两种细胞凋亡检测方法的比较

0引言近年来随着细胞凋亡分子机制研究的深人，人们认识到凋亡的意义不只局限于能使肿瘤细胞减少．‘它对于研究肿瘤的发生机制也有着重要的意义[1]．我们将比较两种最常用于群体细胞凋亡的检测方法．l材料和方法1．l材料HL－60细胞山本校病理教研室白庆咸博士提供，etoposide100mg（5ml）购自西安光华制药厂；RP－MI1640培养基为Gibco产品．1．2方法l．2．l凋亡模型的建立培养细胞至16X1O6，分为4组，即加人etoposide90g／mL。作用0，l.0，2．5，3．5h4组，其中0．5h．～3.5h组先加人etoposi作用0．5h，再1000r／minX3min离心去除etop…     

四种检测细胞凋亡方法的比较

目的：比较４种细胞凋恨检测方法的优缺点。方法：以ｂｕｆａｌｉｎ诱导ＨＬ６０细胞凋亡为例,选择４例方法即电镜（ＥＭ）、ＤＮＡ电泳、原位缺口标记法（ＴＵＮＥＬ）和流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡,并对凋亡率进行了比较。结果：ＥＭ和ＤＮＡ电泳技术是定性说明凋亡的可靠方法,而ＴＵＮＥＬ和ＦＣＭ擅长于定量检测凋亡细胞,ＥＭ、ＴＵＮＥＬ和ＦＣＭ检测的凋亡率具有显相关性。结论：研究细胞凋亡时宜选用既特异、灵敏     

过氧化氢对K562细胞凋亡的影响

目的：探讨活性氧对K562细胞凋亡的影响。方法：用过氧化氢(hydrogen peroxide，H2O2)作用于对数生长期的K562细胞。结果：Hoechst 33258染色法观察到K562细胞明显凋亡；caspase活性定量测定及Western Blotting检测显示caspase-3，-8，-9同时被激活。结论：H2O2可诱导K562细胞凋亡，且通过同时激活线粒体途径和死亡受体途径起作用。     

细胞凋亡的MTT染色法检测

目的研究MTT染色法用于检测细胞凋亡的可行性。方法以As2O3诱导K562细胞建立凋亡细胞模型,并比较以下3种方法检测凋亡的结果。MTT染色法检测、直接在光镜下进行形态学观察以及DNA凝胶电泳。结果MTT染色法可准确判定细胞凋亡,并可清晰分辨正常细胞、凋亡细胞和死亡细胞。结论MTT染色法是一种简单、可行的检测细胞凋亡的方法。     

细胞凋亡的MTT染色法检测

目的 研究MTT染色法用于检测细胞凋亡的可行性。方法 以As2O3诱导K562细胞建立凋亡细胞模型，并比较以下3种方法检测凋亡的结果。MTT染色法检测、直接在光镜下进行形态学观察以及DNA凝胶电泳。结果 MTT染色法可准确判定细胞凋亡，并可清晰分辨正常细胞、凋亡细胞和死亡细胞。结论 MTT染色法是一种简单、可行的检测细胞凋亡的方法。     

细胞凋亡检测方法

细胞凋亡(apoptosis)即程序性细胞死亡(programm edcell death,PCD)是细胞在一定的生理或病理状态下,遵循自身的程序,自己结束自己生命的过程,最后细胞脱落离体或裂解为若干凋亡小体,而被其他细胞吞噬[1]。它在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定     

原位细胞凋亡的检测—POD法

细胞凋亡是许多正常的生理过程所必须的 ,在许多病理条件下 ,凋亡抑制的调节失衡在癌症、艾滋病、心脏病、中枢神经系统的退行性变等疾病中起着重要的作用 [1 ] 。由于细胞凋亡可由抗癌药物、放射及高热等启动 ,因此细胞凋亡的研究已趋向于热门。在检测细胞凋亡的众多方法中 ,POD法因其简便、快速及高敏感性而获得了较为广泛的应用。我教研室采用细胞凋亡原位杂交检测试剂盒 (北京中山公司提供 )对 5 0例子宫颈癌的病例分 5次进行了检测。每次均设阳性及阴性对照 ,使实验成功率达到了 10 0 %。介绍如下。1　方法1.1　石蜡切片脱蜡置蒸馏水…     

几种凋亡细胞检测方法的比较

在细胞凋亡的基础研究领域 ,如有关凋亡信号转导、基因调控等方面的研究 ,以及在细胞凋亡的应用研究领域 ,诸如将细胞凋亡作为化疗药物的筛选模式、检测肿瘤组织切片中凋亡细胞数以评价肿瘤预后等 ,都涉及到凋亡细胞的识别与检测这一基本问题 ,因此 ,选择合适的检测凋亡细胞的方法便成为各个实验室必须解决的问题。本文结合相关文献及在研究中的体会 ,就凋亡细胞与坏死细胞的区别、几种常用凋亡细胞检测方法适用范围及应用中的影响因素、结果分析等简述如下。1　凋亡细胞与坏死细胞的区别在凋亡检测时必须将其与坏死区别开来 ,而将二者加以…     

细胞凋亡的检测方法

自 1972年Ｋｅｒｒ首次提出细胞凋亡的概念以来 ,凋亡的研究迅速在生命科学领域扩展和深入。凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是指细胞在一定的生理或病理条件下 ,遵循自身的程序 ,由基因调控的主动的死亡过程[1 ] 。凋亡是不同于细胞坏死 (ｎｅｃｒｏｓｉｓ)的另一种细胞死亡的形式 ,二者在形态学、生化基础及发生学等方面有明显差异 ,详见表 1。本文对细胞凋亡的检测方法予以综述。表 1　细胞凋亡和坏死的区别项　别凋　亡坏　死诱导原因生理和病理病理基因调控　 +　 -细胞形态皱缩肿胀核染色质浓缩聚集核膜下成新月形染色质呈不规则移位胞浆浓…     

细胞凋亡检测方法的研究

现已证实细胞凋亡（Apoptosis）是基因调控的程序死亡，又称程序化细胞死亡。细胞凋亡的概念提出后引起了学者们的关注，     

TUNEL法原位检测凋亡细胞的某些改进

目的 :探索避免TUNEL法检测凋亡细胞出现的假阳性和消除非特异性反应的方法。方法 :脑和心肌组织石蜡切片 ,改进的TUNEL染色。选用多聚甲醛固定 ,蛋白酶K修复抗原 ,将H2 O2 封闭内源性过氧化物酶放在反应液标记DNA片段之后 ,先后用小牛血清或羊血清两次封闭非特异性反应。结果 :证实本实验方法避免了假阳性 ,背底十分清亮。结论 :改进后的TUNEL方法适用于凋亡细胞的检测     

原位末端标记—TUNEL法检测脊髓凋亡细胞

原位ＤＮＡ末端标记ＴＵＮＥＬ法是目前检测细胞凋亡的一种常用方法 .其基本原理是利用细胞凋亡过程中ＤＮＡ断裂暴露的末端 ,用已标记荧光的碱基与之互补连接 ,而后直接用荧光显微镜观察或用相应荧光抗体与之结合 ,再通过快红等显色剂显色了解有无ＤＮＡ断裂从而了解细胞凋亡 .由于一个凋亡试剂盒所做切片有限 ,因而 ,凋亡试剂显得相对较为昂贵 .进而 ,摸索一些实验方法以增加实验的成功率成为了学者们关心的问题 .本文介绍用本室摸索总结的实验方法检测脊髓的凋亡细胞 .1　材料和方法用 5只成年雄性健康家猫脊髓的Ｌ3节段 ,常规脱水后 ,石…     

凋亡蛋白酶活化因子-1与细胞凋亡

细胞凋亡(apoptosis)即细胞编程性死亡(programmed cell death)，它是一种高度有序的细胞死亡。凋亡不仅在多细胞动物的生长发育、形态构建与维护中扮演重要角色，而且在外伤后细胞的演变过程中起关键作用。越来越多的证据表明，外伤所致的脑损伤后，神经细胞的死亡有两种形式，即细胞的直接损伤坏死和迟发性的细胞死亡即凋亡。1977年，Yang的研究小组和Kluek的研究小组同时证明Bel-2通过阻止细胞色素C，从线粒体上释放发挥其抑制凋亡的作用，     

细胞凋亡的检测方法

细胞凋亡的检测方法彭吉林综述熊琛审校（郧阳医学院微生物学教研室十堰４４２０００）细胞凋亡是一种不同于细胞坏死的细胞死亡方式，是在一定的生理或病理情况下，机体为维护内环境的稳定，通过基因调控，激活内源性核酸内切酶，发生细胞自动消亡的过程，亦称程序化细胞...     

ICE样蛋白酶与细胞凋亡

<正>细胞凋亡在维持多细胞有机体的正常发育、平衡机体内环境、抗御病毒入侵、预防细胞癌变等多方面都具有重要作用,ICE(IL-1βconverting enzyme)样蛋白酶因其与细胞凋亡的调控密切相关而越来越受到人们的广泛关注。本文仅就哺乳类ICE样蛋白酶与细胞凋亡的关系进行简要综述。     

末端转移酶原位标记法检测细胞凋亡

目的：建立一种用末端转移酶标记对凋亡的细胞进行原位检测方法，方法：在末端转移酶催化下，将地高辛修饰的核苷酸掺入凋亡细胞中的ＤＮＡ断裂缺刻，再用显色法检测被标记的ＤＮＡ，从而检出调亡细胞。结果：本实验建立了一种灵敏，特异，有效的凋讯检测方法。结论：末端转移介导的原位标记法是研究凋亡的一个非常有用的工具。     

细胞凋亡检测方法的研究进展

目的 对目前国内外用于细胞凋亡的检测方法进行综合评价。方法 结合国内外相关文献分析讨论细胞凋亡各种检测方法的原理及应用范围。结果 各种方法均具有一定的优缺点及应用范围。结论 选择多种适当的方法进行综合检测,常可得到较准确的结果。     

细胞凋亡的检测方法研究进展

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ,Ａｐ）是一特异的细胞死亡过程,与坏死有着本质的区别,不仅参与生物体的生长与发育,而且也介导了一些疾病的发生和发展,因此,开展Ａｐ研究十分重要。形态学观察和细胞ＤＮＡ电泳分析是Ａｐ检测的基本方法;流式细胞计数法的观察凋亡提供了新手段,通过单一或多种分析可检测出凋亡细胞在代谢,生物化学及分子水平的表现,灵敏,快速,特异性高,特别实用于大量标本的检测;细胞原位标记技术用以检