Flt3配体研究进展

Flt3配体 (FL)是新近发现的、能够刺激早期造血的细胞因子。该因子通过与酪氨酸激酶受体 3(Flt30 )结合 ,刺激造血干细胞的增殖和分化 ,增加淋巴细胞、树突状细胞 (DC)、自然杀伤 (NK)细胞及体外长期培养的干细胞等的数量。最近的研究还发现 ,FL通过促进体内DC、NK细胞、细胞毒T细胞 (CTL)的增殖、分化和成熟 ,发挥抗肿瘤作用。本文对FL的基因克隆及蛋白质结构作一简单介绍 ,并重点对近年来FL生物学特性研究状况作一综述。     

FL与骨髓造血调控

FL（Flt3 ligand）是内源性酪氨酸激酶活性的造血生长因子受体Flt3（fins—like tyrosine kinase3）的配体，同集落刺激因子-1（CSF-1）和干细胞因子（SCF）一样，都是酪氨酸激酶受体的配体。Flt3与FI，特异性结合，启动细胞内信号传导，主要影响早期造血，并通过与其它造血因子协同促进原始干／祖细胞的增殖与分化。最近的研究表明，在骨髓造血功能障碍时，骨髓及血浆中FL水平显著升高，FL水平有可能作为辐射或其它因素所导致骨髓损伤的生物学指标。     

Flt3配体临床应用研究进展

Flt3配体 (FL)是新近发现的、具有促进早期造血功能的细胞因子。在再生障碍性贫血、骨髓抑制等一系列造血功能障碍时 ,血清FL浓度升高 ,FL是评价造血功能的可靠指标之一。FL单用或与其它细胞因子联合应用 ,可以有效地扩增造血干 祖细胞 ,增加定向造血干 祖细胞及除红系以外的各系列血细胞。FL可有效地激发造血干 祖细胞进入细胞周期 ,因此 ,对以造血干 祖细胞为靶细胞的基因治疗具有重要意义。研究还发现 ,由于FL对DC细胞、NK细胞及CTL的刺激作用 ,其在体内具有显著的抗肿瘤作用。     

Flt3L对小鼠胸腺树突状细胞在FTOC体系中分化发育的作用

为了借助FTOC体系探讨Flt3L对小鼠胸腺树突状细胞分化发育的影响。摘取15～16d龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胎鼠胸腺器官培养-FTOC),根据所使用培养基的不同实验分为两组:对照组(基础培养基)和Flt3L组(培养基中含有细胞因子Flt3L),在体外进行FTOC常规培养,12d后分别收集两实验组的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态。骨髓来源的c-kit+造血干细胞通过悬滴培养方法种植入2-脱氧鸟苷处理过的胸腺,随后将胸腺放置于组织器官培养皿中所使用的培养基为基础培养基或加入细胞因子Flt3L的培养基,进行为期12d的FTOC常规培养。12d后收集不同条件下FTOC培养的胸腺细胞,通过流式细胞仪对胸腺细胞的表型进行分析;将在不同条件下FTOC培养获得的胸腺细胞进行MACS分选,从而获得胸腺树突状细胞(CD11c+DC),再与异源的CD4+T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况。结果:在正常FTOC体系中,流式细胞仪检测结果和细胞形态学结果显示:Flt3L组胸腺DC有明显的增加,且FTOC联合悬滴培养体系中Flt3L组胸腺DC的生成率明显高于对照组;MTT检测结果也显示:没有CpG2006刺激时,胸腺DC刺激T细胞增殖的能力比较弱,但添加CpG2006刺激后,胸腺DC趋向于成熟表型,刺激T细胞增殖的能力有所增强。提示,Flt3L在小鼠胸腺DC的分化发育中发挥重要的调节作用,明显促进小鼠骨髓来源的c-kit+造血干细胞向胸腺DC的分化。     

转FL基因基质细胞对脐血造血干细胞的作用

造血干细胞不足，限制了造血干细胞移植在临床的应用。我们曾探讨了持续稳定表达人FL(FLT3配体)和GMCSF(粒-巨噬细胞集落刺激因子)的转基因基质细胞系对CD34^ 细胞具有扩增作用，而在CD34^ 细胞中只有CD34^ 、CD38^-细胞才可使造血功能重建。本实验拟通过已建立的持续稳定表达人FL转基因基质细胞系，进一步探讨FL基因修饰的骨髓基质细胞对人脐血造血干细胞的体外扩增作用。     

Flt3L免疫扩增T、B、NK、DC细胞的研究进展

Flt3L是一种可以促进多种干细胞、血细胞及其前体细胞生成、分化的细胞因子 ,对T细胞、B细胞和NK细胞和DC的前体细胞都有促进增生、诱导分化的功能。而且与其它促细胞生长的细胞因子有很好的协同作用。目前 ,尚未发现具有毒性作用 ,是一种良好的扩增剂 ,对研究细胞的形态、细胞表现型和功能具有重要的意义。     

075 Flt3L免疫扩增T、B、NK、DC细胞的研究进展

Flt3L是一种可以促进多种干细胞、血细胞及其前体细胞生成、分化的细胞因子,对T细胞、B细胞和NK细胞和DC的前体细胞都有促进增生、诱导分化的功能.而且与其它促细胞生长的细胞因子有很好的协同作用.目前,尚未发现具有毒性作用,是一种良好的扩增剂,对研究细胞的形态、细胞表现型和功能具有重要的意义.     

IL-3的分子生物学研究进展

白细胞介素-3(IL 3)是T 细胞受分裂素或抗原刺激后产生的一种淋巴因子,最初发现它可刺激裸鼠某些细胞分化为成熟T细胞,以后证明它的生物活性非常广泛,可刺激多能造血干细胞和各系祖细胞的分化与增殖,故又称为多集落刺激因子(Multi-CSF)。此外,IL 3还促进和维持肥大细胞的增殖,增强嗜酸性粒细胞的活性,促进NC 细胞(natural cytoxicity cell)杀伤实体瘤的活性等功能。由于IL 3的多方面作用,它很可能在治疗造血系统疾病、肿瘤、先天和后天性免疫缺损病、变态反应及放射病等具有临床价值。近年来,随着分子     

间充质干细胞免疫负调节机制研究进展

骨髓间充质干细胞是存在于骨髓中含量极微的一群细胞,它们通过与造血干细胞的密切接触,支持造血干细胞的分化和成熟,另外它也可以向骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞进行多向分化。近年来研究发现,骨髓间充质干细胞具有弱免疫原性以及能够抑制T、B、NK细胞和DC的功能等一系列独特的免疫学特点,有望在将来利用骨髓间充质干细胞进行免疫介导疾病的治疗,但是目前有关免疫机制仍然有待全面深入研究。     

人脐血非造血干细胞免疫原性的实验研究

目的 探讨人脐血非造血干细胞免疫原性,为脐血非造血干细胞的应用提供依据.方法 通过流式细胞术检测人脐血非造血干细胞的免疫表型;体外混合淋巴细胞培养观察人脐血非造血干细胞原代、P1代、诱导分化细胞及干扰素-γ(IFN-γ)刺激异种T淋巴细胞增殖活化作用.结果 人脐血非造血于细胞表达HLA-ABC,微弱表达HLA-DR,经IFN-γ处理后,未明显改变HLA-ABC、HLA-DR的表达水平.混合淋巴细胞培养未见各处理组人脐血非造血干细胞明显刺激T淋巴细胞的增殖.结论 人脐血非造血干细胞无论原代、传代细胞、分化细胞及IFN-γ处理的细胞免疫原性均较弱.     

NK细胞发育分化分子机制及其相关疾病研究进展

自然杀伤细胞(Natural killer cells,NK细胞)是天然免疫应答中关键的效应细胞,通过分泌细胞因子和细胞杀伤功能发挥病原体清除和肿瘤免疫监视的作用。造血干细胞在外在因子和内在因子的调控下,可定向分化为NK细胞。经过30年的研究,科学家们在NK细胞发育过程、发育微环境、发育调控及NK细胞与疾病关系等基础和应用研究方面取得了长足进步。在本综述中,我们将详细探讨调控NK细胞发育的分子机制及NK细胞功能低下与疾病的关系。     

NK-IL-2-IFN系统与免疫调节

NK细胞以其自然性抗肿瘤、抗病毒效应而引人重视.在深入探讨NK如何获得这些功能活性的研究中,发现IL-2和IFN在NK细胞的增殖、分化及活化过程中,起到重要的调节作用;而且在一定条件刺激下,NK细胞本身即可产生IL-2、IFN等淋巴因子.NK细胞在人体内的发育分化过程,大体经历先躯细胞(progenifor,Pro-NK)、前身细胞(Pre-NK)和成熟细胞或自然活性细胞等三个阶段.Pro-NK和Pre-NK出现于造血组织(骨髓),成熟型NK则进入血流及脾脏等周围淋巴组织.对于这些不同发育阶段的NK细胞的增殖、分化及活化,IL-2和IFN是必不可缺的调节因     

含人AGM区、胎肝及骨髓基质细胞培养体系程序化诱导小鼠胚胎干细胞向造血干细胞的分化

背景：前期已分别制备人主动脉-性腺-中肾区基质细胞系及胎肝基质细胞系,发现前者可促进小鼠胚胎干细胞定向分化为造血干细胞。 目的：模拟胚胎发育过程中永久造血发育的时空顺序,探讨人主动脉-性腺-中肾(AGM)区、胎肝(FL)及骨髓(BM)基质细胞对小鼠胚胎干细胞体外诱导分化为造血干细胞的支持作用,以寻求更佳的诱导条件。 方法：将小鼠E14胚胎干细胞诱导为拟胚体(EB),并利用Transwell非接触共培养体系依次在人主动脉-性腺-中肾区、胎肝及骨髓基质细胞饲养层上进一步诱导分化,按不同诱导阶段分为拟胚体对照、EB/AGM、EB/AGM+FL和EB/AGM+FL+BM共4组。共培养6 d后分别收获各组拟胚体来源细胞,以流式细胞仪检测Sca-1+c-Kit+细胞含量,进行各系造血细胞集落形成单位分析并观察细胞形态。 结果与结论：①EB/AGM+FL组和EB/AGM+FL+BM组收获细胞涂片均发现原始造血细胞。②拟胚体来源细胞经AGM区基质细胞诱导后Sca-1+c-Kit+ 细胞明显升高(P < 0.05)。③拟胚体对照组造血细胞集落形成单位低于其他各组(P < 0.05), 而EB/AGM+FL、EB/AGM+FL+BM组造血细胞集落形成单位计数亦较EB/AGM组明显增高。提示AGM+FL和AGM+FL+骨髓基质细胞微环境对原始造血干细胞的扩增效应均明显高于单纯主动脉-性腺-中肾饲养层。     

集落刺激因子（CSF）的研究进展

造血生长因子是近年来人们的研究热点之一。随着基因工程技术的发展,在国外许多重组的造血生长因子已进入临床试用阶段,广泛的临床应用也将为期不远了。造血生长因子主要包括红细胞生成索(Epo)和集落刺激因子(CSF)。Epo将有专门文章综述,本文仅就CSF的各种特性、生物学活性及临床应用做一简单综述。 一、集落刺激因子(CSF)的一般特性 在体外,造血祖细胞(Progenitor cells)的存活、增殖及终末分化依赖于细胞的造血生长因子即集落刺激因子(CSF)。已发现多种CSF,均为糖蛋白。根据其对造血祖细胞克隆增殖的作用不同而命名:“GM-CSF”刺激粒细胞和巨噬细胞的生成;“M-CSF”     

蜕膜间充质干细胞免疫调节作用及临床应用研究进展

蜕膜间充质干细胞除了具有间充质干细胞一般表型及分化潜能外,还具有低免疫原性等独特性质,是一种多能基质细胞。蜕膜间充质干细胞不但为妊娠期间胚胎植入提供适宜环境,而且通过表达免疫调控因子与多种免疫细胞相互作用,如T细胞、NK细胞及DC等,发挥其在胚胎植入、免疫耐受建立及正常妊娠维持中的重要作用。目前蜕膜间充质干细胞已经应用于造血干细胞移植、再生治疗等,具有较高的临床应用价值。本文就蜕膜间充质干细胞的来源、特征、功能及临床应用前景等进行综述。     

不同细胞因子诱导的小鼠骨髓树突状细胞亚群与小鼠脾脏树突状细胞亚群的比较

目的对粒-单集落刺激因子(GM-CSF)/白介素4(IL-4)或脱氧氟胸腺嘧啶配体(Flt3-L)体外诱导的小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)亚群和正常小鼠脾脏DC亚群进行比较,探索诱生DC的特性。方法分离Balb/c小鼠骨髓细胞,分别加入含GM-CSF/IL-4或Flt3-L的培养液,体外培养7d,倒置显微镜观察细胞形态,并用流式细胞术检测CD11c、MHCⅡ、CD4、CD8α、CD45RA及Sirp-α分子;利用免疫磁珠从小鼠脾脏细胞中分离DC。结果两组细胞因子均可在体外诱导小鼠骨髓细胞分化发育为未成熟的DC;倒置显微镜下观察可见BMDCs表面有树突状突起,具有典型的DC形态学特点,与Flt3-L诱导的BMDC相比GM-CSF/IL-4诱导的DC体积大,树突长;但是,流式细胞术检测发现Flt3-L体外诱导的BMDCs与小鼠脾脏DC亚群更为相似。结论 GM-CSF/IL-4及Flt3-L均可在体外诱导小鼠骨髓细胞分化发育为DC,且Flt3-LDC亚群与脾脏DC亚群相似,有可能成为体外研究脾脏来源DC的一种方法。     

The progress of studies on immunomodulation and clinical application of decidual mesenchymal stem cells

蜕膜间充质干细胞除了具有间充质干细胞一般表型及分化潜能外,还具有低免疫原性等独特性质,是一种多能基质细胞.蜕膜间充质干细胞不但为妊娠期间胚胎植入提供适宜环境,而且通过表达免疫调控因子与多种免疫细胞相互作用,如T细胞、NK细胞及DC等,发挥其在胚胎植入、免疫耐受建立及正常妊娠维持中的重要作用.目前蜕膜间充质干细胞已经应用于造血干细胞移植、再生治疗等,具有较高的临床应用价值.本文就蜕膜间充质干细胞的来源、特征、功能及临床应用前景等进行综述.     

FLT3配基与血小板生成素对造血调节作用的研究进展

FLT3配基(FL)主要影响造血干/祖细胞生长,影响淋巴系及髓系细胞的增殖;抑制髓系祖细胞的凋亡;促进树突细胞生长.TPO是血小板生成的主要调节因子,不仅促进巨核系造血,也作用于早期造血干/祖细胞,使早期造血干/祖细胞扩增,维持存活及抑制凋亡.FL与TPO联合,能使脐带血干细胞维持长时期的增殖和自我更新;在具有基质细胞层HESS-5细胞的无血清培养体系中,加入TPO与FL,可使CD34+CD38-细胞增殖.FL与TPO联合,对造血干/祖细胞显著扩增,有助于脐血移植的可行性.     

FLT配基与血小板生成素对造血调节作用的研究进展

FLT3配基(FL)主要影响造血干/祖细胞生长,影响淋巴系及髓系细胞的增殖;抑制髓系祖细胞的凋亡;促进树突细胞生长.TPO是血小板生成的主要调节因子,不仅促进巨核系造血,也作用于早期造血干/祖细胞,使早期造血干/祖细胞扩增,维持存活及抑制凋亡.FL与TPO联合,能使脐带血干细胞维持长时期的增殖和自我更新;在具有基质细胞层HESS-5细胞的无血清培养体系中,加入TPO与FL,可使CD34+CD38-细胞增殖.FL与TPO联合,对造血干/祖细胞显著扩增,有助于脐血移植的可行性.     

Flt3L免疫扩增T、B、NK、DC细胞的研究进展

F1t3L是一种可以促进多种干细胞、血细胞及其前体细胞生成、分化的细胞因子，对T细胞、B细胞和NK细胞和DC的前体细胞都有促进增生、诱导分化的功能。而且与其它促细胞生长的细胞因子有很好的协同作用。目前，尚未发现具有毒性作用，是一种良好的扩增剂，对研究细胞的形态、细胞表现型和功能具有重要的意义。