HL－60和抗分化HL－60细胞的基本生物学和细胞遗传学特征比较

对本实验室克隆的人急性早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０及其抗维甲酸分化亚系ＨＬ－６０／ＲＡ进行细胞增殖、细胞周期、分裂中期细胞染色体分布和Ｇ－显带核型分析。发现两者在倍增时间和细胞形态上基本一致。在细胞周期分布上，两者都具有肿瘤细胞的周期分布特征，但ＨＬ－６０／ＲＡ细胞的Ｓ期细胞群少于ＨＬ－６０细胞。两者染色体数量分布比较集中，染色体众数分别为４５±３（ＨＬ－６０）和４５±１（ＨＬ－６０／ＲＡ），呈近二倍体核型，Ｇ－显带核型分析表明两者都接近正常二倍体核型，都含较多的异常染色体。上述结果说明ＨＬ－６０和ＨＬ－６０／ＲＡ细胞的遗传学来源一致。     

应用PCR检测HL－60细胞诱导分化前后c－myc癌基因的扩增

应用ＰＣＲ方法研究了维甲酸（ＲＡ）和二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）诱导ＨＬ－６０细胞分化过程中ｃ－ｍｙｃ基因扩增的变化。结果：ＨＬ－６０细胞内ｃ－ｍｙｃ基因扩增为１１，经ＲＡ诱导６ｄ后，其扩增程度无明显变化，而ＤＭＳＯ诱导３ｄ后，ｃ－ｍｙｃ基因扩增出现下降，至５ｄ，较未诱导分化前下降约３０％。提示了ＲＡ和ＤＭＳＯ对ＨＬ－６０细胞不同的诱导分化机制。     

联苯双酯对HL－60白血病细胞的诱导分化作用

为探讨抗肝炎药物联苯双酯（ＤＤＢ）对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０（ＨＬ－６０）的影响。方法应用细胞生物学的方法进行ＨＬ－６０细胞生长曲线、ＮＢＴ还原能力、细胞吞噬活力、酸性磷酸酶活力测定结果ＤＤＢ能抑制ＨＬ－６０细胞增殖。ＨＬ－６０细胞用ＤＤＢ（１０－４ｍｏｌ／Ｌ）处理６天后，近５０％的细胞可获得硝基蓝四氮唑（ＮＢＴ）还原能力，同样浓度的ＤＤＢ处理４天后，其ＨＬ－６０细胞的吞噬能力也明显增强；细胞形态学观察发现ＤＤＢ处理的ＨＬ－６０细胞分化趋向于成熟的中性粒细胞。结论ＤＤＢ能显著提高ＨＬ－６０细胞酸性磷酸酶活力，并具有诱导ＨＬ－６０细胞向中性粒细胞分化的作用。     

4－甲基组胺对HL＿（60）细胞增殖、分化及c－myc基因表达的影响

用体外液体培养法，观察组胺Ｈ＿２受体激动剂４－ＭＮ对人类早幼粒白血病细胞系ＨＬ＿（６０）细胞的增殖和分化的影响。结果表明，１０￣（－３）～１０￣（－５）ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）的４－ＭＨ能抑制ＨＬ＿（６０）细胞增殖，促进其分化。用胞浆ＲＮＡ斑点杂交技术检测到１０￣（－４）ｍｏｌ·Ｌ￣（－４）４－ＭＨ能降低ＨＬ＿（６０）细胞ｃ－ｍｙｃ基因的ｍＲＮＡ表达。     

鬼臼叉甙诱导HL－60细胞分化时c－myc蛋白的表达

目的：观察小剂量鬼臼叉甙对ＨＬ－６０细胞的诱导分化作用和对ｃ－ｍｙｃ蛋白表达的影响。方法：应用加入鬼臼叉甙（ＶＰ－１６）和维甲酸（ＲＡ）的含２０％小牛血清的培养基培养人类早幼粒细胞株（ＨＬ－６０），分别在培养后１、２、４、６ｄ测定细胞各时相的ｃ－ｍｙｃ蛋白水平。结合细胞形态、细胞化学和氯化硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原试验，观察ＶＰ－１６、ＲＡ对ＨＬ－６０细胞的诱导分化作用及其与ｃ－ｍｙｃ蛋白表达的关系。结果：与ＲＡ一样，小剂量ＶＰ－１６能诱导ＨＬ－６０细胞向粒系分化。并且在ＨＬ－６０细胞分化过程中ｃ－ｍｙｃ蛋白水平明显降低。ＶＰ－１６处理的ＨＬ－６０细胞其ｃ－ｍｙｃ蛋白降低与其诱导分化作用呈负相关。结论：实验结果提示，ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达的变化可能是ＶＰ－１６诱导ＨＬ－６０细胞分化的机制之一。     

GM_3对HL－60细胞的诱导分化作用及细胞膜流动性的影响

作者将纯化得到的神经节音脂ＧＭ３加到人早幼粒白血病细胞系（ＨＬ－６０）ＤＭＥ／Ｆ１２培养液中，终浓度为５０μＭ，细胞的增殖明显受到抑制，并按单核－巨噬细胞途径定向分化成熟，表现为细胞吞噬功能显著增强，非特异性酯酶活性升高等。细胞的形态也呈现与这种分化相一致的变化。在此基础上，作者探讨了以ＤＰＨ为探针测定ＨＬ－６０细胞膜流动性的实验条件，研究了促分化剂神经节耷脂ＧＭ３、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）和佛波酯（ＴＰＡ）对ＨＬ－６０细胞膜流动性的影响，结果表明：ＧＭ３、ＤＭＳＯ和ＴＰＡ均可降低ＨＬ－６０细胞膜流动性。     

GM_3对HL－60细胞的诱导分化作用及细胞膜流动性的影响

作者将纯化得到的神经节音脂ＧＭ３加到人早幼粒白血病细胞系（ＨＬ－６０）ＤＭＥ／Ｆ１２培养液中，终浓度为５０μＭ，细胞的增殖明显受到抑制，并按单核－巨噬细胞途径定向分化成熟，表现为细胞吞噬功能显著增强，非特异性酯酶活性升高等。细胞的形态也呈现与这种分化相一致的变化。在此基础上，作者探讨了以ＤＰＨ为探针测定ＨＬ－６０细胞膜流动性的实验条件，研究了促分化剂神经节耷脂ＧＭ３、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）和佛波酯（ＴＰＡ）对ＨＬ－６０细胞膜流动性的影响，结果表明：ＧＭ３、ＤＭＳＯ和ＴＰＡ均可降低ＨＬ－６０细胞膜流动性。     

LDL－阿克拉霉素复合物对白血病HL－60细胞的生长抑制作用

选择人急性早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０进行体外培养，以正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）作为对照细胞，观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对ＨＬ－６０细胞生长的影响、ＬＤＬ与抗癌药物阿克拉霉素（ＡＣＭ）复合物的入胞作用以及对ＨＬ－６０细胞株的选择性杀伤作用。结果表明：１．ＬＤＬ对ＨＬ－６０细胞的生长无明显影响；２．ＬＤＬ作为载体可增加ＡＣＭ进入ＨＬ－６０细胞的量，但对ＰＢＬ的影响不明显；３．ＬＤＬ载体可增强ＡＣＭ对ＨＬ－６０细胞的杀伤力，而对ＰＢＬ无明显影响。提示ＬＤＬ是脂溶性抗肿瘤药物的良好载体     

人早幼粒白血病细胞系HL－60体外诱导分化研究

用体外短期液体培养技术，观察ＲＡ和不同来源的造血调控因子对ＨＬ－６０细胞增殖与分化的影响。以生长曲线和倍增时间作为观察各种试剂对ＨＬ－６０细胞增殖作用的指标；以ＮＢＴ还原反应和细胞形态变化作为分化成熟的指标。结果是ＲＡ、ＰＨＡ－ＬＣＭ单用时对ＨＬ－６０细胞均有抑制增殖和诱导分化作用，ＰＷＭ－ＳＣＭ、ＬＰ３－ＣＭ仅部分抑制增殖，而ＦＧＦ、Ｈｕ－ＣＳＦ和ＥＰＯ等无效。各种造血生长因子分别与ＲＡ合用时，能加强ＲＡ对ＨＬ－６０细胞的增殖抑制和诱导分化作用的有ＦＣＦ、ＰＷＭ－ＳＣＭ、ＰＨＡ－ＬＣＭ和Ｈｕ－ＣＳＦ等；ＬＰ３－ＣＭ仅增强抑制增殖：ＥＰＯ未显示作用。     

反义寡核苷酸对HL60细胞c—myc基因表达的抑制和诱导分化作用

研究ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃ－ｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法 采用针对原癌基因ｃ－ｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５‘ｄ（ＣＴＴ ＣＴＣ ＧＡＧ ＧＣＡ ＧＧＡ ＧＧＧ）３「与人早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞共培养５ｄ，检测ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ量的变化及其对ＨＬ６０细胞分化的影响。     

对－苯二甲酸衍生物的合成及其诱导分化HL－60细胞的活性

作者合成了１３个对－苯二甲酸衍生物，其中有９个化合物尚未见文献报道。通过对ＨＬ－６０细胞诱导分化活性试验，发现有两个化合物在浓度为５×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ时，可使细胞分化率达５５％，低于维Ａ酸的分化率（７９％，１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ）。     

应用PCR检测HL—60细胞诱导分化前后c—myc癌基因的扩增

应用ＰＣＲ方法研究了维甲酸（ＲＡ）和二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）诱导ＨＬ－６０细胞分化过程中ｃ－ｍｙｃ基因扩增的变化。结果：ＨＬ－６０细胞内ｃ－ｍｙｃ基因扩增为１１，经ＲＡ诱导６ｄ后，其扩增程度无明显变化，而ＤＭＳＯ诱导３ｄ后，ｃ－ｍｙｃ基因扩增出现下降，至５ｄ，较未诱导分化前下降约３０％。提示了ＲＡ和ＤＭＳＯ对ＨＬ－６０细胞不同的诱导分化机制。     

反义寡核苷酸对HL60细胞c-myc基因表达的抑制和诱导分化作用

目的研究ｃｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法采用针对原癌基因ｃｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５’ｄ（ＣＴＴＣＴＣＧＡＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧ）３’与人早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞共培养５ｄ，检测ｃｍｙｃｍＲＮＡ量的变化及其对ＨＬ６０细胞分化的影响。结果用ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ检测出ＨＬ６０细胞ｃｍｙｃｍＲＮＡ的含量减少；细胞形态学变化以及非特异性酯酶（ＮＳＥ）染色、硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原试验均提示ＨＬ６０细胞出现了分化，部分细胞向粒细胞方向分化，部分细胞向单核细胞方向分化。结论ｃｍｙｃ反义寡核苷酸能够抑制ｃｍｙｃ基因的表达并能诱导ＨＬ６０细胞分化。     

人早幼粒白血病细胞系HL—60体外诱导分化研究

用体外短期液体培养技术，观察ＲＡ和不同来源的造血调控因子对ＨＬ－６０细胞增殖与分化的影响。以生长曲线和倍增时间作为观察各种试剂对ＨＬ－６０细胞增殖作用的指标；以ＮＢＴ还原反应和细胞形态变化作为分化成熟的指标。结果是ＲＡ、ＰＨＡ－ＬＣＭ单用时对ＨＬ－６０细胞均有抑制增殖和诱导分化作用，ＰＷＭ－ＳＣＭ、ＬＰ３－ＣＭ仅部分抑制增值、而ＦＧＦ、Ｈｕ－ＣＳＦ和ＥＰＯ等无效。各种造血生长因子分别与ＲＡ合用时，     

4甲基组胺对HL60细胞增殖,分化及c—myc基因表达的影响

用体外液体增减法，观察组胺Ｈ２受本激动剂４－ＭＨ对人类早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞的增殖和分化的影响，结果表明，１０＾－３－１０＾－５ｍｏｌ．Ｌ＾－１的４－ＭＨ能抑制ＨＬ６０细胞增殖，促进其分化。用胞浆ＲＮＡ斑点杂交技术检测到１０６－４ｍｏｌ．Ｌ＾－４４－ＭＨ能降低ＨＬ６０细胞ｃ－ｍｙｃ基因的ｍＲＮＡ表达。     

对－取代苯甲酰氨基苯甲酸（甲酯）的合成及其分化诱导HL－60细胞活性试验

作者合成了１６个对－苯甲酰氨基苯甲酸（甲酯），并进行了分化诱导人髓系白血病细胞（ＨＬ－６０细胞）的活性试验，其中有４个化合物活性较强，在浓度为１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ时可使２５％～５０％以上的早幼粒细胞分化为较成熟细胞；有两个化合物在浓度为５×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ时可使细胞分化率提高到７０％，但较维Ａ酸分化率（９７％）为低。     

8—Br—cAMP对人白血病HL—60细胞生长,分化及有关基因表达的影响

观察８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对ＨＬ－６０细胞生长，分化及其相关基因的调节。方法组化化学、原位杂交和完整细胞ＲＮＡ斑点印迹结果８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ作用２４ｈ，ＨＬ－６０细胞ｃ－ｆｏｓ癌基因和ｐ＾２１ｗａｆｌ抑癌基因表达明显升高，ｃ－ｍｙｃ癌基因表达明显降低；８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ作用４８ｈ，ＨＬ－６０细胞生长、增殖明显受抑制，并向中性粒细胞方向分化。结论８－Ｂ可调整ＨＬ－６０细胞生长，分化及相关癌基因和抑癌基因     

白血病细胞株HL60和HL60/DNR的多药耐药性

目的研究白血病细胞的多药耐药性（ＭＤＲ）。方法用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＨＬ６０，ＨＬ６０／ＤＮＲＭＤＲ１的ｍＲＮＡ表达，用流式细胞仪分析单抗ＵＩＣ２标记的细胞株Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）的表达，了解它们摄取和滞留荧光素Ｒ１２３的功能。结果ＨＬ６０／ＤＮＲ在ｍＲＮＡ水平高度表达ＭＤＲＩ，在蛋白质水平高度表达Ｐｇｐ，功能性试验中细胞内Ｒ１２３最终浓度ＨＬ６０为ＨＬ６０／ＤＮＲ的５０倍。结论ＨＬ６０／ＤＮＲ为典型的表达ＭＤＲ１的细胞株     

鬼臼叉甙诱导HL—60细胞分化时c—myc蛋白的表达

目的：观察小剂量鬼臼叉甙对ＨＬ－６０细胞的诱导分化作用和对ｃ－ｍｙｃ蛋白表达的影响。方法：应用加入鬼臼叉甙（ＶＰ－１６）和维甲酸（ＲＡ）的含２０％小牛血清的培养基培养人类早幼粒细胞株（ＨＬ－６０），分别在培养后１、２、４、６ｄ测定细胞各时相的ｃ－ｍｙｃ蛋白水平。结合细胞形态、细胞化学和氯化硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原试验，观察ＶＰ－１６、ＲＡ对ＨＬ－６０细胞的诱导分化作用及其与ｃ－ｍｙｃ蛋白表达的关     

环孢菌素A对白血病细胞株HL60和HL60/DNRP糖蛋白功能的影响

克服白血病细胞的多药耐药性（ＭＤＲ）。方法用流式细胞仪分析单抗ＵＩＣ２标记的ＨＬ６０、ＨＬ６０／ＤＮＲＰ糖蛋白（Ｐｇｐ）的表达，了解细胞株摄取和滞留荧光素Ｒ１２３的功能，并观察环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）和丙磺舒（Ｐｂｃ）对细胞株上Ｐｇｐ的逆转作用。结果ＨＬ６０／ＤＮＲ高度表达Ｐｇｐ，且可被ＣｓＡ逆转，使细胞内药物浓度达到敏感细胞株水平。Ｐｂｃ不能逆转ＨＬ６０／ＤＮＲ。结论ＣｓＡ对ＨＬ６０／ＤＮＲ的逆转作用可能是对其细胞膜上Ｐｇｐ的抑制