28例HCV RNA阳性血清聚合酶链反应产物的酶切分析

为了探讨广州地区ＨＣＶ感染的基因型，作者对广州地区不同人群中１０５例抗－ＨＣＶ阳性血清用逆转录聚合酶链反应（ＴＲ－ＰＣＲ）进行了ＨＣＶ ＲＮＡ的检测，对其中８２例ＨＣＶ ＲＮＡ阳性患者血清做了ＰＣＲ产物的限制性内切片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析，结果显示：ＨＣＶⅡ型感染７８例（９２．１％），ＨＣＶⅢ型１例，ＨＣＶⅡ／Ⅲ型混合感染３例，４例ＨＣＶⅢ型感染均是肝病患者，初步表明广州地区ＨＣＶ感染大多数     

82例 HCV RNA 阳性血清聚合酶链反应产物的酶切分析

为了探讨广州地区ＨＣＶ感染的基因型，作者对广州地区不同人群中１０５例抗－ＨＣＶ阳性血清用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）进行了ＨＣＶＲＮＡ的检测，对其中８２例ＨＣＶＲＮＡ阳性患者血清做了ＰＣＲ产物的限制性内切片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析，结果显示：ＨＣＶⅡ型感染７８例（９２．１％），ＨＣＶⅢ型１例，ＨＣＶⅡ／Ⅲ型混合感染３例，４例ＨＣＶⅢ型感染均是肝病患者，初步表明广州地区ＨＣＶ感染大多数属Ⅱ型。     

HCV RNA链扩增反应（PCR）检测及其基因分型方法的建立

我们用选自ＨＣＶ５’ＮＣＲ和Ｃ区引物建立了检测血清中ＨＣＶＲＮＡ及其基因型的ＲＴ／ＰＣＲ方法，可以敏感而特异地检出血清中ＨＣＶＲＮＡ及其４种基因型。５０例抗ＨＣＶ阳性献血员ＨＣＶＲＮＡ检出率为８４％（４２／５０），４２例ＨＣＶＲＮＡ阳性者中ＨＣＶⅡ型占５９．５％（２５／４２），Ｉ型和混合型（包括Ⅰ／Ⅱ、Ⅱ／Ⅲ、Ⅰ／Ⅲ和Ⅰ／Ⅱ／Ⅲ各２例）分别占１１．９％和１９％，另有４例Ｃ区分型结果阴性，为未定型，占９．５％，没有发现Ⅳ型。上述结果说明我国献血员中存在无症状ＨＣＶ携带者，ＨＣＶ基因型则以Ⅱ型为主，Ⅰ型次之，Ⅲ型较少。     

不同临床型HCV感染的基因分型与血清学分型研究

采用酶免疫（ＥＩＡ）和反转录聚合酶链反应９ＲＴ－ＰＣＲ）技术对不同临床型ＨＣＶ感染的血清标本进行ＨＣＶ分型，结果显示，各临床型ＨＣＶ感染的的型别构成无明显差异。主要为基因Ⅱ型（９３．７％）、少量基因Ⅲ型（２．７％）和Ⅱ＋Ⅲ混合型（３．６％）未见基因Ⅰ、Ⅳ、菲分型一血清学分型总符合率为９７．９６％，血清学分型率与ＨＣＶ抗－ＣＳ／Ｃ 正相关；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者９３．７５％可基因分型，但仅有５２．０８     

丙型肝炎病毒基因分型研究

采用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）法检测了泰安地区４６例输血后丙型肝炎（ＰＴＨ－Ｃ）患者的血清ＨＣＶ－ＲＮＡ〉对其中３４例生进物ＰＣＲ产物用限制性长度多生分析泊（ＲＦＬＰ）进行了ＨＣＶ基因分型。结果ＨＣＶ－Ⅱ型检出率为７３．５％，ＨＣＶ－Ⅲ型检出率为１１．８％；ＨＣＶⅡ／ＨＣＶⅢ型混合感染率为１４．７％，未发现Ⅰ、Ⅳ和Ⅴ型感染。     

乙型和丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌

为探讨乙型和丙型肝炎病毒（ＨＢＶ和ＨＣＶ）感染与肝细胞癌（肝癌）发生的关系，采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对沈阳地区１１７例肝癌、１０７例肝硬化和４５例血液透析患者血清进行了ＨＢＶ和ＨＣＶ血清标志及ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检测，并采用限制性片段长度多态性对其中７３例ＨＣＶＲＮＡ阳性血清进行了ＨＣＶ基因分型。结果，肝癌组ＨＢＶ感染率（６０７％）显著高于ＨＣＶ感染率（３３３％，Ｐ＜００１），肝硬化组ＨＢＶ感染率（４３９％）明显高于ＨＣＶ感染率（２９０％，Ｐ＜００５）；血液透析组ＨＢＶ和ＨＣＶ重叠感染率（２６７％）明显高于肝硬化组（１０３％，Ｐ＜００５）；各组均以ＨＣＶⅡ型为主（６５２％～８００％），ＨＣＶⅢ型次之（２００％～３１４％）。结果提示：沈阳地区肝癌的诱发因素仍以ＨＢＶ为主，血液透析患者ＨＢＶ和ＨＣＶ重叠感染的机会更大，ＨＣＶⅡ型感染在本地区ＨＣＶ相关性肝癌和肝硬化的发生中可能起主要作用。     

乙型用丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌

为探讨乙型和丙型肝炎病毒（ＨＧＢＶ和ＨＣＶ）感染与肝细胞癌（肝癌）发生的关系采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对沈阳地区１１７例肝癌、１０７便肝硬化和４５ 析患者血清进行了ＨＢＶ和ＨＣＶ血清标志及ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶ ＲＮＡ检测，并采用性片段长度多态性对其中７３便ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清进行了ＨＣＶ基因分型。结果，肝癌组ＨＢＶ感染率（６０．７％）显著高于ＨＣＶ感染率（３３．５％，Ｐ〈０．０１），     

西安地区丙型肝炎病毒基因分型研究

目的　了解西安地区不同人群ＨＣＶ 基因型分布．方法　先用逆转录－ 套式多聚酶链反应检测抗－ ＨＣＶ 阳性血清的ＲＮＡ, 阳性者再用限制性片段长度多态性分析法进行ＨＣＶ 基因分型．结果　１１３ 份ＨＣＶＲＮＡ 阳性血清的基因型如下：输血后丙肝组,Ⅱ型、Ⅲ型及Ⅱ／ Ⅲ混合型分别为８０ ％ ,１６－７ ％ 和３－３ ％ ．散发性丙肝组,Ⅱ型、Ⅲ型分别为７８－９ ％ 和２１－１ ％ ,未检出Ⅱ／Ⅲ混合型． 肝硬变组, Ⅱ型、Ⅲ型及Ⅱ／ Ⅲ混合型分别为８７－９ ％ ,９－１ ％ 和３ ％ ． 原发性肝癌组,Ⅱ型、Ⅲ型分别为８７－１ ％和１２－９ ％ ,未检出Ⅱ／ Ⅲ混合型． 分型总结果为：ＨＣＶⅡ型、Ⅲ型及Ⅱ／ Ⅲ混合型分别为８４－１ ％ ,１４－２ ％ 和１－７ ％ ．结论　ＨＣＶⅡ型是西安地区优势株． 不同人群中ＨＣＶ 基因型总体分布差异无显著性．     

肝细胞癌患者乙、丙和丁型肝炎病毒感染状况

为探讨乙型、丙型和丁型肝炎病毒（ＨＢＶ，ＨＣＶ和ＨＤＶ）感染对肝细胞癌（肝癌）发生的意义，本文作者采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应法对７２例广东籍肝癌患者ＨＢＶ、ＨＣＶ和ＨＤＶ血清标志以及血浆ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ进行了检测。ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＣＶ阳性率分别为８４．７％和１８．１％，显著高于１２８名健康对照者。ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢＶＤＮＡ总阳性率为９３．１％，抗－ＨＣＶ和／或ＨＣＶＲＮＡ阳性率为２７．８％，ＨＢＶ和ＨＣＶ重叠感染率为２２．２％。其中６１例ＨＢｓＡｇ阳性肝癌的ＨＤＶ血清标志检出率为１４．８％，明显高于６１例ＨＢｓＡｇ阳性的肝炎对照者。结果表明，广州地区肝癌的发生，主要与ＨＢＶ和ＨＣＶ感染密切相关外，且可能与ＨＤＶ感染有关。     

原发性肝癌患者血清和肝组织中庚型肝炎病毒基因的PCR检测

用逆转录－聚合酶链反应法（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了原发性肝癌（ＰＬＣ）患者血清及肝癌和癌旁肝组织中的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ，以ＰＣＲ－双脱氧末端终止法测定了ＰＣＲ产物的核苷酸序列。结果显示，血清和肝组织中ＨＧＶＲＮＡ的检出率分别为１９．４％（１３／６７）和２５．７％（９／３５），且ＨＧＶＲＮＡ在肝癌组织呼吕旁肝组织中同时存在，血清和肝组织中ＨＧＶ ＲＮＡ检测结果的符合率为８５％；５′非编码区（５     

原位聚合酶链技术检测肝细胞癌组织内丙型肝炎病毒核酸及其意义

应用一步反转录。聚合酶链原位扩增法（ＯＲＴ－ＰＣＲＩＳ）检测肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌周组织内丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶＲＮＡ），同时以一步反转录－ＰＣＲ（ＯＲＴ－ＰＣＲ）法检测血清及肝组织匀浆内ＨＣＶＲＮＡ。发现癌和癌周组织经原位扩增后ＨＣＶＲＮＡ检出率为７７．８％（２／２７）及８１．５％（２２／２７），而血清及组织匀浆内仅为２９．６％及３７．Ｏ％，两者与癌及癌周组织相比差异均有显著性（Ｐ＜０．０１）。ＯＲＴ－ＰＣＲＩＳ示在癌组织中ＨＣＶＲＮＡ以核型为主（１２／２１），阳性细胞点样分布，细胞内信号强度多为＋（５７．１％）；而癌周组织以核浆型为主（１４／２２），阳性细胞弥漫分布，信号强度多为＋＋＋（５０．０％）。无论在癌还是在癌周组织均未发现ＨＣＶｃＤＮＡ存在。结果提示ＯＲＴ－ＰＣＲＩＳ优于ＲＴ－ＰＣＲ，ＨＣＶ对本地区ＨＣＣ发生、发展起着极为重要的作用。癌周ＨＣＶ复制较癌组织内活跃，癌和癌周细胞核阳性表明ＨＣＶＲＮＡ在核内整合或复制，这种整合或复制对肝细胞基因组ＤＮＡ产生的影响可能与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）相类似。     

丙型肝炎病毒母婴传播的研究

目的研究丙型肝炎病毒母婴传播的可能性与机率。方法采用前瞻性研究方法，使用ＰＣＲ技术检测ＨＣＶＲＮＡ，用二代ＥＩＡ试剂检测抗－ＨＣＶ。结果１３例输血后丙型肝炎母亲和她们所生的１５例婴儿，婴儿ＨＣＶ感染率为８６．７％，其中临床型１例（７．７％），亚临床型ＨＣ３例（２３．１％），ＨＣＶ隐性感染９例（６９．２％）。抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性率均随年龄增长而降低，至３岁时分别为７．７％和１５．４％。结论感染ＨＣＶ母亲所生婴儿，ＨＣＶ感染率高，但转归较好。观察引产胎儿肝脏和血液发现，孕妇抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性所引产的胎儿血清和／或肝脏中抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ阳性，ＨＣＶ的母婴传播，主要发生于子宫内。     

逆转录－套式－聚合酶链反应检测HCV RNA正链和负链及与肝细胞癌的关系

为了解ＨＣＶ与肝癌的关系，采用ＨＣＶ５－ＮＣＲ正相引物和反相引物逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）检测了２２例肝癌手术患者血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链和负链；用ＨＢＶＣ保守区引物ＰＣＲ法检测了ＨＢＶＤＮＡ。结果发现：５例抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者中，３例血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链扩增试验均阳性；１例三者均阴性；１例血清和癌旁组织阳性。３例正链扩增试验阳性的癌组织和癌旁组织均检出了ＨＣＶＲＮＡ负链，但血清中未检出负链。在２２例ＨＣＣ中１３例血清、８例癌组织和１５例癌旁组织中检出ＨＢＶＤＮＡ。５例有ＨＣＶＲＮＡ和／或抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者血清、和／或癌组织、和／或癌旁组织中均伴随ＨＢＶＤＮＡ和／或ＨＢ－ＶＭ阳性。提示ＨＣＶ可在癌旁肝细胞或肝癌细胞中感染并复制；ＨＢＶ感染与肝癌发生的关系比ＨＣＶ感染更密切。     

血液病患者中庚型肝炎病毒检测及感染情况研究

目的：了解武汉地区血液病患者中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的感染情况,探讨ＨＧＶ的传播途径。方法：采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及逆转 录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法测定各型血液病患者血清中的抗ＨＧＶ和ＨＧＶＲＮＡ。结果：５１例血液病患者中血清抗ＨＧＶ阳性６例,占１１．８％（５／６１）,ＨＧＶＲＮＡ均阴性。６例抗ＧＨＶ阳性患者中急粒２例,占２５％（２／８）,慢粒１例,占５０％（１／２）,再障２例     

原发性肝癌患者血清中庚型肝炎病毒核酸的检测分析

为了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在原发性肝癌患者中的感染状况，本文对１４５例原发性肝癌患者血清进行了分析。应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术扩增庚型肝炎病毒基因，采用蛋白酶Ｋ裂解法提取血清中ＨＧＶ－ＲＮＡ，逆转录为ｃＤＮＡ后进行巢式扩增，获得２３８ｂｐ的特异性片段。用此方法对１４５例原发性肝癌（ＨＣＣ）患者血清标本进行检测，结果发现２１例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性（１４．５％），均为男性患者。     

Fc受体介导HCV跨膜研究系列报告:——丙型肝炎病毒感染孕妇羊水中HCVRNA定量检测及意义

检测丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)感染孕妇羊水中ＨＣＶＲＮＡ ,探讨ＨＣＶ母婴传播途径。应用荧光定量ＰＣＲ和逆转录套式ＰＣＲ(ＲＴ ｎＰＣＲ)技术检测孕妇血清和羊水标本。对ＨＣＶＲＮＡ阳性标本采用酶切分型检测 ,依据限制性片段长度多态 (ＲＦＬＰ)图谱判断ＨＣＶ基因型。结果表明 ,在 34例ＨＣＶ感染孕妇羊水中仅有 2例 ( 5.9% )检测出ＨＣＶＲＮＡ ,病毒滴度分别为 10 5、10 6拷贝 /ｍｌ;对照组 4 0例孕妇血清和羊水标本中均未检测出ＨＣＶＲＮＡ。 34例血清中ＨＣＶＲＮＡ阳性标本ＨＣＶ基因分型以Ⅱ型居多 (占 79.4 % )。羊水中ＨＣＶ…     

丙型肝炎病毒抗体检测的诊断价值

用国产第二代丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）检测试剂盒检测了２９６例临床血清标本以及２８例供血者血清标本。并用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了这些标本的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，以了解抗－ＨＣＶ检测对ＨＣＶ感染的诊断价值。同时探讨其在供血员筛选中的应用价值。结果在临床标本中，抗－ＨＣＶ阳性者有８１．１％ＨＣＶＲＮＡ阳性。抗－ＨＣＶ阴性者有２１．７％ＨＣＶＲＮＡ阳性。但是２８例抗－ＨＣＶ阴性的供血者ＨＣＶＲＮＡ全部阴性。提示：抗－ＨＣＶ阳性对于ＨＣＶ感染的诊断价值很高。临床怀疑为ＨＣＶ感染而进行检测的血清标本即使抗－ＨＣＶ阴性，也不能除外ＨＣＶ感染。用抗－ＨＣＶ筛选供血者可能使供血中ＨＣＶＲＮＡ阳性率大大降低。     

山东地区输血后丙肝患者HGV感染状况及HGV部分核酸序列测定

应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测庚肝病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ,并对阳性扩增的产物采用ＰＣＲ片段直接克隆法测定。结果从８６例输血后丙型肝炎（ＰＴＨ－Ｃ）患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性者３１例（３６．０％）,其中１例ＨＧＶＮＳ５区部分核苷酸序列与美国原始株和另１例日本株核苷酸同源性比较分别为８６．０％和８４．０％。证实山东地区ＰＴＨ－Ｃ２存在着ＨＧＶ感染和ＨＧＶ／ＨＣＶ混合感染,但是否存在不同亚型或ＨＧＶＲＮＡ阳性     

散发性戊型肝炎的病原学和血清学研究

目的 研究散发性戊型肝炎（ＨＥ）患者病毒血症,粪便排病毒及抗体消长规律。方法 采用逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）动态检测血清和粪便ＨＥＶＲＮＡ,采用ＨＥＶＯＲＦ２,ＯＲＦ３合成多肽单独和联合ＥＩＡ法动态检测血清抗－Ｈ。结果 血清ＨＥＶＲＮＡ阳性患者占７１％（４４／６２）平均持续时间为病后２０．６天（全程随访３２例）粪便ＨＥＶＲＮＡ阳性标本中有９６．２％（２５／２６）出现在     

丙型肝炎病毒血清抗体分型研究

为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）血清抗体分型的可能性及其意义，采用酶联免疫技术（ＥＩＡ）对１４０例丙型肝炎患者血清抗－ＨＣＶ型特异性抗体进行检测，并比较其与基因分型的检测结果。结果显示６３．６％（８９）的患者检测出ＨＣＶ血清型特异性抗体，其中血清１型占８７．６％（７８／８９），血清型占６．７％（６／８９），血清１＋２型占５．６％（５／８９）。对其中７１例血清ＨＣＶ ＲＮＡ阳性者的血清型结果与基因型结果