低氧诱导因子-1α和轴突导向因子4D在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的比较低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和轴突导向因子4D（Sema4D）在结直肠癌组织和正常组织中的表达,探讨两者之间的相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测86例结直肠癌组织和52例正常组织中HIF-1α和Sema4D的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织中HIF-1α和Sema4D蛋白阳性表达率显著高于正常组织[分别为58．1％（50／86）比7．7％（4／52）,X2=34．624,P〈0．01;60．5％（52／86）比11．5％（6／52）,x2=31．839,P〈0．01]。HIF-1α和Sema4D蛋白与结直肠癌组织分化程度（P／0．003,P=0．010）、TNM分期（P=0．003,P=0．017）和淋巴结转移（P=0．003,P=0．020）明显有关;且两者表达呈正相关（r=0．567,P〈0．01）。全组患者5年生存率为37％。其中HIF-1α蛋白阳性和阴性表达者的5年生存率分别为24％和56％（P=0．003）;Sema4D蛋白阳性和阴性表达者的5年生存率分别为23％和59％（P=0．001）。Cox多因素分析显示,Sema4D表达是结直肠癌患者的独立预后因素（P=0．026）,而HIF-1α表达不是其独立预后因素（P=0．501）。结论HIF-1α和Sema4D具有协同关系,两者蛋白的联合检测,可为预测结直肠癌的预后判断提供参考。     

结直肠癌组织中成纤维细胞激活蛋白的表达及临床意义

目的探讨成纤维细胞激活蛋白（FAP）在结直肠癌组织中的表达及其与各病理学指标之间的关系。方法应用免疫组织化学染色法检测55例结直肠癌组织和50例正常结直肠组织中FAP的表达,观察阳性细胞在不同组织中的分布数量,结合肿瘤分期、有无淋巴结转移及不同浸润深度等病理学指标,评价FAP表达与结直肠癌病理特征的相关性。结果正常结直肠组织中几乎无FAP表达,少数癌细胞有微弱表达。FAP阳性细胞主要为结直肠癌间质组织中的肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）。TNMⅢ～Ⅳ期标本中FAP阳性细胞为（40．1±15．9）个,多于Ⅰ-Ⅱ期的（18．3±7．7）个（P〈0.01）;且阳性细胞数量与分期程度相关（r=0．544,P〈0．01）。淋巴结转移组中阳性细胞为（44．4±13．3）个,多于无淋巴结转移的（18．5±8．1）个（P〈0．01）;且阳性细胞数量与有无淋巴结转移相关（r=0．793,P〈0．01）。不同浸润深度T2、T1和T4组标本中FAP阳性细胞数分别为（25．2±8．9）、（32．4±19．3）和（29．2±16．5）个（P〉0．05）;阳性细胞数量与浸润深度无关（r=0．003,P〉0．05）。结论FAP在正常结直肠组织中无表达．而主要表达于结直肠癌组织中的CAFs中。FAP阳性细胞与结直肠癌的TNM分期及淋巴结转移相关。     

血管内皮生长因子D和微淋巴管密度及微血管密度与直肠癌进展的关系

目的研究血管内皮生长因子D（VEGF—D）、微淋巴管密度（MLD）和微血管密度（MVD）在直肠癌中的表达情况及它们与直肠癌发展、转移的相关性。方法选取手术切除并经病理证实的中低位直肠癌标本80例、直肠息肉标本40例和正常直肠组织80例，应用免疫组织化学方法测定其VEGF—D的表达和MLD、MVD水平。结果（1）VEGF—D在直肠癌组织中的阳性率为55％（44／80），直肠息肉和正常直肠组织则均为0（P〈0．05）；MLD在直肠癌组织中为2．80±1．31，直肠息肉中为0．50±0．72，正常直肠组织中MLD为0．25±0．44，直肠癌组织中的MLD明显高于直肠息肉和正常直肠组织（P〈0．05）；MVD在直肠癌组织中为80．10±23．18，直肠息肉中为27．00±11．01，正常直肠组织中为10．45±5．34，直肠癌组织中的MVD明显高于直肠息肉和正常直肠组织（P〈0．05）。（2）直肠癌组织中的VEGF-D表达和MLD、MVD水平与淋巴结转移、术前远处转移有明显相关性（P〈0．01，P〈0．05）。（3）直肠癌组织中的MLD与VEGF—D呈正相关，随着VEGF—D表达的增高MLD明显增高（P〈0．01）。结论VEGF-D和MLD是反映直肠癌淋巴管生成的理想指标，同时也是反映直肠癌进展程度的重要指标，直肠癌淋巴管生成及血管生成可能具有协同作用。     

载脂蛋白M在结直肠癌组织中的表达及其临床病理相关性

目的探讨载脂蛋白M（apoM）在结直肠癌组织中表达水平的变化及其临床相关性。方法采用荧光定量PCR检测20例结直肠癌组织及其癌旁组织中apoM的mRNA表达：采用免疫组织化学方法检测7例正常肠黏膜、6例肠炎组织、10例肠息肉、20例结直肠癌及其癌旁组织中apoM的蛋白表达水平。结果apoMmRNA在结直肠癌组织和癌旁组织中均有表达．前者相对表达量显著低于后者（0．05±0．01比0．19±0．05,P〈0．05）。无淋巴结转移者apoMmRNA表达水平显著低于有淋巴结转移者（P〈0．01）。结直肠癌组织中apoM蛋白表达中位分值为5．50．显著低于癌旁组织（10．5,P〈0．05）、肠炎组织（9．75,P〈0．05）、肠息肉组织（11．0,P〈0．01）及正常黏膜组织（10．5,P〈0．05）。未见结肠癌组织中apoM蛋白水平与患者临床病理特征有关（P〉0．05）。结论载脂蛋白apoM在肠癌组织中的mRNA及蛋白水平较正常组织及良性病变组织显著降低。结直肠癌组织中apoMmRNA表达水平与淋巴结转移有关。     

Claudin-1和Claudin-4在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨紧密连接蛋白Claudin-1和Claudin-4在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色法．检测60例结直肠癌组织和20例正常结直肠黏膜组织中claudin-1和claudin-4的表达水平．分析其临床意义。结果Claudin-1和Claudin-4在结直肠癌组织中表达阳性率分别为76．6％（46／60）和85．0％（51／60）,显著高于正常结直肠黏膜组织的20．0％（4／20）和30．O％（6／20）,差异有统计学意义（均P〈0．01）。Claudin-1和Claudin-4蛋白表达阳性率与肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关（均P〈0．05）。结论Claudin-1和Claudin-4在结直肠癌组织中的高表达．可能对其发生发展起促进作用。Claudin-1和Claudin-4可能成为结直肠癌判断预后的标志物．     

Bmi-1及Mel-18反向调节结直肠癌的形成和发展

目的探讨Bmi-1和Mel-18在结直肠癌组织中的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学染色法和RT—PER检测Bmi一1和Mel一18基因与蛋白在50例结直肠癌组织、20例结直肠腺瘤组织及20例正常结直肠组织中的表达。分析两者在结直肠癌组织中的表达情况和相关性,以及两者表达与临床病理因素的关系。结果Bmi-1mRNA和蛋白的表达在正常结直肠组织、结直肠腺瘤组织、结直肠癌组织均呈明显依次递增（均P〈0．05）,而Mel-18则呈反向趋势;结直肠癌组织中Bmi．1与Mel-18mRNA及蛋白表达之间均明显呈负相关（r=-0．551,P=0．000;r=-0．579,P：0．000）;Bmi-1基因表达和蛋白阳性率水平与远处转移及临床分期呈正相关（P〈0．05）。Mel-18基因表达水平与远处转移及临床分期呈负相关（P〈0．05）。结论Bmi-1高表达与Mel-18低表达可能是结直肠组织恶性转变以及结直肠癌发生浸润转移的重要生物学诊断指标。     

抑癌基因RASSF1A在结肠癌中的表达研究

目的探讨抑癌基因Ras相关区域家族1A（RASSFlA）基因在结肠癌组织以及相应正常结肠组织中的表达并分析其表达与结肠癌临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法和Western blot法检测34例结肠癌手术标本和相应的正常结肠组织中RASSFlA蛋白的表达水平,应用RT-PCR法检测RASSFlAmRNA在结肠癌和正常结肠组织中的表达情况。结果①免疫组织化学法结果：结肠癌组织中RASSFlA蛋白表达阳性率明显低于其在正常结肠组织中的表达阳性率[35．3％（12／34）比97．1％（33／34）,P〈0．05]。结肠癌组织中RASSFlA蛋白的表达与肿瘤分化程度和TNM分期均有关（P〈0．05）,即高、中分化及TNM分期较低（Ⅰ＋Ⅱ期）者的RASSFlA蛋白表达阳性率较高P〈0．05）。②Western blot法结果：在34例结肠癌患者中RASSFlA蛋白表达水平明显低于其在相应的正常结肠组织中的表达水平[0．3168＋0．0196比0．9144±0．1776,P〈0．05];该结果与RT-PCR法检测到的RASSFlAmRNA表达情况基本一致[0．1589±O．2237和0．5723±0．1939,P〈0．05]。结论RASSFlA基因的失表达可能在原发性结肠癌的发生、发展中起重要作用,检测RASSFlA的表达情况可为结肠癌的早期诊断提供帮助。     

结直肠癌组织中胃泌素的表达与Fas／FasL和天冬半胱氨酸蛋白酶的关系

目的了解胃泌素（GAS）mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中的表达情况，并探讨其与结直肠癌细胞凋亡指数（AT）和凋亡调控基因Fas／FasL、天冬半胱氨酸蛋白酶（easpases）的关系。方法采用巢式RT-PCR方法检测79例结直肠癌组织中GAS的mRNA表达．用TUNEL法检测细胞凋亡情况，结直肠癌组织中GAS、Fas／FasL、caspase-3、caspase-8的蛋白表达采用免疫组织化学SP法。结果结直肠癌组织中GASmRNA与其蛋白表达呈正相关（rGAS=0．99，P〈0．01）．高、中分化结直肠癌组织中GASmRNA及其蛋白的表达明显低于低分化者（χ^2，（高与低）=10．47、10．23，均P〈0．01；χ^2（中与低）=6．68、4．95，均P〈0．05）；GASmRNA及其蛋白在乳头状腺癌、管状腺癌的阳性表达率明显低于黏液印戒细胞癌及未分化癌（χ^2（乳与黏印）=4．80、6．22，χ^2（乳与未）=5．44、8．43，χ^2（管与黏印）=4．40、4．38．χ^2（管与未）=4．92、6．43，均P〈0．05）；DukesA、B期的GASmRNA及其蛋白阳性表达率明显低于C、D期（χ^2=4．84、4．45，均P〈0．05）。GAS高、中表达组的细胞AI明显低于低表达组，差异有统计学意义（q（高与低）=6．71，q（中与低）=4．60，均P〈0．01）；FasL阳性表达率在GAS低、中、高表达3组间相比。差异具统计学意义（χ^2=9．35，P〈0．011，其中FasL在GAS高、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组（χ^2（高与低）=6．24．χ^2（中与低）=4．74，均P〈0．05）：结论GAS对结直肠癌细胞凋亡的调控可能与Fas／FasL的表达失衡及其功能和信号系统的紊乱有关。GAS的检测可作为临床结直肠癌生物学行为的评估指标之一．     

脂联素、CEA及CA19—9在结直肠癌患者血清中的表达及其意义

通过研究脂联素、CEA及CA19—9在结直肠腺瘤和结直肠癌患者血清中的表达变化及其与临床病理指标的关系,以探讨其在结直肠癌发生、发展和转移中的作用。采用电化学发光法及酶联免疫法分别检测30例结直肠腺瘤患者（A组）和54例结直肠癌患者（B组）血清中脂联素、CEA及CA19—9的含量,对结直肠癌不同临床病理特征下的血清脂联素、CEA及CA19—9水平差异进行统计分析。结果显示,B组血清脂联素水平为（998．28±78．33）pg／ml明显低于A组（1529．59±81．79）pg／ml（P〈0．05）。B组随着肿瘤Dukes分期进展,血清脂联素水平呈现进一步下降的趋势（P〈0．05）,与肿瘤的发病部位、分化程度及有无淋巴结转移的血清脂联素水平无明显差异（P〉0．05）。A组血清CEA、CA19-9的水平明显低于B组（P〈0．05）。结果表明,结直肠癌患者血清的脂联素水平明显低于结直肠腺瘤患者,且随着肿瘤分期进展,血清脂联素水平呈现进一步下降的趋势。     

抑癌基因KLF-6和APC在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的 研究抑癌基因KLF-6和APC在结直肠癌中的表达规律及其临床意义。方法 应用RT-PCR和免疫组织化学法对32例结直肠癌组织和正常黏膜组织中KLF-6和APC基因mRNA及蛋白的表达进行检测和分析。结果 KLF-6与APC的mRNA阳性表达率在结直肠癌组织中分别为37、5％和34，3％，明显低于正常结直肠黏膜组织的96．9％和93．8％（P〈0．05）。KLF-6与APC的免疫组化染色阳性表达率在结直肠癌组织中分别为28．1％和25．0％，明显低于正常结直肠黏膜组织的81．3％和84．4％（P〈0．05）。KLF-6与APC在结直肠癌中的表达存在相关性（P〈0．05），并与肿瘤组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均有明显相关性（P〈0．05）。结论 抑癌基因KLF-6和APC的低表达可能与结直肠癌的发生、发展、转移及预后有关，且两者存在相关性。     

VEGF—C基因高表达促进胃癌细胞增殖及克隆和小管形成的实验研究

目的：构建人血管内皮生长因子（VEGF）-C基因慢病毒表达载体,并研究其在胃癌细胞中的功能。方法：采用SYBRGreen相对定量逆转录聚合酶链反应（qRT—PCR）及蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测6种不同类型的胃癌细胞系MKN-45、MKN-28、NCI—N87、BGC-823、AGS和SGC-7901中VEGF—CmRNA及其蛋白表达水平;通过构建VEGF—C基因慢病毒表达载体进行细胞增殖、克隆形成和内皮细胞管形成实验,按实验组（MKN-45-GV／C）、对照组（MKN-45-GV）和空白细胞组（MKN-45）加以比较。结果：qRT—PCR和Westernblot实验表明,在6种胃癌细胞中均可检测到VEGF～CmRNA及其蛋白的表达,其中在胃癌细胞MKN-45中表达最低（0．45±1．44）,SGC-7901中表达最高（31.13±0.75）;增殖实验结果显示,与对照组比较,实验组细胞增殖数量明显增加（P〈0．001）;克隆形成结果显示,实验组和对照组细胞在每平均视野形成克隆数分别为6．234±0．32和1．40±1．67,克隆形成率分别为85％和31％（P〈0．05）;内皮细胞管形成实验结果显示,实验组、对照组和空白细胞组小管数目分别为8．14土1．25、12．76±0．79和18．46±0．72（P〈0．01）,小管长度分别为98．56±3．71、105．17±134和151．62±2．51（P〈0．05）。结论：VEGF—C基因真核表达载体构建成功,VEGF—C基因促进胃癌细胞增殖、克隆形成和小管形成。     

血管内皮生长因子D在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨血管内皮生长因子D（VEGF．D）在食管鳞状细胞癌中的表达及意义。方法收集中山大学附属第一医院2009年3月至2010年2月间收治的39例食管鳞癌及癌旁组织标本。用原位杂交法检测肿瘤组织及癌旁组织中VEGF．DmRNA的表达情况;用免疫组织化学法检测D2．40表达,计算D2—40标记的微淋巴管密度（MLVD）。分析VEGF．DmRNA表达与食管鳞癌临床病理资料及MLVD的关系。结果肿瘤组织中VEGF．DmRNA阳性表达率为56.4％（22／39）．明显高于癌旁组织[2．6％（1／39）,P〈0．05]。有淋巴结转移者VEGF．DmRNA阳性表达率明显高于无淋巴结转移者E92．9％（13／14）比36．0％（9／25）,P〈0．05]。VEGF．DmRNA阳性表达者MLVD明显高于阴性表达者（8．20±1．22比5.31±0．97,P〈0．01）。结论VEGF—D可能通过诱导淋巴管生成促进食管鳞癌淋巴转移。     

KLF4、KLF6在人膀胱移行上皮癌组织中的表达及临床意义

目的:观察KLF4、KLF6在人膀胱移行上皮癌组织中的表达,并探讨其对膀胱癌发生、发展的影响。方法:采用实时定量荧光PCR技术检测49例膀胱癌手术切除标本癌组织与25例正常膀胱上皮组织内KLF4、KLF6mRNA的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系,采用SPSS 19.0软件进行统计学分析。结果:实时定量荧光PCR结果显示KLF4在膀胱移行上皮癌组织中的相对含量为(0.218±0.046),在膀胱正常上皮组织中的相对含量为(0.311±0.056),二者之间差异有统计学意义(P0.05)。KLF6在膀胱移行上皮癌组织中的相对含量为(0.198±0.038),在膀胱正常上皮组织中的相对含量为(0.285±0.043),差异有统计学意义(P0.05)。膀胱移行上皮癌组织中,KLF4与肿瘤的组织学分级、TNM分期及有无淋巴结转移有关(P0.05),与患者的性别、年龄无关(P0.05);而KLF6表达与肿瘤的TNM分期有关(P0.05),与肿瘤组织学分级、淋巴结转移及患者的年龄性别均无关(P0.05)。结论:KLF4和KLF6表达降低可能与膀胱移行上皮癌的发生和浸润密切相关,通过干预KLF4和KLF6的活性可能成为治疗膀胱移行上皮癌的新靶点。     

COX-2和MMP-7的表达与胃癌组织生物学行为的关系

目的：探讨癌组织中环氧合酶（COX）-2和基质金属蛋白酶（MMP）-7的表达与胃癌组织生物学行为的关系。方法：选取55例进展期胃癌手术的切除标本,以免疫组织化学SP法检测病灶中COX-2和MMP-7的表达情况。分析COX-2和MMP-7的表达与临床病理因素的关系。结果：COX-2和MMP-7的阳性表达率分别为63.6%和72.7%。COX-2的阳性表达率与肿瘤大体类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关（P〈0.05）;MMP-7的阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关（P〈0.001）,而与肿瘤大体类型和分化程度无关（P〉0.05）。胃癌组织中COX-2和MMP-7的表达呈等级正相关（P〈0.001）。结论：COX-2和MMP-7与胃癌组织的生物学行为密切相关,其高表达是胃癌组织高侵袭能力和预后不良的标志之一。COX-2和MMP-7可作为反映胃癌组织侵袭转移及判断预后的生物学指标。     

HGF／Met通路对肝癌细胞株MHCC97-H干细胞样表型的影响

目的观察HGF／Met通路对肝癌细胞株MHCC97-H干细胞样表型的影响,探讨其可能的作用机制。方法体外培养肝癌细胞株Huh7和MHCC97-H,采用细胞免疫荧光染色技术筛选高表达Met的肝癌细胞株MHCC97-H,将其分为4组：空白组（不做处理）、HGF刺激组（50μg/L HGF）、抑制组（50μg／LHGF＋1mol／LHGF抑制剂PHA665752）和表皮生长因子（EGF）／成纤维细胞生长因子（FGF）刺激组（50μg/LHGF＋20μg/LEGF＋20μg/LFGF）。Westernblot检测前3组MHCC97-H细胞中Met和磷酸化Met（p-Met）蛋白的表达。培养24h后光镜下观察前3组细胞形态学变化。克隆球形成实验检测4组细胞克隆球形成能力。荧光实时定量PCR检测空白组和HGF刺激组不同时间点（2、4、8、16、24h）MHCC97-H细胞中多能干细胞相关基因表达变化。计量资料采用x±s表示,多组间比较采用单因素方差分析和重复测量的方差分析,两两比较采用LSD—t检验。结果细胞免疫荧光染色检测结果显示：肝癌细胞株MHCC97-H与Huh7细胞比较．前者高表达Met,将其作为后续研究对象。Westernblot检测结果显示：空白组、HGF刺激组和抑制组细胞中Met蛋白的相对表达量分别为0．44±0．04、0．37±0．03和0．41±0．04,3组比较,差异无统计学意义（F=2．31,P〉0．05）。而3组细胞中p-Met蛋白的相对表达量分别为0．020±0．010、0．070±0．020和0．010±0．000,3组比较,差异有统计学意义（F=34．11,P〈0．05）,其中HGF刺激组p-Met蛋白的表达水平高于空白组和抑制组（t=3．87,5．20,P〈0．05）。HGF刺激组MHCC97-H细胞形态呈现长梭状问质样改变,而抑制组和空白组细胞形态相似,呈上皮样。克隆球形成实验结果表明：空白组、HGF刺激组、抑制组和EGF／FGF刺激组克隆球数目分别为0、（35．0±6．3）个、（4．3±1．5）个和（54．3±2．5）个,4组比较,差异有统计学意义（F：511．28,P〈0．05）,其中HGF刺激组克隆球数目多于空白组和抑制组（t=9．62,8．21,P〈0．05）,而少于EGF／FGF刺激组（t=4．93,P〈0．05）。实时定量PCR检测结果显示：空白组和HGF刺激组不同时间点（2、4、8、16、24h）C—myemRNA相对表达量分别为1．00±0．11、1．68±0．09、1．08±0．24、1．18±0．13、0．78±0．14、1．06±0．04;Klf4mRNA分另1为1．00±0．20、1．43±0．16、0．87±0．28、1．19±0．29、2．17±0．43、1．41±0．06;Oct4mRNA分别为1．00±0．12、0．54±0．12、0．69±0．19、1．08±0．12、1．62±0．30、0．97±0．11,空白组和HGF刺激组不同时间点上述各指标比较,差异均有统计学意义（F=13．64,8．52,13．56,P〈0．05）;HGF刺激组2hc—myemRNA相对表达量达到峰值,与空白组比较,约升高了1．68倍（t=8．29,P〈0．05）,HGF刺激组16hK]f4mttNA相对表达量达到峰值,与空白组比较,约升高了2．17倍（t=4．27,P〈0．05）,HGF刺激组16hOct4mRNA相对表达量达到峰值,与空白组比较,约升高了1．62倍（t=3．32,P〈0．05）。结论HGF／Met通路的活化能够诱导肝癌细胞MHCC97-H的干细胞样表型转化,其可能作用机制是通过增加多能干细胞相关基因的表达而实现的。     

Ku蛋白在膀胱癌组织中表达的免疫组织化学研究

目的：研究Ku蛋白表达与膀胱癌发生、进展的关系。方法：应用SP法对98例行经尿道膀胱肿瘤电切术（TuRBT）、根治性膀胱切除术的膀胱组织标本进行免疫组织化学染色;应用形态计量学分析方法结合临床相关病理资料分析Ku蛋白表达与膀胱癌肿瘤相关指标的关系。结果：98例膀胱癌组织中Ku蛋白总阳性表达数为79例（80．61％）。67例非肌层浸润性膀胱癌组织中Ku蛋白阳性表达数为60例（89．55％）,31例肌层浸润性膀胱癌中Ku蛋白阳性表达数为19例（6J．29％）,两者差异有显著统计学意义（P〈0．01）。图像分析结果：肌层浸润性膀胱癌组（2453．05±221．24）和非肌层浸润性膀胱癌组（4349．41±307．20）之间积分光密度的差异有显著统计学意义（P〈O．01）。肿瘤组织（3605．67±1024．80）与癌旁组织（396．84±60．24）之间积分光密度的差异度亦有显著统计学意义（P〈O．01）。结论：Ku蛋白可能在膀胱癌进展的过程中发挥着重作用。早期Ku蛋白表达增加是膀胱癌发生的一个重因素。晚期Ku蛋白表达下调与膀胱癌的侵袭性密切相关。     

siRNA沉默VEGF基因对肾癌细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨siRNA干扰血管内皮生长因子（VEGF）基因对人肾细胞癌细胞株（ACHN）细胞增殖与凋亡的影响.方法：化学合成针对VEGF的小干扰RNA,通过脂质体转染至ACHN中,利用Western印迹法检测细胞内VEGF的表达,采用台盼蓝拒染法测定细胞生长曲线,用MTT比色分析法检测细胞增殖抑制率（IR）,用TUNEL方法检测细胞凋亡率（AR）.结果：生长曲线提示,与空白对照组及阴性对照组相比,siRNA1组、siRNA2组ACHN细胞的生长明显减慢 在24 h、48 h、72 h,siRNA1的增殖抑制率为10.6%、18.0%、27.1%,siRNA2增殖抑制率为18.9%、32.7%、40.3%,均高于空白对照组及阴性对照组（P〈0.05） siRNA1组的细胞凋亡率为10.7%、15.2%、20.3%,siRNA2组的细胞凋亡率为17.3%、26.2%、37.4%,均高于空白对照组及阴性对照组（P〈0.05） siRNA1组、siRNA2组VEGF蛋白表达水平明显低于空白对照组及阴性对照组,其中siRNA2对ACHN细胞的IR、AR和VEGF蛋白表达的抑制作用均显著高于siRNA1组（P〈0.05）.结论：VEGF在肾癌的发生发展中起着重要作用,化学合成的VEGF-siRNA能特异性抑制肾细胞癌ACHN细胞株中VEGF的表达,抑制细胞生长增殖,促进细胞凋亡.对于VEGF基因高表达的肾细胞癌患者,针对VEGF的RNAi技术有望成为肾细胞癌新的基因治疗手段.     

后腹腔镜与开放肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿疗效分析

目的：评价后腹腔镜肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿的临床价值。方法：回顾分析后腹腔镜肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿18例（A组）及开放组20例（B组）的临床资料。结果：手术操作时间分别为A组（76±31）min、B组（113±26）min;手术中出血量A组（25±29）ml、B组（190±76）ml;术后肠功能恢复时间A组（33±9）h、B组（69±14）h;术后下床活动时间A组（39±8）h、B组（74±12）h;术后住院天数A组（6．7±2．5）天、B组（12．4±4．1）天;住院总天数A组（14．8±4．7）天、B组（23．9±6．4）天;A组并发症方面明显少于B组,差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;手术治疗费用A组（7582±1952）元、B组（3044±1015）元;B组在手术治疗费用方面少于A组,差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论：后腹腔镜肾蒂淋巴管结扎术治疗乳糜尿借助腹腔镜的放大作用,可清楚辨认肾门处的淋巴管,使淋巴管结扎更完全,具有仓0伤小、出血量少,术后卧床和住院时间短、无明显的并发症、恢复快、术后无复发等优点。但应严格掌握手术适应证,积极做好围手术期处理。     

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂在原发性肝癌患者血清中的表达及其意义

目的：探讨血清肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂（sTWEAK）在原发性肝癌患者中的表达,分析sTWEAK和患者病理学指标之间的关系。方法：ELISA法检测50名健康自愿者及114例原发性肝癌患者血清sTWEAK表达水平,并分析临床病理学关系。结果：原发性肝癌患者血清sTWEAK表达水平（56．22±1．90）ng／mL明显高于健康人群（41．26±2．60）ng／mL（P〈0．0001）;原发性肝癌患者血清sTWEAK表达水平和患者肿瘤大小、肿瘤的Edmondson分级、TNM分期以及意大利评分标准密切相关（P〈0．05）。结论：原发性肝癌患者sTwEAK表达水平可以作为评估肿瘤分级以及判断患者预后的一个潜在指标。抑制原发性肝癌患者sTwEAK产生或者释放也许可以作为治疗原发性肝癌的一个潜在方法。