吴茱萸次碱对三种肿瘤细胞体外增殖抑制作用的研究

目的:探讨吴茱萸次碱的体外抗肿瘤活性。方法:采用MTT法检测了不同浓度的吴茱萸次碱在不同的时间点对S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞、人源Hep G2肝癌细胞的抑制情况。结果:吴茱萸次碱在浓度为64、32、16、8、4μg/ml时,对S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞、人源Hep G2肝癌细胞均具有明显的抑制作用,随着药物浓度增加,抑制率逐渐增大,与阴性对照组比较作用极其显著。吴茱萸次碱作用细胞24h时,对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为34.10、24.81和28.07μg/ml,对H22的IC50值最小(24.81μg/ml),生长抑制作用最好;作用48h时,对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为19.35、20.62和27.81μg/ml,对S180的IC50值最小(19.35μg/ml),抑制作用相对最好;作用72h时,对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为15.35、17.74和14.52μg/ml,对Hep G2的IC50值最小(14.52μg/ml),抑制作用最好。结论 :吴茱萸次碱对三种肿瘤细胞增殖均有明显的抑制作用。     

人参皂苷Rb1干预长春新碱抑制骨髓基质细胞增殖的研究

目的:探讨人参皂苷Rb1(GS Rb1)促进小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)生长及干预长春新碱(VCR)抑制小鼠BMSCs增殖的作用。方法:正常对照组,GS Rb1(1.0、5.0、10.0、15.0μg/ml)诱导BMSCs增殖组,VCR(2.5、5.0、10.0、15.0μg/ml)抑制BM-SCs增殖组,GS Rb1干预VCR抑制BMSCs增殖组,应用MTT法测定BMSCs增殖。结果:①与正常对照组比较,GS Rb1 1.0～10.0μg/ml随浓度升高其促进BMSCs增殖也增加,GS Rb1为10.0μg/ml时差异具有显著性(P<0.05);VCR 2.5～15.0μg/ml随浓度的升高抑制BMSCs增殖也增强,VCR 5.0～15.0μg/ml时差异具有显著性(P<0.05);GS Rb1 1.0～15μg/ml各组与VCR 5.0～15.0μg/ml各组比较,以及GS Rb1 10.0μg/ml组与VCR 2.5μg/ml组比较其BMSCs增殖显著增加(P均<0.05)。②GS Rb1 5.0μg/ml、10.0μg/ml1、5.0μg/ml分别与VCR 5.0μg/ml培养,其能显著干预VCR对BMSCs增殖的抑制(P均<0.05)。结论:长春新碱明显抑制骨髓基质细胞生长;人参皂苷Rb1可促进骨髓基质细胞生长且具有干预长春新碱对骨髓基质细胞增殖的抑制作用。     

银杏酸的荧光特征和光热稳定性研究

目的 研究银杏酸的荧光特征,探讨光、热对银杏酸稳定性的影响.方法 通过荧光扫描研究溶剂、pH值对银杏酸荧光特性的影响,建立检测银杏酸的荧光分光光度法.结果 银杏酸在pH 4.0甲醇溶液中荧光强度较强,激发波长279 nm,发射波长404 nm时,银杏酸在0.221～20.31 μg/ml浓度范围内与荧光强度呈现良好的线性关系,相关系数为R=0.997 5;检测限0.023 5 μg/ml.结论 银杏酸溶液对光不稳定,随光照时间延长浓度降低;银杏酸溶液在5℃时稳定,25℃时稳定性有所下降,并随温度升高或加热时间延长降解率增大.该方法可用于测定光照、加热对银杏酸的影响.     

人参皂苷Rb1抑制长春新碱诱导的骨髓基质细胞凋亡

目的:探讨人参皂苷Rb1抑制长春新碱诱导的小鼠骨髓基质细胞凋亡的作用。方法:研究分为正常对照组、长春新碱组、长春新碱凋亡诱导组,不同浓度人参皂苷Rb1(1.0、5.0、10.0、15.0μg/ml)抗长春新碱(5.0μg/ml)对骨髓基质细胞的生长抑制和凋亡组;采用MTT法测定骨髓基质细胞增殖,采用Annexin V/PI双染流式细胞术及Hoechst 33342荧光染色法测定细胞凋亡。结果:人参皂苷Rb1在5.0¹5.0μg/ml浓度范围内显著地降低了长春新碱对骨髓基质细胞的生长抑制;人参皂苷Rb1在5.015.0μg/ml浓度范围内显著地降低了长春新碱对骨髓基质细胞的生长抑制;人参皂苷Rb1在5.0¹5.0μg/ml浓度范围内显著地阻断长春新碱对骨髓基质细胞的生长抑制。人参皂苷Rb1抗长春新碱诱导的骨髓基质细胞凋亡具有浓度依赖性。结论:人参皂苷Rb1能够抑制长春新碱诱导的骨髓基质细胞凋亡。     

楮实子生物碱的细胞毒作用研究

目的:对楮实子总生物碱抗肿瘤细胞的活性进行探讨。方法:分别用MTT及集落形成法考察楮实子中提得的总生物碱对Hela、BEL-7402、A375、SMM1990、Saos-2细胞株的细胞毒作用。结果:当药物浓度在10μg/L以下,抑制作用不明显。随着药物浓度的升至50μg/L时,药物对肿瘤细胞生长的抑制作用较明显,MTT法测得抑制率在20%以上,集落形成法测得抑制率在30%以上。而当药物浓度达到100μg/L时,楮实子总生物碱显示出较为显著的肿瘤细胞抑制作用,两种方法的细胞生长抑制率分别在50%和60%以上。结论:楮实子中总生物碱有较强的细胞毒作用。     

三叶青脂溶性提取物对A375细胞增殖及黑色素合成的影响

目的探讨三叶青三氯甲烷提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。方法采用MTT比色法,测定不同浓度三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞体外抑制作用;比色法测定酪氨酸酶活性和黑色素含量;采用光学显微镜法观察其对细胞形态的影响。结果三叶青三氯甲烷提取物在6～500μg/ml浓度范围内对A375细胞增殖有显著的抑制作用(P<0.01),且呈时间-剂量依赖性;浓度小于50μg/ml时,对酪氨酸酶活性和黑色素合成抑制有增加趋势;在100～500μg/ml时,对A375肿瘤细胞有较强的抑制作用;光学显微镜下可见典型凋亡细胞形态学改变。结论三叶青三氯甲烷提取物对A375细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素合成具有抑制作用。     

辽东楤木叶总皂苷体外抗肿瘤作用的研究

目的探讨辽东楤木叶总皂苷(ETS)的体外抗肿瘤作用,为进一步将其开发成新靶点的抗肿瘤药物提供可靠的科学依据,为研发具有自主知识产权的抗肿瘤新药奠定坚实的基础。方法利用磺酰罗丹明B(SRB)染色法,观察辽东楤木叶总皂苷不同浓度对A549、BGC、BEL-7402和HCT-8肿瘤细胞的抑制作用。结果 ETS浓度达到31.25μg.ml-1时即可对人肺腺癌A549细胞、人胃癌BGC细胞和人肝癌BEL-7402细胞有50%生长抑制作用,达到62.5μg.ml-1时即可对人结肠癌HCT-8细胞有50%生长抑制作用。其浓度达到125μg.ml-1时即可对人胃癌BGC细胞和人肝癌BEL-7402细胞有50%杀死的作用。浓度达到500μg.ml-1时即可对人结肠癌HCT-8细胞有50%杀死的作用,而对人肺腺癌A549细胞未测出其50%杀死作用。各组均未测出完全抑制细胞生长所需的ETS浓度。对于体外加药48 h后对A549、BGC、BEL和HCT-8细胞OD值的影响,ETS组500,250,125μg.ml-1均有极显著性统计学差异(P<0.01),62.5μg.ml-1对A549、BEL和HCT-8均有显著性意义;31.25μg.ml-1均无统计学意义。结论 ETS体外对人肺癌A549、人胃癌BGC、人肝癌BEL-2、人结肠癌HCT-8肿瘤细胞有一定的抑制作用。     

黄芩苷对人肝癌细胞系SMMC7721抑瘤作用的实验研究

目的 研究黄芩苷对人肝癌细胞系SMMC7721的生长抑制作用并初步探讨其作用机制.方法 采用 MTT法检测黄芩苷对人肝癌SMMC7721细胞株增殖的抑制作用,并采用流式细胞技术检测其对SMMC7721细胞周期的影响.结果 ①4～0.005 312 5 ms/ml黄芩苷组对SMMC 7721肿瘤细胞生长均具有明显抑制作用,与细胞组对照比差异有显著性(P<0.05或P<0.01).0.5～0.062 5 ms/ml黄芩苷组肿瘤生长抑制率与其他浓度组比差异有显著性(P<0.01),与顺铂对照组比较,差异无显著性(P>0.05).当黄芩苷浓度为0.5 ms/ml时,其对肿瘤细胞的生长抑制率最高,为63.8%;②0.5 mg/ml黄芩苷对SMMC7721肿瘤细胞形态的损害作用最明显,可见60%～70%的细胞呈碎片样,少数细胞呈悬浮生长;③0.5 ms/ml黄芩苷能够使细胞组滞于G0/G1期(G0/G1期细胞为72.19%).结论 黄芩苷对SMMC 7721细胞生长具有明显抑制作用,且可影响其细胞增殖周期.     

川芎嗪、丹参对血管内皮细胞生长的影响

目的:探讨川芎嗪、丹参二种注射液对血管内皮细胞生长的影响.方法:以川芎嗪和丹参作用于血管内皮细胞,采用苔盼蓝染色排除法活细胞计数,倒置相差显微镜观察细胞形态学改变.结果:川芎嗪注射液1.5μg/ml、15μg/ml、150μg/ml作用于ECV304细胞,其计数均较对照组显著减少(P＜0.05).丹参注射液150μg/ml、15μg/ml对ECV304细胞仅有减少趋势.结论:川芎嗪注射液对血管内皮细胞的生长有明显的抑制作用,丹参注射液对血管内皮细胞的生长没有抑制作用.     

仙鹤草注射液对人癌细胞生长抑制作用的研究

目的:研究仙鹤草注射液对人癌细胞的生长抑制作用.方法:应用流式细胞技术和电镜技术体外分别观察了仙鹤草注射液对胃癌BGC-803和宫颈癌Hela细胞株的生长抑制作用及细胞周期的影响.结果:仙鹤草注射液在药物浓度为100μg(生药)/ml时,对胃癌BGC-803和宫颈癌Hela的抑制率分别为61.9%、67.9%.流式细胞检测结果显示仙鹤草注射液可干扰肿瘤细胞周期进程,阻滞肿瘤细胞由G1 G0期向S期和G2 M期转化,属于细胞周期特异性抗肿瘤药物.结论:仙鹤草注射液对人肿瘤细胞有生长抑制作用.     

银杏酸单体的抗菌活性研究

目的:从银杏外种皮中得到银杏酸混合物及三种单体,研究银杏酸的抗菌活性及其侧链与活性的关系.方法:采用二倍稀释法测定了银杏酸混合物、各单体及水杨酸的最低抑菌浓度.结果:银杏酸混合物对痤疮丙酸杆菌等G 菌具有良好的抑制作用.水杨酸无侧链,无抗菌活性.银杏酸侧链为C13:0时抑菌效果最强.结论:银杏酸的侧链是其产生抗菌活性的主要效应部位,侧链长短是银杏酸抗菌作用强弱的关键.     

银杏酸抑菌效果的初步研究

对银杏外种皮石油醚提取物和银杏酸的抑菌活性进行了初步研究,发现银杏酸和外种皮粗提物对金葡菌、蜡样芽孢杆菌、枯草杆菌均有抑制作用,对耐青霉素金葡菌也有一定的抑制作用,银杏酸与青霉素联用,具有加强作用。     

青天葵中黄酮类化合物的体外抗肿瘤实验研究

目的:观察青天葵中黄酮类化合物鼠李柠檬素和鼠李秦素对7种肿瘤细胞的抑制作用。方法:采用MTT法测定了它们各自对白血病细胞株L1210和P388D1、宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、黑色素瘤细胞株B16、神经性肿瘤细胞株NG108-15、人肝癌细胞株Hele7404的生长抑制情况。结果:鼠李柠檬素对L1210,P388D1,Hela,B16,NG108-15和Hele7404 6种瘤株都有直接抑制作用,而且都随着浓度的增加,抑制作用增强。但鼠李柠檬素对瘤株SGC7901基本无抑制作用,鼠李秦素对7种瘤株均无抑制作用。结论:鼠李柠檬素具有一定的体外抗肿瘤作用,初步确定鼠李柠檬素为青天葵抗肿瘤的活性成分之一。鼠李秦素基本无抗肿瘤作用。     

海绵提取物S1～S3抑制肝癌细胞和肺腺癌细胞增殖作用的实验研究

目的:用体外培养法研究海绵提取物S1～S3对肝癌7402细胞、肺腺癌GLC-82细胞和胃癌MCG-803细胞增殖的抑制作用.方法:采用MTT法进行研究.结果:海绵提取物S1、S2和S3分别处理肿瘤细胞48 h后,S3呈剂量依赖性抑制肺腺癌GLC-82和肝癌7402细胞增殖,测得IC50分别为2.714 μg/ml和2.598 μg/ml,而对胃癌MCG-803细胞增殖无明显抑制作用;S1和S2对3种肿瘤细胞增殖均无抑制作用.结论:海绵提取物S3对肝癌7402细胞和肺腺癌GLC-82细胞的增殖有抑制作用.     

荆芥挥发油抗肿瘤作用的研究

目的:研究荆芥挥发油的抗肿瘤活性,确定其最小杀伤肿瘤细胞的剂量;同时观察诱导细胞凋亡的最小剂量以确定其抗肿瘤机制。方法:根据药物作用的不同时间,分为24h、48h、72h三组,每组分设不同剂量(0.125mg/ml-16mg/ml)。以吐温-80作为助溶剂对荆芥挥发油倍比稀释,对人A549肺癌细胞进行抗肿瘤试验,采用SRB方法和形态学确认细胞杀伤率,并采用荧光染料Hochest33258染色检测细胞的凋亡水平。结果:大于或等于4mg/ml以上剂量的荆芥挥发油提取物对A549具有较高的抑瘤率,最低可达91.2%;最低抑瘤浓度为1mg/ml,抑瘤率为43.3%。形态学观察结果表明,被杀伤的细胞体积萎缩、细胞膜皱缩、成活细胞数稀疏、数量明显低于空白对照组。不同给药时间的研究结果表明,与作用时间为24h组比较,48h及72h组的杀伤作用效果更佳(P<0.05或P<0.01)。以低于杀伤浓度的剂量(0.125-1mg/ml)作用于A54972h,利用Hochest33258观察其对A549细胞凋亡的影响,结果表明,0.25mg/ml-1mg/ml剂量的荆芥挥发油提取物作用于细胞72h对肿瘤细胞具有明显的诱导细胞凋亡的作用。结论:高浓度(4mg/ml-16mg/ml)的荆芥挥发油对人肺癌A549细胞株有杀伤作用,低浓度(0.25mg/ml-1mg/ml)的荆芥挥发油对A549有诱导细胞凋亡的作用。     

人参皂甙对CD34+造血干/祖细胞的增殖和分化作用

目的：探索人参皂甙（ＧＳ）对ＣＤ３４＾＋造血干／祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法：采用免疫磁珠法（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＾＋细胞，在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的ＧＳ，检测对ＣＤ３４＾＋造血干／祖细胞增殖，形成祖细胞集落的提高率，并用流式细胞仪检测液体培养后细胞表面标记的变化。结果：ＧＳ（５～５０μｇ／ｍｌ）能提高ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ集落     

人参二醇、三醇皂苷对人骨髓造血祖细胞增殖作用的研究

目的：探讨人参二醇皂苷(panaxadiol saponin,PDS)和三醇皂苷(panaxtrol saponin,PTS)对骨髓造血祖细胞增殖的作用。方法：从人参总皂苷进一步分离纯化出PDS和PTS,用体外造血祖细胞集落形成技术,观察PDS、PTS对小鼠骨髓红系祖细胞(CFU—E、BFU—E)、粒单系祖细胞(CFU—GM)和多向祖细胞(CFU—Mix)的刺激增殖作用。结果：不同浓度的PDS(2．5～200μg／m1)可促进造血祖细胞增殖;CFU—E,BFU—E,CFU—GM和CFU—Mix集落产率均显著高于对照组(P<0．05),提高率(％)分别达54．9±6．3、48．8±5．1、27．6±4．2和48．9±3．9。而PTS在同样浓度时,CFU—E、BFU—E产率均显著低于对照组(P<0．05)：终浓度为200μg／ml时,CFU—E、BFU—E集落产率为零。在CFU—GM培养中,12．5μg／ml浓度的PTS使集落产率提高(29．7±2．2)％(P<0．05);而100μg／ml和200μg／ml的PTS却出现对CFU—GM的抑制作用,抑制率分别为(48．6±3．9)％和100％,、结论：PDS是总皂苷内促进造血的有效成分,而PTS对红系祖细胞具有抑制作用,对粒-单系祖细胞的作用呈剂量依赖关系。     

3种中草药滴眼液对不同细胞株的体外细胞毒作用

目的:探讨3种中草药滴眼液对体外培养的人癌细胞和正常细胞的细胞毒作用。方法:采用噻唑蓝(MTT法)测定鱼腥草滴眼液、葛根素滴眼液和双黄连滴眼液对6种细胞株(CNE2、G lc-82、HRPE、F ibro、3T3和ECV-304)的细胞毒作用并以半数抑制浓度(IC50)进行评价。结果:鱼腥草滴眼液对人癌细胞CNE2和G lc-82的IC50分别为11.5±0.25μl/m l和24.0±0.8μl/m l;对正常细胞HRPE、F ibro、3T3和ECV-304细胞的IC50分别为18.0±3.5μl/m l、52.0±14.0μl/m l、17.5±3.5μl/m l和17.5±1.3μl/m l。葛根素滴眼液对CNE2和C lc-82细胞的IC50为9.8±2.3μl/m l和17.0±5.0μl/m l,对ECV-304细胞的IC50为10.5±0.95μl/m l,而对HRPE、F ibro和3T3的IC50均>110μl/m l。双黄连滴眼液对CNE2、G lc-82细胞的IC50为18.9±5.0μl/m l和23.9±0.6μl/m l,对HRPE细胞的IC50为113.9±25.6μl/m l,对F ibro、3T3和ECV-304的IC50均>100μl/m l。结论:鱼腥草滴眼液对人癌细胞和正常细胞均有显著的细胞毒作用。葛根素滴眼液和双黄连滴眼液对正常细胞无明显的细胞毒作用。     

黄芪注射液对小鼠骨髓细胞增殖周期的影响

采用骨髓细胞体外培养以及流式细胞仪等实验血液学方法。研究黄芪注射液（ＡＭＩ）对正常和贫血小鼠骨髓细胞增殖周期的影响。终浓度为４０ｕｇ／ｍｌ的ＡＭＩ以及终浓度为４０ｕｇ／ｍｌ、４００ｕｇ／ｍｌ的ＡＭＩ加入培养体系中可分别促进正常或贫血小鼠骨髓细胞进入增殖活跃期（Ｐ〈０．０５）,提示一定浓度的ＡＭＩ可以增强小鼠的造血功能。     

灵芪胶囊含药血清对人红白血病K562细胞增殖抑制作用的影响

目的：观察灵芪胶囊（LQC）含药血清在体外对K562白血病细胞增殖抑制作用的影响。方法：采用血清药理学方法制备灵芪胶囊含药血清,以不同浓度的含药血清处理体外培养的K562白血病细胞,并测定抑制率、分裂指数以及克隆形成能力,观察灵芪胶囊含药血清对肿瘤细胞的抑制作用;用W right-G iemsa染色方法观察肿瘤细胞形态的变化。结果：不同浓度灵芪胶囊含药血清对K562细胞的增殖具有抑制作用,并呈剂量依赖关系;灵芪胶囊含药血清对肿瘤细胞的分裂指数和克隆形成能力均具有显著的降低作用,在一定的时间内与剂量呈正相关,同时亦使肿瘤细胞的形态结构发生改变。结论：灵芪胶囊含药血清对K562白血病细胞具有细胞毒作用,其直接杀伤和破坏肿瘤细胞的作用是灵芪胶囊抗肿瘤的主要机理之一。