缺氧环境下的肝星状细胞中缺氧诱导因子1α与缺氧诱导因子2α对CD248表达水平影响

目的探究缺氧状态下的肝星状细胞(HSC)中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子2α(HIF-2α)对内皮唾液酸蛋白(endosialin/CD248/TEM1)表达水平的影响。方法首先,通过对布-加综合征(BCS)患者肝组织样本进行HIF-1α、HIF-2α和CD248免疫组化染色,并通过计算HIF-1α、HIF-2α和CD248的免疫组化累积光密度(IOD)值来分析CD248与HIF-1α、HIF-2α之间表达的相关性。其次,将成功包装的HIF-1α、HIF-2α过表达慢病毒和空载慢病毒分别感染体外培养的LX-2人肝星状细胞(HSC-LX2),并使用CoCl2进行低氧诱导处理。使用β-actin作为内参基因,通过定量聚合酶链反应技术观察缺氧环境下过表达慢病毒和空载慢病毒感染的HSC-LX2细胞中CD248基因表达水平,并对数据进行统计学分析。结果通过对BCS患者肝组织样本HIF-1α、HIF-2α和CD248的IOD值进行检测,显示CD248与HIF-1α(Pearson相关系数:r=0.285,P=0.010)和HIF-2α(Pearson相关系数:r=0.382,P<0.001)的表达水平呈现显著的正相关。定量聚合酶链反应技术检测显示,与空载慢病毒感染的HSC-LX2细胞比较,HIF-1α与HIF-2α过表达慢病毒感染的HSC-LX2细胞中CD248的表达丰度均明显升高(P均<0.05)。结论在缺氧状态下的HSC中,HIF-1α、HIF-2α均可能参与调控CD248基因表达增加。     

缺氧诱导因子HIF—1α与恶性肿瘤

IBF-1α是与恶性肿瘤生长进程密切相关的转录调节因子，瘤细胞氧状态及基因变异共同调控HIF-1α表达水平及其活性。HIF—1α高表达在人体恶性肿瘤中广泛存在。HIF-1α高表达对肿瘤组织放化疗敏感性有显著影响，体外实验表明针对HIF-1α的靶向药物和基因治疗能够通过主动下调HIF-1α表达水平，抑制肿瘤细胞生长。因此研究HIF—1α对肿瘤生长、侵袭、转移、预后和诊治等方面都有重要意义。     

糖尿病大鼠视网膜组织中缺氧诱导因子-1α、内皮素-1的表达研究

目的检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）与内皮素-1（ET-1）在糖尿病视网膜组织中的表达变化,探讨其在糖尿病视网膜病变（DR）发生、发展中的作用。方法将SD大鼠随机分为对照组（CON）和糖尿病（DM）组。其中糖尿病组采用STZ一次性尾静脉注射建立糖尿病模型,制模成功后分别于2、4、8、12周处死大鼠,取眼球组织,应用免疫组化和放免法检测各组大鼠视网膜组织中HIF-1α、ET-1的表达变化。结果免疫组织化学染色显示正常对照组大鼠视网膜不表达HIF-1α,DM组2周时有少量表达,4周时阳性细胞数量增多,8周达到高峰,12周时表达已降低,各组之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。经放免法测定,对照组大鼠视网膜组织中仅有少量ET-1,而DM组大鼠随病程延长,视网膜组织中的ET-1含量呈进行性增加。各组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HIF-1α与其下游基因ET-1在DM病程中的表达变化提示二者可能与视网膜组织的损伤有关,并在DR的发生、发展中发挥重要作用。     

缺氧诱导因子1α活性调节机制及其应用进展

缺氧诱导因子1α作为维持内环境氧平衡的核心调控因子,调控一系列缺氧相关基因的表达,在传递缺氧信号的过程中发挥重要作用。通过其转录激活参与对低氧反应基因的调控,从而使机体对低氧刺激作出复杂的病理生理反应。在缺氧诱导因子1α的转录活性调节机制中,羟基化调节和磷酸化调节起主导作用。     

缺氧诱导因子HIF-lα与恶性肿瘤

HIF-lα是与恶性肿瘤生长进程密切相关的转录调节因子,瘤细胞氧状态及基因变异共同调控HIF-lα表达水平及其活性.HIF-lα高表达在人体恶性肿瘤中广泛存在.HIF-lα高表达对肿瘤组织放化疗敏感性有显著影响,体外实验表明针对HIF-lα的靶向药物和基因治疗能够通过主动下调HIF-lα表达水平,抑制肿瘤细胞生长.因此研究HIF-lα对肿瘤生长、侵袭、转移、预后和诊治等方面都有重要意义.     

低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α蛋白和血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的:探讨低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响.方法:选用健康雄性SD大鼠72只,随机分为9组.采用递增负荷跑台训练及低氧、超低氧两种不同程度的递增低氧刺激,在运动中和运动后给予低氧处理.应用免疫组织化学、原位杂交、计算机显微图像分析等方法,检测HIF-1α、VEGF mRNA在骨骼肌组织中的定位及含量.采用相关分析方法,分析低氧训练骨骼肌HIF-1α蛋白表达对骨骼肌VEGF转录的促进作用.结果与结论:低氧和运动训练可增加骨骼肌组织HIF-1α蛋白和VEGF mRNA含量,低氧训练骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达的增加对VEGF基因转录具有促进作用.     

缺氧诱导因子1α、微血管密度在前列腺癌中的表达

目的检测前列腺癌组织中缺氧诱导因子-1浕(HIF-1浕)和微血管密度(MVD)的表达,探讨HIF-1浕和MVD在前列腺肿瘤发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学两步法测定30例前列腺癌和15例良性前列腺增生(BPH)组织标本中HIF-1α的表达和MVD计数,对HIF-1浕的表达和MVD值之间的相关性进行分析。结果 HIF-1α在前列腺癌中的表达显著高于BPH(P<0.05),与肿瘤病理分级、临床分期和远处转移密切相关。前列腺癌组织中MVD计数也显著高于BPH组织,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。前列腺癌组织中HIF-1α的表达和MVD计数之间呈正相关(r=0.835,P<0.05)。结论 HIF-1α与前列腺癌的新生血管形成密切相关,提示HIF-1α可能在促进前列腺癌的发生、发展中起重要作用。     

缺氧诱导因子-1α基因多态性和乳腺癌易感性关系的Meta分析

目的 运用Meta分析方法评价缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)基因多态性与乳腺癌发生的关系。方法 检索PubMed、Cochrane Library、中国期刊全文数据库、万方数据库等数据库中所有关于HIF-1α基因多态性与乳腺癌易感关系的相关文献,合并各研究的OR值进行Meta分析。结果 HIF-1α C1772T基因多态性与乳腺癌发生的研究共纳入9篇文献,乳腺癌患者2 787例,对照组2 686例,G1790A基因多态性与乳腺癌风险的研究共纳入4篇文献,其中乳腺癌患者796例,对照组651例。Meta分析结果表明,C1772T以及G1790A基因型均与乳腺癌发病风险无明显相关。排除了对照组基因分布不符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律后,对C1772T基因多态性与乳腺癌关系进行敏感性分析,结果表明显性模型（TT vs CT+CC）以及（TT vs CC）与乳腺癌发生有密切关系[OR=2.61,95%CI(1.32~5.15),P=0.006;OR=2.62,95%CI(1.33~5.16),P=0.005];对G1790A基因多态性研究进行敏感分析,未发现对总体分析结果有明显影响。结论 HIF-1α C1772T基因隐性模型个体发生乳腺癌风险可能增加,但HIF-1α基因多态性与乳腺癌发病风险之间的关系尚不明确。     

缺氧诱导因子1α、多药耐药相关蛋白1在脊索瘤中的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白、多药耐药相关蛋白1(MRP1)在脊索瘤中的表达水平及其与脊索瘤病理特征和放化疗抵抗之间的关系。方法收集2000年1月-2008年12月接受手术治疗的50例脊索瘤患者的肿瘤组织石蜡标本,另取15例骨软骨瘤标本作为对照。50例脊索瘤患者中男35例,女15例;年龄17～77岁,平均53.3岁;原发病例26例,复发病例24例;病理类型包括普通型48例,去分化型1例,外周型1例。采用免疫组化Envision法检测HIF-1α、MRP1蛋白表达情况,分析其与放化疗抵抗的关系,并探讨HIF-1α、MRP1表达与脊索瘤临床病理特征的关系。结果50例脊索瘤组织HIF-1α、MRP1的阳性表达率分别为80%和74%,均明显高于骨软骨瘤组织(分别为20%和27%,P<0.01)。相关性分析显示,脊索瘤组织中HIF-1α与MRP1的表达呈正相关关系(r=0.80,P<0.01)。脊索瘤组织中HIF-1α、MRP1的表达水平与患者性别、年龄、发病次数及肿瘤大小、部位、分化程度、分期、淋巴结转移均无明显关系。结论脊索瘤组织中HIF-1α和MRP1表达明显增高,且两者表达水平呈正相关,其过度表...     

TACE联合内皮抑制素治疗兔VX2肝移植瘤MRS特征与细胞凋亡的对照研究

目的:通过分析TACE联合内皮抑制素(ES)治疗兔VX2肝移植瘤后1 H-MRS与凋亡指数(AI)及细胞密度的关系,探讨1 H-MRS对治疗疗效评价的生物学基础.方法:24只新西兰大白兔采用直视下瘤组织块包埋法建立兔VX2肝移植瘤模型,随机分为TACE联合ES组、ES组和对照组.观察肿瘤治疗前后1 H-MRS所得的Cho峰值与Lip峰值及Cho/Lip峰值比的变化情况;免疫组织化学法及HE染色检测治疗后肿瘤组织AI及细胞密度,并将二者分别与1H-MRS所得数据进行对比分析.结果:兔VX2肝移植瘤治疗后两个治疗组肿瘤组织Cho峰值及Cho/Lip峰值比降低幅度较对照组大,而Lip峰值升高幅度较大;移植瘤治疗后TACE联合ES组和ES组肿瘤组织AI值均高于对照组,TACE联合ES组肿瘤组织AI值高于ES组(P＜0.05);TACE联合ES组细胞密度最低,ES组次之,对照组最高(P＜0.05);AI与Cho峰值及Cho/Lip峰值比呈负相关(r=-0.552,P=0.018;r=-0.737,P=0.001),与Lip峰值呈正相关(r=0.710,P=0.009);细胞密度与Cho峰值呈正相关(r=0.701,P=0.011).结论:TACE联合应用ES更容易促进肿瘤细胞凋亡,1 H-MRS能有效反映肿瘤治疗前后组织学改变.     

兔VX2肝移植瘤TACE治疗前后ADC值与细胞密度的相关性研究

目的：探讨兔VX2肝移植瘤模型TACE治疗前后磁共振扩散加权成像的ADC值与细胞密度的相关性研究。方法：建立兔VX2肝移植瘤动物模型,并随机分为对照组（n=10）和TACE组（n=10）。接种后用二维超声监测肿瘤生长至1～2cm大小,对照组经肝动脉插管给予生理盐水10ml;TACE组给予超液化碘油2mg/kg和阿霉素2mg／kg。介入术前和术后第7天（处死动物前）行DWI检查,观察介入治疗前后肿瘤的磁共振信号及表观扩散系数（ADC值）变化情况。据常规HE染色计算细胞密度,分析肿瘤治疗前后的ADC值和细胞密度的变化及其相关性。结果：对照组不同b值所对应正常肝组织的ADC值明显高于肿瘤组织的ADC值（P〈0．05）,对照组在注人生理盐水前后的ADC值差别无统计学意义（P〉0．05）,肿瘤组织的ADC值与细胞密度呈负相关关系（P〈0．05）。TACE组介入治疗前ADC值高于治疗后的ADC值,差别有统计学意义（P〈0．05）,肿瘤TACE术后ADC值与细胞密度存在负相关性（P〈0．05）,且介入术后TACE组肿瘤细胞密度较对照组降低（P〈0．05）。结论：肿瘤组织与正常肝脏ADC值存在显著差异,ADC值能反映出肿瘤治疗前后组织微观结构的改变,可用于评估肿瘤增殖情况及治疗疗效。     

耐药VX2肝癌模型的建立

目的　探讨应用经化疗药物诱导后传代的VX2肿瘤建立移植性耐药肝癌模型的可行性。方法　将 2 0只大耳白兔随机分为 4组 ,建立肝癌模型。A、B组和C、D组植入肿瘤分别取自常规传代和药物诱导后的传代兔。模型建立 3周后 ,增强CT检查确定肿瘤大小。直视下穿刺肝动脉 ,A、C两组注入阿霉素 (4mg/2ml) ,B、D两组注入等量生理盐水。 1周后CT复查 ,比较各组肿瘤倍增率。流式细胞仪检测各组肿瘤凋亡率。结果　模型建立 3周后各组肿瘤大小无明显差异。治疗 1周后增强CT复查 ,各组肿瘤体积均增大。其中 ,A组肿瘤倍增率显著低于其他组 (P <0 .0 5 ) ;C组低于B、D组 ,但各组间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。A组肿瘤凋亡率显著高于其他组 (P <0 .0 5 ) ;C组高于B、D组 ,但组间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　通过药物诱导建立的移植性兔VX2肝癌模型具有明显耐药特征 ,可作为耐药肝癌模型用于肝癌全身与介入性药物治疗的实验研究。     

兔VX2肝转移性肿瘤模型的建立

兔VX2肝移植瘤模型是较为理想的肝癌实验模型,便于检测肿瘤生长、治疗情况.笔者于2009年10月至2010年10月期间采用经导管注入瘤组织悬液的方法制作兔VX2肝转移性肿瘤模型,并行MRI和病理检查对模型进行评价.     

Lp-THAE诱导兔VX2肝癌细胞凋亡

目的 研究Lp-THAE诱导兔肝VX2肿瘤细胞凋亡.方法 27只新西兰大白兔种植性VX2肝癌,均分成Lp-THAE组、THAI组和对照组,处理后2～5 d处死动物,在肿瘤中央部位、外周部位和非瘤肝区正常组织取材.采用HE染色光镜观察典型凋亡细胞、计算凋亡指数,FTTC-Annexin V/PI双染色双变量流式细胞术分析凋亡细胞百分率.结果 THAE组肿瘤中央与外周部位的凋亡指数分别为(17.769±2.417)%.(4.129±1.172)%,P＜0.01,凋亡细胞百分率分别为(16.483±1.404)%,(9.478±0.964)%,P＜0.01,坏死细胞百分率分别为(43.559±5.053)%,(33.460±1.840)%,P=0.093.凋亡细胞与坏死细胞百分率总和分别为(60.042±13.979)%,(42.938±8.979)%,P＜0.01.THAE组的肿瘤细胞凋亡指数、凋亡细胞百分率和坏死细胞百分率都显著大于THAI组和对照组(P＜0.01),肿瘤中央部位的细胞凋亡指数、凋亡细胞百分率都显著大于肿瘤外周部位(P＜0.01).结论 Lp-THAE诱导肿瘤细胞凋亡和引起肿瘤细胞坏死是其作用机制的两种形式.