用聚合酶链反应法检测172例孕妇尿中巨细胞病毒－DNA

本文对１７２例孕妇的尿用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）进行巨细胞病毒－ＤＮＡ检测（ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓＨＣＭＶ－ＤＮＡ），结果显示非正常孕妇（以前有自然流产、死胎、畸胎、不育症等）１２１人尿中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者４３例，阳性率为３５．５％，而５１例正常孕妇中阳性者仅２例，阳性率为３．９％，表明活动性人巨细胞病毒感染是非正常孕妇的重要原因之一。２０例孕妇尿中ＮＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者用干扰素、转移因子等治疗后，１４例转阴。用ＰＣＲ法检测活动性人巨细胞病毒感染是一个比较准确、敏感、快速的方法，并是保证优生优育的重要手段之一。     

孕妇人巨细胞病毒感染危险因素的研究

对２６３例孕妇于分有用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测宫颈分泌物中人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ），以了解孕妇感染ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的危险因素。受检孕妇的ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率为２２．８１％（６０／２６３），经非条件Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型单因素分析发现，孕妇的文化程度低、既往妊娠史、妊娠次数、流产史、死产史、妇科疾病史和第一次性接触年龄较低均能增加孕寺ＨＣＭＶ感染的风险。经多因素分析，筛选出     

~（31）用PCR技术产前诊断人巨细胞病毒感染

~（３１）用ＰＣＲ技术产前诊断人巨细胞病毒感染［孙永玉，陶幼慈，蒋晓薇．中华医学遗传学杂志，１９９５，１２（５）：２７９］人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）可危害孕妇及胎儿健康。作者应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测１２～２０周孕妇羊水中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ，研究?..     

烧伤患者人巨细胞病毒感染状况的研究

目的：了解烧伤患者人巨细胞病毒感染状况。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法分别对１４５例烧伤患者尿中人巨细胞病毒ＤＮＡ（ＨＣＭＶＤＮＡ）和血清中ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体进行检测。结果：烧伤患者ＨＣＭＶＤＮＡ阳性率为６１．３８％,正常对照组为２９．４９％,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）;烧伤总面积（ＴＢＳＡ）≥３０％患者阳性率为７３．１３％,显著高于ＴＢＳＡ＜３０％患者５１．２８％（Ｐ＜０．０５）;小儿烧伤组阳性率为７８．７９％显著高于成人烧伤组５６．２５％（Ｐ＜０．０５）。同时,烧伤患者血清中ＨＣＭＶ－ＩｇＭ抗体阳性率为１０．３４％,在ＰＣＲ检测阳性８９例患者中有１５例ＨＣＭＶ－ＩｇＭ为阳性。结论：烧伤后人巨细胞病毒感染率显著升高,尤其以大面积烧伤患者更甚,在临床上应引起广泛重视。     

器官移植术后受者人巨细胞病毒的PCR检测

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对３０例器官移植受者血，尿标本进行人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ检测。结果显示，１６例ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率５３．３％，提示ＰＣＲ是一种敏感特异，简便快速，能早期诊断ＨＣＭＶ感染的方法，适用于监视器官移植病人术后ＨＣＭＶ感染。     

器官移植术后受者人巨细胞病毒的PCR检测

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对３０例器官移植受者血、尿标本进行人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ检测。结果显示，１６例ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率５３．３％。提示ＰＣＲ是一种敏感特异、简便快速、能早期诊断ＨＣＭＶ感染的方法，适用于监视器官移植病人术后ＨＣＭＶ感染。     

用PCR检测消化道巨细胞病毒感染

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测５１例消化道疾病患者活检或手术标本的人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）－ＤＮＡ，阳性率９．８０％；采用间接免疫荧光法随机检测其中４１例患者血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ。结果显示：消化道组织巨细胞病毒感染数低于血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性数（Ｐ＜０．０１）；血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ检测中，恶性肿瘤和结肠炎患者ＨＣＭＶ感染均较对照组为高（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。提示ＰＣＲ是消化道巨细胞病毒感染的特异而敏感的早期诊断方法     

用PCR检测消化道巨细胞病毒感染

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测５１例消化道疾病患者活检或手术标本的人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）－ＤＮＡ，阳性率９．８０％；采用间接免疫荧光法随机检测其中４１例患者血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ。结果显示：消化道组织巨细胞病毒感染数低于血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性数（Ｐ〈０．０１）；血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ检测中，恶性肿瘤和结肠炎患者ＨＣＭＶ感染均较对照组为高（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）。提示ＰＣＲ是消化道巨细胞病毒     

巨细胞病毒宫内感染的初步研究

目的：寻找巨细胞病毒宫内感染产前诊断的途径。方法：应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对２４例妊娠患有巨细胞病毒（ＣＭＶ）活动性感染的产妇，分娩的新生儿脐血抗ＣＭＶ－ＩｇＭ型抗体和羊水及尿液ＣＭＶ－ＤＮＡ进行检测。结果：２４例ＣＭＶ活动性感染孕妇中有１４例发生宫内感染，宫内感染率５８．３％，与对照组比较有高度显著性差异。宫内感染儿羊水ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率７８．６％，显著高于脐血ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率．孕妇尿液排毒状态与宫内感染的发生无明显关系。结论：宜将ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性孕妇视为有宫内感染潜在危险的对象；羊水ＰＣＲ－ＣＭＶ检测可望成为产前诊断ＣＭＶ宫内感染的有效手段。     

套式聚合酶链反应及限制酶分析对孕早期孕妇巨细胞病毒感染的研究

在人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）－ＡＤ１６９株直接早期基因的ＥｃｏＲＩＪ片段内，自行设计二对引物，建立套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）加限制酶分析检测ＨＣＭＶＤＮＡ，经实验证明有高度的特异性与敏感性，对其它疱疹类病毒及正常人基因组ＤＮＡ无交叉反应，一次性ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株基因组的最小检出量为１００ｆｇ，而套式ＰＣＲ可达１０ｆｇ，经ＰｓｔＩ酶切后，得到的片段与设计相符，对５８名孕早期孕妇外周静脉血     

人巨细胞病毒感染与染色体着丝粒点变异关系研究

目的：研究孕妇ＨＣＭＶ感染对胚胎染色体着线粒点（Ｃｄ）变异的影响,探讨ＨＣＭＶ感染引起出生缺陷的原因和机制。方法：用我入良的Ｃｄ－ＮＯＲ同步银染技术对１５例ＨＣＭＶ感染和２５例非感染孕妇的胚胎或绒毛组织ＣＤ消失、ＣＤ变进行比较分析。结果：前者ＣＤ消失、ＣＤ变异频率较后者有显著和极显著的增高。结论：染色体ＣＤ的变化可能是ＨＣＭＶ感染引起胚胎发育的重要原因之一。对ＨＣＭＶ感染孕妇的胚胎或绒毛杂色体ＣＤ     

FQ-PCR与IFA检测HCMV感染效果比较

目的比较检测孕妇HCMV-DNA与HCMV-pp65对诊断HCMV感染的效果。方法采用荧光定量PCR（FQ-PCR）检测孕妇血浆HCMV-DNA及采用间接免疫荧光染色法（IFA）检测其外周血白细胞HCMV-pp65抗原,比较两者的诊断效果。结果 100例孕妇HCMV-DNA的阳性为9例,阳性率为9%,HCMV-pp65阳性为8例,阳性率为8%,两者均阳性为6例。两检测方法一致率为95%,两者之间的阳性检出率无显著性差异（χ^2=0.064,P〉0.05）。结论应用HCMV-DNA及HCMV-pp65抗原检测的两种联合监测,能更有效地提高孕妇早期HCMV活动性感染的诊断水平,对预防及降低胎儿宫内感染有着较好的临床价值。     

2403份不同类型标本中人巨细胞病毒DNA的检出情况及临床分析

目的 探讨孕妇和婴儿不同类型标本中人巨细胞病毒（HCMV）DNA的检出情况,并进行临床分析。方法 2021年5月至2021年10月收集到在昆明市妇幼保健院检验科采用荧光定量PCR法进行HCMV-DNA检测的临床标本共2 403份,对不同标本来源人群、不同类型标本的HCMV-DNA检出率进行回顾性分析。结果 2 403份不同类型的标本中,乳汁的HCMV-DNA检出率为31.70%,尿液为0.85%,血清为0%。2个年龄段（0～28 d和28 d至6个月）母亲乳汁、尿液标本的检出率随婴儿年龄增加而增高,且差异均有统计学意义（P <0.001）。同时进行了尿液及其母亲乳汁HCMV-DNA检测的221例婴儿中,检出率：乳汁22.62%,尿液0.45%,乳汁的检出率高于尿液。当母亲乳汁标本HCMV-DNA阴性,患儿自身尿液标本为阳性的占0.58%,阴性占99.42%;母亲乳汁标本HCMV-DNA阳性时,患儿自身尿液标本全为阴性。结论 孕妇及其婴儿的各类标本中,乳汁标本的HCMV-DNA检出率明显高于其他类型标本,对于疑似HCMV感染的孕妇或婴儿,建议首先采集母亲乳汁标本进行检测。然而母亲乳...     

Expression and its clinical significance of HLA-G in HCMV-infected placenta] villi at early pregnant stage

Objective:To study the expression and its clinical significance of HLA-G in HCMV intrauterine infected placental villi at early pregnant stage. Methods:PCR (polymerase chain reaction) was used to screen the peripheral blood for HCMV-DNA in 462 women who had willingly undergone induced abortion. Then immunohistochemistry was also used to detect expressions of mouse anti-HCMV early antigen (HCMV-EA) and mouse anti-HLA-G in HCMV-DNA positive cases' placental villi. The difference of HLA-G expressions between the intrauterine infection group (HCMV-EA positives), the intrauterine infection-free group(HCMV-EA negatives) and the normal control group (SO cases of healthy early placental villi) was compared. Results: Of the 78 cases, which were detected HCMV-DNA positive, 11 (14. 10%) were HCMV-EA positive. Compared with the other two groups, HLA-G expressions in the intrauterine infection group were both obviously decreased (both P<0. 001). HLA-G expression positions in all three groups were mainly located in the cytotrophoblast. Conclusion:Intrauterine HCMV infection at early pregnant stage is closely related to HLA-G expression at the maternal-fetal interface. The virogenetic products may affect the expression of HLA-G at the maternal-fetal interface and that of its immunological function, thus leading to different clinical outcomes.     

人巨细胞病毒DNA检测在小儿人巨细胞病毒感染诊断中的应用

目的 探讨小儿血液、尿液及其母亲母乳的人巨细胞病毒DNA检测结果在人巨细胞病毒感染的诊断价值。 方法 选取2017年—2018年期间在浙江大学丽水医院就诊的疑似人巨细胞病毒感染的患儿328例为研究对象。收集患儿血液、尿液和对应母乳标本,进行实时荧光定量PCR,检测人巨细胞病毒DNA载量;再将患儿血清用化学发光法检测HCMV-IgM,比较不同标本不同检测方法的阳性率。针对阳性患儿,对不同临床症状分布构成进行分析。 结果 328例患儿检测总阳性率为71.04%,男性患儿和女性患儿阳性率分别为71.02%和69.74%,差异无统计学意义(χ2=0.065,P=0.799)。血液、尿液和乳汁的人巨细胞病毒阳性率分别为49.09%、70.43%和58.23%,尿液阳性率最高,差异有统计学意义(χ2=31.147,P<0.001)。新生儿组的乳汁阳性率最高,为72.41%,28 d到1岁之间和1岁以上患儿尿液阳性率最高,各年龄组之间阳性率差异有统计学意义(P<0.05);血人巨细胞病毒DNA和血清HCMV-IgM阳性率检出率分别为49.09%(161/328)和16.16%(53/328),2种方法联合检测的阳性检出率为49.69%,对比单一血DNA检测方法,两者差异无统计学意义(P>0.05)。临床症状小于1岁患儿主要以黄疸,腹泻为主,大于1岁的患儿主要以肝损害和肺炎为主。 结论 在小儿血液、尿液及其母亲母乳HCMV-DNA的检测中,尿液HCMV-DNA对诊断患儿人巨细胞病毒有更好的临床应用价值。且尿标本留取方便、无创,易为家长和小儿接受,所以采用FQ-PCR方法对小儿尿标本进行检测能起到快速、简洁、灵敏的作用,对提高HCMV感染的诊断率有实际的临床意义,对于小月龄患儿临床应推广尿液HCMV-DNA检测。      

Expression and its clinical significance of HLA-G in HCMV-infected placental villi at early pregnant stage

Objective：To study the expression and its clinical significance of HLA-G in HCMV intrauterine infected placental villi at early pregnant stage. Methods：PCR （polymerase chain reaction） was used to screen the peripheral blood for HCMV-DNA in 462 women who had willingly undergone induced abortion. Then immunohistochemistry was also used to detect expressions of mouse anti-HCMV early antigen （HCMV-EA） and mouse anti-HLA-G in HCMV-DNA positive cases＇ placental villi. The difference of HLA-G expressions between the intrauterine infection group（HCMV-EA positives）, the intrauterine infection-free group（HCMV-EA negatives） and the normal control group （50 cases of healthy early placental villi） was compared. Results： Of the 78 cases, which were detected HCMV-DNA positive, 11 （14.10%） were HCMV-EA positive. Compared with the other two groups, HLA-G expressions in the intrauterine infection group were both obviously decreased（both P〈0. 001）. HLA-G expression positions in all three groups were mainly located in the cytotrophoblast. Conclusion：Intrauterine HCMV infection at early pregnant stage is closely related to HLA-G expression at the maternal-fetal interface. The virogenetic products may affect the expression of HLA-G at the maternal-fetal interface and that of its immunological function, thus leading to different clinical outcomes.     

实时荧光PCR检测黄疸婴儿尿中人巨细胞病毒感染研究

目的探讨实时荧光PCR技术检测尿中人巨细胞病毒(HCMV)在黄疸婴儿HCMV活动性感染的检测价值。方法分别应用实时荧光PCR法和ELISA法检测2585例黄疸婴儿尿HCMV-DNA和血清HCMV-IgM,比较病毒DNA与血清抗体的平行性和敏感性。结果 2585例黄疸婴儿尿中实时荧光PCR检测HCMV-DNA阳性1428例;ELISA检测HCMV-IgM阳性1084例。两种方法阳性符合率为73.88%,实时荧光PCR法和ELISA法阳性检出率分别为55.24%和41.93%,差异有统计学意义(P0.01);实时荧光PCR法阳性标本的平均拷贝数为7.86×105。结论 HCMV是引起婴儿黄疸的主要原因之一,实时荧光PCR法检测敏感性要高于ELISA法检测,可以有效地提示体内活动性HCMV感染,具有良好的应用价值。     

实时荧光定量PCR方法对3种不同标本中巨细胞病毒检出率的比较

目的比较患者血清、晨尿及外周血单个核细胞中real-time PCR检测(实时PCR检测)巨细胞病毒(CMV)的检出率。方法对血清HCMV-IgM检测(胶体金标免疫层析法)阳性疑似病例,应用real-time PCR检测其血清,晨尿和外周血单个核细胞中的HCMV-DNA,比较3种不同标本检测的阳性率。结果血清标本CMV-DNA阳性检出率为4.76%,晨尿沉渣标本阳性检出率为18.18%,外周血单个核细胞分离液标本阳性检出率20.93%,3者之间均有统计学差异。结论 Real-timePCR法检测HCMV-DNA以外周血中单个核细胞中检出率最高,其次为晨尿沉渣标本,血清标本检出率最低。     

人巨细胞病毒活动性感染与习惯性流产的关系探讨

目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）活动性感染与习惯性流产的关系。方法：选择2008年5月。2010年5月我院妇产科收治的反复性流产孕妇40例作为研究组,选择同期体检正常孕妇50例作为对照组,采集两组患者外周血,离心分离出有核细胞及血浆,采用实时荧光定量PCR和免疫荧光法检测HCMV-DNA和HCMVpp65抗原,分析HCMVpp65抗原阳性与流产的关系及两种检测方法的一致性。结果：研究组HCMVpp65抗原阳性率明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义（X2=7．69,P〈0．05）;研究组中流产次数多的孕妇,HCMVpp65抗原阳性率明显高于流产次数相对较少的孕妇,差异有统计学意义（x2=8．58,P〈0．05）。研究组中实时荧光定量PCR检测HCMV—DNA和免疫荧光法检测HCMVpp65抗原的一致性较好,达92．5％。结论：孕妇习惯性流产与其体内巨细胞病毒活动性感染有重要联系．习惯性流产孕妇HCMVpp65抗原检测与HCMV—DNA有良好的一致性,可作为习惯性流产的早期判断指标。