A型肉毒毒素对大鼠受损背根节神经元放电和交感-感觉耦联的影响

目的 研究A型肉毒毒素(BTXA)对慢性压迫背根节(DRG)神经元(慢性神经痛模型)的自发放电和交感-感觉耦联的影响.方法 采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在受损DRG上加BTXA,观察BTXA对DRG神经元自发放电的影响.电刺激腰交感神经干,观察交感刺激对受损DRG神经元放电的调节作用,静脉注射BTXA后,再观察交感刺激对受损DRG神经元放电的影响.结果 慢性压迫DRG神经元有丰富的自发放电,47个受损DRG神经元放电对无钙人工脑脊液有显著的兴奋反应,但BTXA对这些神经元的自发放电无影响.64%的受损DRG神经元对腰交感神经干电刺激有反应,交感刺激对受损DRG的这种作用可被静脉注射BTXA所阻断.结论 BTXA对慢性压迫DRG神经元的自发放电无影响.在慢性压迫DRG神经元上存在交感-感觉耦联现象,BTXA可以阻断这种交感-感觉耦联现象.     

乙酰胆碱对大鼠慢性压迫背根节神经元放电的影响

目的研究乙酰胆碱(ACh)对大鼠慢性压迫背根节(DRG)神经元放电的影响。方法采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在DRG慢性压迫模型上观察ACh对受损DRG神经元自发放电的影响。结果受损DRG神经元有丰富的自发放电,77.9%有自发放电的受损DRG神经元对ACh有反应,其中反应类型有单纯兴奋和先兴奋后抑制两种形式,而且反应的幅度随ACh浓度的延长而逐渐增大。结论在慢性压迫DRG神经元有大量的自发放电,ACh可明显影响受损DRG神经元的自发放电。     

Effect of chaotic and periodic sympathetic nerve stimulation on the activity of chronically compressed rat dorsal root ganglion neurons]

OBJECTIVE: To study the responses of injured dorsal root ganglion (DRG) neurons to sympathetic nerve stimulation with different time sequences. METHOD: In chronically compressed DRG model, the spontaneous activity of the single fiber from injured DRG neurons was recorded, and the responses of DRG neurons to chaotic and periodic electric stimulation of the lumbar sympathetic trunk compared. RESULTS: Sympathetic-sensory coupling was present in chronically compressed DRG neurons, and the response of DRG neurons increased gradually as the sympathetic stimulating frequency increased from 5 to 20 Hz (P<0.01). The chaotic stimulation evoked much greater response than periodic stimulation, even though the stimulating frequency was similar (P<0.01). CONCLUSIONS: Besides the stimulating frequency, the time sequence of the stimulation is one of the important factors that influence the response of DRG neurons to sympathetic stimulation. Chaotic sympathetic stimulation causes greater response than periodic stimulation does, and the chaotic activity of presynaptic neuron evokes greater postsynaptic response than periodic activity. The chaotic activity of the neurons might be one of the effective ways for information transmission through the nerves.     

混沌和周期的交感神经刺激对大鼠受损背根节神经元放电的影响

目的研究受损背根节(DRG)神经元对不同时间序列的交感神经刺激反应。方法采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在DRG慢性压迫模型上,电刺激腰交感神经干,比较受损DRG神经元对周期和混沌的交感神经刺激的反应。结果慢性压迫DRG中存在交感-感觉耦联现象。受损DRG神经元对交感神经刺激的反应随刺激频率(在5~20 Hz范围内)的增加而增大(P<0.01)。将刺激平均频率和刺激强度相同而刺激时间序列不同的交感神经刺激引起受损DRG神经元的反应进行比较发现,混沌的交感神经刺激引起的反应比周期的交感神经刺激引起的反应大(P<0.01)。结论除刺激频率外,交感神经刺激的时间序列是影响受损DRG神经元反应的重要因素,混沌刺激引起的效应比周期刺激效应强,突触前神经元的混沌放电比周期放电可引起更大的突触后效应,神经元的混沌放电可能是神经传递信息的一种有效形式。     

Influence of sympathetic stumulating time series on activity of chronically compressed dorsal root ganglion neurons in rat

Objective: To study responses of injured DRG neurons to sympathetic stimulation with different temporalstimulating pattern. Methods: In chronically compressed DRG model, the spontaneous activity of single fiber from theinjured DRG neuron was recoeded, lumbar sympathetic trunk was electrical stimulated, and the responses of DRG neu-rons caused by chaotic and periodic sympathetic stimulation were compared. Results: It was found that the response of     

大鼠尾-壳核痛反应神经元对伤害性重复刺激的反应

本文通过重复刺激坐骨神经的方法,进一步探讨了痛兴奋神经元的电活动。结果发现,大鼠尾-壳核内存在着一种特殊类型的痛反应神经元,即痛抑制-兴奋神经元。     

丙戊酸钠对大鼠损伤背根节神经元异位自发放电的抑制作用

目的: 探讨丙戊酸钠(sodium valproate, VPA)对损伤背根节神经元异位自发放电的影响及其时间和剂量关系. 方法: 分离背根单纤维,引导来自损伤背根节(dorsal root ganglion, DRG)神经元的异位自发放电,观察不同浓度VPA对放电频率和放电模式的影响. 结果: VPA可抑制异位自发放电,降低其放电数,并具有剂量依赖关系. 结论: 局部应用VPA可抑制DRG神经元自发放电,这可为外周应用VPA进行镇痛治疗提供依据.     

大鼠背根节神经元异位自发放电与钙依赖性钾通道的关系

探讨神经元异位自发电的产生机制。方法分离背根单纤维，引导来自损伤背根节神经元的异位自发放电，观察Ｃａ＾２＋和Ｋ＾＋离子浓度变化及有关通道阻断剂其的影响。     

Interaction of arachidonic acid with electrogenic properties of mouse chemosensory neurons

Chemosensory neurons respond to stimulation induced by gasses, volatile and non-volatile compounds. Neuronal excitation mediated via second messengers involves typically: cGMP, cAMP, or IP?3. Transduction pathways based on cyclic nucleotide have three-phosphate nucleotide as substrate, while IP?3 has a membrane lipid substrate. These derivatives of cholesterol are signaling molecules with modulator-like effects on many proteins, including membrane ion channels. In the present study, spontaneous and induced activities were recorded in a whole-cell configuration, in current and voltage clamp modes, in isolated chemosensory neurons obtained from the mouse. Chemosensory neurons responded with an inward depolarizing current to application of arachidonic acid, which suggests a role for it in putative mechanisms of signal transduction.     

受损背根节神经元持续性钠流的检测

目的:检测损伤大鼠背根节(DRG)神经元持续性钠流(persistent sodium current, Inap)并研究其与阈下膜电位振荡的关系. 方法: 术后3～6 d慢性痛大鼠模型背根节急性分离,消化离散成单细胞,对中小型DRG神经元运用全细胞膜片钳技术记录. 结果: 电压钳下,钳制电位在-80 mV,给予斜波去极化到-30 mV时,细胞产生一持续时间150～200 ms,幅值89～200 pA的持续性内向钠流,且对100 nmol/L TTX敏感.电流钳下,产生阈下膜电位振荡的细胞,给予100 nmol/L TTX后,振荡消失.结论:在受损DRG神经元上检测到的持续性钠流可能是产生阈下膜电位振荡的基础之一.     

电刺激黑质网状部抑制大鼠丘脑腹内侧核神经元的自发放电

本文用细胞单位记录方法观察了电刺激大鼠黑质网状部（ＳＮＲ）对丘脑腹内侧核（ＶＭ）神经元放电活动的影响，结果显示电刺激ＳＮＲ抑制大多数ＶＭ神经元的自发放电；反应分为单纯抑制和先抑制兴奋两种不同形式，结果提示，在大鼠，ＳＮＲ－ＶＭ传入投射主要通过抑制ＶＭ神经元的放电活动，参与对躯体运动的调节。     

GABAA受体α2亚基参与神经病理性痛

目的探讨GABAA受体α2亚基参与神经病理性痛的可能机制。方法分别运用全细胞膜片钳和免疫荧光技术观察坐骨神经压榨性损伤(CCI)模型手术侧、手术对侧及假手术组背根神经节(DRG)神经元GABAA受体特异性激动剂Muscimol激活电流幅度以及GABAA受体α2亚基表达。结果①CCI模型鼠热缩足反射潜伏期与假手术组或手术对侧组相比显著缩短(P<0.01)。②Muscimol在DRG上记录到3种典型的反应形式,均对特异性GABAA受体阻断剂Bicuculline敏感。③在3组DRG神经元上,Muscimo(l0.1～1 000.0μmol/L)引起浓度依赖的内向电流。假手术组、CCI模型鼠手术侧和对侧组DRG神经元上1 000μmol/L Muscimol引起内向电流幅度分别为(1 487.0±92.9)、(541.0±63.3)和(1 945.0±284.4)pA,组间比较差异有统计学意义,3组的EC50值差异无统计学意义。④GABAA受体α2亚基表达于DRG神经元膜上,CCI模型手术侧组DRG神经元GABAA受体α2亚基较假手术组表达减少,而手术对侧表达增强。结论神经病理性痛可能通过下调GABAA受体α2亚基的表达使GABA介导的突触前抑制作用减弱,易化伤害性信息的传入,产生痛觉敏化。     

Properties of "possibly" cholinergic neurons ascending from the rat ponto-mesencephalic area: comparison with noradrenergic and serotonergic neurons.

In urethane-anesthetized rats single neuronal activity was recorded in the laterodorsal tegmental nucleus, which has a dense complement of cholinergic neurons. In many experiments neuronal activity was recorded also in the dorsal raphe and locus coeruleus for comparison. In each experiment two to five active sites were marked with pontamine sky blue, deposited from the recording electrode ionophoretically and located histologically. Most neurons of the laterodorsal tegmental nucleus responded antidromically to stimulation of either one or more of the following sites: medial frontal cortex, medial septal nucleus, lateral geniculate nucleus or superior colliculus. Conduction velocities of their axons, estimated from latencies of antidromic responses, were within the range of unmyelinated fibers. Most of them gave rise to broad spikes (positive stroke, greater than 1.0 msec; negative stroke, greater than 3.0 msec), resembling monoaminergic neurons. Others generated brief spikes (positive and negative strokes, less than 0.8 and less than 2.2 msec). The former are probably cholinergic. Some neurons in the laterodorsal tegmental nucleus had rather regular spontaneous firing at a low rate (0.2-5 Hz), while others were not spontaneously active. Their response to noxious stimulation (tail pinch) was different from neuron to neuron, but that most frequently encountered was limited to phasic excitation, in contrast to locus coeruleus neurons which showed phasic excitation followed by mild tonic excitation; and to dorsal raphe neurons likely to be suppressed. Upon repetition of tail pinch the response of laterodorsal tegmental nucleus neurons tended to become weak or disappear while a desynchronized pattern continued to appear in the EEG in each occasion. Thus, putative cholinergic neurons, which constitute a major group in the laterodorsal tegmental nucleus, have properties similar to those of monoaminergic neurons, except for the phasic and decrementing nature of their response to tail pinch. The cholinergic, noradrenergic, and serotonergic ascending projections seem likely to subserve different roles in regulating activity of the forebrain.     

孤束核神经元α肾上腺素能受体与5-羟色胺能受体的关系

在30个大鼠脑薄片上,共观察了5-HT与NE对57个孤束核神经元单位放电的作用。其中47个对5-HT与NE均有反应,而其中的8个用低钙高镁阻断突触传递后再给5-HT与NE仍有5例有该反应。另外5例对5-HT与NE单独起反应或均无反应的神经元用上述方法阻断突触传递后,有3例对5-HT与NE均有反应,提示在孤束核神经元上自身同时存在着5-HT与α肾上腺素受体。并有少数受其他神经元的抑制。在另外的5个NE与5-HT均兴奋的神经元,同时给NE与5-HT。其中3个转变为抑制;3个对单独用NE与5-HT抑制的神经元合用后,2个变为兴奋。提示在某些孤束核神经元上这两种受体可能存在相互抑制作用。     

缺氧对小鼠背根神经节细胞IK电流的影响

目的:探讨氧感受过程参与对钾通道调制的假设。方法:应用新鲜分离的小鼠背根神经节小细胞,采用全细胞膜片钳记录IK电流。结果:当小细胞缺氧时,钾通道在3 min之内即可发生变化,表现为绝大多数(86%,6/7)细胞的IK减弱,1个细胞(14%,1/7)的IK电流增强;缺氧1 min时IK减弱,3 min时产生最大抑制。当测试电位从 10 mV至 70 mV时,急性缺氧显著性降低IK,IK电流密度降低最大幅度从(304.4±122.9)降为(253.9±106.4)pA.pF-1,但IK稳态激活曲线无明显变化。结论:急性缺氧抑制小鼠背根神经节小细胞IK电流,而IK电流的抑制作用可能是外周神经细胞对缺氧的一种适应和保护机制。     

脊神经结扎慢性痛大鼠背根神经节细胞超极化激活电流(Ih)的变化

目的:研究超极化激活电流( hyperpolarization-activated current, Ih )在慢性神经源性痛中的作用.方法:以单侧L5和L6脊神经结扎制备神经源性痛大鼠模型,运用全细胞电压钳技术记录和分析背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)神经元Ih的表达和激活特征.结果:脊神经结扎后,相应节段小直径DRG神经元表达Ih的细胞比率升高,但大、中直径神经元Ih没有改变,另外大、中、小直径神经元Ih的活性增强.结论:神经损伤导致DRG神经元Ih的表达和电流活性发生改变,提示此种电流参与了神经源性痛"外周敏化"的发生.     

大鼠背根节内两类兴奋性神经元的放电特征

目的:观察大鼠背根节(DRG)神经元兴奋性分类的放电特征.方法:在新鲜分散的中、小型大鼠背根节神经元运用全细胞膜片钳技术,观察给予胞内去极化,超极化电流刺激引起细胞放电的特征.结果:根据大鼠背根节神经元的放电特征可将它们区分为两类兴奋性.1类:神经元兴奋性与刺激强度相关,逐渐增强的去极化刺激可引发频率由低到高的动作电位.一般于超极化刺激后不产生反跳动作电位.动作电位的幅值一致,符合"全或无"定律.2类:神经元的兴奋性与去极化刺激强度关系不明显,神经元放电频率比较稳定,不随刺激强度的增强而增加,放电前后有规律的膜电位振荡.于较弱的超极化刺激后可产生反跳动作电位.动作电位的幅值不一致.结论:大鼠DRG两类兴奋性神经元各具不同的放电特征.     

人参皂苷Rb1对胎鼠背根神经节损伤的保护作用

目的观察不同浓度人参皂苷Rb1对损伤胎鼠背根神经节（DRG）神经元形态学改变的影响,探讨人参皂苷Rb1对谷氨酸引起的兴奋性神经毒损伤的保护作用,为Rb1的进一步研究和临床应用提供理论依据。方法选择胎龄为15 d的SD大鼠,获取DRG神经元并进行体外分散培养48 h后,随机分为对照组、谷氨酸损伤组、谷氨酸损伤＋低浓度Rb1（10μg/ml）保护组和谷氨酸损伤＋高浓度Rb1（100μg/ml）保护组,继续培养12 h。终止培养后,倒置相差显微镜观察各组神经元的生长状态,MTT检测不同浓度人参皂苷Rb1孵育的背根神经节神经元的凋亡增殖情况。结果对照组DRG神经元细胞贴壁呈单层散在分布,少部分出现细胞聚集现象,突起较长且互相交织形成网状;谷氨酸损伤组DRG神经元细胞聚集现象明显,神经元突起变短、断裂甚至消失;谷氨酸损伤＋Rb1保护组DRG神经元细胞部分呈簇状聚集,部分呈单个散在分布,突起仍然相互交织。MTT结果显示谷氨酸损伤＋Rb1保护组细胞存活率均高于谷氨酸损伤组,但高浓度Rb1保护组与低浓度Rb1保护组之间差异无统计学意义。结论人参皂苷Rb1可以影响损伤胎鼠DRG神经元的形态学改变和凋亡增殖情况,对胎鼠背根神经节神经元具有一定的保护作用。     

针刺对备用背根节神经元TrkC表达的影响

目的：探讨针刺对备用背根节（DRG）TrkC表达的影响。方法：将成年雄猫分为三组，即假手术组、单侧部分背根切除术组、单侧部分背根切除术并针刺组。通过免疫组化ABC法，观察各组L6DRG中TrkC免疫反应（TrkC-IR)神经元数量。结果：在假手术组TrkC-IR主要定位于L6DRG的大神经元及少数中小神经元胞浆内：部分背根切断后，TrkC-IR大神经元数量明显减少，而中小神经元数量则明显增多（P＜0．05）；针刺后，TrkC-IR大神经元数量较手术组又明显增多，且反应强度明显增加（P＜0．05），而对中小神经元TrkC阳性细胞数无明显影响。结论：针刺促进TrkC在大神经元的表达上调，提示TrkC可能与脊髓可塑性有关。     

猫部分背根切断后背根节一氧化氮合酶的表达变化

目的 了解一氧化氮合酶(NOS)在背根损伤的背根节及邻近未受损之背根节中表达的变化。方法 采用部分去背根传入动物模型,通过免疫组织化学ABC法,观察猫背根节中nNOS及eNOS同工酶阳性免疫产物的分布、阳性神经元的数量及变化。结果 猫背根节中nNOS阳性反应物主要分布于小神经元中;背根被切断的L。背根节及邻近完好的L。备用背根节中nNOS阳性小神经元数量较非术侧均有增加;eNOS在成年猫背根节神经元中未见表达。结论 在背根节神经元中表达的nNOS及由nNOS催化产生的NO可能与神经损伤和修复的生理病理过程有关。