HER3高表达与胃癌恶性表型的关系

目的 探讨人表皮生长因子受体3 (HER3)在人胃癌组织及胃癌细胞株中的表达.方法 回顾性分析胃癌患者161例,应用免疫组化方法分析HER3表达.构建针对人HER3基因的小干扰RNA(siRNA),对HER3高表达的胃癌细胞株进行转染,检测转染前后胃癌细胞株增殖、迁移率、凋亡率变化.结果 HER3高表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、分期、神经脉管侵犯及预后有关(P＜0.05或P＜0.01).多因素分析显示:肿瘤分期(HR:4.044,95％ CI:2.149-7.609,P=0.000)、HER3高表达是胃癌独立的预后因素(HR:1.922,95％CI:1.081-3.416,P=0.026).HER3 siRNA处理胃癌细胞株后,HER3表达下调,胃癌细胞株增殖(72 h时,MNK45 vs.MNK45siRNA,SGC7901 vs.SGC7901 siRNA:P＜0.05; 96 h时,MNK45 vs.MNK45 siRNA:P＜0.05,SGC7901 vs.SGC7901 siRNA:P＜0.01)、迁移受抑制(P=0.0071),凋亡增加(MNK45 vs.MNK45siRNA:P=0.0019;SGC7901 vs.SGC7901 siRNA:P=0.0061).结论 HER3与胃癌恶性表型密切相关,是胃癌预后不良的独立指标之一,有可能成为治疗新靶点.     

钠氢交换蛋白1在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖的影响

目的：观察钠氢交换蛋白1（Na＋／H＋,exchanger 1,NHE1）在人胃癌组织和胃癌细胞中的表达变化,以及对SGC‐7901胃癌细胞增殖的影响。方法采用实时逆转录聚合酶链式反应（real time PCR ,RT‐PCR）和免疫印迹（Western Bloting）技术检测比较NHE1在正常胃黏膜组织、胃癌组织、正常胃黏膜细胞株GES‐1和胃癌细胞株SGC‐7901中的表达;用不同浓度的NHE1特异性阻断剂[5‐（N‐乙基‐N‐异丙基）]阿米洛利[5‐（N‐ethyl‐N‐isopropyl） amiloride （EIPA ）]处理胃癌 SGC‐7901细胞24 h ,MTT法检测其对SGC‐7901细胞增殖的影响。结果 NHE1在人正常胃黏膜组织、胃癌组织、正常胃黏膜细胞和胃癌细胞中均有表达,但在人胃癌组织和 SGC‐7901胃癌细胞中,其mRNA 和蛋白表达水平均明显增高（P＜0．05）;EIPA10μm／mL ,20μm／mL ,30μm／mL处理,均能抑制胃癌SGC‐7901细胞的过度增殖（P＜0．05）,且呈现良好的剂量‐效应关系。结论 NHE1 mRNA和蛋白表达水平在胃癌中表达显著升高;NHE1特异性阻断剂EIPA能抑制胃癌SGC‐7901细胞的增殖,N H E1的改变可能与胃癌细胞的增殖密切相关。     

二烯丙基二硫诱导人胃癌MGC803细胞的差异microRNA表达

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人胃癌MGC803细胞的差异miRNAs表达。方法采用miRNAs芯片与qRT-PCR检测DADS诱导人胃癌MGC803细胞的差异miRNAs表达。结果 microRNA芯片检测显示,30 mg·L~(-1)DADS处理24 h后,MGC803细胞的差异miRNAs表达中,miR-200b、miR-22、miR-7、miR-143、miR-138、miR-34a、miR-150等7个miRNA表达明显上调,miR-222、miR-21、miR-15b、miR-182、miR-18a等5个miRNA下调。q PCR证实,30 mg·L~(-1)DADS处理MGC803细胞后,miR-200b、miR-22、miR-7、miR-143、miR-138、miR-34a、miR-150等表达较未处理组明显上调(P <0. 05)。且q PCR检测显示,miR-200b与miR-22在MGC-803、BGC-823、MKN-28、SGC-7901、HGC-27等各种人胃癌细胞表达较正常人胃癌GES-1细胞明显下调(P <0. 05)。miR-200b与miR-22在胃癌组织中表达较正常胃组织明显下调(P <0. 05)。结论DADS诱导人胃癌MGC803细胞的差异miRNAs表达有7个miRNA明显上调,5个miRNA下调。miR-200b与miR-22在胃癌组织与细胞中表达下调。DADS可上调MGC803细胞miR-200b与miR-22表达。     

胃癌组织中FBXO45和SKP1蛋白表达及其临床预后意义

为了探讨胃癌组织中FBXO45与S期激酶相关蛋白1(SKP1)蛋白表达及其临床预后意义,选取2013年5月至2014年5月该院进行胃癌手术的60例患者作为研究对象。收集其癌组织标本及对应的癌旁组织标本,并采用免疫组化染色法检测其中FBXO45与SKP1蛋白的表达水平,采用χ^2检验分析FBXO45与SKP1表达情况与胃癌临床病理特征的关系,多因素Cox回归分析探讨FBXO45与SKP1表达情况与预后的相关性。胃癌组织FBXO45、SKP1阳性表达率分别为33.33%,65.00%;癌旁组织FBXO45、SKP1阳性表达率分别为68.33%,30.00%,胃癌组织与癌旁组织中FBXO45、SKP1阳性表达比较存在明显差异(P<0.05)。TNMⅢ~Ⅳ期、低分化、出现淋巴结转移患者的FBXO45阴性表达率、SKP1阳性表达率均上升(P<0.05)。经单因素分析得出:TNMⅢ~Ⅳ期、低分化、出现淋巴结转移、FBXO45阴性表达、SKP1阳性表达的胃腺癌患者生存时间均显著缩短(P<0.05)。经多因素分析显示:TNMⅢ~Ⅳ期(HR=3.50,95%CI:2.32~5.29)、淋巴结转移(HR=3.13,95%CI:2.16~4.54)、肿瘤低分化(HR=3.76,95%CI:2.47~5.72)、FBXO45阴性表达(HR=2.69,95%CI:1.99~3.64)、SKP1阳性表达(HR=4.11,95%CI:2.51~6.74)均为影响胃癌预后的独立危险因素(P<0.05)。FBXO45在胃癌组织中表达水平降低,而SKP1表达在胃癌组织中表达水平升高,FBXO45表达阴性与SKP1表达阳性均为胃腺癌患者预后危险因素,二者可作为判断胃癌预后的生物标志物。     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白6在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的　探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白6（TNFαIP6）在胃癌中的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法　收集133例胃癌患者的临床病理资料及随访数据,通过免疫组化染色检测TNFαIP6在胃癌组织中的表达情况,分析TNFαIP6表达与胃癌临床病理特征的关系。绘制Kaplan-Meier生存曲线比较TNFαIP6高表达与低表达者的总生存率差异,采用Cox回归分析确定胃癌患者预后的影响因素。结果　133例患者中TNFαIP6高表达52例,低表达81例。低分化腺癌、Borrmann Ⅳ型、T3~T4期、M1期、淋巴结转移及血管侵犯患者TNFαIP6高表达的比例明显升高。生存分析显示,TNFαIP6高表达组5年总生存率较低表达组明显下降（56.5% vs. 82.9%,Log-rank χ2=12.404,P＜0.01)。Cox多因素分析证实,T3~T4期（HR=2.291,95%CI：1.028~5.103）、M1期（HR=3.628,95%CI：1.421~9.260）及TNFαIP6高表达（HR=2.742,95%CI：1.265~5.945）是胃癌患者预后的独立危险因素（均P＜0.05）。结论　TNFαIP6在胃癌组织中的高表达与肿瘤的侵袭性特征有关,是影响胃癌患者预后的一个独立标志物。     

中期因子及MVD在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨中期因子（midkine,MK）在胃癌组织中表达及其与微血管密度（MVD）和临床病理特征的关系,探讨影响胃癌患者长期生存的预后因素。方法应用免疫组化两步法检测107例胃癌组织中中期因子和CD34的表达,并以31例正常胃黏膜标本作对照。对CD34阳性血管进行MVD计数,并结合临床资料进行统计学分析。结合随访资料,应用Cox比例风险模型对可能影响胃癌预后结果的参数进行分析。结果胃癌组织中的中期因子阳性表达率分别为69．2％,MVD为32．74±6．46;正常胃黏膜组织中期因子0．00％,MVD为14．55±4．07,胃癌组织中中期因子表达率及MVD均明显高于正常胃黏膜组织（均P〈0．01）。中期因子表达与胃癌的大小、有无淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关（均P〈0．01）,而与患者年龄、性别无关。在胃癌组织中中期因子的表达与MVD呈正相关（r=0．592,P〈0．01）。MVD与胃癌的大小、浸润深度、有无淋巴结转移、TNM分期有关（均P〈0．01）。Cox单因素回归分析表明胃癌的大小、浸润深度、有无淋巴结转移、病理分期、中期因子表达与胃癌的预后有关（P〈0．05）,而性别、年龄等与预后无关（P〉0．05）。但经Cox多因素回归分析,只有肿瘤的病理分期、MK表达具有独立的预后意义（P〈0．05）。结论在胃癌组织中,中期因子的过度表达可能在肿瘤的血管生成和进展过程中起着重要作用。MK过表达可作为评估胃癌患者预后的独立指标,从而指导胃癌的治疗。     

氧化苦参碱通过下调miR-155-5p对胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭作用

目的 探讨氧化苦参碱通过调节miR-155-5p表达对胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭中的作用和其潜在机制。方法 使用TRIzol法提取组织标本和细胞系的总RNA,检测胃癌组织与癌旁组织中的miR-155-5p表达情况。采用qRT-PCR评估miR-155-5p在人胃癌细胞系（SGC7901、MGC803）与正常胃黏膜上皮（GES-1、AGS）细胞中的表达情况。将MGC803分为空白组、转染错义序列siRNA组、miR-155-5p模拟物组、miR-155-5p抑制剂组、氧化苦参碱（100 μmol/L）组、氧化苦参碱＋miR-155-5p模拟物组。采用MTT法观察不同干预下胃癌细胞的生长抑制作用,用细胞集落形成试验检测不同干预下胃癌细胞的增殖情况。用流式细胞技术分析不同干预对胃癌细胞凋亡的影响。Transwell法检测不同干预后胃癌细胞的迁移、侵袭情况。蛋白质印迹法检测MGC803细胞中Claudin 1、c-Myc、cyclin D1、Bcl-2、Caspase-3蛋白的相对表达量。结果 与癌旁组织和胃黏膜细胞（GES-1、AGS）相比,在胃癌组织和胃癌细胞系（SGC7901、MGC803）中miR-155-5p相对表达量升高（P＜0.001）。而氧化苦参碱通过调节miR-155-5p表达抑制胃癌细胞生长。MTT实验表明,miR-155-5p模拟物的转染后MGC803细胞活力显著增加,而氧化苦参碱可显著抑制胃癌细胞、转染和miR-155-5p模拟物的细胞活力（P＜0.001）。与空白组、错义序列siRNA组相比,miR-155-5p模拟物转染后MGC803细胞活力显著增加,细胞集落生成增加,而氧化苦参碱可显著抑制胃癌细胞的活力和转染miR-155-5p模拟物的细胞活力,及细胞集落生成数（P＜0.001）。miR-155-5p-模拟物组的细胞迁移和侵袭细胞数显著增加、凋亡比例降低,而氧化苦参碱组和miR-155-5p-抑制剂组细胞迁移和侵袭细胞数量降低、凋亡比例升高（P＜0.001）。miR-155-5p模拟组的Claudin 1、c-Myc、Cyclin D1、Bcl-2相对表达量增加,而Caspase-3相对表达量降低（P＜0.01、0.001）。而miR-155-5p抑制剂组、氧化苦参碱组和氧化苦参碱＋miR-155-5p抑制剂组的Claudin 1、c-Myc、Cyclin D1、Bcl-2表达较miR-155-5p模拟组显著下降,Caspase-3表达增加（P＜0.001）。结论 miR-155-5p可能是胃癌的治疗靶点,氧化苦参碱可通过miR-155-5p的调节作用发挥抗肿瘤作用。     

干细胞标志物CD133与胃癌临床特征的相关性研究

目的探讨CD133蛋白表达与胃癌患者临床特征以及预后之间的关系。方法使用免疫组化染色方法检测我院118例胃癌患者手术切除的病灶组织中CD133表达情况,并检索相关数据库对已报道的CD133表达与胃癌临床特征的研究做系统性荟萃分析,进一步验证我们的结果。结果免疫组化结果显示胃癌患者CD133蛋白表达阳性率为28.81%(34例/118例)。CD133表达与患者年龄、性别、肿瘤直径、分化程度、Lauren’s分型无关(P0.05);但与胃癌患者肿瘤的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期明显相关(P0.05)。Meta分析结果显示胃癌肿瘤浸润越深(OR=0.36,95%CI=0.26~0.49,P0.0001);有淋巴结转移(OR=0.36,95%CI=0.26~0.50,P0.0001);以及TNM分期越高(OR=0.32,95%CI=0.24~0.42,P0.0001),CD133蛋白阳性表达率越高。并且CD133阳性表达提示胃癌患者预后不良(HR=2.21,95%CI=1.52~3.22)。结论 CD133表达与胃癌浸润深度,淋巴转移,临床分期以及预后显著相关,也许能够作为未来胃癌治疗的新的分子靶点。     

胃癌组织中miR-185检测的临床价值及与Vav3-Rac1通路的关系

目的 探讨胃癌及癌旁正常胃黏膜中微小RNA145(miR-185)、Vav3、Rac1基因的表达情况及关系.方法 荧光实时定量PCR技术检测100例胃癌组织及80例癌旁正常胃黏膜中miR-185、Vav3、Rac1基因mRNA的表达情况.比较胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中这3种基因mRNA的表达差异;绘制受试者工作曲线(ROC曲线);分析miR-185、Vav3、Rac1基因mRNA表达与患者生物学特征的关系;分析胃癌组织中miR-185与Vav3、Rac1的关系.结果 胃癌组织中miR-185的表达低于癌旁正常胃黏膜组织,而Vav3、Rac1的mRNA表达则明显高于癌旁正常胃黏膜组织(P<0.05).miR-185、Vav3、Rac1的ROC曲线最佳cut-off值分别为0.3440、0.3346、0.2944.miR-185的表达与胃癌的浸润深度、分化及淋巴结转移有关;Vav3、Rac1的表达与胃癌的分化及淋巴结转移有关(P<0.05).Spearman相关分析显示,在胃癌组织中miR-185与Vav3、Rac1存在负相关,Vav3与Rac1存在正相关(P<0.05).结论 胃癌组织中miR-185表达明显降低且与胃癌的生物学特征有关,miR-185可能通过抑制Vav3-Rac1通路而参与了胃癌进展的调控过程.     

胃癌细胞和胃癌组织中GKLF、IKLF表达及临床意义

目的 研究胃癌细胞株和胃癌组织中胃肠富集Kruppel样冈子(GKLF)、肠道富集Kruppel样因子(IKLF)的表达及临床意义.方法 采用免疫细胞化学法检测人正常胃上皮细胞株GES-1及胃癌细胞株MKN28、SGC7901、BGC823、HGC227中GKLF、IKLF的表达.免疫组织化学法检测96例胃癌组织及其远端正常胃组织中GKLF、IKLF的表达.结果 GKLF在人正常胃上皮细胞株内阳性表达,在胃癌细胞株内无表达;IKLF在人正常胃上皮细胞株内无表达,在胄癌细胞株内阳性表达.胃癌组织中GKLF阳性率为20.8%,显著低于远端正常胃组织的64.6%(P＜0.01),胃癌组织中IKLF阳性率为71.9%,显著高于远端正常胃组织的21.9%(P＜0.01).GKLF、IKLF表达与胃癌患者的年龄、性别、分化程度、Lauren分型无关,但与淋巴结足台行转移及pTNM分期相关.结论 GKLF、IKLF在胃癌发生、发展中起一定的作用,检测GKLF、IKLF的表达有助于判断胃癌患者病情程度和预后.     

Dihydrotanshinone induces apoptosis of SGC7901 and MGC803 cells via activation of JNK and p38 signalling pathways

Context: Dihydrotanshinone (DHT), a natural compound from Salvia miltiorrhiza Bunge (Lamiaceae), showed higher cytotoxic potential compared with other tanshinones. Its effect and mechanism on gastric cancer have not been investigated.

Objective: This study evaluates the effects of DHT on cell proliferation and apoptosis on gastric cancer cells, and elucidates its molecular mechanisms.

Materials and methods: Human gastric cancer MGC803 and SGC7901 cells were treated with various concentrations of DHT (0–15?μM) for 24 and 48?h, and cell growth was measured by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide assay. Cell apoptosis was analysed by flow cytometry and DAPI staining. Western blots were performed to investigate changes in the level of apoptosis related genes in gastric cancer cell.

Results: DHT exhibited obvious inhibition of the survival of gastric cancer cells. The IC₅₀ values in SGC7901 and MGC803 cells were 9.14 and 5.39?μM for 24?h, respectively. Cells treated with 6?μM DHT resulted in 41.3% and 35.4% apoptotic cell fractions in SGC7901 and MGC803 cells, respectively, significantly higher than that of the control. Hallmarks of apoptosis were observed in gastric cancer cells after DHT exposure. DHT enhanced the expression levels of cleaved caspase-3, caspase-9 and poly-ADP-ribose polymerases. Furthermore, DHT increased the phosphorylation of JNK and p38 in SGC7901 and MGC803 cells.

Conclusion: DHT induced growth inhibition and apoptosis of gastric cancer cells, involving activation of caspase proteins and the JNK/p38 signaling pathway. The results indicated that DHT has a promising chemotherapeutic potential for human gastric cancer.     

胃癌组织中干细胞标志物 Sox2 的表达及临床意义

摘要： 目的 探讨胃癌组织中干细胞标志物 Sox2 的表达及临床意义。方法 RT-PCR 检测 60 例胃癌患者癌组 织（胃癌组）和癌旁组织（癌旁组）中 Sox2 mRNA 表达, 免疫组织化学法检测 2 组 Sox2 蛋白表达水平。比较 Sox2 mRNA 阳性表达情况在不同年龄、 性别、 肿瘤大小、 组织类型、 TNM 分期、 分化程度、 浸润深度及淋巴结转移中的差 异。结果 胃癌组 Sox2 mRNA 阳性表达率 53.3% （32/60） 高于癌旁组的 20.0%（12/60）; Sox2 mRNA 的相对表达强度 高于癌旁组（0.724±0.209 vs. 0.256±0.065, P＜0.01）。胃癌组 Sox2 蛋白的阳性表达率 50.0%（30/60）高于癌旁组的 16.7%（10/60, P＜0.01）。胃癌组 Sox2 mRNA 阳性表达率临床 TNM 分期（Ⅲ＋Ⅳ）组高于（Ⅰ＋Ⅱ）组, 低、 未分化组 高于中、 高分化组, 浸润深度 T3～T4组高于 T1～T2组, 淋巴结转移组高于无转移组（均 P＜0.05 或 P＜0.01）。结论 胃癌组织中 Sox2 高表达与其发生、 侵袭、 进展及转移有关, 可作为胃癌诊疗新的分子标志物。     

表皮生长因子受体和基质金属蛋白酶-9在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在胃癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测80例胃癌组织和30例正常胃组织中EGFR和MMP-9蛋白的表达情况。结果80例胃癌组织中44例EGFR表达阳性（55．O％）,明显高于正常胃组织中的6．7％（2／30）（X^2=20．95,P〈0．05）;在淋巴结转移阳性患者胃癌组织中的EGFR表达阳性率为63．6％（35／55）,高于淋巴结转移阴性患者胃癌组织的36．0％（9／25）（x。=5．30,P〈0．05）。MMP-9在80例胃癌组织中阳性表达率70．0％（56／80）,明显高于正常胃组织中的20．o％（6／30）（X^2=22．18,P〈0．05）;在胃癌不同TNM分期中,（Ⅲ期＋Ⅳ期）组中EGFR和MMP-9的表达均高于其在（Ⅰ期＋Ⅱ期）组中的表达（X^=4．26、5．78,均P〈0．05）。结论EGFR和MMP-9在胃癌组织中高表达,与胃癌TNM分期及淋巴结转移相关,是评估胃癌生物学行为及预后的重要指标。     

miR-21调控HTN1蛋白对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨miR-21调控HTN1蛋白对胃癌细胞迁移和侵袭能力的作用.方法 定量聚合酶链反应检测胃癌组织和胃癌细胞中miR-21的表达情况,过表达miR-21后蛋白免疫印迹法检测HTN1的表达,双荧光素酶实验检测miR-21和HTN1表达在胃癌细胞中的关系,划痕实验检测过表达miR-21对胃癌细胞迁移能力的影响,Transwell侵袭实验检测过表达miR-21对胃癌细胞侵袭能力的影响.结果 miR-21在胃癌组织及胃癌SGC7901细胞中表达水平均降低(P<0.05).miR-21的表达与病理分期及有无淋巴结转移有关(P<0.05).过表达miR-21胃癌SGC7901细胞株荧光素酶活性、HTN1基因和蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05).过表达miR-21胃癌SGC7901细胞的迁移速率较对照组减慢,侵袭细胞数目少于对照组(P<0.05).结论 miR-21在胃癌中表达下调,其可以调控HTN1表达影响胃癌细胞迁移和侵袭能力.     

胃癌患者69例预后影响因素分析

目的探讨影响胃癌预后的相关危险因素。方法回顾性分析69例胃癌行手术治疗患者的临床资料,并进行单因素和COX多元回归分析。结果单因素及多因素分析显示,胃癌病理学分级、肿瘤TNM分期、淋巴结转移因素与胃癌手术预后存在相关性,是影响胃癌预后的独立相关危险因素（均P〈0．05）。而性别、年龄、根治方式、术后辅助化疗等因素与胃癌预后无关（均P〉0．05）。结论影响胃癌患者预后的原因是多方面的,肿瘤TNM分期是其主要危险因素。     

LncRNA Linc00152靶向miR-193a-3p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探讨LncRNA Linc00152靶向调控miR-193a-3p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 采用qRT-PCR法检测正常胃黏膜细胞GES-1及4种胃癌细胞(MGC803、BGC803、SGC7901、AGS)中Linc00152的表达水平。MGC-803细胞分为pcDNA3.1-GFP-Linc00152组、pcDNA3.1-GFP组;AGS细胞分为si-Linc00152组、si-NC组,分别转染相应的Linc00152过表达和抑制载体。qRT-PCR法检测Linc00152、细胞周期素D1(cyclin D1,CCND1)和miR-193a-3p基因的表达水平,CCK-8检测细胞的活性,细胞克隆试验检测细胞的克隆能力,Annexin VFITC/PI染色后采用流式细胞术检测转染细胞凋亡率,Transwell法检测细胞侵袭,荧光素酶报告试验检测Linc00152和miR-193a-3p靶向关系,Western blotting检测Bcl-2、Bax、CCND1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。并将si-Linc00152组、si-NC组细胞接种裸鼠,观察裸鼠体质量和一般状态,处死后称重记录肿瘤体积、质量,qRT-PCR法测定肿瘤组织Linc00152、CCND1和miR-193a-3p的表达水平。结果 与GES-1细胞相比,胃癌细胞MGC803、BGC803、SGC7901、AGS中Linc00152的表达升高,其中Linc00152在胃癌MGC803细胞中表达较低,而在胃癌AGS细胞中的表达较高,选用胃癌MGC803、AGS细胞进行后续试验。与pcDNA3.1-GFP组相比,pcDNA3.1-GFP-Linc00152组细胞的活性显著升高,克隆能力增强,细胞凋亡减少,侵袭能力显著上升,CCND1、Bcl-2、波形蛋白的表达显著升高,miR-193a-3p和E-钙黏蛋白的表达显著降低。双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,Linc00152可直接调控miR-193a-3p的转录活性,且Linc00152可显著上调MGC-803细胞CCND1蛋白表达。与si-NC组相比,si-Linc00152组的裸鼠体内的异种移植瘤体积和体质量显著下降,CCND1和Linc00152的表达显著下降,miR-193a-3p的表达显著上升。结论 Linc00152可靶向作用于miR-193a-3p促进胃癌细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制与细胞周期、上皮细胞间充质转化以及细胞凋亡有关。     

人类表皮生长因子受体 2对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响

目的 研究人类表皮生长因子受体2(HER2)对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响,并探讨其机制.方法 2018年11月至2019年6月,运用实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测永生化的正常胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823中HER2的表达;将空载体(pcDNA 3.1)、HER2过表达载体(pcDNA 3.1-HER2)、小干扰RNA阴性对照(si-NC)、HER2小干扰RNA(si-HER2)用脂质体法转染至SGC-7901细胞.噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;Tran-swell小室检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中p16、p21、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、裂解的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、裂解的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达.结果 与正常胃上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823中HER2的表达[(3.02±0.28),(2.51±0.21),(2.36±0.19)比(1.00±0.08)]明显升高,其中SGC-7901细胞中的表达最高(P<0.05);过表达HER2后,SGC-7901细胞的增殖[(1.12±0.09)比(0.61±0.06)]、迁移[(170±15)比(100±9)]和侵袭[(130±12)比(75±6)]能力均明显上调,细胞的凋亡力[(8.03±0.69)％比(19.46±1.44)％]明显下调(P<0.05);敲减HER2则可下调SGC-7901细胞的增殖[(0.59±0.05)比(0.89±0.08)]、迁移[(55±5)比(100±8)]和侵袭[(36±4)比(75±6)]能力,上调细胞的凋亡[(16.82±1.15)％比(8.01±0.65)％]能力(P<0.05).重要的是,过表达HER2可明显抑制SGC-7901细胞中增殖抑制蛋白p16、p21,迁移侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9,凋亡促进相关蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3的表达,敲减HER2具有相反的作用.结论 HER2可促进胃癌细胞的增殖、迁移侵袭,抑制凋亡,其可能与调控功能增殖、迁移侵袭及凋亡相关蛋白表达有关.     

胶原蛋白 Ⅴ型 2链对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭及肿瘤生长的调控作用

目的探究胶原蛋白 Ⅴ型 2链( COL5A2)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭及肿瘤生长的调控作用。方法于 2022年 1―3月开展研究,基于 TCGA数据库分析 COL5A2在胃癌组织、正常组织中的表达差异, COL5A2对胃癌分期的作用及对病人预后的价值。荧光定量聚合酶链式反应( qRT-PCR)、蛋白质印迹法( WB)检测正常人胃黏膜上皮细胞 GES-1、胃癌细胞 MGC-803、 MKN-45、SGC7901中 COL5A2的表达。慢病毒介导稳定转染 shRNA-COL5A2、shRNA、NC的 MKN-45细胞。克隆形成实验、细胞计数试剂盒( CCK8)、 5-乙炔基 -2''-脱氧尿苷( EdU)染色检测细胞的增殖;碘化丙啶( PI)染色检测细胞周期分布; Transwell实验、伤口愈合实验检测细胞的迁移、侵袭能力;裸鼠成瘤实验检测肿瘤的生长;免疫组织化学实验检测肿瘤组织 PCNA蛋白。结果胃癌组织 COL5A2相对表达量为 4.74±0.45,显著高于正常组织的 2.53±0.26(P<0.05)与正常组织相比,胃癌组织中 COL5A2升高,与病人临床分期、预后差有关。 GES-1组 COL5A2相对表达量为 0.25±0.04,显著,低于胃癌细胞中 MGC-803组0.47±0.05、MKN-45组 0.72±0.08、SGC7901组 0.54±0.04(P<0.05),其中 MKN-45升高幅度最大。与 shRNA组细胞相比, shRNA-COL5A2组细胞 COL5A2表达降低,细胞的克隆形成数、在 48、72 h的活性、 EdU阳性率、迁移和侵袭数量、划痕愈合率均降低,细胞周期阻滞 G1/S期, CyclinD1和 CDK4表达降低( P<0.05)。异种移植裸鼠成瘤的体积、质量均降低,肿瘤 PCNA表达也降低。结论 COL5A2在胃癌中高表达,下调 COL5A2抑制癌细胞增殖、迁移侵袭及肿瘤的生长。