MyD88/NF-κB信号通路与流感病毒感染相关性探析

MyD88/NF-κB信号通路是炎症反应过程中的关键通路,通过调节MyD88/NF-κB信号通路进而影响蛋白和基因表达是当今研究的热点问题.本文从该信号通路的构成和流感病毒感染的相关性探讨了该信号通路与流感病毒感染之间的关系.通过调节MyD88/NF-κB信号通路中的关键因子来调控相关基因表达,继而影响细胞炎性因子的产...     

银翘散对IV感染小鼠肺组织中TLR7/Myd88/NF-кB信号表达的影响

目的:研究银翘散对甲型流感病毒诱导的肺炎小鼠肺组织中TLR-7介导的MyD88依赖性信号传导通路的调控机制。方法:将48只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、利巴韦林组,银翘散低、中、高剂量组(20、10、5 g·kg·d-1)。除正常组外,建立流感病毒FM1鼠肺适应株滴鼻感染的小鼠流感病毒性肺炎模型。感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,药物组分别予以各药物治疗,连续3 d。以苏木素-伊红染色(HE染色)法观察病理改变;RT-PCR检测肺组织TLR-7、髓样分化因子88(MyD88)、核因子(NF-κB p65)mRNA水平。结果:银翘散20、10 g·kg·d-1均能减轻肺组织炎性损伤;降低了TLR-7、Myd88、NF-κB P65 mRNA水平(P<0.05,P<0.01)。结论:银翘散通过抑制TLR-7介导的MyD88依赖性信号通路,抑制了NF-κB p65的表达,从而达到减少肺组织损伤的治疗目的。     

外寒对小鼠肺组织BAFF和NF-κB表达的影响

目的:观察外寒对小鼠肺组织BAFF和NF-κB表达的影响。方法:50只昆明小鼠随机分为5组:常温对照组、4℃7天组、4℃14天组、0℃7天组、0℃14天组,置于人工气候箱中处理后取小鼠肺脏进行病理切片,ELISA法检测IgG-S和IgG-R,实时荧光定量PCR检测BAFF的表达,Western blot法检测小鼠肺组织中NF-κB蛋白的表达情况。结果 4℃7天组、0℃7天组小鼠肺部出现明显的病理的改变,肺泡内出现大量的渗出液,各实验处理组IgG-S和IgG-R较常温对照组明显升高,差异具有显著性意义,实时荧光定量PCR检测发现各处理组BAFF的表达与常温对照组比较,明显上调,Western blot结果显示各处理组NF-κB蛋白的表达较常温对照组明显增加。结论外寒通过上调BAFF和NF-κB的表达,促发机会的获得性免疫。     

双表法对流感病毒感染小鼠肺形态学改变及肺组织病毒载量的影响

目的:探讨扶正祛邪双表法对流感病毒感染致病毒性肺炎小鼠的治疗作用。方法:以流感病毒A/FM/47(H1N1)鼠肺适应株滴鼻感染昆明种小鼠,并用解表药(银翘散)、固表药(玉屏风散)、双表药(玉屏风散+银翘散),银屏散、阳性对照药(利巴韦林)干预相应组别小鼠。在流感病毒感染后3、5、7 d,计算肺指数和抑制率,观察肺组织切片光镜下的病理改变;采用实时荧光定量PCR(real time RT-PCR)检测小鼠肺组织中病毒载量的变化。结果:银翘散、玉屏风散、银屏散在感染后第3、5、7 d可明显降低小鼠感染后肺指数;明显减轻肺组织炎性损伤,降低肺组织病毒载量。在各时间点,与模型组相比明显低表达(P<0.05),以银屏散组效果最佳。结论:扶正祛邪双表法在治疗小鼠病毒性肺炎具有一定的优势。     

芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路分子表达的影响

目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路相关分子表达的影响。方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、顺铂组、芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg、芪玉三龙汤80.5 g/kg+顺铂3.67 mg/kg组,每组20只移植瘤小鼠。灌胃相应药物或生理盐水,联合组灌胃及腹腔注射给予,连续治疗21天,剥离瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率。HE常规染色,光镜下观察肿瘤组织病理形态学。RT-qPCR、Western Blot法检测各组小鼠肿瘤组织中TLR4/MyD88/NF-κB通路相关基因和蛋白表达水平。结果:芪玉三龙汤具有移植瘤抑制作用,量效关系明显,与顺铂联用具有明显协同作用。光镜下观察模型组肿瘤细胞排列紊乱,周围未见坏死肿瘤细胞,而芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg组可见不同程度的坏死肿瘤细胞,其中以80.5 g/kg组最为明显。同时该复方能够下调TLR4/MyD88/NF-κB通路中TLR4、MyD88、IRAK、TRAF6、NF-κB及IκB基因和蛋白的表达水平,量效关系明显,且与顺铂联用具有明显协同作用。结论:结合前期研究基础,芪玉三龙汤的抑瘤作用可能与其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,改善免疫功能有关。     

黄芩苷对溃疡性结肠炎患者NF-κB及磷酸化NF-κB表达的影响

目的：本研究旨在探讨UC患者外周血单个核细胞NF-κB及磷酸化NF-κB及相关细胞因子在溃疡性结肠炎（UC）中的表达,并进一步探讨体外黄芩苷干预的作用.方法：应用westernblotting蛋白水平检测UC患者外周血单个核细胞NF-κBp65和Phospho-NF-kBp65,用ELISA法检测血清IFN-r、IL-4、IL-6、IL-10水平及体外黄芩苷干预下的检测上述指标.结果：与健康对照组和IBS-D组相比较,p-NK-FB明显增高,NK-FB明显下降,p-NK-FB/NK-FB明显增高,差异有显著性（P〈0.05）;IBS-D组和健康对照组之间无显著性差异（P〉0.05）.体外培养体外黄芩苷干预下,在40umol浓度干预下p-NK-FB/NK-FB较未干预前、DMSO干预、5umol干预、10umol和20umol浓度干预下下降,存在显著性差异（P〈0.05）.从ELISA检测较高浓度的黄芩苷能够明显抑制IFN-r、IL-6等细胞因子,可以使IL-4、IL-10升高.结论：黄芩苷作为黄芩汤的重要组成成分之一,可能是一种潜在的免疫抑制剂,可能抑制p-NK-FB/NK-FB,调节免疫平衡而缓解溃疡性结肠炎的炎症反应,为深入研究UC的发病机制及新药开发提供理论基础.     

番茄红素对肥胖小鼠糖脂代谢的影响及其对胰腺组织TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调节作用

目的探讨番茄红素对肥胖小鼠糖脂代谢和胰腺组织炎症的影响及其可能的作用机制。方法利用高脂饲料复制肥胖小鼠模型。番茄红素干预8周后,观察其对小鼠体质量、血糖、血脂和体脂率的影响。采用HE染色法观察胰腺病理改变,Westernblotting法检测Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白表达水平,免疫组化法检测各组小鼠胰腺组织巨噬细胞浸润程度。结果番茄红素能显著抑制高脂饮食诱导的肥胖小鼠体质量增长,降低空腹血糖,改善糖耐量及血脂水平;减轻胰腺组织的空泡化、水肿变性以及胰岛肥大等炎性病变;同时,番茄红素可明显降低TLR4、MyD88和NF-κB蛋白在胰腺组织中的表达水平,减轻胰腺炎性浸润。结论番茄红素能够改善高脂饮食诱导肥胖小鼠的血糖、血脂水平和胰腺炎症,其作用机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。     

血府逐瘀汤对COPD模型小鼠炎症因子及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 运用分子生物技术探究血府逐瘀汤对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型小鼠炎症因子与TLR4/衔接蛋白髓样分化因子（MyD88）/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的作用。方法 香烟烟熏联合LPS滴鼻法制作COPD模型小鼠,血府逐瘀汤给药处理后,通过HE染色法镜下比较各组小鼠肺组织病理改变;ELISA检测小鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)水平;免疫组化检测小鼠肺组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白水平。结果 镜下HE染色可见血府逐瘀汤不同剂量组小鼠小气道、肺泡、血管的病理改变及炎性细胞的聚集均有不同程度地减轻。血府逐瘀汤各剂量组小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17的含量较模型组明显下降（P <0.05）。免疫组化观察到血府逐瘀汤各剂量组小鼠肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达较模型组更低（P <0.05）。结论 血府逐瘀汤可以减少COPD小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-8...     

灰树花多糖对白念珠菌肠道感染脾虚小鼠TLR2/MyD88/NF-κB通路基因早期转录的影响

目的:初探灰树花多糖对白念珠菌肠道感染脾虚小鼠TLR2/MyD88/NF-κB通路基因早期转录的影响。方法:6～8周龄SPF级昆明种小鼠随机分为6组,即空白对照组(A组)、脾虚模型组(B组)、脾虚感染白念珠菌组(简称脾虚感染组,C组)、灰树花多糖低剂量组(简称灰低组,5 mg/kg,D组)、灰树花多糖中剂量组(简称灰中组,10 mg/kg,E组)、灰树花多糖高剂量组(简称灰高组,20 mg/kg,F组),除A组外均采用复合因素法进行脾虚证造模,共14 d。实验第15天,将除A、B组以外的小鼠经口灌入2×10~8CFU/mL的白念珠菌悬液(0.2 mL/10 g体质量);第16天对D组、E组、F组灌胃灰树花多糖,每日1次(0.2 mL/10 g体质量),其他组灌胃等量无菌生理盐水。从实验第1天开始,观察各组小鼠一般状况的改变及体质量变化;肠道染菌后3 d(实验第18天)检测大便中活菌数,计算出每克大便中活菌数量;实时定量RT-PCR法检测小肠组织中TLR2、MyD88、NF-κB和TNF-αmRNA的表达水平。结果:造模14 d后,除A组以外的小鼠均出现脾虚证的表现。实验第18天时,B～F组小鼠体质量仍显著低于A组(P0.01);虽然与B组和C组相比,D～F组体质量升高没有显著性差异(P0.05),但已有升高的趋势;染菌3 d后,与A组比较,B～F组小鼠粪便中活菌数均显著增多(P0.01);与B组比较,C组小鼠粪便中的活菌数显著升高(P0.01);与C组比较,E组小鼠粪便中的活菌数显著降低(P0.01);灌胃灰树花多糖第3天,C组TLR2、 MyD88、NF-κB和TNF-αmRNA表达均较A组和B组显著升高(P0.05或P0.01);而灌胃灰树花多糖的D、E、F组TLR2、MyD88、NF-κB和TNF-αmRNA表达均比C组显著降低(P0.05或P0.01)。结论:灰树花多糖在感染早期可通过抑制TLR2/MyD88/NF-κB通路基因的转录改善脾虚并肠道白念珠菌感染的病理状态。     

外燥对小鼠肺组织NF-κB活性的影响

目的:观察外燥对小鼠肺组织NF-κB活性的影响.方法:120只SPF级昆明种小鼠随机分为温燥组、凉燥组、常温常温组、常温燥组各30只,模拟外燥"温度-相对湿度-风"综合刺激进行造模,造模后第6、第12、第18天检测各组小鼠肺组织NF-κB活性.结果:温燥组、凉燥组第6、第12、第18天肺组织NF-κB活性均低于常温常湿...     

TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在RA中的作用及中药干预研究进展

TLR4/MyD88/NF-κB作为机体炎症的重要信号通路，参与许多疾病的发生与调控过程。类风湿关节炎（RA）是一种慢性自身免疫性疾病，发病机制尚不完全明确，但诸多研究表明，TLRs、NF-κB等炎症信号通路在RA的发生、发展中起着重要的作用，另有研究表明中药可通过影响TLRs、MyD88、NF-κB等信号通路起到调节免疫、调节细胞因子的作用。因此，拟通过分析TLR4/MyD88/NF-κB信号通路在RA发生、发展中的作用，初步探讨中医药通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路治疗RA的研究现状及作用机理，为RA的治疗提供更多的治疗途径。     

苜蓿素对哮喘小鼠肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88/NF-κB通路的抑制作用

目的观察苜蓿素对低剂量脂多糖(LPS)诱导的哮喘小鼠气道炎症的抑制作用。方法采用低剂量LPS+卵白蛋白(OVA)建立BALB/c小鼠哮喘气道炎症反应模型,随机分为哮喘模型组、苜蓿素组、地塞米松(阳性药)组,另设空白对照组。ELISA法对小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)炎症介质NO、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平进行检测;HE染色观察小鼠肺组织病理情况;RT-PCR法和Western blot法对小鼠肺泡巨噬细胞的Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)、核因子κB p65(NF-κB p65)mRNA及蛋白表达进行检测。结果苜蓿素可显著降低哮喘小鼠BALF液中NO、TNF-α、IL-1β水平,有效改善哮喘小鼠肺部炎症,显著下调肺泡巨噬细胞的TLR4、My D88、NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达量。结论苜蓿素对哮喘小鼠气道炎症有抑制作用,其机制可能与干预TLR4/My D88/NF-κB通路有关。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨电针对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响

目的：观察电针“肾俞”“丰隆”穴对阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆能力的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路探讨其作用机制。方法：60只大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾组、化痰组、补肾化痰组。除假手术组外,其余组双侧脑室注射β淀粉样蛋白（Aβ）25-35造模。补肾组、化痰组、补肾化痰组分别电针“肾俞”单穴、“丰隆”单穴及“肾俞”“丰隆”双穴。Morris水迷宫（MWM）检测学习记忆能力;HE染色、尼氏染色观察海马病理形态;ELISA检测血清肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-4、IL-6、IL-10浓度;RT-PCR检测海马TLR4、MyD88、NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达;Western Blot检测海马TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达。结果：与模型组比较,其余各组大鼠平均逃避潜伏期显著减少（P<0.01）,平均穿越平台次数显著增加（P<0.01）;海马神经元层次清晰,神经元相对表达显著增加（P<0.01）;血清TNF...     

苦参素对感染性休克大鼠肺组织NF-κB等细胞因子的影响

目的：观察苦参素（oxymatrine，OMT）对感染性休克大鼠肺组织NF-κB等细胞因子的影响。方法：采用大鼠盲肠节扎穿孔法（CLP）复制大鼠感染性休克模型，随机将56只大鼠分为假手术组、OMT对照组、模型（CLP）组、CLP＋OMT高、中、低剂量组、阳性对照（CLP＋地塞米松）组。采用免疫组化法检测肺组织NF-κB（p65）及IkB-α的活性；放射免疫分析法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-6（IL-6）的含量改变。结果：OMT能显著抑制肺组织NF-κB（p65）及IkB-α的活性（P〈0．05），降低肺组织匀浆中TNF-α及IL-6的含量（P〈0．05），并提高动脉血PaO2，SaO2含量，降低PaCO2，HCO3^-含量；降低肺组织W／D比值及肺系数（PWI）。结论：OMT能通过抑制诱导NF-κB的激酶（NF-κB-inducing Kinase，NIK）的活化从而抑制细菌、病毒等对NF-κB的激活作用，减少TNF-α，IL-6等促炎因子的表达，进而对感染性休克大鼠肺损伤性病变发挥治疗作用。     

益气活血方对糖尿病肾病大鼠肾组织中NF-κB表达的影响

目的:探讨益气活血方对糖尿病大鼠肾脏损害的保护作用,及对肾皮质氧自由基代谢状态及NF-κB表达的影响。方法:雄性大鼠60只,随机分为4组,正常组、模型组、益气活血方组、贝那普利片组,除正常组外,其余各组大鼠均采用高糖高脂+手术+STZ法复制糖尿病肾病模型,3天后血糖≥16.7mmol/L者视为造模成功。分别给药或水,益气活血方剂量为0.9ml/100g体重,贝那普利片治疗剂量为0.9mg/100g。治疗4周后,肾脏组织进行电镜病理观察腹主动脉取血,室温静置1~2小时后,2500rpm离心10min,分离上清,存放于2.0ml冻存管中,-80℃保存备用,采用免疫组化法检测各组大鼠血清中NF-κB的表达。结果:与正常组比较,糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织中NF-κB表达明显上调,而益气活血方治疗后NF-κB表达又有所下调。结论:益气活血方可降低糖尿病大鼠肾脏蛋白排泄,其机制可能是通过抑制NF-κB活性有关。     

热毒宁注射液对LPS诱导ALI/ARDS小鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响

目的 探讨热毒宁注射液对LPS诱导急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)小鼠肺损伤的保护作用及对TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组、热毒宁注射液组、地塞米松(阳性药)组,每组6只,气管注射LPS溶液制备ALI/ARDS模型,造模后3 h给予各组相应药物,连续干预7 d后,检测小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平,HE染色观察肺组织病理改变,Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、IKKα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性、血清炎性因子水平和肺组织TLR4、MyD88、IKKα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01),肺泡腔增大,肺泡壁增厚,肺部有大量的炎性细胞浸润;与模型组比较,热毒宁注射液组和地塞米松组小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性、血清炎性因子水平和肺组织TLR4、MyD88、I...     

康莱特注射液对免疫低下小鼠的免疫功能及NF-κB蛋白表达的影响

目的：观察康莱特注射液对免疫低下小鼠的免疫功能以及核因子-kappaB（NF-κB）和IκB蛋白表达的影响。方法：将40只C57BL/6小鼠随机分为KLT高、低剂量组、模型组和空白对照组各10只。除空白对照组外,其余小鼠给予环孢素A建立免疫低下模型,同时KLT高、低剂量组每天腹腔注射KLT 25、6.25 mL/kg,连续给药7 d。取脾脏称重并计算脾脏指数,并检测脾细胞中IL-2的表达及脾脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达。结果：KLT高、低剂量组脾脏指数比模型组和空白对照组显著升高（P〈0.05）;与模型组相比,IL-2的表达在KLT高、低剂量组中显著升高（P〈0.05）;与模型组比较,KLT高、低剂量组NF-κB蛋白在胞核内表达升高,IκBα蛋白在胞质中表达降低。结论：KLT在免疫低下小鼠模型中,通过提高脾脏指数、IL-2的表达,以及对NF-κB、IκBα蛋白表达的影响,以达到提高机体免疫功能的目的。     

艾灸对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠血清炎性细胞因子、结肠组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)的影响,探讨艾灸干预IBS-D的机制。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和艾灸组,每组8只。采用慢性束缚联合番泻叶灌胃建立IBS-D大鼠模型。艾灸组大鼠予以艾灸"天枢""上巨虚",30 min/次,1次/d,共干预7 d。观察各组大鼠稀便率和直结肠扩张所引起腹部回缩反射(AWR)的最小容量阈值;ELISA法检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;HE染色观察各组大鼠结肠组织病理改变;免疫组织化学法检测各组大鼠结肠组织中TLR4和NF-κB(p65)的表达;实时荧光定量PCR法检测结肠组织中TLR4、MyD88和NF-κB(p65) mRNA的相对表达量;Western blot法检测结肠组织中TLR4、MyD88和NF-κB(p65)蛋白的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠结肠存在低度炎性反应,AWR的最小容量阈值显著下降(P<0.01),稀便率...