五子衍宗丸对GnRHa控制性超促排卵小鼠着床期S100A11基因的调控

目的:研究中药五子衍宗丸对GnRHa长方案控制性超促排卵(COH)小鼠着床期S100A11表达的影响,探讨COH影响胚胎着床的机制,寻求有效改善COH低妊娠率的中药方剂。方法:将60只小鼠随机分成3组:模型组(GnRHa+HMG+HCG),中药组(五子衍宗丸+GnRHa+HMG+HCG),对照组(生理盐水)。观察小鼠阴栓率和着床期子宫胚胎着床数及着床率;应用免疫组化法、RT-PCR和Western blot方法分别检测小鼠着床期子宫内膜S100A11 mRNA及蛋白的表达。结果:模型组胚胎着床数高于对照组和中药组(P0.01),但胚胎着床率和妊娠率均明显降低(P0.05)。模型组着床期子宫内膜S100A11mRNA及蛋白表达下降,与对照组和中药组比较均有明显差异(P0.05)。结论:中药五子衍宗丸可上调因GnRHa长方案COH所致下降的S100A11基因的表达,提高子宫内膜容受性,改善小鼠妊娠率和胚胎着床率。     

健胎液对围着床期小鼠子宫炎性细胞因子IL-1的影响

目的:探讨健胎液对胚胎着床障碍小鼠着床期子宫炎性细胞因子IL-1β及IL-1RⅠ的影响。方法:建立胚胎着床障碍的动物模型,分为三组,观察各组着床率和着床点数,妊娠第5天分别检测各组小鼠子宫内膜IL-1β的蛋白含量,以及子宫内膜IL-1β、IL-1RⅠ的mRNA水平。结果:模型组胚胎着床数、着床位点数与正常组比较显著降低(P0.01);中药组胚胎着床数、着床位点数与模型组比较明显升高(P0.05),但仍低于正常组(P0.05)。模型组子宫内膜IL-1β蛋白量同正常组、中药组比较明显升高,中药组IL-1β蛋白量同正常组比较无显著性差异。模型组IL-1β、IL-1RⅠ的mRNA表达水平同正常组比较显著升高,中药组IL-1RⅠ的mRNA表达水平同模型组比较明显降低,但仍比正常组水平高。结论:围着床期子宫内膜IL-1β、IL-1RⅠ参与胚胎着床的病理生理过程,健胎液可能通过调节IL-1表达,改善子宫内膜微环境,提高子宫内膜胚胎种植容受性,促进着床。     

二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫血管生成相关因子表达的影响

目的：探讨二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜形态及血管生成素-1（Ang-1）mRNA、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达和定位的影响。方法：24只ICR雌性小鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组、二补助育汤组，每组6只，用米非司酮建立胚胎着床障碍动物模型，各组给予相应药物灌胃，妊娠第5天处死小鼠后，检测各组妊娠率、平均着床位点数、子宫内膜Ang-1和VEGF mRNA表达量及其蛋白定位。结果：模型组小鼠平均胚胎着床位点数、Ang-1 mRNA、VEGF mRNA表达量明显低于空白组（均P<0.05）；与模型组比较，二补助育汤组平均胚胎着床位点数、Ang-1 mRNA、VEGF mRNA表达量显著提高（均P<0.05）。结论：二补助育汤可提高子宫内膜Ang-1和VEGF蛋白表达量，促进子宫内膜血管生成，从而提高子宫内膜容受性。     

针刺对促排卵治疗的多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜容受性的影响

目的：观察针刺对促排卵治疗的多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠子宫内膜容受性的影响,探讨其作用机制。方法：皮下脱氢表雄酮（DHEA）的麻油溶液制作多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠模型,对照组（Con）同期皮下注射麻油。PCOS大鼠随机分为模型组（M）、克罗米芬组（C）、克罗米芬＋针刺组（C＋A）,其中M组不做任何处理,其他各组均于80日龄起进行干预5天。治疗结束后,各组部分大鼠断头处死,留取血清、子宫和子宫内膜标本。各组另部分大鼠与雄鼠交配,于妊娠第8天处死,观察大鼠胚泡着床情况。结果：与C组相比,C＋A组大鼠血清E2水平较高,子宫内膜发育更好,子宫内膜容受性的标志分子蛋白及mRNA表达水平也更接近对照组（P〈0．01）,着床率和平均着床胚泡数也显著增加（P〈0．01）。结论：针刺能显著改善克罗米芬促排卵治疗导致的子宫内膜容受性不良状态,促进胚泡着床,可能通过调节血清E2水平、子宫内膜容受性的标志分子蛋白及mRNA表达而实现。     

寿胎丸对控制性超促排卵模型小鼠围着床期蜕膜TWEAK/Fn-14表达的影响

目的 研究寿胎丸对控制性超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation, COH)模型小鼠内膜容受性、植入胚胎数及围着床期蜕膜TWEAK/Fn-14动态表达的影响。方法 将ICR系小鼠分为对照组、COH模型组、寿胎丸组。COH模型建立：曲普瑞林+尿促性腺激素+人绒毛膜促性腺激素(曲普瑞林+HMG+HCG),3组小鼠分别于孕3、5、7天处死，取子宫，HE染色观察子宫内膜形态、腺体和血管，免疫组化法检测着床窗口期子宫内膜TWEAK、Fn-14的分布，RT-PCR、Western-blot检测TWEAK、Fn-14 mRNA和蛋白表达水平，孕第9天计算植入胚胎数。结果 模型组植入胚胎数显著低于对照组，寿胎丸处理后显著提高COH模型组小鼠植入胚胎数(P<0.05);HE染色显示，模型组小鼠子宫内膜厚度、腺体面积、血管数较对照组显著降低(P<0.05),寿胎丸干预后各指标显著升高(P<0.05);免疫组化结果显示，TWEAK主要分布于子宫腔上皮、腺上皮和基质细胞，Fn-14则主要表达与腔上皮和腺上皮细胞；RT-PCR及Western-blot结...     

补肾助孕方、逍遥丸对超促排卵小鼠围着床期妊娠结局和子宫内膜容受性的影响

目的研究补肾助孕方、逍遥丸对超促排卵小鼠妊娠结局和子宫内膜容受性的影响及可能作用机制。方法将240只动情周期正常的昆明系雌性小鼠随机分为正常组、模型组、补肾组、疏肝组,每组各60只。除正常组,其余各组小鼠建立控制性超促排卵模型。造模第1天始补肾组、疏肝组分别给予补肾助孕方混悬液(浓度1.5 g/mL)和逍遥丸混悬液(浓度0. 09 g/mL),均0.4 mL/(30 g·d)灌胃,模型组及正常组给予同等剂量蒸馏水灌胃,连续11天。比较各组小鼠围着床期血清雌二醇(E_2)、孕酮(P)、NO含量及子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白及其mRNA表达,测量子宫内膜厚度,观察小鼠内膜胞饮突表达,统计各组小鼠妊娠数、胚胎着床数。结果与正常组比较,模型组小鼠妊娠数、胚胎着床数减少(P0.05),同时模型组血清E_2、P降低,子宫内膜ER、PR蛋白,VEGF、eNOS蛋白及其mRNA表达,子宫组织匀浆内NO含量均降低(P0.05),子宫内膜厚度变薄,胞饮突发育不良;与模型组比较,补肾组、疏肝组小鼠妊娠数及胚胎着床数增加,血清E_2、P含量及子宫内膜ER、PR蛋白,VEGF、eNOS蛋白及其mRNA表达,子宫组织匀浆内NO含量均升高(P0.05),子宫内膜厚度增加,胞饮突发育接近正常组。结论补肾法、疏肝法均能够增加超促排卵小鼠妊娠率及胚胎着床数,其作用机制可能与调节雌、孕激素水平及其受体,影响VEGF、eNOS表达,调控NO释放,改善小鼠子宫内膜组织形态及血管通透性有关。     

肾虚型大鼠子宫内膜容受性及内膜形态结构的实验研究

目的 建立肾虚型子宫内膜容受障碍大鼠模型,探讨子宫内膜容受性与自然流产的相关性。方法 以羟基脲建立肾虚型子宫内膜容受障碍大鼠模型,比较模型组与正常对照组大鼠动情期内膜腺体腺腔个数、面积,腺上皮超微结构,血清雌二醇(E2)、黄体酮(P)含量。于模型大鼠妊娠第11天,比较模型妊娠组与正常妊娠组大鼠胚胎数及胚胎吸收率,血清E2、P含量。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠内膜腺上皮表面微绒毛分布稀疏,腺上皮细胞内可见较多空泡化线粒体,内质网数量较少,核糖体减少、散在。与正常妊娠组大鼠比较,模型妊娠组大鼠有胚胎数减少、胚胎吸收率增加的趋势,但差异无统计学意义。结论 羟基脲可复制子宫内膜容受障碍大鼠模型,该模型可用于因子宫内膜容受性不良导致的不孕、自然流产的相关研究。     

安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HOXa-10表达的影响

目的:观察安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HOXa-10表达的影响,探讨其对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及其机制。方法:将有规律动情周期的雌性小鼠随机分为正常组、模型组和中药组,每组25只。先期用安坤种子丸对中药组小鼠进行灌胃,雌、雄合笼后观察雌鼠阴栓率,妊娠第4天对中药组和模型组小鼠颈背部皮下注射米非司酮进行干预,制成胚泡着床障碍模型;于妊娠第5、6天处死小鼠,留取子宫标本。采用Q-PCR技术和免疫组化方法检测小鼠子宫内膜HOXa-10基因及蛋白的表达;同时制备HE切片以观察各组小鼠子宫内膜形态结构的变化,统计分析各组间妊娠率、平均着床胚泡数及着床率等指标的变化。结果:安坤种子丸可以提高胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HOXa-10基因及蛋白的表达,妊娠率、平均着床胚泡数及着床率等指标虽低于正常组,但高于模型组。结论:安坤种子丸可能通过提高雌鼠子宫内膜上HOXa-10基因及蛋白的表达,一定程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

活血消异方对子宫内膜异位症妊娠功能低下模型小鼠HOXA10基因的影响

目的:通过观察中药活血消异方对子宫内膜异位症妊娠功能低下模型小鼠着床窗口期子宫内膜HOXA10基因表达量的影响,探讨子宫内膜异位症对子宫内膜容受性的影响机制以及活血消异方对子宫内膜异位症相关不孕症子宫内膜容受性改善的作用机理。方法:建立子宫内膜异位症妊娠功能低下的小鼠模型,随机分为模型组、中药组及假手术组,采用RT-PCR法检测各组小鼠种植窗口期子宫内膜HOXA10的表达水平。结果:假手术组种植窗口期子宫内膜HOXA10mRNA表达量高于中药组及模型组,差异有统计学意义(P0.05);而中药组种植窗口期子宫内膜HOXA10mRNA表达量高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:子宫内膜异位症可导致小鼠种植窗口期HOXA10mRNA表达下调,进而降低其子宫内膜容受性。而中药活血消异方可上调小鼠子宫内膜HOXA10mRNA的表达,改善着床窗口期子宫内膜容受性。     

电针对控制性超排卵小鼠子宫内膜同源盒基因A10表达时相的影响

目的 观察电针对控制性超排卵(COH)小鼠子宫内膜同源盒基因A10(HOXA10)表达时相的影响,探讨电针提高体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床妊娠率的作用机制.方法 共有150只雌性和80只雄性小鼠,取50只雌性鼠为自然周期组,剩余100只雌鼠制备COH模型并随机分为COH组(50只)和电针组(50只).各组内再...     

补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜P21表达的影响

目的：观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠着床部位子宫内膜中周期素依赖的蛋白激酶抑制物P21和增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法：采用免疫印迹法观察胚泡植入 ［即妊娠第6天(pregnancy day 6,Pd6),Pd7和Pd8］时P21在整个子宫中的表达,采用免疫组化法进一步定位观察着床部位子宫内膜中PCNA和P21的表达。结果：与对照组相比,模型组子宫内膜PCNA和P21的出现和消失在时间和空间上均明显滞后；补肾益气和血方能促进PCNA和P21及时有序地表达或消失,从而改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜的蜕膜反应。结论：补肾益气和血方可通过促进子宫内膜的蜕膜反应来改善胚泡着床,其作用机制与其促进子宫内膜PCNA和P21时空有序地表达和消失密切相关。     

经皮穴位电刺激改善冻融胚胎移植周期患者子宫内膜容受性的临床研究

目的观察经皮穴位电刺激对行IVF冻融胚胎移植周期患者的子宫内膜容受性的影响。方法将90例IVF-ET周期中因不明原因子宫内膜生长不良而受孕失败的患者随机分为两组,观察组从月经第5 d起使用经皮穴位电刺激进行干预,至下次月经来潮为1疗程,2个疗程后,第三个月经周期自月经第五天开始每日一次经皮穴位电刺激治疗,直至排卵日,排卵后给与黄体酮100 mg/d黄体支持,排卵后三天行胚胎移植术;对照组于复苏周期当月月经第5天起每日口服戊酸雌二醇2 mg,口服12 d后加用黄体酮100 mg/d进行黄体支持,两组移植术后都加用HCG2000U,im,qod,连用3支。比较两组患者治疗前一般情况,复苏周期移植前子宫内膜厚度及内膜类型、子宫粘膜下血流参数、生化妊娠率及临床妊娠率。结果观察组移植前厚度及内膜类型较对照组改善明显（P〈0.05）。子宫内膜下血流参数中,观察组阻力指数（RI）及波动指数（PI）明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。临床妊娠率方面,观察组高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论经皮穴位电刺激能促进子宫内膜生长,改善子宫内膜容受性,促进胚胎着床,提高临床妊娠率。     

艾迪注射液对DEN诱导型肝癌大鼠体内细胞色素P450酶表达的影响

目的:观察艾迪注射液(AD)对二乙基亚硝胺(DEN)化学诱导的原发性肝癌(HCC)大鼠体内细胞色素P450(CYP450)4种亚型酶CYP1A2,CYP2E1,CYP3A2,CYP2C11 mRNA和蛋白表达的影响.方法:健康SD雄大鼠随机选取3只作为空白组,余下大鼠采用DEN间断性诱导原发性肝癌大鼠模型,模型成功后随...     

黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠氧化应激及铁死亡相关指标GSH-Px4，P53，SLC7A11的影响

目的:探讨黄芩汤治疗溃疡性结肠炎(UC)的可能作用机制。方法:采用葡聚糖硫酸钠进行造模,实验分正常组,模型组,黄芩汤低、中、高剂量组(4.55,9.1,18.2 g·kg^-1)5个组。造模同时给予灌胃给药,连续7 d,第8天实验结束时采集标本测量结肠长度、质量,计算结肠质量指数,苏木素-伊红(HE)染色观察病理变化,生化试剂检测小鼠血清铁离子,超氧化物歧化酶(SOD),还原型谷胱甘肽(GSH),过氧化氢酶(CAT),髓过氧化物酶(MPO)等含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠中长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4),谷胱甘肽过氧化物酶4(GSH-Px4),铁蛋白重链(FTH1)蛋白的表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测结肠组织中肿瘤蛋白53(P53),胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清MPO,铁离子含量,ACSL4蛋白阳性表达及P53 mRNA表达均明显升高(P<0.05),血清SOD,CAT,GSH含量,GSH-Px4,FTH1蛋白表达及SLC7A11 mRNA表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,黄芩汤干预后,小鼠血清MPO,铁离子含量,ACSL4蛋白阳性表达及P53 mRNA表达均明显降低,血清SOD,CAT,GSH水平,GSH-Px4,FTH1蛋白表达及SLC7A11 mRNA表达均明显升高,且以高剂量组差异明显(P<0.05,P<0.01)。小鼠一般状态、结肠长度、肠重指数及HE染色结果表明,黄芩汤可在不同程度上改善小鼠临床症状及病理组织学变化。结论:以上结果表明黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠有治疗作用,其作用机制可能与抑制氧化应激及细胞铁死亡相关。     

健胎液对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素及其受体的影响

目的探讨健胎液促进胚泡着床障碍小鼠子宫内膜发育的机制。方法采用米非司酮诱导的小鼠胚泡着床障碍模型,予健胎液进行干预,于妊娠第8天处死小鼠,留取血清及子宫标本,采用放免法检测血清和子宫局部雌二醇(E₂),孕酮(P)含量,采用免疫组化技术检测子宫雌,孕激素受体(ER,PR)表达。结果各组血清和子宫组织E₂,P含量无显著差异(P>0.05);中药组子宫内膜腺体、间质ER,PR表达范围和强度均较模型组显著增高(P<0.05),与正常组无差异(P>0.05)。结论健胎液通过促进胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体、间质的ER,PR表达,改善子宫内膜的发育,利于胚泡着床。