LPS刺激对RAW264.7细胞p38蛋白激酶的细胞内定位的影响

目的 探讨p38蛋白激酶信号传导的过程及其在细胞中的特异性作用机制。方法 应用间接荧光标记免疫探针技术及共聚焦激光扫描技术观察单核细胞中p38蛋白激酶的分布及LPS对其分布的影响。结果p38在未受刺激的静息单核细胞及内皮生长因子（EGF）刺激的单核细胞胞浆和胞核中荧光强度均呈弥散性分布;脂多糖（LPS）刺激使细胞核区的荧光强度明显增强,而胞浆区域的荧光强度降低。激酶动力学的研究显示,p38激活先于p38移位。LPS刺激后30 min,p38激酶活性即达到高峰,随后2 h内逐步下降,p38激酶活性呈一过性增高;LPS刺激45 min后,核区荧光强度达到峰值,且在2 h内维持在高水平。结论 单核细胞由LPS激活后,其p38蛋白激酶由胞浆转位到胞核,反应具有一定的特异性;p38移位入核依赖于p38磷酸化活化及由细胞浆移位到细胞核是一系列连续发生的事件。     

p38蛋白激酶不同亚型在RAW264.7细胞中的定位

目的 探讨p38的4种亚型在细胞中的分布以及对外界刺激的反应。方法 应用激光共聚焦显微镜对RAW264.7单核细胞内的4种亚型进行定位观察。结果 p38(、p38(在未受刺激的静息细胞内的荧光强度呈弥散性分布,受脂多糖（LPS）刺激后,细胞核荧光强度明显增强,细胞浆荧光强度降低,提示LPS诱导p38(和p38(磷酸化活化后移位入细胞核。p38(在静息和受LPS刺激后的细胞中均呈散在、弥漫性地分布,提示p38(刺激后无移位现象。静息时,p38(弥散地分布于细胞,刺激后细胞核膜部荧光强度增高,提示受刺激后p38(移位于核膜周围。结论 p38不同亚型在细胞受LPS刺激后移位表现不同,可能与它们在组织和细胞分布的特异性及作用途径有关。     

Activation of p~(38) mitogen activated protein kinase induced by lipopolysaccharide and its role in TNF a gene expression

Mitogen--activatedproteinkinase(MAPKs)aremajormediatorsineukaryoticcellstotransductextracellularsignalsintocellularresponses['].Thereareatleast4subgroupsofMAPKsidentifiedinmammaliancells:extracellularsignal--regulatedkinase(ERK),c--JunN--terminalkinase(JNK)orstressactivatedproteinkinase(SAPK),ERKSorBMK1andp38['"].MAPKsareactivatedbyvariousstimulitomediatemanycellularprocessesorresponses,includingcellgrowth,death,cellcycle,inflammationandstressresponses,elc.[l.31.ActivationofMAPKs…     

脂多糖激活p38在诱导肿瘤坏死因子α基因表达中的作用

目的探讨防治内毒素休克的新方法,研究脂多糖（ＬＰＳ）诱导肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）表达的分子机制。方法用蛋白激酶活性测定检测ＬＰＳ刺激引起的激酶活性变化;共聚焦激光扫描技术显示ｐ３８激活移位;用反转录聚合酶链反应和报告基因系统研究ＴＮＦα基因转录的分子机制。结果发现ＬＰＳ刺激ＲＡＷ细胞引起ｐ３８激活并由胞浆移位至胞核。ＬＰＳ刺激引起ＴＮＦαｍＲＮＡ表达增加,而且由ＬＰＳ引起的ＴＮＦα的转录活性可被ｐ３８特异性抑制剂所抑制。结论激活的ｐ３８通过磷酸化转录因子增加ＴＮＦα基因转录活性,这是中毒性休克时ＴＮＦα生成增加的一个重要机制。ｐ３８是ＬＰＳ诱导ＴＮＦα基因表达的重要调节物质。     

Effect of eucalyptus globulus oil on activation of nuclear factor-kappaB in THP-1 cells]

OBJECTIVE: To study the effect of eucalyptus globulus oil on the activity of nuclear factor-kappaB(NF-kappaB) in THP-1 cell line. METHODS: THP-1 cells were cultured with or without eucalyptus globulus oil at different concentrations (1, 10, 100 mg x L(-1), 30 min) before being stimulated with lipopolysaccharide (LPS, 1 mg x L(-1), 30 min). The location of NF-kappaB p65 subunit (NF-kappaB/p65) in THP-1 cells was detected by indirect immunofluorescence and laser scanning confocal microscope. The expression of NF-kappaB/p65 in nuclei was measured by Western-blot analysis. RESULT: The FITC-label NF-kappaB/p65 was mainly located in the nuclei after THP-1 cells were stimulated with LPS. Whereas, no fluorescence were seen in the nuclei of cells pretreated with eucalyptus globulus oil. This effect on NF-kappaB/p65 nuclear translocation was in a concentration dependent manner. CONCLUSION: Eucalyptus globulus oil inhibits the nuclear translocation of NF-kappaB induced by LPS in THP-1 cells.     

p38丝裂原激活蛋白激酶对人胚胎肾293细胞一氧化氮合酶基因转录的调控

目的：探讨p38丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）家族四种亚型对诱导型一氧化氮合酶（iNOS)基因的转录调控。方法：以人胚胎肾293（HEK293）细胞为靶细胞，采用脂质体（LPS）介导的细胞基因共转染技术，荧光素酶报告基因技术，分别将FLAG－tagged p38MAPK4种亚型，含有鼠iNOS基因启动子区的荧光素酶报告基因质粒（piNOS-Luc)，空载体（pcDNA3),β－半乳糖苷酶表面质粒（pCMV－β）共转染，检测并比较荧光素酶相对活性。结果（1）未加刺激时，在HEK293细胞中，p38MAPK中仅有p38α的诱导作用亦有明显，结论：（1）LPS能够在HEK293细胞中诱导iNOS基因转录活性；（2）在HEK293细胞中，p38MAPK参与了静息时及LPS刺激下对iNOS基因的转录调控。     

p38MAPK在脂多糖诱导的人内皮细胞表达诱导型一氧化氮合酶中的作用

目的：研究P38丝裂原激活蛋白激酶（P38MAPK）在脂多糖（LPS）诱导的人内皮细胞－ECV304诱导一氧化氮合酶（iNOS)表达的一氧化氮（NO）产生中的作用，方法：用Griess法检测人内皮细胞培养液中NO水平，分别用免疫荧光法和RT－PCR检测细胞iNOS蛋白和mRNA的表达，采用免疫沉淀法检测细胞p38MAPK的活性，结果：与对照组相比，LPS刺激后的ECV304细胞iNOS蛋白和mRNA的表达显著增加，用p38特异性抑制剂SB2023580预处理后，可以显著抑制细胞iNOS的表达和NO的产生，LPS 刺激内皮细胞后15min,p38MAPK的活性达到高峰，维持45min后逐渐下降，结论：p38MAPK参与与LPS诱导的内皮细胞iNOS的表达和NO的产生，可通过阻断信号转导通路来减少iNOS及其他细胞因子的产生，为败血症休克的防治提供一条新的思路。     

脂氧素A4通过p38 MAPK及Nrf2通路调控气道炎症反应

目的：研究脂氧素A4（LXA4）对脂多糖（LPS）诱导的人正常支气管上皮细胞炎症反应的抑制作用及其机制。方法：将对数生长期的BEAS-2B细胞分为3组。对照组：不做任何处理;LPS组：100 ng/mL LPS刺激24 h;LPS+LXA4组：100 nmol/L LXA4预处理30 min,加入100 ng/mL LPS刺激24 h。qPCR法检测IL-6、IL-1β、血红素加氧酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶（NQO-1）mRNA表达水平;流式细胞术测定胞内活性氧（ROS）水平;谷胱甘肽（GSH）试剂盒检测GSH水平。为进一步了解LXA4的作用机制,Western blot法检测各处理组p38的磷酸化水平以及Nrf2的核转位及磷酸化水平。结果：与对照组相比,LPS组IL-6、IL-1β mRNA以及胞内ROS表达水平升高（P＜0.05）,HO-1 mRNA水平下降（P＜0.01）,p38磷酸化水平上升（P＜0.01）,胞核中Nrf2相对表达量下降（P＜0.01）,总Nrf2磷酸化水平下降（P＜0.05）。经LXA4干预后,与LPS组相比,除上述改变逆转外（P＜0.05）,NQO-1和GSH水平显著上升（P＜0.05）。结论：LXA4可减轻LPS引起的BEAS-2B细胞炎症反应并促进炎症消退,其机制可能一方面与抑制p38 MAPK通路,减少促炎因子的分泌有关;另一方面与增强Nrf2的核转位以及磷酸化,减轻氧化应激损伤有关。     

丝裂原活化蛋白激酶通路对脂多糖诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α基因表达的协同调节作用

目的 探讨脂多糖（LPS）诱导RAW264.7细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达过程中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路的协同调节作用及其分子机制。方法 用蛋白激酶活性测定分析LPS刺激RAW264．7细胞引起的激酶活性变化;用报告基因技术和反转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法研究LPS诱导的TNF－α基因转录的分子机制。结果 LPS刺激RAW264．7细胞可引起细胞外信号调节激酶1（ERK1）、c-Jun氨基末端激酶1（JNK1）和p38MAPK的一过性激活,用MAPK上游激酶的活性突变体分别转染RAW264．7均可不同程度地诱导TNF－α启动子转录活性;而且,这些MAPK通路激活诱导的TNF－α启动子转录活性表现出明显的协同效应;三种MPAPK的无活性突变体均显示出对LPS刺激引起的TNF－α启动子转录激活的抑制效应;RT－PCR的结果证实,ERK、JNK和p38MAPK的特异性抑制剂对TNF－αmRNA表达具有不同程度的抑制作用。结论 LPS刺激引起的TNF－α启动子转录活性增加,可能涉及了ERK、p38和JNK三条通路的激活;这些通路通过协同效应共同发挥对TNF－α基因表达的调控。     

脂多糖通过p38/MAPK通路对巨噬细胞自噬的调控作用

摘 要:【目的】 观察脂多糖(LPS)对巨噬细胞自噬的影响及p38/MAPK通路在其中的作用?【方法】 体外培养巨噬细胞株RAW264.7,分为对照组?饥饿状态激活自噬组?单纯LPS刺激组?LPS+P38抑制剂(SB203582)组和LPS+mTOR抑制剂(rapamycin)组?将前期构建的载体pcDNA3.1-GFP-LC3,转染RAW264.7,通过荧光显微镜观察各组细胞中自噬体形成情况?qRT-PCR方法检测各组中与细胞自噬相关的基因Atg5,Atg7,LC3-Ⅱ和Bnip3 mRNA表达水平的改变?利用Western blotting检测LC3-Ⅱ?p-P38?P38蛋白在各组中的表达情况,以评价LPS激活巨噬细胞自噬过程中p38/MAPK通路的作用?【结果】 在荧光显微镜下可以观察到自噬在饥饿状态组?LPS+SB203582组和LPS+rapamycin组有明显增强;qRT-PCR检测到自噬相关基因Atg5,Atg7,LC3-Ⅱ,和Bnip3 mRNA的表达在饥饿状态组?LPS+SB203582组和LPS+rapamycin组有明显增强;Western blotting 检测发现p-P38在饥饿状态组?LPS组和LPS+rapamycin组中表达明显升高; LC3-Ⅱ的表达在饥饿状态组?LPS+SB203582组和LPS+rapamycin组中表达要高于对照组和LPS组?【结论】 LPS参与巨噬细胞自噬的调控,除经典mTOR通路之外,p38/MAPK通路是其抑制通路之一?     

p38MAPK红色荧光蛋白融合载体的构建及表达

目的 构建在哺乳动物细胞中的表达的p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）红色荧光蛋白（RFP）融合表达载体。方法 将克隆在pcDNA3上的FLAG标记的p38MAPK亚克隆到红色荧光蛋白载体pDsRed1-N1上，随后转染HeLa细胞。在荧光显微镜下观察。结果 结果 重组质粒经酶切，PCR和测序证明正确无误，并在HeLa细胞中得到高量表达，融合蛋白发出的红色荧光表明p38MAPK弥散分布于细胞质中，细胞核中也有一定的分布。结论 成功构建了p38MAPK红色荧光蛋白融合载体。该载体能在哺乳动物细胞中进行表达，为研究p38MAPK的细胞内定位提供了一个重要的工具。     

p38 MAPK在脂多糖诱导的人内皮细胞表达诱导型一氧化氮合酶中的作用

目的研究p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)在脂多糖(LPS)诱导的人内皮细胞－ECV304诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达和一氧化氮(NO)产生中的作用。方法用Griess法检测人内皮细胞培养液中NO水平,分别用免疫荧光法和 RT－PCR检测细胞 iNOS蛋白和mRNA的表达,采用免疫沉淀法检测细胞 p38 MAPK的活性。结果 与对照组相比,LPS刺激后的BCV304细胞iNOS蛋白和mRNA的表达显著增加,用p38特异性抑制剂SB203580预处理后,可以显著抑制细胞 iNOS的表达和NO的产生。LPS刺激内皮细胞后15 min,p38 MAPK的活性达到高峰,维持45 min后逐渐下降。结论p38MAPK参与了LPS诱导的内皮细胞iNOS的表达和NO的产生;可通过阻断信号转导通路来减少iNOS及其他细胞因子的产生,为败血症休克的防治提供一条新的思路。     

Effect of cigarette smoke extract on lipopolysaccha- ride-activated mitogen-activated protein kinase signal transduction pathway in cultured cells

Background  Lipopolysaccharide (LPS) forms outer membrane of the wall of Gram-negative cells. LPS can directly cause damage to epithelia of respiratory tract and is the major factor responsible for the chronic inflammation of respiratory passage. The mitogen-activated protein kinase (MAPK) signal transduction pathway of the airway epithelia is intimately associated with the action of LPS. The chronic inflammation of respiratory tract and smoking are interrelated and entwined in the development and progression of chronic lung diseases. This study was designed to examine the effects of cigarette smoke extract (CSE) and LPS on MAPK signal transduction pathway in order to further understand the roles CSE and LPS play in chronic lung inflammation.
Methods  Cultured primary human epithelial cells of airway were divided into four groups according to the stimulants used: blank control group, LPS-stimulation group, CSE-stimulation group and CSE plus LPS group. Western blotting was employed for the detection of phosphorylation level of extracellular-signal-regulated-kinase (ERK_1/2), p38 MAPK and c-Jun N-terminal kinase (JNK). The expression of cytokines of MAPK transduction pathway (granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) and mRNA of IL-8) in the primary epithelial cells of respiratory tract was also determined.
Results  Western blotting revealed that the phosphorylation levels of ERK_1/2, p38 MAPK and JNK were low and 2 hours after the LPS stimulation, the phosphorylation of ERK_1/2, p38 MAPK and JNK were all increased. There was a significant difference in the phosphorylation between the LPS-stimulation group and blank control group (P<0.05); no significant difference was found between CSE-stimulation group and blank control group (P>0.05); there was a significant difference between CSE + LPS group and blank control group and between CSE + LPS group and LPS group (P<0.05). The phosphorylation of CSE-LPS group was higher than that of blank control group but lower than that of LPS group. In blank control group, the expression of IL-8 and GM-CSF mRNA was low in the epithelial cells of airway and the release of IL-8 and GM-CSF was also at a low level. One hour after LPS stimulation, the level of IL-8 mRNA increased (P<0.05) and reached a peak after 2 hours. On the other hand, GM-CSF mRNA level increased 2 hours after the stimulation (P<0.05) and reached the highest level 4 hours after the stimulation. Two hours after LPS stimulation, IL-8 and GM-CSF protein level began to rise (P<0.05), and the level was the highest 8 hours after the stimulation (P<0.01). Stimulation with CSE alone had no effect on the release of IL-8 and GM-CSF and expression of IL-8 mRNA (P>0.05), but pre-treatment with CSE could delay the LPS-induced release of IL-8 and GM-CSF and the expression of IL-8 mRNA and its peak was lower.
Conclusions  LPS stimulation can significantly increase the phosphorylation of ERK_1/2, p38 MAPK and JNK in the epithelial cells of airway and activate the MAPK transduction pathway, thereby can activate the downstream signal transduction pathway, and can ultimately result in the release of cytokines by the epithelial cells of airway. CSE can partially abolish the LPS-induced activation of MAPK signal transduction pathway and the expression of cytokines of the pathway, which might contribute to the development and progression of the inflammatory reactions in COPD patients.

     

凉膈散药物血清对脂多糖诱导体外培养巨噬细胞核转录因子-κB的影响

目的观察凉膈散药物血清对脂多糖(LPS)诱导的体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞核转录因子-κB(NF-κB)变化的影响．探讨凉膈散解毒作用的细胞信号转导调控机制。方法制备凉膈散药物血清；提取并体外培养小鼠腹腔巨噬细胞；以凉膈散药物血清及LPS共同刺激已培养细胞，免疫荧光法检测巨噬细胞NF-κB亚基p65，用激光扫描共聚焦显微镜观察并测定各组小鼠腹腔巨噬细胞核的p65的荧光表达情况。结果小鼠巨噬细胞经LPS刺激1h后，其核内的荧光强度(代表p65的表达量)显增强。与LPS刺激组相比：抑制剂TLCK组、凉膈散药物血清不同剂量组的荧光强度值均较低．有显性差异，以TLCK及凉膈散大剂量组强度值最低，中、小剂量组次之；空白血清不同剂量组则均无显差异。药物血清不同剂量组之间有显差异，呈剂量依赖性关系；空白血清不同剂量组之间无显性差异。结论不同剂量凉膈散药物血清均能抑制LPS所致的细胞核内p65升高，且呈剂量依赖性，这可能是凉膈散解毒作用的细胞信号转导机制之一。     

Biochemical pathways in the antiatherosclerotic effect of berberine

Background This study investigated the inhibitory effect of berberine （BBR） on lipopolysaccharide （LPS） induced cyclooxygenase-2 （COX-2） expression via the mitogen activated protein kinase （MAPK） signalling cascade pathways in human peripheral blood monocytes （PBMC）.
Methods PBMC from whole blood were isolated and cultured for up to 24 hours after division into 5 groups treated with LPS, LPS＋BBR 25 μmol/L, LPS＋BBR 50 μmol/L or LPS＋BBR 100 μmol/L and untreated. Monocytes were extracted for RT-PCR and Western blot analyses to examine COX-2 mRNA and protein activated expression of p38 mitogen activated protein kinase （p38MAPK）, Jun N-terminal kinase （JNK） and extracellular regulated kinases 1/2 （ERK1/2） signalling pathways.
Results COX-2 mRNA and protein expression decreased to a minimum at 12 hours after BBR treatment （P 〈0.05）. With the increasing concentration of BBR treatment, the COX-2 expression decreased progressively （P 〈0.01）. With BBR treatment for 6, 12 or 24 hours at three doses, ERK1/2 protein expression was significantly inhibited. For the JNK pathway, only with the treatment of BBR at the concentration of 100 μmol/L was JNK protein expression inhibited compared with the LPS stimulation group （P 〈0.01）. Irrespective of the BBR concentration, no difference was shown between the BBR group and the LPS group for p38MAPK protein expression. Human monocytes COX-2 mRNA, by RT-PCR, and protein expression, by Western blot analysis, were inhibited when incubated with PD98059, SP600125 and SB203580 （P 〈0.05）.
Conclusions Berberine inhibits COX-2 expression via the ERK1/2 signalling pathway and, possibly, at a high dosage via the JNK pathway. P38MAPK may have no relationship with the effect of BBR in PBMC. Berberine inhibited COX-2 mRNA and protein expression in a dose dependent manner and suppressed COX-2 expression to a minimal level after 12 hours of berberine treatment.     

氢气对急性肺损伤大鼠肺组织p38 MAPK活化的影响

目的探讨氢气对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤大鼠的肺保护作用及其可能的分子生物学机制。方法采用腹腔注射LPS
法建立大鼠急性肺损伤模型。32只雄性SD大鼠（体质量200~250 g）随机分为4组（n=8）：生理盐水组（SA组）、氢气吸入组（SH
组）、急性肺损伤组（LA组）和急性肺损伤+氢气吸入组（LH组）,氢气治疗为腹腔注射生理盐水或LPS后持续吸入混有低浓度
氢气（2%）的空气6 h,用Western blot 技术检测肺组织中p38 MAPK 的表达,用ELISA法检测肺组织及血清中TNF-α的浓度。
结果氢气吸入可以使肺组织中的活化的p38 MAPK明显降低,同时降低其下游因子TNF-α在肺组织及血清中的浓度。结论
氢气吸入可下调肺组织及血清中TNF-α的表达,此作用可能与抑制肺组织中p38 MAPK活化有关。
     

己酮可可碱对p38丝裂原激活蛋白激酶激活的影响

目的:观察己酮可可碱(PTX)对p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)激活的影响,探讨PTX保护内皮细胞单层通透性的机制.方法:建立内皮细胞单层损伤模型,随机分为脂多糖(LPS)-A组、LPS-B组、LPS PTX-A组及LPS PTX-B组,分别以不同终浓度LPS及PTX刺激不同时间,以Western印迹杂交技术检测内皮细胞p38MAPK活性.结果:LPS组,随着LPS刺激时间的延长及刺激浓度的增大,磷酸化的p38MAPK亮度逐渐增强;LPS PTX组,磷酸化的p38MAPK亮度随着PTX刺激时间的延长及刺激浓度的增大而逐渐减弱.结论:PTX可通过降低p38 MAPK的活性而起保护内皮细胞通透性的作用.     

p38 MAPK在大鼠急性肺损伤模型中的表达及抗氧化剂NAC的影响

目的:观察磷酸化的分裂原激活的蛋白激酶(p38 MAPK)在脂多糖(LPS)引起的大鼠急性肺损伤中在体原位的表达. 方法:采用免疫组织化学ABC法和Western-blot技术,检测磷酸化的p38 MAPK在大鼠急性肺损伤模型气道和肺组织的表达,并同时观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对其表达的影响. 结果:对照组气道和肺组织无或偶见反应极弱的p38 MAPK阳性细胞,散在分布于气道上皮细胞和肺泡上皮细胞. LPS致伤组p38 MAPK阳性细胞较对照组明显增多(P<0.01),主要分布于浸润的炎症细胞、气道上皮细胞、肺泡上皮细胞、胸膜间皮细胞和血管内皮细胞. NAC治疗组气道和肺组织中阳性细胞数较LPS致伤组明显减少(P<0.01),Western-blot结果验证了上述结果. 结论:LPS诱发的大鼠急性肺损伤模型中,磷酸化p38 MAPK在气道和肺组织内表达增加,p38 MAPK的激活见于肺组织内多数细胞,提示肺内炎性和非炎性细胞均有p38 MAPK信号分子的激活. NAC是有效的抗氧化剂,其对急性肺损伤的炎症抑制可能是通过抑制p38 MAPK的激活起作用.     

脂多糖致急性肺损伤时Tribbles同源蛋白3表达变化

目的 探讨Tribbles同源蛋白3(TRB3)在脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)时的变化及其与p38-MAPK信号通路的关系.方法 体内实验:复制LPS致ALI大鼠模型,分5 ml/kg生理盐水组和5 ml/kg LPS刺激组,免疫组织化学法检测肺组织中TRB3蛋白表达,RT-PCR检测肺组织TRB3 mRNA表达.体外实验:体外培养大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC),随机分为LPS量效组(0、2、4、10 μg/ml LPS分别孵育4 h)、LPS时效组(10 μg/ml LPS分别孵育0、4、8、12 h)和p38抑制剂(SB203580)干预组(分为正常对照组、10 μg/ml LPS组、10 μmol/L SB203580组、10 μmol/L SB203580+10 μg/ml LPS组).Western blot法检测TRB3蛋白、p-p38和 p38-MAPK表达.结果 免疫组织化学法显示大鼠肺泡壁和腺上皮均表达TRB3;RT-PCR法检测大鼠肺组织和大鼠PMVEC均表达TRB3 mRNA;与生理盐水组比较,LPS致ALI大鼠肺组织TRB3 mRNA表达显著增加(t=15.524,P<0.01),LPS刺激的大鼠PMVEC中TRB3 mRNA表达增加(t=7.549,P<0.01);Western blot法显示PMVEC表达TRB3蛋白的表达量随LPS浓度(0、2、4、10 μg/ml)增加逐渐升高,差异有统计学意义(F=12.619,P<0.001);时效组TRB3蛋白表达量于4 h达高峰, 之后下降,8 h时仍高于0 h,差异有统计学意义(F=11.273,P<0.001).干预组:与正常对照组比较,10 μg/ml LPS组诱导大鼠PMVEC的p-p38、TRB3蛋白表达量增高(t=49.121、15.113,P<0.001);10 μmol/L SB203580+10 μg/ml LPS组与10 μg/ml LPS组比较,p-p38、TRB3蛋白表达量下降(t=7.040、11.900,P<0.05、0.001);10 μmol/L SB203580组对大鼠PMVEC表达p-p38及TRB3蛋白无影响,与正常对照组比较,差异无统计学意义.结论 LPS致ALI时TRB3表达增加,TRB3表达受p38-MAPK信号通路调控.