LncRNA ADAMTS9-AS2表达上调抑制结直肠癌的增殖和转移

目的：探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)ADAMTS9-AS2在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达、临床意义和生物学作用。方法：利用基因芯片数据分析CRC中ADAMTS9-AS2的表达情况,并利用real-time PCR技术在20例CRC组织和癌旁正常组织及细胞系中进行验证。利用基因芯片提供的临床数据进行临床病理特征相关性分析、Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析。利用CCK-8、克隆形成和Transwell迁移和侵袭实验检测ADAMTS9-AS2对CRC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果：ADAMTS9-AS2在CRC组织和细胞中显著低表达(P<0.05),其表达高低与早期CRC患者的年龄、性别、分期、病灶位置和错配修复状态均无明显相关性(P>0.05)。在早期CRC患者中,ADAMTS9-AS2高表达组患者的5年无复发生存率高于低表达组(83.8% vs 73.5%,P=0.041),ADAMTS9-AS2高表达是CRC患者无复发生存的独立保护因素(风险比=0.528,95% CI：0.299~0.932;P=0.028)。ADAMTS9-AS2表达上调能明显抑制CRC细胞的增殖和转移(P<0.05),表达下调则导致相反的结果(P<0.05)。结论：ADAMTS9-AS2通过抑制CRC细胞的增殖和转移发挥抑癌基因的作用,是CRC重要的预后因素。     

LncRNA GATA3-AS1促进乳腺癌细胞的增殖迁移及其机制

目的 长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)与多种肿瘤的发生发展密切相关.本研究旨在探讨LncRNA GATA3-AS1在乳腺癌进展中的生物学作用及其机制.方法 使用starBase等在线数据库预测GATA3-AS1的下游靶基因GATA3,采用qRT-PCR技术检测正常乳腺细胞与乳腺癌...     

低表达lncRNA RP11-316M1.12通过上调miR-138-5p抑制膀胱癌细胞的侵袭和迁移

目的 探讨RP11-316M1.12对膀胱癌细胞侵袭、迁移、上皮间充质转化等恶性生物学行为的影响及相关机制.方法 lncRNAs from cancer arrays(lnCAR)数据库分析RP11-316M1.12在膀胱癌和癌旁组织中的表达水平.荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescence quantitati...     

脱氢姜酮通过调控miR-223-3p抑制喉癌细胞Hep-2增殖、迁移及血管形成

目的 探讨脱氢姜酮(DZG)对喉癌细胞Hep-2增殖、迁移及血管形成的影响及其相关机制。方法 分别以不同浓度的DZG(0,75,150,300μmol/L)处理Hep-2细胞24 h, MTT法、Transwell、Western blot法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)分别检测Hep-2细胞的存活率、迁移能力、迁移蛋白波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和血管形成蛋白血管内皮生长因子(VEGF)以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)相对表达水平和miR-223-3p mRNA相对表达量。将Hep-2细胞分别分为：(1)空白对照组(control组)、模拟物阴性对照组(miR-NC)、miR-223-3p组(转染miR-223-3p);(2)空白对照组(si-control组)、阴性对照组(si-NC)及miR-223-3p小干涉RNA组(si-miR-223-3p)。MTT法检测细胞增殖抑制能力,Transwell检测细胞迁移能力,Western blot检测细胞VGEF、MMP-2、Vimentin、N-cadherin蛋白相对表达量。结果 0,7...     

LncRNA TUC338通过激活EGFR/PI3K/AKT 信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨长链非编码RNATUC338（lncRNA TUC338）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、迁移、侵袭及表皮生长因子受体（EGFR）/磷酸肌醇3激酶（PI3K）/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT）通路的影响。方法 收集2019年7月—2021年6月我院胸外科手术切除的37例NSCLC患者肺癌组织与癌旁组织标本,RT-qPCR检测组织标本及NSCLC细胞中lncRNA TUC338表达;对NCI-H157细胞进行干预,将si-TUC338、si-NC、pcDNA-TUC338、pcDNA-NC质粒转染细胞及EGFR与PI3K双重抑制剂MTX-211（MTX-211）、pcDNA-TUC338与MTX-211共同处理细胞,CCK-８法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9蛋白及EGFR、PI3K、AKT相关蛋白表达。结果 LncRNA TUC338在肺癌组织与细胞中高表达;抑制lncRNA TUC338表达可显著抑制NCI-H157细胞增殖、迁移与侵袭及EGFR/PI3K/AKT通路激活（P＜0.05）;过表达lncRNA TUC338可促进NCI-H157细胞增殖、迁移与侵袭及EGFR/PI3K/AKT激活（P＜0.05）。结论 LncRNA TUC338在肺癌中呈高表达,可能通过激活EGFR/PI3K/AKT信号通路促进肺癌NCI-H157细胞增殖、迁移与侵袭。     

miR-218-5p靶向EGLN3抑制肺腺癌增殖、迁移和侵袭

目的 微小RNA(microRNAs, miRNA)参与了多种癌症的发生发展,有研究证明微小RNA-218-5p(microRNA-218-5p, miR-218-5p)在癌症的发展中发挥着重要作用。然而,miR-218-5p影响肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)发展的具体机制尚未明确。方法 通过癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据分析肺腺癌组织中miR-218-5p的表达情况,实时荧光定量PCR(quantitative real time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测miR-218-5p和EGLN3在人肺正常细胞系和人肺腺癌细胞系中的表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-218-5p对AKT/mTOR信号通路关键蛋白表达的影响以及细胞中EGLN3的蛋白表达。使用生物信息学方法预测并通过荧光素酶报告基因检测证实miR-218-5p与EGLN3的靶向关系。细胞活力和细胞毒性检测(cell counting kit-8, CCK-8)、细胞克隆形成、细胞...     

miR-885-3p抑制胃癌细胞的增殖和迁移

目的 探讨微小RNA miRNA-885-3p对胃癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用qRT-PCR检测miR-NA-885-3p在4种胃癌细胞株(SGC-7901、MGC-803、BGC-823、AGS)以及人胃正常黏膜GES-1细胞中的表达.将mimic(miRNA-885-3p模拟物)或miRNA-NC转染SGC-...     

LncRNA XIST通过miR-193a-3p/RSF1轴对骨肉瘤细胞增殖和迁移的作用研究

目的 研究长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)通过miR-193a-3p/重构剪切因子1(RSF1)轴对骨肉瘤细胞增殖、迁移的作用.方法 收集2017年9月至2018年12月滨州医学院烟台附属医院30例行骨肉瘤切除术获得的癌组织和癌旁组织,RT-qPCR检测癌组织和癌旁组织中lncRNA XIS T m RN A表达.采用脂质体转染法将sh-lncRN A XIS T重组质粒、空载质粒分别转至对数期生长的骨肉瘤HOS细胞,另取未做任何处理的HOS细胞为空白组.稳定转染48 h后,CCK-8法检测各组细胞培养24、48、72 h时的吸光度(A)值,划痕实验检测培养24 h时细胞的融合距离,荧光素酶报告基因实验检测LncRNA XIST、miR-193a-3p与RSF1之间的作用关系,RT-qPCR检测lncRNA XIST、miR-193a-3p、RSF1 mRNA表达,Western blot检测RSF1蛋白表达.结果 骨肉瘤组织中lncRNA XIST mRNA表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05).空白组、空载组及实验组A值随转染时间的延长而升高,差异有统计学意义(P<0.05).与空白组和空载组比较,实验组培养24、48、72 h后A值降低,融合距离缩短,lncRNA XIST、RSF1 mRNA表达降低,miR-193a-3p mRNA表达升高,RSF1蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 敲降ln-cRNA XIST可抑制骨肉瘤细胞增殖和迁移能力,可能通过miR-193a-3p/RSF1轴发挥作用.     

lncRNA MNX1-AS1通过调控miR-218-5p影响非小细胞肺癌细胞的增殖、凋亡及迁移

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1通过调控miR-218-5p的表达对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法qRT-PCR检测MNX1-AS1和miR-218-5p在肺癌细胞系及肺正常上皮细胞系中的表达;采用双荧光素酶报告基因实验和RNA pull down实验验证MNX1-AS1和miR-218-5p之间的靶向关系;干扰A549细胞中MNX1-AS1和miR-218-5p的表达后,MTT、流式细胞术和Transwell实验检测MNX1-AS1靶向miR-218-5p对癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果与肺正常上皮细胞系相比,肺癌细胞系中MNX1-AS1表达升高,miR-218-5p表达降低(P＜0.05);荧光素酶报告基因实验显示,MNX1-AS1可与miR-218-5p结合导致荧光素酶活性显著降低(P＜0.05);RNA pull down实验证实miR-218-5p能特异性结合MNX1-AS1(P＜0.05);抑制A549细胞中MNX1-AS1的表达后,miR-218-5p水平上调,细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低,凋亡率显著升高;与MNX1-AS1抑制剂组相比,共抑制MNX1-AS1和miR-218-5p的细胞增殖、迁移、侵袭能力升高,凋亡率下降(P＜0.05)。结论MNX1-AS1可以通过靶向下调miR-218-5p的表达影响非小细胞癌的增殖、凋亡、迁移和侵袭。     

circFOXK2靶向miR-409-3p调控肺癌细胞的增殖、迁移及侵袭

目的 探讨circFOXK2对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法 收集45例肺癌患者的癌组织和癌旁组织,采用qRT-PCR法检测组织中circFOXK2和miR-409-3p表达。体外培养肺癌细胞A549和H1299,双荧光素酶报告基因实验验证circFOXK2和miR-409-3p的调控关系。转染circFOXK2小干扰RNA、miR-409-3p模拟物、或共转染circFOXK2小干扰RNA与miR-409-3p抑制剂至A549和H1299细胞。细胞增殖、迁移和侵袭用CCK-8法、克隆形成实验和Transwell分析。蛋白质印迹法检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达。结果 肺癌组织中circFOXK2水平明显上升(P<0.05),而miR-409-3p水平明显下降(P<0.05)。circFOXK2在A549和H1299细胞中靶向结合并负调控miR-409-3p。敲减circFOXK2或过表达miR-409-3p后,肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降(均P<0.05),N-cadherin水平降低(P<0.05),而E-...     

LncRNA LHFPL3-AS2在肺鳞癌中的表达、功能及潜在机制

目的 探究LncRNA LHFPL3-AS2在肺鳞癌(LUSC)组织和细胞中的表达水平及其对LUSC细胞增殖和迁移能力的影响,并分析其潜在机制。方法 通过RNA-seq数据分析LHFPL3-AS2在LUSC组织中的表达水平;采用RT-qPCR检测LHFPL3-AS2在不同肺鳞癌细胞系中的表达水平;通过CCK8实验和划痕实验探究LHFPL3-AS2过表达对LUSC细胞增殖能力和迁移能力的影响;GO、KEGG和PPI分析等生物信息学方法被用于初步机制研究。结果 LHFPL3-AS2在LUSC组织中的表达明显低于正常肺组织(P<0.05),而在LUSC细胞中的表达高于正常肺上皮细胞。过表达LHFPL3-AS2后,LUSC细胞的迁移能力受到了显著抑制(P<0.05),但对LUSC细胞增殖能力的影响因细胞类型的不同而不同。富集分析发现钙信号通路、Jak-STAT信号通路和GnRH信号通路可能参与了LHFPL3-AS2对LUSC的抑制作用。结论 LHFPL3-AS2在LUSC组织及细胞中的表达存在差异性,LHFPL3-AS2在LUSC组织中低表达并抑制细胞的迁移,有望成为LUSC治疗的...     

miR-141-3p靶向UNC5C促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 本文旨在探究miR-141-3p对结直肠癌细胞的生物学功能及其影响结直肠癌发展的分子机制。方法 用生信分析法分析结肠癌组织中的差异表达基因;qRT-PCR检测细胞中miR-141-3p和UNC5CmRNA的表达;WB检测各细胞中UNC5C的蛋白表达;通过MTT实验、细胞划痕实验、Transwell实验分别检测各细胞增殖、迁移和侵袭情况。双荧光素酶实验检测miR-141-3p对UNC5C的靶向作用。结果 结肠癌细胞中miR-141-3p高表达;下调miR-141-3p抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭;UNC5C在结肠癌细胞中低表达, miR-141-3p靶向抑制UNC5C的表达;miR-141-3p通过靶向UNC5C促进结肠癌细胞的增殖, 迁移和侵袭。结论 miR-141-3p靶向抑制UNC5C的表达, 为结肠癌患者的治疗提供了新思路。     

长链非编码RNA YAF2-AS1通过调控微小RNA-141-3p表达抑制肝星状细胞活化实验研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)YAF2-AS1在肝星状细胞活化中的作用及可能的分子机制。方法:采用基因表达数据库(GEO)分析YAF2-AS1在肝纤维化组织和正常肝组织中的表达。用YAF2-AS1质粒转染人肝星状细胞LX-2细胞并设为YAF2-AS1组,以转染阴性对照质粒为对照组。采用CCK-8实验检测LX-2细胞增殖。采用流式细胞术检测LX-2细胞周期分布和活性氧(ROS)含量。采用lncRMap软件和双荧光素酶活性实验验证YAF2-AS1与miR-141-3p的靶向关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-141-3p表达。采用Western blot检测蛋白磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路中PTEN、p-AKT蛋白以及肝纤维化标志物[α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)]的表达。结果:与正常肝组织比较,肝纤维化组织YAF2-AS1表达水平降低(P<0.01)。与对照组比较,YAF2-AS1组LX-2细胞增殖活性被抑制(P<0.05);G...     

LncRNA LINC00987通过靶向miR-375抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的 探讨IncRNA LINC00987对肺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法 以正常肺泡上皮细胞HPAEPIC为对照,qRT-PCR检测肺癌细胞株A549、HCC827和H1299中LINC00987表达量,选择表达差异较大的A549细胞进行后续实验.将A549细胞分为pcDNA-control组、pcDNA-LI...     

miR-223-3P对肺鳞癌细胞顺铂敏感性的影响

目的研究miR-223-3p对肺鳞癌细胞顺铂(CDDP)敏感性的影响。方法通过分别升高或降低(miR-223-3p mimics、NC-mimics、miR-223-3p inhibitor、NC-inhibitor)肺鳞癌NCI-H520和SK-MES-1细胞内miR-223-3p的含量后,qRT-PCR检测细胞内miR-223-3p基因表达水平;CCK-8法检测细胞半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测细胞加入CDDP药物刺激后凋亡率的改变(分别设计四组不同的处理:miR-223-3p mimics+CDDP、NC-mimics、miR-223-3p inhibitor+CDDP、NC-inhibitor);Transwell实验检测SK-MES-1细胞迁移能力的变化;Western blot法检测SK-MES-1细胞中Bax、ZEB1和E-cadherin的变化。结果 CCK-8实验结果表明,miR-223-3p mimics组的IC50低于对照组的IC50,miR-223-3p inhibitor组的IC50高于对照组的IC50;流式细胞术凋亡检测结果显示,miR-223-3...     

LncRNA LINC00342通过靶向miR-596促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 研究LINC00342在胃癌组织、细胞中的表达水平及影响胃癌细胞生物学功能的具体通路。方法 运用生物信息学技术,通过GEO数据库及相关预测软件,进行相关筛选及文献查询后,确定所研究的LncRNA及其下游所调控的miRNA;采用qRT-PCR检测LINC00342、miR-596在胃癌细胞系及人胃黏膜细胞中、胃癌组织及相应癌旁组织中的表达差异;细胞生物学功能上,过表达胃癌BGC-823细胞系中的LINC00342,将其分为pcDNA-LINC00342组和pcDNA组;过表达胃癌MGC-803细胞系中的miR-596,将其分为miR-596-mimic组及mimic-NC组;敲低胃癌MGC-803细胞系中LINC00342的表达,将其分为siLINC00342组及si-NC组、敲低胃癌BGC-823细胞系中miR-596的表达,将其分为miR-596-inhibitor组及inhibitor-NC组;分别进行CCK-8、Edu细胞增殖实验、划痕实验、Transwell细胞侵袭实验、细胞周期实验以验证LINC00342及miR-596对胃癌细胞功能的影响;双荧光素酶标记实验验证LIN...     

LncRNA DANCR通过miR-33a-5p/C-MYC调控前列腺癌增殖、迁移和侵袭的作用机制

目的 观察长链非编码RNA DANCR(lncRNA DANCR)通过miR-33a-5p调控前列腺癌PC3细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制.方法 RT-PCR法检测36例前列腺癌组织及相应的癌旁组织临床样本中lncRNA DANCR的表达水平.通过使用siRNA敲低PC3细胞中lncRNA DANCR的表达水平,MT...