胶体金与酶联免疫法检测乙肝表面抗原结果分析

目的了解国产胶体金法快速检测乙肝表面抗原(HBsAg)的特异性和敏感性,及其与ELISA的一致性。方法使用2个厂家生产的胶体金法试纸条及1个厂家生产的ELISA试剂检测600份标本的HBsAg,对结果进行统计分析。结果 2个生产厂家的胶体金法检测的阴、阳性结果与ELISA法总的一致性分别为96.5%和97.3%。阳性标本检测结果的一致性分别为86.7%和89.4%。阳性标本的S/C在10以下时,2种国产试纸条的检测结果与ELISA一致性均为0.0%。阴性标本的检测结果的一致性均大于100.0%。结论依据两法检测结果总的一致性较高而在临床推广使用胶体金法检测HBsAg不合适。医疗机构应选择敏感性较强的试剂进行HBsAg筛选试验。     

酶免法检测乙肝表面抗原实验精密度研究

目的 探讨酶免法检测HBsAg实验精密度的影响因素及实验精密度对检验结果的影响.方法 检测卫生部临检中心0.5ng/ml质控血清,计算精密度;比较手工操作与全自动酶免分析仪法检测的精密度;检测不同效价的阳性血清,比较精密度,并作统计学分析.结果 临界值附近的标本可能引起误判,手工操作与全自动酶免分析仪法检测实验精密度差异有统计学意义(t=4.72,P<0.01).结论 实验精密度的高低对酶免法检测HBsAg实验存在影响,检验结果的判定应设置灰区并进行复检或进一步检测.     

灰区设置在酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎表面抗原中的意义

乙型肝炎是目前流行最广泛、危害最严重的病毒性肝炎之一,乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物检测仍是目前临床诊疗的重要依据。有关血清中低水平乙型肝炎表面抗原（HBsAg）测定及其临床意义已有报道,而对HBsAg检测中灰区设置及其临床意义尚缺乏系统的研究。     

无偿献血者HBsAg酶免筛查结果分析

目的 了解2006～2010年大连地区无偿献血者血液乙肝病毒感染情况,方法 采用酶联免疫法对245 833名献血者血液标本进行HBsAg检测.结果 历年HBsAg不合格率男女比较差异无统计学意义(P＞0.05);4个年龄组中,18～25岁的HBsAg不合格率最高,HBsAg复检不合格数占本组献血人数的0.40％,不同年龄组的HBsAg总不合格率比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 加强HBsAg初筛人员培训,杜绝人为因素造成的不合格,同时探讨建立适宜的检测模式,既防止漏检,又最大限度降低由假阳性反应导致的血液不合理淘汰.     

两种酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原的结果比较

目的 比较乙肝表面抗原-酶联免疫吸附试验一步法(简称一步法)和乙肝表面抗原-酶联免疫吸附试验二步法(简称二步法)检测乙肝表面抗原(HBsAg)的结果,研究钩状效应对一步法检测HBsAg结果的影响,评价二步法检测HBsAg的应用价值.方法 分别用一步法和二步法检测1200份无偿献血者初检标本,并用一步法(稀释法)检测怀疑存在钩状效应的标本6份.结果 一步法检测出29份HBsAg阳性,二步法检测出35份HBsAg阳性,6份一步法检测结果阴性怀疑存在钩状效应的标本进行1∶5、1∶10、1∶30、1∶60倍稀释后,再采用一步法进行检测,分别有6份、6份、4份、3份结果转为阳性.结论 采用二步法或一步法同时对标本进行一定倍数稀释后检测,可以克服钩状效应,提高检测的敏感度.     

ELISA法检测乙型肝炎表面抗原假阳性的影响因素

<正>目前,大多数实验室采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行定性检测,当检测标本的吸光度值大于试剂盒设定的临界值时为阳性,反之为阴性。对于强阳性和明显阴性的标本几乎不会错检,但是在检测临界值附近的弱显色反应(S/CO:1～2)标本时可能出现假阳性结果,ELISA法操作过程中也存在一部分     

ELISA法检测HBsAg实验条件的优化

目的探讨温度、孵育时间、振荡对ELISA法检测HBsAg的影响,以期进一步优化检测条件。方法采用HBsAg含量约为1ng/mL的血清标本,在4种不同条件(37℃振荡、37℃不振荡、25℃室温震荡、25℃室温不振荡)下的3个不同反应时间(10、20、30min)测定HBsAg,记录吸光度值。结果除10min37℃不振荡和25℃不振荡差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组差异都有统计学意义(P<0.05)。结论 37℃振荡20min为ELISA检测HBsAg的较佳条件。     

酶联免疫法和胶体金免疫层析法测定乙肝表面抗原的比较

目的：比较酶联免疫法和胶体金免疫层析法测定乙肝表面抗原的结果。方法：对1 020例血清标本同时通过酶联免疫法和胶体金免疫层析法测定乙肝表面抗原,并且对结果进行分析。结果：两种方法测定的特异性接近,但是灵敏度逊于酶联法。结论：酶联合免疫法和胶体金免疫层析法对抗原的测定都是可靠准确的方法,完全适用于临床,但是各有特点,胶体金免疫层析法简便快捷,无须特殊设备,适合大批量的体检、急诊等,酶联合免疫法技术可靠,历史悠久,成本低廉,仍广泛应用于临床。     

溶血标本使用国产HBsAg酶免试剂可用于常规分析

目的 观察标本不同程度溶血对国产两步法乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂检测结果的影响.方法 收集HBsAg阴性和阳性已确定的血液标本各3例,并将其分别作为HBsAg阴性组和阳性组.标本人为处理为无、轻、中、重度溶血,用3种国产HBsAg ELISA试剂对其进行重新检测,分析溶血后标本吸光度值与临界值的比值（S/CO值）的变化.结果 在HBsAg阴性标本中,不同浓度的溶血标本未检出阳性,S/CO值无明显改变（P〉0.05）;在HBsAg阳性标本中,不同浓度的溶血标本和无溶血的标本比较,S/CO值也无明显变化（P〉0.05）.结论 国产两步法HBsAg ELISA试剂可用于溶血标本的常规检测.     

酶联免疫法和胶体金法联合检测乙型肝炎表面抗原的结果分析

对我院酶联免疫法和胶体金法联合检测乙型肝炎表面抗原的结果分析如下。1材料与方法1.1标本来源2007-06/2007-12我院门诊和住院患者新鲜采集的全血样本2 909份,2 h内离心分离血清。1.2试剂酶联免疫试剂盒：科华,新创生产;胶体金试剂：新创生产;HB sA g确认试剂,罗氏公司生产。所有试剂均按说明书进行操作。1.3仪器酶标仪：芬兰M K-3雷勃酶标仪;洗板机：科华ST-36W洗板机。1.4方法所有初检标本先选用一个厂家的酶联免疫试剂检测乙型肝炎表面抗原,     

乙型肝炎表面抗原酶联免疫法检测试剂的性能评价

目的对我室使用国产乙型肝炎表面抗原酶联免疫法（ELISA）检测试剂进行性能评价。方法用ELISA法使用国产试剂检测国家参考品（n=33）、临床科研血清盘（n=40）及临床标本（n=270）,判断其是否符合国家检定标准,并分析其真实性、可靠性和收益指标。结果检测国家参考品的阴性符合率为100%（20/20）,阳性符合率为100%（3/3）,三种亚型的最低检出量均为0.5ng/mL;其真实性指标：灵敏度、特异性、粗一致性和约登指数（Youden）分别为96.88%、99.45%、98.39%和0.96;可靠性指标：变异系数（CV）和Kappa值分别为5.2%和0.96;收益指标：阳性预测值与阴性预测值分别为99.20%和97.84%。结论国产试剂性能评价结果优质,适用于临床标本检测。     

HBsAg弱阳性样本的3种测定方法比较

目的比较胶体金免疫层析试验（GICA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）与微粒子化学发光检测技术（MEIA）检测HBsAg弱阳性样本的结果符合率，以了解3种方法的特异性与灵敏度等诊断指标。方法用3种方法平行检测收集的血清标本HBsAg，并相互比较。结果3种方法检测HBsAg的结果符合率为74．3％，其中ELISA与MEIA结果符合率为94．9％；GICA与MEIA结果符合率为76．9％。GICA检测HBsAg弱阳性样本时的各项诊断指标都不甚理想。结论1．GICA的灵敏度和特异性分别为81．3％和81．3％，较ELISA和MEIA低，检测HBsAg弱阳性样本时存在一定程度的漏检率和误诊率，只能起筛查作用，遇到HBsAg弱阳性的血清标本必须与ELISA法并用，实行双检。2．ELISA较MEIA灵敏度和特异性略低，当测定标本的OD值在临界值附近即检测灰区时建议用MEIA复检。     

一种国产HBsAg确认试剂的临床应用评价

目的 评价一种国产HBsAg确认试剂的临床应用价值.方法 对543份经HBsAgELISA初筛吸光度值/临界值(S/CO)10.7的血清标本,用国产HBsAg确认试剂盒进行确认,在双份待确定标本中分别加入特异性抗-HBs试剂和对照试剂,保温后按常规HBsAg ELISA法测定吸光压(A)值,按公式求得加抗-HBs孔的抑制率,如抑制率≥50%即表示该标本被确认为HBsAg阳性.对HBsAg弱阳性的标本进行"延长确认试验",即延长酶反应时间,以提高检测的灵敏度.随机挑选39份弱阳性标本用美国雅培公司Murex HBsAg确认试验进行比对.结果 对543份标本进行确认试验,其中504份初筛HBsAg阳性的标本中,被确认为阴性的有89份(17.7%),按初筛不同S/CO值分区的阴性份数/检测份数分别为:S/CO≤5.0有87/143(60.8%),5.0相似文献   

HBV DNA PCR检测在HBsAg阴性献血人群中的应用

目的 探讨HBsAg阴性献血者HBV DNA榆测的应用价值,评估核酸检测的必要性.方法 采用PCR检测HBsAg阴性献血者HBV DNA.采用8人份混合血样测定,超离心浓缩病毒,磁珠法提取病毒核酸.如HBV DNA为阳性,则进一步检测乙型肝炎病毒血清标志物5项.结果 HBVDNA检测限量为25 U/ml,23 225份标本中有4份为HBV DNA阳性,检出率为0.17‰.进一步检测其他HBV感染的血清学指标,发现这4份标本中有2份为抗HBe和抗HBc阳性,1份为抗HBc阳性,1份为抗HBs、抗HBc阳性.对HBV DNA的定量测定表明,其含量在50～200 U/ml.结论 现行的2次酶联免疫技术的血液筛查存在HBV漏检,有必要在现有的血液筛查模式中增加抗HBc检测,或增加病毒核酸筛查.     

时间分辨免疫荧光定量检测乙型肝炎病毒前S1抗原的研究

目的 建立时间分辨免疫荧光定量分析乙型肝炎病毒PreS1抗原的方法.方法 以基因重组的带有PreS1抗原的乙型肝炎表面抗原作标准品,应用双抗体夹心免疫荧光分析方法,用抗PreS1单克隆抗体和抗-HBs分别作为固相抗体和铕标记抗体,若样本中含有PreS1抗原,则形成抗体-抗原-铕标记抗体复合物,加增强液解离铕离子,采用时间分辨荧光测量技术,对乙型肝炎病毒PreS1抗原进行检测.结果 自制TRFIA试剂检测PreS1抗原,单侧95%参考范围为0～0.26 ng/ml;自制TRFIA试剂与ELISA试剂对乙型肝炎患者血清标本中PreS1抗原的检测,TRFIA方法灵敏度高于ELISA方法,250份乙型肝炎患者血清标本中有3例标本ELISA方法结果为阴性,而用TRFIA方法可检测到PreS1抗原;对于弱阳性标本用ELISA方法检测不到时,TRFIA方法仍可检出.ELISA方法在一阳性标本1：4 096倍稀释时结果为阴性,而TRFIA方法在1：16 384倍稀释时仍为阳性;高、中、低三个浓度,批内和批间精密度测试变异系数（CV,%）均小于10%,平均回收率为103.3%;TRFIA方法检测PreS1抗原与HBsAg及HBeAg无交叉反应;50份我院正常体检者血清标本进行PreS1抗原的检测,结果均正常,特异性100%.结论 TRFIA方法定量检测PreS1抗原,灵敏度高,特异性强,能够准确及时敏感地反映患者体内乙型肝炎病毒的复制情况.     

献血者肝炎病毒感染状况分析

目的分析献血者肝炎病毒感染现状。方法应用固相酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测16578例献血者血清中的HBsAg、抗-HCV。结果献血者HBsAg、HCV感染率分别为7．80％、1．40％,总感染率为9．20％;男性组与女性组的总感染率分别为6．65％和2．52％,两组间差异有统计学意义（P〈O．01）。结论男性组比女性组有更高的肝炎病毒感染率。     

对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究

目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原（HBsAg）低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法（MEIA）检测的HBsAg结果（S/CO）在1.0-10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒（HBV）酶联免疫吸附试验（ELISA）,对比各试验结果间的差异。结果抗体中和确认试验阳性92例（82.9%）,ELISA检测阳性47例（42.3%）,2项试验检测结果间差异有统计学意义（P=0.033）。结论对HBsAg低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原的评价

目的　对４ 种胶体金免疫层析测定（ＧＩＣＡ） 试条检测乙型肝炎表面抗原（ ＨＢｓＡｇ） 的性能、结果等技术参数进行评价,为各实验室的选用提供参考。方法　采用ＧＩＣＡ 法和酶免疫（ＥＩＡ） 法对定值的ＨＢｓＡｇ 样品和２ １５８ 份全血或血清标本同时测定,并结合有关物理现象作观察,对４ 种ＧＩＣＡ试条的敏感性、特异性、试条渗透性、固相膜均匀性等结果进行评价。结果　４ 种ＧＩＣＡ 试条对ＨＢｓＡｇ的最小检出量为１ ～５ ｎｇ／ｍｌ;与ＥＩＡ 法比较,检出率为９５ ．６ ％ ～９８ ．７ ％ ,一般不出现假阳性,未发现前带反应;检测所需时间５ ～３０ 分钟,但试剂成本为ＥＩＡ 法的４ ～５ 倍。结论　ＧＩＣＡ 适用于急诊检验,便于献血员现场采血前的筛选;其敏感性低于ＥＩＡ 法,成本高;单独用于献血员筛选并不可靠,必须与ＥＩＡ 法并用,实行双检。     

乙型肝炎病毒S基因在毕赤酵母中的表达及在乙型肝炎病毒表面抗体检测中的应用

目的　构建含有乙型肝炎病毒S基因的表达载体 ,在毕赤酵母中表达出高免疫反应性的重组乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)S蛋白 ,用以制备乙型肝炎表面抗体 (HBsAb)酶免试剂盒。 方法采用聚合酶链反应从含乙型肝炎病毒全基因序列 (adw)的质粒PHBV1中扩增出S基因 ,并将其插入pPICZB质粒。携带有S片段的pPICZB质粒转化毕赤酵母菌株KM71H ,甲醇诱导重组酵母细胞表达S蛋白。表达产物包被聚丙乙烯反应板 ,用酶联免疫吸附实验 (ELISA)检测HBsAb。结果　酶切电泳及DNA测序证实乙型肝炎病毒S基因已正确克隆到表达载体中 ;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示HBsAg在毕赤酵母中表达 ;表达量约占总蛋白的 2 5 %～ 35 %。表达产物用ELISA测定效价达 1∶2 5 6 0 0 ;Westernblot显示与正常人血清无交叉反应 ;用纯化产物作为包被抗原对卫生部临床检验中心HBsAb质控物及血清标本进行检测 ,灵敏度达 10mIu/ml,特异性达 10 0 % ,重复性及线性良好 ,与国产商品试剂检测结果一致。结论　毕赤酵母表达系统高效表达出具有良好免疫反应性和特异性的HBsAg,可用于基因工程原材料的HBsAb酶免试剂盒的研制     

对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究

目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法(MEIA)检测的HBsAg结果(S/CO)在1.0~10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒(HBV)酶联免疫吸附试验(ELISA),对比各试验结果间的差异。结果抗体中和确认试验阳性92例(82.9%),ELISA检测阳性47例(42.3%),2项试验检测结果间差异有统计学意义(P=0.033)。结论对HBsAg低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。