制作临床快速冰冻切片的质量控制

目的:探讨冰冻切片的制作、HE染色和免疫组化的标准化实验方法,达到质量控制标准.方法:详细介绍了冷冻切片的方法、影响因素、标准化与质量控制及其在临床快速病理诊断的HE和免疫组织化学染色方法.结果:经此方法制备的冷冻切片组织结构完整、细胞染色清晰、境界清楚、核质分明、对比度好,无刀痕、皱折、重叠、冰晶、切片平整、厚薄均匀一致等.结论:可为临床快速病理诊断的HE染色、脂肪黏液染色、酶组织化学、免疫组织化学、免疫荧光、核酸原位杂交以及原位PCR等病理诊断与研究提供优质冷冻切片.     

冰冻切片在临床病理诊断与研究中的应用

本实验详细介绍冷冻切片的方法、影响因素、标准化与质量控制及其在临床快速病理诊断的HE、免疫组织化学和核酸原位杂交染色方法。制备的冷冻切片组织结构完整,细胞染色清晰、境界清楚、核质分明、对比度好,无刀痕、皱折、重叠、冰晶、切片平整、厚薄均匀一致等;可用于临床快速病理诊断的HE染色、脂肪黏液染色、酶组织化学、免疫组织化学、免疫荧光、核酸原位杂交以及原位PCR等病理诊断与研究。     

免疫组化染色质量控制在肝脏穿刺组织切片中的应用

目的:探讨肝脏穿刺组织HE染色切片及免疫组化染色切片的质量控制与标准化操作在提高病理诊断准确率中的意义。方法:按照质控标准化对298例肝脏穿刺组织行HE制片和免疫组化染色,盲法比较标准化前后病理诊断结果。结果:按照质控标准化制备的常规HE染色切片优良率为92.3%,免疫组化染色切片优良率为91.1%;明显高于未标准化制备的HE切片和免疫组化染色切片(78.9%,74.9%),两者差异有统计学意义(P<0.05)。298例肝脏穿刺组织,标准化后做出明确诊断的有259例(86.9%),标准化前为219例(73.5%),两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:此实验流程提高了肝脏穿刺组织免疫组化染色的质量,诊断率提高,可作为肝脏穿刺组织制片的标准流程应用。     

HE染色在临床病理诊断中的应用

目的探讨病理技术HE染色在病理诊断中的应用,以及对临床病理诊断的重要性。方法对11 800例石蜡切片染色、快速组织病理染色。5 000例细胞学染色的观察、分析其病理HE染色在临床病理诊断准确率中的重要作用,以及在病理技术HE染色方面存在的不足,需要做进一步的改进。结果观察出石蜡切片、快速冰冻切片、脱落细胞学在HE染色的质量受一定因素的影响。通过在实践中技术的改进大大的提高HE染色的质量,提高临床病理诊断率。结论通过对不同的组织病理采用不同的固定、脱水、制片、HE染色方法,大大的提高了制片的质量,提高了病理诊断准确率,也提高了临床治愈率,为临床提供准确的病理资料。     

病理常规制片技术标准化的探讨

病理外检诊断离不开HE切片 ,控制HE切片的质量一直是病理技术中受关注的课题。作者从取材、固定、脱水和透明、浸蜡及包埋、切片、展片和烤片、染色、封片等八个方面深入探讨了如何控制HE切片的质量 ,力图使HE制片技术标准化、规范化 ,从而提高常规病理诊断的准确率。     

病理常规制片技术标准化的探讨

病理外检诊断离不开HE切片,控制HE切片的质量一直是病理技术中受关注的课题.作者从取材、固定、脱水和透明、浸蜡及包埋、切片、展片和烤片、染色、封片等八个方面深入探讨了如何控制HE切片的质量,力图使HE制片技术标准化、规范化,从而提高常规病理诊断的准确率.     

探讨HE染色方法在临床病理诊断中的应用价值

随着现代医学技术的发展,临床病理诊断在临床医学中起着举足轻重的作用,甚至是金指标。本文结合我院2015年8月份至11月份送检的100例病理切片资料进行研究,分析HE染色技术在临床病理诊断中的作用。通过快速的组织病理染色,其中52例细胞学染色的切片,经过仪器的检测、分析病理HE染色在临床病理诊断中准确率。结果显示:石蜡切片、快速冰冻切片、脱落细胞学等在HE染色的质量均受到一定因素的影响,通过技术改良可以使HE染色的质量得到很好的提高,为临床提供精准的病理资料。作为临床病理诊断过程中一种可靠适用的HE染色技术,运用不同的方式,使病理切片质量得到很好的提高,可以使临床医生更加准确的诊断疾病,具有较高的应用价值。     

微小组织冰冻制片技术的改进

<正> 随着纤维内镜检查及各种内镜针吸等检查广泛开展,微小组织逐渐增多,目前多有用石蜡切片法、HE染色在光镜下观察并做出病理诊断。按照上述常规切片法和染色法,需时间较长,不能急时诊断。为满足病理快速和科研需要,提高微小组织冰冻切片的质量和染色速度,我们采用琼脂包埋微小组织进行冻切片,分别进行组织化学、免疫荧光染色、免疫酶染色和快速染色法弥补了微小组织冰冻制片之不足,现介绍如下。     

组织芯片技术的质量控制对肿瘤诊断准确性的研究

目的研究组织芯片技术对宫颈癌病理诊断的质量控制对肿瘤诊断准确性的影响。方法选择136例宫颈癌病理标本构建的组织芯片,HE染色以及免疫组织化学染色后与常规切片比较一致性,确定组织芯片对肿瘤诊断准确性影响。结果宫颈癌组织芯片确诊率不受组织大小的影响(P0.05),避免了常规切片的局限性(P0.05),两组组织芯片的确诊率(98.5%94.4%)都高于常规切片免疫组化结果。结论组织芯片对常规切片诊断结果能够进行质量控制,提高了肿瘤诊断的准确可靠性。     

羊水栓塞临床病理分析

目的探讨羊水栓塞病人临床病理特征及病理诊断。方法收集2例死于羊水栓塞患者标本,通过HE切片染色、免疫组织化学CD34、cytokeratin染色,观察其病变特征。结果2例尸检明确诊断为羊水栓塞,在HE染色的肺组织切片及子宫肌层中小血管及毛细血管内均见长梭形,三五成团或散在分布的角化上皮,其中1例心肌小血管内见到角化上皮,免疫组化标记cytokeratin染色阳性,CD34染色阴性。结论羊水栓塞的病理诊断应该以HE切片结合病史及临床表现为主,免疫组化染色作辅助诊断。     

淋巴组织免疫组织化学染色及质量控制

目的 建立淋巴组织的制片与免疫组化的标准化实验方法，达到临床病理检验质控要求。方法 详细介绍了淋巴组织的取材、固定、脱水、透明、石蜡包埋、切片、免疫组化和TUNEL染色方法及其质量控制环节。结果 用此法制备的免疫组化切片具有阳性结果呈颗粒状的棕黄色，定位准确，对比明显，背景浅，组织结构与细胞轮廓完整、清晰，适合显微照相以及染色结果稳定可靠，特异性强、敏感性高。结论 该方法可作为淋巴组织的制片与免疫组化的标准化实验方法应用。     

乳腺浸润性微乳头状癌临床病理分析

目的:观察分析乳腺浸润性微乳头状癌(IMPC)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法:从300余例乳腺癌中筛选出符合IMPC(单纯型)形态学标准的病例5例,用光学显微镜观察其石蜡切片和免疫组织化学标记,并分析研究。结果:5例IMPC无特殊临床症状、体征、肉眼观察及术中冷冻镜下特征;石蜡切片光镜下特征为:缺乏纤维血管轴心的微乳头或腺泡状细胞簇在纤细网状或胶原纤维性间质分隔形成的透明间隙中浸润;IMPC微乳头边缘EMA(+),肿瘤CD31(-),表明微乳头缺乏纤维血管轴心;E-cad主要表达于肿瘤细胞间连接面的细胞膜,而微乳头朝向间质面的细胞膜则表达减弱或消失。结论:IMPC只能通过组织形态借助免疫组化诊断;IMPC的高淋巴管侵袭和高淋巴结转移要引起病理医师高度重视。     

甲状腺乳头状癌患者BRAF基因V600E检测的意义

目的 评估免疫组化法检测BRAF基因V600E突变对甲状腺乳突状癌的诊断价值,进一步明确BRAF基因V600E突变与甲状腺乳头状癌外扩散的相关性。方法 2011年3月至2014年3月37例经病理确诊甲状腺乳突状癌患者,对于免疫组化染色阳性肿瘤进行染色强度分类。评估年龄、甲状腺外扩散、侵袭淋巴管血管、区域淋巴结转移病理变化。结果 直接测序法显示28例（75.7%）PTC BRAF基因V600E阳性;免疫组化染色显示25（67.6%）BRAF基因V600E阳性。以直接测序法为标准,免疫组化法对BRAF基因V600E特异抗体检测突变的敏感性为89.3%、特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为75.0%。 结论 免疫组化染色是检测甲状腺乳突状癌中BRAF基因V600E突变准确的方法,能够量化BRAF基因V600E表达,预测肿瘤侵袭性。     

甲状腺过氧化物酶在细针抽吸甲状腺肿瘤细胞中的表达及意义?

目的:观察甲状腺过氧化物酶(TPO)在细针抽吸甲状腺肿瘤细胞中的表达,评价TPO免疫化学染色对良、恶性甲状腺肿瘤的鉴别诊断价值.方法:应用免疫化学染色法观察TPO在71例手术切除的甲状腺肿瘤组织细针抽吸物(FNA)涂片及组织冰冻切片中的表达,阳性判定按照80%以上甲状腺细胞染色为阳性.结果:TPO在恶性组织的FNA细胞涂片与组织切片标本中的表达均低于良性甲状腺肿瘤,差异有统计学意义(P＜0.01);而FNA细胞涂片与组织切片TPO表达阳性率无显著差异.图像分析结果显示恶性甲状腺肿瘤细胞的TPO染色强度明显低于良性甲状腺组织细胞,两者平均密度值、相对光密度值和着色的颜色强度均有显著差异(P均＜0.05);而FNA细胞涂片和组织切片间无显著差异.甲状腺肿物囊液涂片中良、恶性细胞的TPO表达阳性比分别为20/22、0/4,两者有显著差异(P＜0.05).以H-E染色为参考,FNA细胞涂片阳性及阴性预告值分别为95.74%、91.67%,组织切片染色为100%、66.47%,囊液涂片染色为97.44%、88.46%.结论:TPO在良性甲状腺细胞中的表达明显高于恶性甲状腺肿瘤细胞;TPO免疫化学染色可用于甲状腺针吸细胞,作为诊断甲状腺良、恶性肿瘤的辅助手段.     

258例鼻-鼻窦良、恶性肿瘤的临床特征分析

目的 分析鼻-鼻窦良、恶性肿瘤的临床特征,以提高其临床诊断准确性.方法 对经病理证实的258例鼻-鼻窦肿瘤患者的临床资料进行回顾性分析并对比良、恶性肿瘤的临床差异.结果 鼻-鼻窦肿瘤临床症状表现多样.鼻出血或涕中带血、头痛、面部麻木或疼痛、眼痛或溢泪所占比率比较,恶性肿瘤患者明显高于良性肿瘤患者(P＜0.05);行手术治疗的196例患者中,良、恶性肿瘤术前石蜡病检与术后石蜡病检符合率相比,差异无统计学意义(P＞0.05).行手术治疗的63例恶性肿瘤中,共行232个切缘冰冻病检,与术后石蜡冰冻病检符合率为98.70％(229/232).34例术中冰冻与术后石蜡病检符合率为91.18％(31/34),其中行术中即时冰冻6例,66.67％(4/6)的患者与术前石蜡活检诊断不相符,从良性变为恶性.结论 鼻-鼻窦肿瘤临床表现缺乏特异性,术中快速冰冻病检有利于提高诊断率;恶性肿瘤的切缘应行连续冰冻病检.     

淋巴组织免疫组织化学染色方法的探讨

目的:鉴于病理淋巴组织的切片常见组织较硬、细胞脆性大,免疫组织化学染色显色模糊,甚至出现假阴性现象,探讨淋巴组织制片与免疫组化染色的新方法与新思路。方法:采用B-5固定液、软化剂的处理进行石蜡切片、免疫组织化学染色方法进行染色。结果:制出背景清晰、定位准确、反差分明、效果较好的免疫组化染色淋巴组织切片。结论:经B-5固定液固定、软化剂处理过的淋巴组织免疫组化切片能为淋巴组织疾病诊断提供定位准确、阳性明显的抗原表达信息。     

冰冻切片苏木紫-伊红快速染色法探讨

探讨冰冻切片苏木紫-伊红快速染色法,为临床及时提供诊断信息。苏木紫-伊红快速染色方法制作出的标本,细胞形态和结构清晰,细胞核、细胞质显色良好,染色过程快,仅5 min后即可镜检,可及时为临床提供送检标本性质。     

固定时间对乳腺癌快速冰冻切片免疫组化结果的影响

目的分析固定时间对乳腺癌冰冻切片免疫组化结果的影响，探寻最佳的固定时间。方法利用AAF固定液（配方为丙酮85mL、冰醋酸5mL、40％甲醛10mL）以1min、2min、4min、6min、8min、10min、12min、15min不同时间对乳腺癌组织冰冻切片进行固定，然后利用6种乳腺癌相应抗体进行免疫组化染色，根据2004—2008年全国十次免疫组化质控活动所用的免疫组化质控评分标准对图像质量进行评分量化。结果固定时间可以直接影响乳腺癌冰冻切片免疫组化图像的质量，最佳的固定时间为6～8min。结论对乳腺癌冰冻切片固定6～8min可取得质量最高的免疫组化结果。     

大鼠视网膜、视神经冰冻切片适宜厚度探索

目的 针对大鼠眼球冰冻切片难度高,各研究对眼球冰冻切片厚度差异较大的问题,探索大鼠视网膜、视神经冰冻切片适宜的厚度.方法 将24只SD大鼠随机分为3组,使用传统的石蜡切片行HE染色做对照,分别对不同厚度的冰冻切片做HE染色和FITC-lectin荧光染色进行观察（5μm、6μm、8μm、10μm、12μm、15 μm,n=8）.结果 视网膜冰冻切片HE染色显示6μm和8μm的大鼠视网膜各层细胞可看到完整细胞,密疏适宜,胞核清楚,核膜光滑完整,神经纤维层厚度均匀;6μm视神经冰冻切片HE染色显示视神经纤维排列密集、规则,染色均匀;免疫组化染色结果显示5μm、6μm和8μm的大鼠视网膜冰冻切片FITC-lectin荧光染色后层次清晰,lectin阳性细胞呈绿色分枝状,在神经节细胞及内网状层清晰可见,亦可在外网状层看到少量绿色lectin阳性细胞,10 μm及15 μm的大鼠视网膜由于各层细胞重叠严重,无法看到绿色lectin阳性细胞.6μm的视神经冰冻切片FITC-lectin荧光染色显示清晰可见的活化小胶质细胞,胞体变肥大,突起缩短,呈阿米巴样变化.结论 6 μm的视神经冰冻切片以及6～8 μm的视网膜冰冻切片,可以得到重复性切片,也可以达到理想的免疫组化染色效果。     

肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色方法的再改良

探讨肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色再改良的方法,以提高石蜡切片的诊断准确率。方法选择2010年6-12月在北京大学深圳医院行肾组织活检确诊为肾小球疾病的患者44例,其中IgA肾病20例,狼疮性肾炎12例,膜性肾病12例。对其肾组织除常规冰冻切片直接免疫荧光染色外,对石蜡切片进行高温、高压修复和胃蛋白酶消化处理,再分别行免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体(C3、C1q)、纤维蛋白(Fib)、HBsAg及HBcAg直接免疫荧光染色,比较石蜡与冰冻切片的直接免疫荧光染色结果。结果冰冻切片:肾小球数1～12个,平均5个;石蜡切片:肾小球数7～30个,平均15个。20例IgA肾病、12例狼疮性肾炎、12例膜性肾病患者的肾组织行冰冻(IgA、IgG、IgM、C3、C1q、Fib、HbcAg和HbsAg)直接免疫荧光染色时在不同荧光强度中所占比例与行石蜡直接免疫荧光染色比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论再改良的肾组织石蜡切片直接免疫荧光染色是冰冻切片失败时较好的补救手段。其石蜡切片组织结构更清晰,免疫复合物沉积部位较冰冻切片更易判断。