p53基因突变与人食管癌转移的关系研究

目的：探讨ｐ５３基因突变与人食管癌淋巴结转移的关系。方法：采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）结合银染技术,对４７例食管瘤组织中ｐ５３ 基因第５～８外显子进行了突变分析。结果：４７例食管癌标本中,ｐ５３基因第５～８外显子出现突变者２０例,其突变率为４２．６％;其中２２例伴有淋巴结转移的原发癌中１３例出现了突变（５９．１％）,其与无淋巴结转移组（２８．０％,７／２５）相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：ｐ５３基因突变与人食管癌的转移可能关系密切。     

结肠癌K-ras和P~(53)基因序列改变

采用PCR和DNA双链四色荧光单道测序方法对 31例结肠癌组织、13例大肠息肉伴不典型增生、11例结肠癌术后并发腹水标本进行K ras基因外显子 1、2和P53基因外显子 5、6、7、8测序分析。结果显示 :31例癌组织中发现K ras突变 7例 ,P53突变 12例 ,阳性率分别为 2 2 .58%和 38.71% ;13例息肉伴不典型增生组织中发现P53突变 2例 ;11例术后腹水标本中发现K -ras突变 1例 ,P53突变 2例 ,且突变与患者包埋组织结果一致。表明结肠组织癌变与这两个基因突变密切相关 ,癌基因突变是结肠癌较早期的细胞损害 ;DNA测序方法是研究癌基因突变的最精确可靠的方法。     

结直肠癌MICA基因的表达与p53K-ras基因突变的关系研究

目的:分析结直肠癌MICA基因的表达与p53、K-ras基因突变的关系.方法:回顾性分析我院2014年3月至2016年3月收治的66例结直肠癌患者的临床资料,应用半定量PCR-SSCP技术,对癌组织mdr1基因表达量与p53、K-ras进行检测,并分析结直肠癌MICA基因表达与p53、K-ras基因突变间的相互关系.结果:经研究发现,MICA表达与结直肠癌患者肿瘤部位、年龄、性别无相关性(P>0.05).于66例患者中,22例淋巴结转移者的MICA平均表达量明显高于淋巴结未转移者,差异具有统计学意义(P<0.05).8例K-ras、p53基因联合突变者MICA基因平均表达量高于非联合突变者,差异具有显著统计学意义(P<0.05),12例K-ras基因突变者MICA平均表达量稍高于未突变者,但比较差异无统计学意义(P>0.05),16例p53基因突变者MICA平均表达量显著优于p53基因未突变者,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:MICA基因高表达已成为了结直肠癌的关键检测指标,而p53、K-ras基因与其高表达具有相关性.     

I期结直肠癌转移基因突变特征及临床特征分析

目的 借助现有的数据库挖掘，借鉴和浓缩数据采集的要点， 进一步明确I期结直肠癌的突变特征，以期指导临床治疗及判断预后。方法 对纪念斯隆-凯特琳癌症中心（MSKCC）数据通过R语言的maftools工具，进一步分析初始I期患者有转移和无转移组突变特征及临床特征。 结果 针对MSKCC突变数据，在I期患者中APC、TP53、KRAS基因突变比例相对于整体数据而言偏低。APC基因突变约占比65%（整体76%），TP53基因突变约占比68%（整体73%），KRAS约占比28%（整体44%），BRAF突变在结直肠癌整体数据中占比12%。I期发生转移的患者APC和TP53突变的比例均高于未发生转移的患者。I期发生转移的患者APC突变占比70%，未发生转移者突变占比59%；I期发生转移的患者TP53突变占比78%,未发生转移者突变占比53%，I期发生转移者TP53突变占比高于APC突变。I期结肠癌患者女性较男性更容易发生转移，I期发生转移者且均为MSS型。结论 本研究借MSKCC数据进行挖掘，发掘了I期结直肠癌转移的一些基因突变特征，I期病人患者中发生转移的APC和TP53突变的比例均高于未发生转移的患者，进一步指导临床治疗及判断预后，并为开展早期肿瘤转移的临床及基础研究，提供了理论依据。     

(大肠癌早期诊断专题）高分辩率熔解曲线分析在大肠癌筛查中的应用

目的 探讨高分辨率熔解曲线分析（high-resolution melting,HRM） 在利用粪便DNA筛查大肠癌中的作用。方法 收集住院治疗的31例大肠癌患者、28例大肠腺瘤患者及20例来医院体检的正常人新鲜粪便标本,应用HRM法检测粪便中APC、K-ras、P53基因的突变情况 。结果 31例大肠癌患者粪便中APC基因突变检出率为41.9%(13/31),K-ras基因突变检出率为35.5%(11/31),P53基因突变检出率为54.8%(17/31),三个基因联合检出率为67.7%(21/31);28例大肠腺瘤患者粪便中APC基因突变检出率为25%(7/28),K-ras基因突变检出率为14.3%(4/28),P53基因突变检出率为46.4%(13/28),三个基因联合检出率为64.3%(18/28);20例正常对照粪便中APC基因突变检出率为5%(1/20),K-ras基因突变率为0(0/20),P53基因突变率为0(0/20)。大肠癌组和大肠腺瘤组基因突变检出率均高于正常对照组(P<0.05) ,而大肠癌和大肠腺瘤组间差异无统计学意义( P>0.05)。结论 利用HRM法检测粪便中APC、K-ras和P53基因突变在大肠癌筛查中具有潜在的应用价值。     

非霍奇金淋巴瘤中p53基因突变情况研究

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin′s Lymphoma,NHL)中p53基因第5~8外显子突变情况。方法采用PCR-SSCP法对47例NHL进行p53基因第5~8外显子的点突变研究。结果p53基因第5~8外显子总突变率为48.94%(23/47)。其中第6外显子的突变率最高为17.02%,其次为第8外显子,突变率为12.87%;高度恶性组和低度恶性组突变率分别为50.00%(12/24)、34.78%(8/23)(P>0.05);T细胞和B细胞突变率分别为39.29%(11/28)、47.37%(9/19)(P>0.05)。结论NHL中存在较高p53基因突变率,提示其突变可能参与了NHL的发生发展。高度恶性组p53基因突变倾向于高发。     

肺鳞癌、肺腺癌Ki-ras和p53基因序列分析

目的 :研究肺鳞癌、腺癌与Ki-ras基因外显子 1,2及p5 3基因外显子 7,8突变谱并观察肺鳞癌、腺癌预后同Ki-ras和 p5 3基因突变的关系。方法 :用PCR和测序方法分析 33例肺鳞癌和 2 7例肺腺癌Ki-ras基因外显子 1,2和 p5 3基因外显子 7,8错义突变。并追踪观察突变者和非突变者的二年存活率。结果 :肺鳞癌中发现 5例 (15 .16 % )Ki-ras基因突变和 12例 (36 .37% )p5 3基因突变 ;肺腺癌中发现 2例 (7.4 1% )Ki-ras基因突变和 7例 (2 5 .93% ) p5 3基因突变 ,两型肺癌间Ki-ras和p5 3基因突变阳性率差异均无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;肺鳞癌、腺癌中 p5 3基因突变总阳性率为 31.6 7% ,Ki-ras基因突变总阳性率仅 11.6 7% ,p5 3基因突变率高于Ki-ras基因突变率 (P <0 .0 5 )。p5 3基因突变谱与一般报道相似。Ki-ras基因突变情况与一般报道有所不同 ,未发现一般文献报道较多的第 12位等密码子突变 ,发现有第 6位密码子纯合性突变和第 31位和第 79位密码子杂合性突变。预后追踪显示 :无突变的病例 2年生存率为 4 0 % ,存在突变的病例 2年生存率仅 12 %。结论 :肺鳞癌、腺癌的Ki-ras和 p5 3基因突变谱较广 ,肺鳞癌和腺癌的预后均与这两个基因突变有关。     

Abnormal Change of p53 Gene in Gastric and PrecancerousLesions and APC Gene Deletion in Gastric Carcinoma and Near Tissues

Hypothesisoftumorsuppressorgenehadbeenproposedtwentyyearsag0['],butthefirstsuppressorgeneRb(retinoblas-toma)wasseparatedandcloneduntill986[z].Suppressorgene,includingp53andAPCgenes,n0whasbecomenew"hot"subjectintheareaoftumorresearch.p53genemutation,deleti0nandAPCgenedele-tionoccurredinsomehumantumorsandtheremaybesomerelationbetweenAPCgeneandp53genedeletion[3-7]-Inthispa-per,PCR-RFLP,PCR-SSCPmeth0dswereusedtoanalyzep53,APCgenealterationsingastriccancerandprecancerouslesi0nsinordertoin…     

鼻咽癌放射治疗分型的临床研究

目的通过调查我院单纯根治性放射治疗的鼻咽癌患者,根据放射治疗后复发转移的情况,提出鼻咽癌临床放射治疗分型,总结其分布规律。方法随机抽取20世纪90年代在中山大学肿瘤防治中心行单纯根治性放疗鼻咽癌住院病人842例,根据5年的随访结果,无原发部位和区域淋巴结复发及无远处转移设定为辐射敏感不易转移型（Ⅰ型）、有原发部位或区域淋巴结复发及无远处转移定为辐射抗拒不易转移型（Ⅱ型）、无原发部位和区域淋巴结复发及有远处转移定为辐射敏感易转移型（Ⅲ型）、有原发部位或区域淋巴结复发及有远处转移定为辐射抗拒易转移犁（Ⅳ型）,分析4种临床放射治疗分型的分布规律以及4种分型与谢志光分型之间的联系。结果（1）4种分型的比例为辐射敏感不易转移型50．6％（426例）,辐射抗拒不易转移型23．2％（195例）,辐射敏感易转移型20．7％（174例）和辐射抗拒易转移型5．6％（47例）。（2）842例患者中有264例可按谢氏分型标准进行分型,其中上行型24．6％（65例）,下行型23．1％（61例）,混合型52．3％（138例）;上行型中：Ⅰ型58．5％,Ⅱ型29．2％,Ⅲ型10．8％,Ⅳ型1．5％;下行型中：Ⅰ型47．5％,Ⅱ型9．8％,Ⅲ型36．1％,Ⅳ型6．6％;混合型中：Ⅰ型34．8％,Ⅱ型26．8,Ⅲ型33．3％,Ⅳ型5．1％。（3）92临床分期早期（Ⅰ、Ⅱ期）有307例,Ⅰ型62．2％（191例）,Ⅱ型21．2％（65例）,Ⅲ型12．4％（38例）,Ⅳ型4．2％（13例）;晚期（Ⅲ、Ⅳ期）有535例,Ⅰ型43．9％（235例）,Ⅱ型24．3％（130例）,Ⅲ型25．4％（136例）,Ⅳ型6．4％（34例）。结论在鼻咽癌中存在上述4种放射治疗分型,其构成比为：放射敏感不易转移型（Ⅰ型）〉放射抗拒不易转移型（Ⅱ型）〉放射敏感易转移型（Ⅲ型）〉放射抗拒易转移型（Ⅳ型）,在谢氏的下行型和混合型中及92福州临床分期晚期（Ⅲ、Ⅳ期）中,放射敏感易转移型（Ⅲ型）的比例大于放射抗拒不易转移型（Ⅱ型）,放射治疗分型是对鼻咽癌临床分型及分期的补充。     

Detection of K-ras and p53 mutations in bronchoscopically obtained malignant and non-malignant tissue from patients with non-small cell lung cancer

Molecular screening may increase the likelihood to identify early malignant lesions in non-small cell lung cancer. However the presence of gene mutations in non-malignant bronchial tissue has remained controversial. The present study was carried out to investigate systematically the presence of mutations of the K-ras and p53 gene in bronchial biopsies taken during routine bronchoscopy of normal as well as tumour tissues from a series of 40 patients with histologically verified non-small cell lung cancer (NSCLC). K-ras mutations were analysed with specific detection oligonucleotides, p53 mutations were examined by SSCP analysis. In all biopsies the wildtype of both K-ras and p53 could be detected. The overall frequency of mutations was 14 (35%) with 2 K-ras mutations (5%) and 12 mutations of the p53 gene (30%). In 3 cases (1 ras mutation, 2 p53 mutations) the same mutation could be shown in the tumour biopsy and in the distant normal control. In another case only the normal appearing tissue had a mutation of the p53 gene. All other mutations could be detected in the tumour tissue only. Our data confirm that K-ras mutations and p53 can be detected not only in malignant but also in non-malignant bioptic samples from patients with NSCLC. The use of molecular screening for the early detection of lung cancer may be a promising new approach.     

人大肠腺癌组织P^53基因突变与表达

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术和免疫组织化学方法检测１８例人大肠腺癌和腺瘤变组织Ｐ＾５３基因第５－８外显子的突变和Ｐ＾５３蛋白的表达，另对９７例大肠腺瘤和腺瘤癌变组织Ｐ５３蛋白表达进行了检测。１８例大肠腺癌中８例Ｐ＾５３基因，第５－６外显子中存在突变。１０例（５６％）Ｐ＾５３表达阳性。     

门静脉血K-ras和p53基因突变与胃癌肝转移的关系

目的探讨门静脉血K-ras、p53基因突变与胃癌肝转移的关系。方法应用PCR单链构象多态性分析技术,对胃癌患者的门静脉血、外周静脉血分别进行K-ras、p53基因检测,术后随访半年,了解肝转移情况。结果62例胃癌患者外周血和门静脉血中的p53和K-ras基因突变阳性率分别为8.06%、4.83%和38.71%、33.87%;有无肝转移者p53和K-ras基因突变阳性率分别为92.30%、76.92%和24.49%、22.45%;剖腹后探查前或胃癌探查后门静脉血p53和K-ras基因突变阳性率分别为38.71%、33.87%和56.45%、62.90%,上述两组指标之间相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论检测门静脉血K-ras、p53基因突变对预测胃癌肝转移,判断预后有重要意义。     

肺癌组织 p53 基因突变的研究

目的：探讨肺癌发生的分子遗传学机理，了解肺癌中ｐ５３基因突变的情况。方法：采取聚合酶链反应（ＰＣＲ）及聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）结合银染技术，对２０例肺癌组织中ｐ５３基因外显子５～８进行了突变分析。结果：ｐ５３基因突变１２例，占总人数６０％（１２／２０），分布于外显子５～８。其中第７外显子６例，第８外显子４例，第５、６外显子各１例。鳞癌突变率５０％（３／６），腺癌突变率６０％（６／１０），小细胞肺癌突变率７５％（３／４）。结论：ｐ５３基因突变与肺癌的发生发展有关。     

P53 Gene Mutation and Expression of MDM2, P53, P16 Protein and their Relationship in Human Glioma

To investigate the effect of P53 protein accumulation and p53 gene mutation in the pathogenesis of glioma and to study the role of MDM2, P53 and P16 protein in glioma formation and progression and their relationship with each other, LSAB immunohistochemical staining method and non-isotopic PCR-SSCP techniques were used to detect the expression of MDM2, P53 and P16 protein and p53 gene mutation in 48 cases of gliomas. The results showed that the positive expression rate of MDM2, P53 and the negative rate of P16 was 22.9 %, 41.7 % and 60.4 %, respectively. The latter two in high grade （grade Ⅲ , Ⅳ） gliomas had a significantly higher rate than in the low grade （grade Ⅱ ） gliomas. Moreover, the co-expression of MDM2 and P53 protein was confirmed in only 1 of 48 cases. No significant difference was found in the rate of the expression of MDM2 between high grade and low grade gliomas （P〉0.1） . PCR-SSCP results showed that mutation of 5 --8 exons of p53 gene was detected in 17 out of 48 cases （35.42 %） . Mutation was detected in 16 of 20 cases of positive p53 expression, and another one was detected in 28 cases of negative expression cases. The correlation between p53 mutation and p53 immunopositivity was observed in 89.6 % of the cases. P53 gene mutation and the level of MDM2, P53 and PI6 protein were not related to age, gender of the patients, tumor location and size. It is concluded that the mutation of p53 and deletion of p16 might play important roles in the tumorigenesis of gliomas and it was significantly associated with the grade of tumor differentiation. P53 protein accumulation can indirectly reflect p53 mutation. MDM2 amplification and overexpression might be an early event in the growth of human gliomas.     

散发性大肠癌多基因突变与肠道内环境因素关系的研究

目的：探讨肠道内环境中因素与散发性大肠癌多基因突变关系。方法：对106例散发性大肠癌患者进行多基因突变和肠道内环境中有关指标(以粪便为标本)的测定，并进行流行病学的病例一病例研究分析。结果：106例散发性大肠癌患者中APC(MCR)，K—raS(12／13)及P53(5／6，7，8)突变率分别为31．19％(32／106)，37．74％(40／106)及39．62％(42／106)。散发性大肠癌患者p53 249密码子突变占p53总突变的42．86％(18／42)；肠道内粪胆汁酸(OR=1．9280，P=0．0052)，Mg^2^ (OR=0．287l，P=0．0121)和Ca^2^ (OR=O．0659，P=O．0307)进入多因素logistic模型；吸烟指数和肠道内胆汁酸与p53 249密码子突变相关。结论：散发性大肠癌确实普遍存在有多种基因的突变，肠道内高胆汁酸可能是散发性大肠癌相关基因突变的重要危险因素，肠道内ca^2^ 和Mg^2^ 可能为保护性因素；广东地区散发性大肠癌p53基因突变有一定特点，有必要探索AFB1在广东地区散发性大肠癌发生发展中可能作用。     

口腔舌鳞癌p53基因突变及其表达的相关性研究

目的：探讨口腔舌鳞癌中p53基因突变及其蛋白的表达两者相关性。方法：应用Western blot和聚合酶链反应-单链构象多态性方法检测38例口腔舌鳞癌、20例口腔癌前病变及10例正常口腔黏膜组织中p53蛋白表达及p53基因突变情况。结果：p53蛋白在口腔舌鳞癌、癌前病变和正常口腔黏膜组织的阳性表达率分别为42．1％（16／38）、10．0％（2／20）、0％（0／10）。39．5％（15／38）的口腔舌鳞癌存在p53基因第5、8外显子突变。在p53基因突变的病例中，p53蛋白表达与其基因突变密切相关。结论：p53基因突变及其蛋白过量表达与口腔舌鳞癌的发生、发展密切相关。     

胃癌组织中Runx3的变化机制及其与 p53突变的对比

目的：探讨胃癌组织中runx3的变化机制及胃癌中runx3甲基化改变和p53突变的区别及意义。方法：采用聚合酶链反应－单链多态性（PCR-SSCP）检测runx3的2～4外显子及p53基因5～8外显子在胃癌中的突变情况，采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）技术对30例胃癌组织甲基化状态进行检测，对runx3甲基化率和p53突变率进行分析。结果：2例胃 癌标本在runx3的第3外显子发现突变，第2、4外显子未发现突变改变。 87％（26/30）胃癌 标本runx3基因检测到甲基化改变， 53.3％（16/30）胃癌标本p53基因发现突变，runx3甲 基化率高于p53突变率（P<0.05）。结论：runx3突变不是胃癌的遗传易感因素，runx3启动子区CpG岛的高甲基化是胃癌中runx3的主要改变机制。与p53突变率比较，runx3高频甲基化改变更具有胃癌的遗传学特异性，可能是引起胃癌的关键性基因。     

检测胃癌患者外周血中K-ras和p53基因突变的临床价值

目的 探讨检测胃癌患者外周血中K-ras和p53基因突变的临床意义.方法 应用聚合酶链反应一单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法,对我院收治的73例胃癌患者外周血中的K-ras和p53基因突变进行检测,并与20例非肿瘤疾病患者作对熙.结果 73例胃癌患者中有7例外周血中检测出p53基因突变,阳性率为9.6%;5例检测出K-ras基因突变,阳性率为6.8%.对照组外周血中均未检出K一瑚和p53基因突变.有无肝转移的胃癌患者外周血p53和K-ras基因突变阳性率间差异均有统计学意义(P＜0.05).不同分化程度及临床分期的胃癌患者外周血p53和K-ras基因突变阳性率间差异无统计学意义(JP＞0.05).结论 PCR-SSCP法检测外周血中K-ras和p53基因DNA有助于胃癌肝转移的诊断.     

用原位杂交及免疫组化方法检测p53基因及ki-67蛋白在胆管癌中的表达

目的　研究胆管癌组织中 p5 3基因表达、ki- 6 7增殖指数高低及它们之间的关系 ,以深入探讨胆管癌发生、发展的机制。方法　采用原位杂交及免疫组化方法对 30例人胆管癌组织 p5 3基因、P5 3蛋白表达及 ki- 6 7蛋白增殖指数进行检测 ,探讨它们之间的关系 ,并进而分析它们与临床病理资料之间的相关性。结果　原位杂交检测30例胆管癌组织中 14例 (46 .7% ) p5 3基因表达阳性 ,p5 3原位杂交结果与胆管癌的临床病理资料无显著相关性。免疫组化检测 30例胆管癌组织中 16例 (5 3.3% )有 P5 3蛋白表达 ,有局部淋巴结转移组 P5 3蛋白表达阳性率明显高于无局部淋巴结转移组 ;临床 期患者 P5 3蛋白表达阳性率明显高于临床 、 期患者。有 P5 3蛋白表达的患者生存期明显短于无 P5 3蛋白表达的患者。 2 9例 (96 .7% )胆管癌患者的肿瘤细胞中有 ki- 6 7蛋白表达。在中、低分化、有局部淋巴结转移、临床 期肿瘤组织中 ,ki- 6 7增殖指数显著高于高分化、无局部淋巴结转移及临床 、 期患者。生存期长的肿瘤患者 ,ki- 6 7增殖指数低于生存期短的患者。结论　 ki- 6 7增殖指数反映了胆管癌细胞的增殖活性 ,分化程度低的肿瘤细胞增殖活跃 ,局部淋巴结转移的危险性较大 ,临床预后较差 ,提示 ki- 6 7增殖指数是用来判断胆管     

结直肠癌MICA基因的表达与p53、K-ras基因突变的关系研究

目的研究结直肠癌MICA基因的表达与p53、K-ras基因突变之间的联系。方法选取我院从2015年8月~2017年8月132例结直肠癌患者为此次研究对象行回顾性分析,应用半定量PCR-SSCP技术,进行mRNA水平的检测,对结直肠癌组织MICA基因表达量与p53、K-ras进行检测,并分析结直肠癌MICA基因表达与p53、K-ras基因突变之间的相互关联。结果在K-ras基因突变组中的MICA平均表达量显著高于K-ras基因未突变组,差异具有统计学意义(P0.05);在p53基因突变组中的MICA平均表达量显著高于p53基因未突变组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论高表达的MICA基因的发生可能与p53、K-ras基因突变关系密切,MICA基因的表达情况是目前检测结直肠癌的关键,应引起人们的广泛关注。