2000年度福建省科技进步奖获奖成果简介(2)大鼠延髓腹面尾端心血管中枢对心率和血管紧张性的调控及其机制

完成单位 :福建医科大学基础医学院主要完成人员 :王　晶 ,林　春 ,贾秉均 ,林　莘 ,林默君研究起止时间 :1 993年 1 1月～ 1 996年 1 1月获奖种类及等级 :福建省科技进步二等奖延髓尾端降压区 ( VSMd)兴奋使 AP下降、心率变慢、肾灌流压 ( PPk)下降。肾上腺素能 α或 β受体阻断剂预先注入延髓头端升压区 ( VSMp) ,能衰减 AP、PPk的下降效应但对心率无影响。荷包牡丹碱注入 VSMp不但使 AP上升且 VSMd的降压效应被翻转。提示 VSMp内的 γ氨基丁酸能中间神经元对加压神经元起抑制作用。延髓尾端升压区 ( CPA)兴奋使心率加快、AP…     

刺激大鼠延髓腹面降压区对心率和肾血管紧张性的影响

研究大鼠延髓腥面降我对心率和肾血管紧张性的影响及其机制。方法，采用延髓腹外侧部向量注射法，以整体灌流肾为模型，观察延髓腹面加压区预先注入不同受体阻断对延髓腹面降压区心血管效应的影响。结果（１）Ｌ－谷氨酸（Ｌ－ｇｌｕ）刺激大鼠延髓腹面降压区（ＶＭｄ），可见平均动脉压下降，心率（ＨＲ）减慢，肾灌流压（ＰＰｋ）下降。（２）延髓腹面升压区（ＶＳＭｐ）预先注射普萘洛尔或酚妥拉明，均能明显衰减Ｌ－ｇｌｕ兴奋Ｖ     

脊髓蛛网膜下腔注射肾上腺素受体拮抗剂及激动剂对延髓腹面升压区引起的肾神经电活动的影响

实验在38只乌拉坦麻醉的大鼠进行,观察下胸段(T_8～T_(10))蛛网膜下腔微量注射α肾上腺素受体拮抗剂或激动剂,对延髓腹面升压区(VSMP)兴奋所诱发的肾交感神经电活动(RSNA)的影响。结果表明:(1)下胸段蛛网膜下腔微量注射α_1;受体拮抗剂哌唑嗪衰减了L—谷氨酸作用于VSMp诱发的RSNA增强效应;(2)哌唑嗪的衰减作用表现明显的量效依赖性;(3)α_1受体激动剂苯肾上腺素在提高RSNA基础电活动的同时,加强了VSMp兴奋所诱发的RSNA增强效应,提示下胸段SPN的α_1肾上腺素受体参与介导延髓腹面升压区调控肾交感神经电活动过程。     

促甲状腺素释放激素对家兔延髓腹侧面加压区的升压作用

在72只乌拉坦麻醉,切断双侧颈迷走神经,制动和人工呼吸的家兔上,用局部给药的方法,观察到促甲状腺激素释放激素(TRH)作用于延髓腹侧面加压区(VSMp)可使血压呈具有剂量-效应关系的明显增高,这种作用主要是由局部的α_1受体介导的,似乎与α_2、β受体无关。在 VSMp 预先给予纳络酮,可显著增强 TRH 的升压效应。预先在延髓腹侧面减压区(VSMd)给予酚妥拉明,可使 TRH 在同侧 VSMp 的升压效应显著增强。预先在一侧孤束核区微量注射甘氨酸,可显著增强 TRH 在同侧 VSMp 的升压效应。     

GABA能中间神经元在外侧下丘脑降压反应中的作用

目的：分析外侧下丘脑（LH）降压反应的机制。方法：大鼠脑内或静脉注射不同药物，观察血压和心率的变化。结果：L-谷氨酸（Glu）兴奋LH引起的降压反应可被酚妥拉明、心得安或甲基阿托品（i．v．）衰减，也可被延髓头端腹外测区（RVL）内分别注射酚妥拉明、心得安、阿托品或GDEE（Glu拮抗剂）削弱。进一步的实验显示LH降压区内预先注射GABA受体阻断剂荷包牡丹碱可反转Glu兴奋该区引起的降压反应。结论：Glu兴奋LH降压区可能通过其内的GABA能中间神经元抑制LH升压反应而产生降压效应。     

尾端延髓腹外侧区咪唑啉受体在可乐定中枢降压效应中的作用

目的:探讨大鼠尾端延髓腹外侧区(CVLM)在介导可乐定降压机制中的作用.方法:氨基甲酸乙酯麻醉SD大鼠20只,体质量250～350 g,应用微量注射和动脉插管记录血压等方法观察CVLM给予咪唑啉1和α2-肾上腺素受体阻断剂对可乐定导致的心血管活动的影响.结果:双侧CVLM预先微量注射咪唑啉1和α2-肾上腺素受体阻断剂idazoxan(5 nmol)不仅能降低平均动脉血压[(-17.3±6.9)mmHg,1 mmHg=0.133 kPa,P＜0.01]和心率[(-23.9±3.6)次/min,P＜0.01],而且能完全阻断静脉注射可乐定(10 μg/kg)导致的降压[(-29.5±6.1)vs(-1.4±2.3)mmHg,P＜0.01]和降心率效应[(-30.8±6.7)vs(-3.0±4.6)次/min,P＜0.01],而预先CVLM微量注射α2-肾上腺素受体阻断剂育亨宾(500 pmo1)则不能影响可乐定导致的心血管效应.结论:CVLM咪唑啉受体1参与可乐定的中枢降压效应.     

缩血管药与扩血管药在休克治疗应用的药理学基础

抗肾上腺素药 (一)α受体阻断剂:苯苄胺和苄胺唑啉。这类药物对α—肾上腺素能受体有高度选择性,能完全及持久地阻断拟肾上腺素药对α受体的兴奋作用,它们能将肾上腺素的升压效应反转为降压,这种现象称为“肾上腺素效应的反转”,这是因为它阻断了同血     

去甲肾上腺素对腹外侧视前区神经元的作用途径研究

目的 研究去甲肾上腺素(NA)对腹外侧视前区(VLPO)中两种类型神经元(促睡眠神经元和中间神经元)的作用途径.方法 采用全细胞膜片钳技术,通过药理学方法在C57BL/6小鼠脑片上,研究NA对VLPO中两种类型神经元兴奋或抑制作用的途径.通过RT-PCR鉴定VLPO脑区NMDA受体表达的类型.结果 电生理结果显示,NA(100 μmol/L)对VLPO中间神经元的兴奋作用能被NMDA受体阻断剂(AP5)阻断(P＜0.05,n = 8),不能被AMPA受体阻断剂(CNQX)和γ-氨基丁酸受体阻断剂阻断.NA(100μmol/L)对VLPO促睡眠神经元的抑制作用均不能被AP5、CNQX和氟马西尼(flumazenil)阻断.RT-PCR结果显示NM-DA 受体的3种亚型(GluN2A、GluN2B、GluN1)在VLPO中均有表达.结论 NA对VLPO中间神经元的兴奋作用是通过谷氨酸能神经元释放谷氨酸引起的间接效应,该兴奋效应由VLPO中间神经元上的NMDA受体介导.     

中枢α_2-肾上腺素能受体对家兔脑室注射P物质所致升压反应的抑制作用

将 Ｐ 物质（ｓｕｂｓｔａｎｃｅ Ｐ, Ｓ Ｐ,０ ．２０ ．９ ｎｇｋｇ） 注入家兔第四脑室（ｉｃｖ） 引起肺动脉压（ Ｐ Ａ Ｐ） 升高或降低,但以升压反应为主。与此同时,颈动脉压（ Ｃ Ａ Ｐ） 上升,心率（ Ｈ Ｒ） 减慢。若预先ｉｃｖ α２肾上腺素能受体阻断剂育亨宾（４５ μｇ） 可增强 Ｓ Ｐ 引起的肺动脉和颈动脉升压反应;预先ｉｃｖ α１肾上腺素能受体阻断剂哌唑嗪（１５ μｇ） 可阻断这两个升压反应,而普萘洛尔（１００ μｇ） 对这两个升压反应无明显影响。以上结果表明, Ｓ Ｐ 引起的肺动脉和颈动脉升压反应是由脑中的α１肾上腺素能受体介导的,而中枢α２肾上腺素能受体系统对传递 Ｓ Ｐ 中枢加压作用的路径有抑制性的调制作用。     

大鼠延髓腹面升压区下行通路在脊髓介导因素的研究

46只300～400g 雄性 Wistar 大鼠,氨基甲酸乙酯腹腔麻醉,以肾交感神经电活动(RSNA),平均动脉压(MAP)为主要指标从延髓背面探查延髓腹面升压区(VSMp),观察 T_(8～10)蛛网膜下腔微量给药对 VSMp 兴奋诱发的 MAP,RSNA 的影响。结果表明:(1)VSM 升压区位于闩上2.0～2.5mm,中线旁开1.5～1.8mm,背面下3.5～4.0mm 范围内;(2)电刺激或 L-谷氨酸作用于 VSMp,增强 RSNA,提升 MAP 的效应;(3)诱发的 RSNA 增强、提升 MAP 的效应可被蛛网膜下腔 T_(8-10)节段微量注射哌唑嗪阻断,不受育亨宾影响。提示 VSMp 对外周交感紧张性调控作用属于神经元性,其下行性兴奋交感神经活动在脊髓的介导因素可能属于α_1受体。     

大鼠外侧隔在中央杏仁核情绪升压系统中作用的实验研究

目的 本实验在于分析乙酰胆碱-外侧隔(Ach-SL)升压系统与中央杏仁核(AC)情绪升压环路之间的关系.方法 脑内核团微量注射不同的药物,记录血压和心率的变化.结果 (1)促肾上腺素(CRF)或P物质(SP)注射入双侧SL可引起升压反应.L-谷氨酸钠(Glu)微量注射到AC的升压反应均被双侧SL内注入CRF或SP拮抗剂所减弱.(2)阿托品(Atro)预先注入双侧外侧僵核(HBL)、蓝斑(Lc)、延髓头端腹外侧区(RVL),Glu对AC的升压反应可被减弱.(3)HBL有Ach能神经纤维投射到背侧丘脑后核(HP)并兴奋HP,HP又通过RVL、LC-RVL产生升压反应.Atro预先注入HP可减弱Glu对AC的升压反应.结论 用Glu兴奋SL能依此有效地兴奋HBL、LC、RVL,此系统的各个通路由M-受体介导,SL-HBL(或HBL-HP)-LC-RVL的升压系统参与AC情绪升压环路.     

脊髓α_1肾上腺素能受体参与毒扁豆碱的中枢升压反应

大鼠脊髓蛛网膜下腔注射α受体阻断剂酚妥拉明可引起血压降低和心率减慢,并可减弱延髓腹侧面头端应用毒扁豆碱引起的升压反应和增心率反应。α_1受体阻断剂苯苄胺有类似作用,而α_2受体阻断剂育亨宾和β受体阻断剂心得安无明显效应。用5-羟色胺合成抑制剂对氯苯丙氨酸预处理对毒扁豆碱的心血管效应也无明显影响。提示脊髓的α_2受体参与心血管活动的紧张性调节并能影响毒扁豆碱所引起的心血管效应,而延髓下行到脊髓的5-羟色胺能神经元通路不参与毒扁豆碱所引起的心血管效应。     

GABA能中间神经元在外侧下丘脑降压反应中的作用

分析外侧下丘脑降压反应的机制。方法：大鼠脑内或静脉注射不同药物，观察血压和心率的变化。Ｌ－谷氨酸兴奋ＬＨ引起的降压反应可被酚妥拉明，心得安或甲基阿托品衰减，也可被延髓头端腹外侧区内分别注射酚妥拉明，心得安，阿托品或ＧＤＥＥ削弱。进一步的实验显示ＬＨ降压区内预先注射ＧＡＢＡ受体阻断剂荷包牡庆碱可反转Ｇｌｕ兴奋该区引起的降压反应。     

延髓腹面降压区与肾血管阻抗的关系（Ⅱ）

实验用３００～３５０ｇ雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，氨基甲酸乙酯腹腔麻醉。电刺激或Ｌ－谷氨酸微量注射于切断双侧迷走神经的大鼠延髓腹面降压区（ＶＳＭｄ），在降压反应的同时，肾血管灌流压（ＰＰｋ）下降。ＰＰｋ的下降依赖于肾神经及肾血管内皮的完整性，并近似于特异性α＿２肾上腺素受体阻断剂育亨宾灌流肾血管的反应。实验表明，ＶＳＭｄ的兴奋通过抑制肾交感神经对肾血管的基础紧张性影响，该影响依赖血管内皮，内皮损毁后，ＶＳＭｄ降ＰＰｋ的效应被取消。     

L-Arg-NO通路对大鼠延髓腹面加压区心血管活动的影响及与L-Glu通路的关系

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）前体Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）单侧微量注入大鼠延髓腹面加压区（ＶＳＭｐ）对动脉血压（ＡＰ）、心率（ＨＲ）、肾灌流压（ＰＰｋ）的影响及与Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）升压作用的关系。方法 采用延髓腹外侧部微量注射法,以整体灌流肾为模型观察与ＮＯ有关药物对心血管活动的影响。结果 （１）ＶＳＭｐ内微量注入Ｌ－Ａｒｇ（４０～１００ｎｍｏｌ）,ＡＰ和ＨＲ呈剂量依赖性下降,与生理盐水注入后的变化相比较,差异均有显著性。如预先注入ＮＯ合酶抑制剂Ｌ－硝基－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）或鸟苷酸环化酶抑制剂甲基蓝,Ｌ－Ａｒｇ的降压效应被衰减。（２）ＶＳＭｐ内微量注入Ｌ－Ａｒｇ（１００ｎｍｏｌ）,ＰＰｋ与ＡＰ同步下降,与基础值比较,差异有显著性。（３）ＶＳＭｐ内微量注入Ｌ－Ｇｌｕ（３５０ｎｍｏｌ）,ＡＰ上升。如预先注     

谷氨酸注入下丘脑的背内侧核引起升压反应的机制

目的:分析下丘脑背内侧核(nucleus dorsomedialis hypothalami, NDM)升压反应的机制.方法:大鼠脑内或静脉注射不同药物,记录血压和心率的变化.结果:(1)谷氨酸(glutamate, Glu)注入NDM,P物质注入室旁核(nucleus paraventricularis, NPV)或延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla, RVL)均引起升压反应;(2)NDM 升压反应可被双侧NPV或RVL内注入P物质拮抗剂衰减,但RVL内注入阿托品无此效应;(3)静脉注射酚妥拉明也能使NDM升压反应减小,而心得安或甲基阿托品静脉注射对该反应无影响.结论:Glu注入NDM可通过NPV(P物质受体)和RVL(P物质受体)-交感缩血管神经系统引起升压反应.     

延髓—脊髓P物质能神经元下行通路参与毒扁豆碱的中枢升压反应

大鼠延髓腹侧面头端应用毒扁豆碱引起血压升高和心率加快,伴有延髓腹侧面头端胆碱酯酶活性降低和脊髓蛛网膜下腔灌流液中P物质样免疫反应活性升高。在延髓腹侧面头端应用阿托品或脊髓蛛网膜下腔注射P物质拮抗剂D-脯~2,D-苯丙~7,D-色~9-P物质均可阻断毒扁豆碱的心血管效应。脊髓蛛网膜下腔注射P物质抗血清或辣椒素均可减弱毒扁豆碱的升压反应。实验结果提示,毒扁豆碱作用于延髓腹侧面头端的M受体,兴奋了延髓-脊髓P物质能神经元下行通路,使之释放P物质,引起交感肾上腺髓质系统兴奋,从而使血压升高和心率加快。     

TRH在蓝斑复合核的呼吸和心血管效应与延髓头端腹外侧区的关系

目的：观察TRH在蓝斑复合核的呼吸和心血管效应,并探讨此效应与延髓头端腹外侧区的关系。方法：实验选用62只行乌拉坦静脉麻醉和人工呼吸的家兔,利用脑内核团微量注射的方法,将TRH微量注入蓝斑复合核,使呼吸频率明显增快,平均动脉血压升高;在延髓头端腹外侧区分别预注射α2或β受体阻断剂,使TRH在蓝斑复合核的呼吸增频效应明显减弱,其升压效应可被延髓头端腹外侧区分别预注射α或β受体阻断拮抗。结果：TRH在蓝斑复合核具有呼吸兴奋和升压效应,此效应可能是通过延髓头端腹外侧区神经元的α或β受体介导实现的。     

TRH在家兔蓝斑复合核的升压效应及其机制初探

实验在３５只乌拉坦静脉麻醉，发断双侧颈迷走神经，人工呼吸家兔上进行，采用脑内核团微量注射方法，观察到促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）注入蓝斑复全核（Ｌｃ－Ｓｃ）可引起明显的升压效应，而对心率无明显影响。在延髓头端腹是区（ＲＶＬＭ）内分别预注射α１、α２和β受体阻断剂，均能拮抗ＴＲＨ在家兔蓝斑得合核的升压效应，结果提示：ＴＲＨ在家兔蓝斑复合核肯有升压效应，基机制可能通过ＲＶＬＭ区的α和β受体介导。     

大鼠脊髓蛛网膜下腔注射去氧肾上腺素的升压效应

目的为阐明脊髓内的α肾上腺素能受体对心血管活动调节的作用。方法在完整和颈1横断脊髓的大鼠，脊髓蛛网膜下腔注射（ith）选择性α1受体激动剂去氧肾上腺素后对血压和心率进行观察记录。结果①完整大鼠ith去氧肾上腺素引起血压和心率明显升高。②在颈1横断脊髓的大鼠，ith相同剂量的去氧肾上腺素也引起显著的升高血压效应。③在颈1横断脊髓的大鼠，ithα受体阻断剂妥拉苏林可减弱ith去氧肾上腺素的升压效应；用选择性α1受体阻断剂哌唑嗪预处理能阻断这种升压效应。结论在脊髓水平存在有由α1受体调控的升压机制。