慢性乙型肝炎的免疫治疗研究进展

临床上应用的抗乙型肝炎病毒(HBV)药物主要有干扰素和核苷(酸)类似物两类,在大多数慢性HBV感染者即使经过长期的抗病毒治疗仍不能彻底清除病毒。感染的控制和病毒的清除有赖于机体的免疫系统。感染慢性化与机体特异性免疫功能,尤其是细胞免疫功能低下密切相关。通过增强抗HBV感染的免疫治疗是被人们寄予厚望的一种治疗策略。目前研究的热点主要包括免疫激动剂、特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)负调节分子阻断剂、特异性CTL调节分子激动剂或佐剂、治疗性疫苗、特异性T细胞受体(TCR)转基因技术、携带嵌合抗原受体的T细胞和多糖类物质等,本文对近年来这方面的研究进展进行了综述。     

CD8+CTL在乙型肝炎发病作用中的研究现状及进展

乙型肝炎的发病机制主要是机体清除乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)而引发的细胞免疫损伤.机体产生的针对HBV的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell,CTL)在病毒清除及肝细胞损伤方面均起关键作用.CD8+CTL是CTL的主要功能亚群,他们通过细胞毒机制和非细胞毒机制清除病毒.在急性自限性HBV感染时,CTL应答呈多克隆性和多特异性,能够及时清除病毒;而在慢性HBV感染时,CTL应答呈单克隆性和寡特异性,导致HBV持续感染.慢性HBV感染可能与CD8+CTL数量不足及功能缺陷有关.     

树突状细胞—一种潜在的特异性免疫治疗有效工具

乙型肝炎病毒形成特异性免疫耐受是病毒持续感染的主要原因。研究乙型肝炎免疫耐受发生机理并寻找打破免疫耐受的有效方法是治疗乙型肝炎急待解决的问题。乙型肝炎病毒感染所形成的免疫耐受与病毒本身的一些致病基因及其编码蛋白有关外,病毒感染后机体免疫应答异常起着重要的作用。现研究表明,机体清除乙型肝炎病毒的重要方式是通过依赖于HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子限制的CD8 细胞毒性T细胞（CTL）介导的细胞免疫应答。而在HBV慢性感染者体内CTL应答往往是低下的。T淋巴细胞活化为杀伤活性的CTL除接受HLA分子第一信号外,抗原递呈细胞（A…     

特异性免疫应答在HBV感染动力学的研究

乙型肝炎病毒（HBV）是引起慢性肝脏炎症疾病的主要原因,而HBV感染的过程是HBV病毒、机体免疫系统以及肝细胞相互作用的过程[1-2],在自限性病毒感染中,虽然自然免疫系统在特异性免疫应答之前已经清除大部分病毒,但仍然能检测到多种特异性的CD4＋Th1及CD8＋T细胞即CTL应答,     

慢性HBV感染的免疫治疗

目前现有的抗病毒药物对慢性HBV感染的疗效不甚满意.HBV感染的控制和清除有赖于机体的免疫系统,其感染慢性化与机体特异性免疫,尤其是细胞免疫功能低下密切相关.旨在通过增强或恢复机体抗HBV免疫功能以控制和清除HBV感染的免疫治疗是被人们寄予厚望的一种治疗策略,备受关注.本文将从树突状细胞、调节性T细胞、CD8~ T细胞、治疗性疫苗等几个方面对近几年慢性HBV感染的免疫学和免疫治疗研究进展进行综述.     

慢性乙型肝炎患者树突状细胞的分离培养

在我国慢性乙型肝炎是引起肝硬变和肝细胞癌最常见的病因。慢性乙型肝炎形成的机制可能是机体免疫功能低下,不能产生有效的针对HBV特异性的CTL反应,不能彻底清除HBV,使HBV病毒得以不断增殖,导致病变进行性发展。因此,治疗慢性乙型肝炎最根本的途径就是清除病毒。有研究表明,细胞免疫应答,包括辅助T细胞(Th)和细胞毒T细胞(CTL)应答,在机体清除乙型肝炎病毒(HBV)的过程中发挥重要作用,树突状细胞(dendritic cells,BC)是一种最具潜能的抗原提呈细胞,并且在增强或调节细胞介导的免疫反应中起     

乙型肝炎的慢性化和慢性乙型肝炎的免疫学治疗

目前,全世界乙型肝炎病毒(HBV)携带者约3.5亿,其中1/ 4的人发展为进展性肝病,其严重并发症包括肝硬化和肝细胞癌。据估计,全球每年死于乙型肝炎及其并发症的人数多达1～2百万。而近年免疫学的发展为慢性乙型肝炎的治疗带来了希望。一、HBV感染后机体的特异性免疫应答HBV感染人体后,诱发机体产生特异性的免疫应答。其中,体液免疫所产生的抗 HBs可以直接中和血中的病毒颗粒。当HBV进入肝细胞后,细胞免疫,尤其是CD8 细胞毒T淋巴细胞(CTL)发挥了更为重要的作用。(一)特异性的CD8 CTL激活　通过T细胞受体(TCR)识别由主要组织相容性…     

非溶细胞性乙型肝炎病毒清除过程中细胞因子的作用

乙型肝炎病毒（HBV）入侵人体后通过诱导宿主免疫反应破坏肝细胞。各种临床类型的肝炎和机体所处的免疫状态有关。近年研究表明,机体感染HBV后,清除病毒的机制主要是溶细胞机制,主要通过CD8＋细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的细胞毒效应清除病毒;非溶细胞性机制,主要由T细胞、自然杀伤（NK）细胞、巨噬细胞、树突状细胞等分泌各种细胞因子介导。HBV感染时,从胞质中清除HBV复制中间体及从细胞核中清除共价闭合环状DNA（cccDNA）主要通过非溶细胞性抗病毒机制,其本质是通过多种细胞因子介导清除细胞中的HBV。     

慢性乙型肝炎病毒携带儿童外周血T细胞亚群变化及其与HBV DNA的关系

乙型肝炎病毒（HBV）感染的发病主要取决于机体的免疫状况。90％HBV感染患儿可成为慢性带病毒状态或慢性乙型肝炎（CHB）患儿,机体免疫功能状况与病毒的长期携带有重要父系．各种免疫细胞特别是细胞亚群之间的调节紊乱,不论原因来自宿主还是源于病毒,都是体内不能清除病毒及任肝内持续复制的主要原因。     

强效联合抗病毒治疗对HIV特异性细胞毒性T淋巴细胞的影响

艾滋病 (AIDS)是由人免疫缺陷病毒 (HIV)引起的一种严重威胁人类生命的传染病 ,其临床特征是细胞免疫功能低下 ,易患各种机会感染和罕见肿瘤 ,病死率极高。目前 ,强效联合抗逆转录病毒治疗 (HAART)可使病毒载量降到可检测阈值以下 ,并可使CD+ 4细胞计数增加 ,使机体免疫功能获得重建。迄今为止 ,HAART仍是治疗AIDS应用最广、疗效最好的治疗方案 ;而细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)是一类杀伤表达特异性抗原靶细胞的T细胞亚群 ,是人体特异性抗病毒感染的主要效应细胞 ,因而HAART治疗方案对CTL的影响是目前人们研究的热点。1　CTL抗…     

Lamivudine treatment can overcome cytotoxic T-cell hyporesponsiveness in chronic hepatitis B: new perspectives for immune therapy

The hepatitis B virus (HBV) cytotoxic T lymphocyte (CTL) response in patients with chronic HBV infection is generally weak or totally undetectable. This inability to mount protective CTL responses is believed to be a crucial determinant of viral persistence, and its correction represents an important objective of immune therapies for chronic hepatitis B. However, amplification of CTL responses in vivo may be ineffective if HBV-specific CD8 cells are either absent or nonresponsive to exogenous stimulation. In this study, we asked whether antiviral treatments able to inhibit viral replication and to reduce viral and antigen load can successfully reconstitute CTL responses creating the appropriate conditions for their therapeutic stimulation. For this purpose, the HBV-specific CTL response before and during lamivudine therapy was studied longitudinally in 6 HLA-A2-positive patients with HBeAg+ chronic hepatitis B. Both HBV-specific cytotoxic T cell activity measured by chromium release assay on peptide stimulation in vitro and CD8+ T cell frequency measured ex vivo by HLA-A2/peptide tetramer staining were significantly augmented by lamivudine therapy. This enhancement followed the reconstitution of CD4 reactivity and the decline of viral load induced by therapy. Our study shows that lamivudine treatment in chronic hepatitis B can restore CTL reactivity, making CTL susceptible to exogenous stimulation. This effect may enhance the probability that T cell-based immune therapies delivered after lamivudine treatment can successfully reconstitute a protective CTL response able to cure chronic HBV infection.     

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T细胞受体β链V区谱型差异研究

目的 探讨外周血T细胞受体（TCR）β链V区（BV）CDR3区谱型差异在慢性HBV感染者炎症发生中的作用。方法研究对象为9例慢性HBV感染无症状携带（AsC）者（AsC组）和12例活动期慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者（CHB组）,分别采集其外周血,肝素钠抗凝,分离单个核细胞,提取RNA并应用RT-PCR扩增TCR BV的CDR3区基因24个家族,采用免疫指纹技术进行TCR BV各家族基因扫描和谱型分析。结果 两组外周血淋巴细胞TCR BV谱型均发生不同程度单克隆性、寡克隆性及偏峰性克隆增生,CHB组发生谱型偏移的TCR BV家族个数及CDR3谱型发生单克隆性和寡克隆性偏移家 族总数均显著多于AsC组（P〈0.05）。结论 CHB患者外周血T细胞克隆性增生程度高于AsC患者,此可能与慢性HBV感染者炎症的发生机制相关。     

急性和慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的动态变化

目的：观察急性和慢性乙型肝炎患者急性期和恢复期外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化。方法在40例急性乙型肝炎和40例慢性乙型肝炎患者,分别在急性期和恢复期检测CD3＋CD4＋T细胞、CD3＋CD8＋T细胞和NK（CD3-CD16＋CD56＋）细胞占淋巴细胞的比率（%）。结果在急性乙型肝炎急性期NK细胞计数为（15.7±7.5）%,而在恢复期则上升至（21.9±8.2）%,（P＜0.05）;急性乙型肝炎患者在急性期CD3＋CD4＋T细胞为（35.5±6.8）%,到恢复期则显著下降（33.6±7.0）%,（P＜0.05）;急性乙型肝炎在急性期CD3＋CD8＋T细胞为（35.6±7.6）%,而在恢复期则显著下降（30.0±7.5）%,（P＜0.05）,后者仍比慢性乙型肝炎患者在病情恢复期高（19.1±7.1）%,（P＜0.05）。结论在急性乙型肝炎病程中,NK细胞呈上升趋势,CD3＋CD8＋T细胞呈下降趋势,而在慢性乙型肝炎患者NK细胞及T淋巴细胞数量下降,致病情迁延不愈。     

慢性乙型肝炎患者PB MC中H BV特异性IL-21表达及其对CD8^＋T淋巴细胞功能的影响

目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）中 HBV特异性IL-21的表达及其对CD8＋T淋巴细胞功能的调节作用。方法以 HBVc18-27（10μg/mL）多肽刺激46例不同临床类型慢性乙型肝炎患者PBMC。ELISA检测上清液IL-21水平。在 HBVc18-27（10μg/mL）多肽和IL-21（50 U/mL）或IL-2（100 ng/mL）培养条件下,应用 MHC-肽五聚体结合流式细胞术检测PBMC中 HBV特异性CTL细胞频数变化;免疫磁珠分离纯化免疫耐受期和免疫激活期慢性乙型肝炎患者PBMC中CD8＋T淋巴细胞,以 HBcAg（10μg/mL）预刺激CD8-PBMC 5 h后,采用Transwell 小室共培养技术,在阻断IL-21通路条件下,应用实时PCR检测CD8^＋T淋巴细胞IFN-γmRNA的表达。结果 HBV特异性IL-21在免疫控制期和免疫激活期慢性乙型肝炎患者P B MC中表达水平显著高于免疫耐受期患者,而在免疫控制期和免疫激活期两组之间无显著差异。与 PBS 对照组相比,IL-21组 HBV 特异性 CTL 细胞频数明显增高,差异有统计学意义（P＜0．01）,而与IL-2组相比差异无统计学意义。以IL-21抗体阻断IL-21通路后,CD8^＋T 淋巴细胞IFN-γmRNA 表达水平显著下降,差异有统计学意义。结论免疫控制期和免疫激活期慢性乙型肝炎患者PBMC 均可生成一定水平的 HBV 特异性IL-21,并能增强外周CD8＋T淋巴细胞的增殖和IFN-γ表达水平。     

丙氨酸氨基转移酶正常的慢性乙型肝炎病毒感染者的处理建议

丙氨酸氨基转移酶（ALT）是确定慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者是否需要治疗的重要指标。但最近的数据显示一些ALT水平正常的慢性HBV感染者中大多存在不同程度的肝脏组织学改变，甚至已发展至肝硬化和肝癌。本文结合HBV感染的自然史、国内外研究的最新进展及目前的慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗现状就ALT正常的慢性HBV感染者提出合理的处理建议。     

Toll样受体2介导的Th17细胞活化在HBV感染中的作用

目的探讨乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中Toll样受体2(TLR2)与Th17细胞的相关性,为阐述HBV感染诱导炎症应答机制提供理论和实验依据。方法选取2012年7月-2013年7月唐都医院感染科门诊和住院的34例乙型肝炎初治患者,其中24例慢性乙型肝炎和10例急性乙型肝炎;另外选取健康对照者10例,分离PBMC,利用HBV C基因型Envelope区肽段(特异性)或佛波酯联合伊屋诺霉素(非特异性)刺激,流式细胞术检测TLR2表达及Th17细胞百分比。进一步用TLR2的激动剂刺激PBMC,检测Th17细胞变化情况。组间比较采用Kruskal-Wallis H检验。结果在非特异性刺激条件下,Th17细胞在慢性乙型肝炎患者体内的百分比(4.08±1.78)%显著高于急性乙型肝炎患者(1.85±1.28)%及健康对照者(2.09±0.53)%(P=0.000 9、0.000 4),而TLR2+及IL-17A+TLR2+的表达在急、慢性乙型肝炎患者与健康人外周血中差异均无统计学意义(P均0.05)。在特异性刺激条件下Th17及TLR2的表达在慢性乙型肝炎患者体内的表达显著高于急性乙型肝炎组[(5.45±1.61)%vs(3.20±1.13)%;(5.19±3.18)%vs(1.88±1.30)%],差异具有统计学意义(P=0.000 6、0.000 6)。加入TLR2激动剂后急、慢性乙型肝炎患者体内Th17细胞的比例均显著升高,但在急性乙型肝炎患者中,刺激前后差异无统计学意义(P0.05)。结论 TLR2可以直接影响Th17细胞的应答,从而促进乙型肝炎中炎症应答反应。     

替诺福韦酯挽救治疗对核苷（酸）类药物耐药的慢性乙型肝炎研究进展

核苷（酸）类似物已广泛应用于慢性乙型肝炎的治疗,其中替诺福韦酯（TDF）具有安全性高和耐药率低的特点,对慢性乙型肝炎（CHB）初治、经治患者,甚至是肝硬化肝功失代偿期患者均具有较强的抗病毒作用,成为经治耐药患者补救治疗的最佳选择。本文综述了TDF在拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎无效或其他核苷（酸）类药物耐药患者中的抗病毒疗效。     

CD127在慢性重型乙型肝炎患者外周血T细胞中的表达及意义

目的:研究慢性重型乙型肝炎患者外周血T细胞表面CD127表达水平的变化及与慢性重型乙型肝炎发病的关系。方法:流式细胞术检测30例慢性重型乙型肝炎、20例慢性乙型肝炎(CHB)患者和20例健康志愿者外周血T细胞中CD127的表达,用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-7(白细胞介素-7)的表达。结果:慢性重型乙型肝炎组和CHB组CD8+T比例均较健康对照组高(P均<0.01),慢性重型乙型肝炎组CD4+T比例较健康对照组高(P<0.01)。慢性重型乙型肝炎与CHB组CD127+细胞的比例均较健康对照组低(P均<0.05)。慢性重型乙型肝炎组CD4+CD127+双阳性细胞的比例低于CHB组,CHB组又低于健康对照组(P均<0.01);慢性重型乙型肝炎组CD8+CD127+双阳性细胞比例较CHB组和健康对照组低(P均<0.01)。CD8+CD127+细胞的表达与HBV DNA载量呈负相关。慢性重型乙型肝炎组和CHB组血清IL-7含量均较健康对照组高(P均<0.01)。结论:慢性重型乙型肝炎患者外周血中CD4+CD127+、CD8+CD127+细胞表达降低;以CD8+CD127+降低更明显,并与HBV DNA载量呈负相关;血清中IL-7表达增高,可能与慢性重型乙型肝炎的发病有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血及肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞的表达及意义

目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL在慢性乙型肝炎患者外周血和肝组织中的表达和临床意义.方法 流式细胞分析技术和流式细胞术细胞因子测定法(CFC)检测157例HBV感染者(包括急性乙型肝炎20例、慢性乙型肝炎115例、乙型肝炎肝硬化22例)和20例健康对照组外周血和部分肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达.组间分析采用t检验.结果急性乙型肝炎,慢性乙型肝炎轻、中、重度患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞分别为(2.87±0.94)%、(3.53±1.56)%、(4.59±2.98)%和(3.65±1.73)%,明显高于对照组的(2.36±0.60)%(t值分别为2.04、5.97、3.30和3.17,P<0.01);慢性乙型肝炎轻、中、重度和乙型肝炎肝硬化患者外周血HBV特异性CTL为(0.189土0.152)%、(0.103±0.110)%、(0.118±0.120)%和(0.098±0.101)%,明显低于急性乙型肝炎患者的(0.815±0.360)%(t值分别为10.09、11.87、9.17和8.96,P<0.01).肝组织中CD4+CD25+调节性T细胞和HBV特异性CTL的表达高于外周血.结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过抑制CD8+T淋巴细胞在机体抗病毒过程中发挥重要作用.     

核苷和核苷酸类药物治疗慢性乙型肝炎的长期性

核苷和核苷酸类药物(NAs)已成功用于慢性乙型肝炎(CHB)治疗。目前一致认为,HBV复制是肝损伤和疾病进展的关键因素,因此CHB治疗的主要目的是最大限度地持续抑制HBV复制。现已证明,应用NAs长期治疗CHB可明显改善肝脏组织学、逆转肝纤维化或肝硬化,以及减少肝细胞癌的发生。本文对CHB长期治疗的必要性、临床获益及管理进行了综述。