植作为对照,于3、5、7 d观察移植肠管病理变化及受体血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α和干扰素(IFN)-γ表达程度.结果 病理显示CsA干预组在7 d出现轻度移植排斥反应;DST联合CsA干预组与对照组结果相似,在3、5、7 d均无明显的移植排斥反应发生.并且DST联合CsA干预组TNF-α表达程度低于单独CsA干预组,在第7天时与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);IFN-γ表达程度低于单独CsA干预组,在第5、7天时与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异基因大鼠间小肠移植在CsA配合应用的情况下,进行DST可诱导其产生一定的免疫耐受,预防及减轻大鼠小肠移植急性排斥反应的发生及反应程度.     

小肠移植排斥反应的肠内免疫监测

尽管对小肠移植排斥反应的某些病理特征已达成共识 ,但组织学上还没有一个完整的评价和诊断排斥反应的标准[1] 。小肠移植排斥反应早期免疫过程包括 :抗原提呈、淋巴细胞和炎性细胞的浸润、激活、增殖、细胞因子的变化、细胞毒素的作用 ,均以短暂、局部、微量的方式发生作用 ,也早于移植肠出现典型的组织病理学及功能改变之前。因此 ,移植肠内的免疫指标的变化可反映早期排斥反应过程 ,监测移植肠内免疫指标的变化可直接反映排斥反应的免疫损伤过程 ,对诊断和预测早期排斥反应的发生是一个更直接的方法。本文对小肠移植急性排斥反应过程中移…     

大鼠移植肠管长度、部位与排斥反应的关系

目的　探讨移植肠管的长度、部位与排斥反应之间的关系。方法　行同种异系原位小肠移植 (SD→Wistar) ,分别移植 3 0 %近端小肠 (A组 )、60 %近端小肠 (B组 )、全小肠 (C组 )、3 0 %远端小肠 (D组 )。观察术后生存时间 ;定期 (1、3、5、7、9d)采血测定血清白细胞介素 2 (IL 2 )、白细胞介素 8(IL 8)水平 ;开腹行麦芽糖吸收实验 ;取移植肠管 ,苏木素 伊红 (HE)染色后光镜检查。结果　A、B组的生存时间 (12 .0 0± 1.67)d、(11.17± 1.94)d与C组 (9.17± 1.17)d及D组 (8.3 3±1.0 3 )d相比差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。麦芽糖吸收实验、血清及病理学结果显示 :A、B组分别于术后 5、7、9d发生轻、中、重度排斥反应 ,C、D组分别于术后 3、5、7d发生轻、中、重度排斥反应。结论　大鼠小肠移植排斥反应强弱与移植肠管的长度无直接关系 ;排斥反应发生的时间与移植肠管的部位有一定关系。     

大鼠小肠移植排斥反应中细胞凋亡的动态研究

目的 研究小肠移植后排斥反应与细胞闻过则喜良心的关系以及雷帕霉素（RAPA）对移植后排斥及细胞凋亡的作用。方法 以SD大鼠为假移植组作对照（1组）,其他各组采用Wistar→SD大鼠异位小肠移植模型,移植后随机分为排斥反应组（2组）、雷帕霉素2mg.kg^-1组（3组）和雷帕霉素4mg.kg^-1.d^-1组（4组）,每组术后1、3、5、7d分别处死6只大鼠,获取移植肠组织行病理学检查和细胞凋亡检测。结果 各组在术后1、3d均未发现排斥反应,2组术后5、7d分别出现I度和Ⅱ度排斥,3组仅在术后7d出现早期排斥迹象,4组枯术后一直未见排斥证据,小肠细胞凋亡数量在排斥反应前期和排斥反应时显著增加,不同强度的排斥反应,细胞凋亡数量差异有显著性。结论 排斥反应中可出现大量的肠细胞凋亡,其始发时间早于排斥的组织学发现,凋亡细胞数量与排斥强度呈正相关,可作为小肠移植后排斥反应的另一种可信的标志物。雷帕霉素对排斥反应的抑制能力与剂量有关,并不能抑制肠细胞凋亡的发生。     

小鼠小肠移植早期体液免疫功能研究

小肠移植是治疗短肠综合征的唯一理想途径,对免疫排斥反应的早期诊断和高效免疫抑制剂的正确使用是控制小肠移植后排斥反应的关键［１］。因此,了解移植后免疫排斥反应的确切机理具有极为重要的意义。为了解同种异体小肠移植术后受体抗移植物体液免疫应答的表现及其与细...     

普乐可复在异种小肠移植中的作用

目的探讨免疫抑制剂普乐可复(FK506)对于异种小肠移植后迟发异种移植物排斥反应和细胞介导的异种移植物排斥反应的作用。方法采用仓鼠-大鼠动物实验模型,分为对照组和治疗组。治疗1组为单纯用FK506组;治疗2组为FK506加脾切除组。观察移植肠管吸收功能、体重、生存时间、FK506血药浓度及移植肠管苏木精-伊红染色。结果治疗1、2组的生存时间分别为(29.5±2.4)d和(106.6±26.3)d,与对照组(4.3±0.5)d相比显著延长(P<0.01);且治疗1、2组之间相比,差异亦有非常显著性意义(P=0.006)。术后第4d对照组苏木精-伊红染色可见绒毛萎缩,有大量炎性细胞浸润。治疗组小肠黏膜显示高分泌状态。术后126d治疗2组小肠肌层明显增厚、绒毛萎缩、肠壁小动脉壁纤维化。结论FK506可抑制异种小肠移植后迟发异种移植物排斥反应和细胞介导的异种移植物排斥反应;加脾切除可明显延长异种小肠移植的存活时间;但不能逆转异种小肠移植后所发生的慢性排斥反应。     

未成熟DC体外扩增诱导大鼠小肠移植免疫耐受的实验研究

目的:通过体外扩增培养大鼠未成熟DC,采用术前预先输入受体体内的方法,了解未成熟DC诱导小肠移植免疫耐受的可行性.方法:体外应用不同细胞因子(GM-CSF或GM-CSF+TGFβ1)培养骨髓和肝脏来源的未成熟DC,阴茎背静脉输入Wistar大鼠体内,1周后建立SD→Wistar同种异基因大鼠并列式小肠移植模型.术后监测移植小肠的免疫排斥反应强度.结果:术后第3、5、7天移植肠出现不同程度排斥反应.结论:大鼠未成熟DC细胞能够诱导小肠移植免疫耐受.     

细胞因子在小肠移植排斥反应中的作用

小肠移植是治疗终末期小肠功能衰竭的理想治疗手段。小肠属于人体内最大的淋巴库，含有大量免疫活性细胞，同时也是体内最大的细菌库，因此小肠移植后常因发生严重的免疫排斥反应和感染而导致手术失败。小肠移植不但有受者对供者的移植排斥反应，还有供者对宿主的反应。多数移植后患者临床表现复杂，反应剧烈，严重妨碍了小肠移植的推广。     

长期应用n-3多不饱和脂肪酸可减轻大鼠移植小肠慢性排斥反应

与其他实体器官移植相比,小肠移植的长期效果不理想.肠道存在大量的淋巴组织,肠道黏膜对缺血损伤的高度灵敏以及经常接触环境刺激等均为移植小肠易发生排斥反应和感染的原因.除了难以控制的急性排斥反应和致命的感染外,慢性排斥反应也是导致小肠移植失败的主要原因之一.     

小肠移植术后内镜引导下移植肠黏膜活检的时机及诊断价值

目的 总结小肠移植术后内镜引导下移植肠黏膜活检的时机及该技术对急性排斥反应和感染的诊断价值.方法 根据免疫抑制方案的不同,将15例小肠移植受者分为3个阶段.1994-1995年为第1阶段(3例),2003-2006年为第2阶段(7例),2007年以后为第3阶段(5例).第3阶段进行计划性内镜引导下移植肠黏膜活检的监测,既术后第3天进行首次内镜引导下移植肠黏膜活检,此后活检的频次在术后第1个月为2次/周,术后第2～3个月为1次/周,术后第4～6个月为1次/2周,术后7个月以后为1次/月,在受者出现排斥反应的临床症状和抗排斥反应治疗期间,也进行内镜引导下移植肠黏膜活检.结果 15例共进行内镜引导下移植肠黏膜活检255次,移植肠腹壁造口肉眼直视下取材活检21次.以上276份样本中,诊断排斥反应共51份(18.5%),其中诊断不确定急性排斥反应至轻度排斥反应32份(11.6%)、中度排斥反应9份(3.3%)、重度排斥反应10份(3.6%),巨细胞病毒(CMV)感染2份(0.7%),细菌感染2份(0.7%).15例共发生病理证实并需l临床治疗的排斥反应20次,其中不确定急性排斥反应至轻度排斥反应11次、中度5次、重度4次,发生细菌性和CMV肠炎各1次.结论 内镜引导下移植肠黏膜活检及其病理学检查是小肠移植术后诊断排斥反应和感染的重要手段,有计划的进行该检查对排斥反应有术后监测、早期诊断、鉴别诊断和指导治疗的价值.     

脾肠联合移植对大鼠小肠移植免疫耐受的影响

目的　探讨脾肠联合移植对小肠移植免疫耐受的诱导作用。方法　选用SD大鼠为供体、Wistar大鼠为受体 ,进行异位全小肠和脾脏联合移植。实验分 3组 ,每组 6只。A组 :小肠移植非免疫干预组 ;B组 :受体脾切除 ,脾肠联合移植组 ;C组 :小肠移植环孢霉素A(CsA)治疗组。术后 3、5、7、10d取移植小肠回肠段 0 .5～ 1.0cm进行病理学检查 ,用病理图像分析系统测量黏膜厚度 ,绒毛高度和隐窝深度。采用TdT介导的脱氧核苷酸原位末端标记法 (TUNEL)检测 3、5、7d移植小肠黏膜细胞凋亡 ,评价移植小肠急性排斥反应损伤程度。结果　A、B两组均有不同程度的急性排斥反应损伤 ,但A组高于B组 ,移植后 3、5、7d分别属于轻、中、重度排斥 ,10d黏膜基本完全脱落。B组移植后 3、5d符合轻度排斥 ,7d中度以下排斥 4只 ,重度排斥 2只 ,10d中度排斥 2只 ,重度 4只 ,但仍可见黏膜层。C组移植后 10d 1只出现轻度排斥其余未见明显损伤。黏膜厚度、绒毛高度和隐窝深度B组明显高于A组 ,黏膜上皮细胞凋亡数目较A组低。结论　受体脾切除 ,脾肠联合移植可减轻移植小肠急性排斥反应损伤 ,诱导一定程度的小肠移植免疫耐受     

亲体小肠移植的血管重建与二期肠吻合术式探讨

小肠移植是治疗不可逆性小肠衰竭的有效方法，但因术后排斥反应、感染等严重并发症而影响其发展。亲体小肠移植组织相容性较高，可减少排斥反应或减轻其严重程度，且有缺血时间短、不需供体等待等优势。我院于2005年1月11日实施1例亲体小肠移植获得成功，现报道如下。     

小肠移植排斥的研究进展

移植排斥是临床小肠移植遇到的最大困难，本文对小肠移植排斥的特点、临床分级、诊断及监测控制排斥的最新进展作一综述。     

小肠移植术后排斥反应的诊断与治疗四例报告

目的 总结小肠移植术后排斥反应的诊断和治疗体会.方法 4例患者小肠移植术后均采用阿来佐单抗诱导及单用他克莫司(Tac)的无激素维持方案,术后前3个月血Tac浓度维持在10～15μg/L,术后4个月开始减少至5～10 μg/L,术后7个月开始减少至5/μg/L.术后采用临床症状观察、移植肠内镜观察及移植肠黏膜活检等方法监测排斥反应.排斥反应的诊断和分级则依据2003年国际小肠移植会议上确立的小肠移植急性排斥反应的病理学诊断标准.当发生IND级至轻度排斥反应时,提高血Tac浓度至15/μg/L并联合短程小剂量激素治疗,如排斥反应控制不理想,则应用大剂量激素冲击治疗;当发生中度排斥反应时,则提高血Tac浓度至15μg/L并联合大剂量激素冲击治疗.同时积极预防全身感染,停止肠内营养使肠道彻底休息.结果 4例患者术后共发生排斥反应9次,术后3个月内3例发生IND级至轻度排斥反应4次,术后3～6个月2例发生IND级至轻度排斥反应3次,术后7～12个月2例发生中度排斥反应2次.发生的9次排斥反应经治疗后均得到很好控制,移植肠功能恢复良好.IND级或轻度排斥反应的恢复时间为2～8d(平均4.8 d),中度排斥反应为15d.4例患者中有2例的存活时间已超过1年,1例为术后8个月余,1例为术后4个月,目前均在顺利康复中.结论 移植肠黏膜活组织病理学检查仍然是诊断排斥反应的金标准.提高血Tac浓度及联合应用激素治疗可成功逆转小肠移植排斥反应.