肿瘤乏氧放射增敏剂的研究进展

摘 要 改善肿瘤细胞的乏氧,可有效减少其对放疗的抵抗,从而提高治愈率。目前用于改善肿瘤细胞缺氧减少放射抵抗的化合物已经不仅仅局限于原有的亲电性放射增敏剂,许多具有靶向性的乏氧放射增敏剂也成为研究重点。本文在介绍肿瘤乏氧机制的基础上,对新型靶向制剂、亲电性乏氧细胞放射增敏剂、生物还原剂与植物天然提取物这四类乏氧细胞放射增敏剂的研究进展进行了综述。     

隐丹参酮对宫颈癌细胞系Hela细胞放射增敏作用及其机制的研究

丹参的主要抗肿瘤活性成分一丹参酮（tanshinone）,是一组脂溶性菲醌类成分。隐丹参酮是丹参中提取的脂溶性成分之一,主要通过抑制细胞增殖、促进凋亡、影响细胞周期分布以及促进分化等机制发挥抗肿瘤作用。通过化学药物有目的地改变细胞周期,进而增强放疗敏感性,对肿瘤的治疗可能有重要意义。本实验主要研究隐丹参酮对宫颈癌细胞系Hela的细胞毒性、放射增敏作用及其对细胞周期的影响,进一步了解其作用机制,为隐丹参酮应用于宫颈癌放射增敏治疗提供临床依据。     

2—硝基咪唑类乏氧细胞放射线增敏剂的合成及其抑制血管增生作用

设计并合成了２－氯代乙酰氨甲酰基－１（２－硝基咪唑基）－３－叔丁氧基丙烷,２－溴代乙酰氨甲酰基－１－（２－硝基咪唑基）－３－（４－叔丁基）酚基丙烷及结构类似的光学异构体,测定了卤代乙酰氨甲酰基－２－硝基咪唑类化合物体外乏氧细胞放射增敏活性和体内抑制血管增生活性。结果表明：２－硝基咪唑侧链上引入卤代乙酰氨甲酰基可明显增大体外乏氧细胞放射增敏活性,而且表现出较强的体内抑制血管增生活性。     

3-硝基-1,2,4-三唑类乏氧细胞放射增敏剂的构效关系

为了寻找毒性低、增敏作用强的乏氧细胞放射增敏剂,设计并合成了一系列5-溴-,5-甲基-,和5-未取代的3-硝基-1,2,4-三唑-1-乙酰胺类化合物,用HeLaS3细胞进行了体外试验。结果表明5-溴取代衍生物的增敏作用强于相应的5-甲基-或5-未取代的硝基三唑衍生物,但是它们的毒性亦增大。修饰1位乙酰胺侧链也可以改变化合物的增敏作用和亲脂性。在所测定的化合物中TA-101[2-(3-硝基-1-三唑基)乙酰胺]由于有高的增敏作用和低亲脂性,可能是一个有希望的放射增敏剂。     

大黄素型羟基蒽醌类化合物对宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响

目的:研究大黄中活性成分大黄素型羟基蒽醌类化合物对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制和体外放射增敏活性。方法:MTT法测定大黄素型羟基蒽醌类化合物对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制活性,集落形成实验测定各化合物对HeLa细胞的放射增敏活性,单靶多击模型拟合剂量存活曲线,计算放射生物学参数和放射增敏比。结果:大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用呈剂量依赖性,其半数抑制浓度(IC50)值分别为262.1、79.9、59.6、435.6μmol·L-1;集落形成实验结果显示,给药合并照射组细胞存活分数低于单纯照射组,芦荟大黄素、大黄酸对宫颈癌HeLa细胞体外放射增敏比分别为1.84和1.13。结论:芦荟大黄素等羟基蒽醌类化合物对宫颈癌HeLa细胞具有较为明显的生长抑制活性,并且对宫颈癌HeLa细胞具有放射增敏活性。     

白藜芦醇对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

近年我国宫颈癌(Cervical Carcinoma)的发病率呈逐渐上升趋势,成为危害妇女生命及降低妇女生活质量的主要疾病之一。从中草药和天然植物中提取和寻找防治肿瘤的有效成分己成为治疗肿瘤的希望和新途径。很多学者认为,治疗肿瘤最有效的途径是诱导肿瘤细胞凋亡,因而,诱导细胞凋亡己成为寻找抗肿瘤药物的新切入点及评价疗效的一项新     

紫杉醇诱导Hela细胞凋亡及其与凋亡相关蛋白的关系

目的　探讨Taxol诱导Hela细胞凋亡的特点及细胞凋亡的分子机制。方法　用紫杉醇诱导Hela细胞凋亡 ,采用HE、TUNEL电镜及流式细胞仪分别检测凋亡及观察凋亡细胞的形态变化特点。采用免疫组化S P法及ELISA等分别检测凋亡相关蛋白PCNA及caspase 3的表达和活性的动态变化。结果　紫杉醇可诱导Hela细胞凋亡并可使Hela细胞出现较多的病理性核分裂像以及细胞核的多微核化 ;正常增生的Hela细胞有一定的PCNA表达 ,加入Taxol后 ,与对照组比较 ,其表达明显增强 ;不同浓度的Taxol可使Hela细胞中caspase 3活性的增高 ,并具有时间及剂量的依赖性。结论　Taxol可诱导Hela细胞凋亡 ,Hela细胞凋亡是Caspase 3依赖性的     

姜黄素对宫颈癌放射增敏的研究进展

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,其发病率仅次于女性乳腺癌,居第二位,其病死率已跃居妇科恶性肿瘤之首。放射治疗是中晚期宫颈癌的主要治疗手段,但由于宫颈癌对辐射中低度敏感,想达到满意的疗效需提高宫颈癌对辐射的敏感性。近年来,姜黄素因具有提高肿瘤放射敏感性的特性而引起了国内外学者的广泛关注。多项体外实验证实姜黄素对宫颈癌具有抑制及放射增敏作用,本文就其对宫颈癌放射增敏机制进行了归纳总结。现将此方面的研究进展进行综述。     

顺铂增加人Hela细胞放疗敏感性涉及细胞周期的研究

目的 探讨小剂量顺铂增加人Hela细胞对电离辐射敏感性涉及细胞周期动力学的机理。方法 将Hela细胞分为空白对照组、单纯放疗组、单纯化疗组和放疗加化疗组，用流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期变化，采用SP免疫组化法检测Hela细胞受作用后p53基因蛋白表达情况。结果 单纯放疗、单纯化疗均可诱导Hela细胞凋亡，而放疗加化疗组细胞凋亡率明显增加，经顺铂作用后，Hela细胞周期发生明显变化，表现为G1期减少、S期和G2／M期增加，突变型p53表达减弱。结论 小剂量顺铂可通过改变培养的人Hela细胞周期，诱导细胞G2／M期延迟从而提高放疗敏感性，可能与其内在的p53基因表达改变有关。     

细胞缝隙连接对乳腺癌细胞紫杉醇敏感性的影响

目的：探讨细胞缝隙连接对乳腺癌细胞紫杉醇敏感性的影响。方法：以乳腺癌T47D细胞为研究对象,采用CCK8法检测细胞毒性。结果：紫杉醇（TAX）的细胞毒性有细胞密度依赖性,与低密度相比,细胞在高密度时的毒性显著增加。这说明,细胞在高密度有缝隙连接（Gap Junction,GJ）形成的情况下,TAX的细胞毒性显著增加。此外,细胞在高密度的情况下,分别采用维甲酸（RA）和甘草次酸（18-α-GA）增强或抑制GJ功能,结果发现,RA组的TAX细胞毒性显著高于正常组,相反,给予18-α-GA抑制GJ功能后,TAX的细胞毒性显著降低。结论：增强GJ功能可显著提高乳腺癌细胞对TAX的敏感性。GJ可能是提高TAX对乳腺癌疗效的新靶点。     

人宫颈癌紫杉醇耐药细胞株Hela/PTX的建立及其生物特性研究

摘 要 目的：建立人宫颈癌紫杉醇耐药细胞株Hela/PTX,并考察其生物学特性。方法: 以人宫颈癌Hela细胞为亲本细胞,采用低浓度持续诱导法建立紫杉醇耐药细胞株Hela/PTX。在显微镜下观察细胞形态学的变化;采用CCK 8法检测耐药细胞株对不同化疗药物的耐药性;采用高效液相色谱法测定细胞中药物的蓄积;采用Western blot法和实时荧光定量PCR技术分别检测细胞中P糖蛋白（P gp）、Survivin蛋白和mRNA表达。结果:成功建立Hela/PTX多药耐药细胞株,其对PTX的耐药数是58.40,且对多西他赛和氟尿嘧啶有交叉耐药,耐药指数分别为8.11,4.62。Hela/PTX细胞中P gp和Survivin的mRNA表达水平分别是Hela细胞的(9.93±0.90)倍(P<0.05)、(3.02±0.57)倍(P<0.05)。在耐药细胞中P gp和Survivin的蛋白表达水平明显高于亲本细胞。结论:成功构建了人宫颈癌耐药细胞株Hela/PTX,具有多药耐药的基本生物学特性,可做为紫杉醇耐药机制研究的体外模型及为宫颈癌多药耐药机制的研究提供实验基础。     

PJA1诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的初步研究

目的:探讨PJA1在宫颈癌Hela细胞中的促凋亡作用。方法:采用流式细胞仪检测转染PJA1后的宫颈癌细胞12,24,36,48 h的凋亡变化。采用Western免疫印迹(Western Blot)检测凋亡通路。结果:宫颈癌Hela细胞在转染PJA1后12 h凋亡率最低,48 h最高,并且在凋亡中与caspase通路相关。结论:PJA1可以通过caspase通路促进宫颈癌Hela细胞凋亡。     

转染p21基因对人宫颈癌Hela细胞的影响

目的研究转染p21基因对人宫颈癌Hela细胞的抑制及凋亡影响。方法用Lipofectamine2000脂质体介导,将质粒pcDNA3．1（＋）-p21基因转入人宫颈癌Hela细胞株;免疫组化法检测转染021基因后,其编码蛋白在Hela细胞的表达情况;描绘p21基因转染后Hela细胞的增殖曲线;WST-1法测定OD值,计算细胞生长抑制率及流式细胞仪检测p21基因转染对Hela细胞的凋亡影响。结果免疫组化法显示p21基因转染后在Hela细胞的胞核内高表达;p21基因的表达可抑制Hela细胞的体外生长,且Hela／021细胞的生长曲线较对照组明显降低;WST-1法显示Hela／p21的细胞活力与对照组相比有显著性差异（P〈0．05）;流式细胞仪检测显示转染p21基因的Hela细胞凋亡率显著高于对照组,约20％以上。结论转染p21基因对Hela细胞具有明显的抑制和诱导凋亡作用。     

化疗药物诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的研究

目的观察顺铂(CDDP)、长春新碱(VCR)、平阳霉素(BLM)、顺铂+平阳霉素、顺铂+长春新碱在体外对人宫颈肿瘤细胞的作用。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法观察药物对Hela细胞的影响,用流式细胞仪观察细胞凋亡变化。结果CDDP、VCR、BLM单用对Hela细胞抑制率和凋亡率均高于联合用药组。各用药组对细胞抑制率均高于凋亡率,仅CDDP组两作用相近。结论CDDP、VCR、BLM能有效抑制Hela细胞生长,联合应用出现拮抗作用。     

阿司匹林诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及机制

目的:探讨阿司匹林对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及机制。方法:体外培养HeLa细胞,分别以0.5,1.0,5.0mmol.L-1阿司匹林干预。采用Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒检测凋亡;碘化丙锭(PI)染色法检测细胞周期;Western-blot法检测NF-κB p65蛋白表达。结果:0.5,1.0,5.0mmol.L-1的阿司匹林均能使Hela细胞凋亡率明显增加,S期、G2/M期细胞比例减少,G0/G1期细胞比例显著增加,细胞中NF-κB p65蛋白表达水平明显下降,且上述作用均呈剂量依赖性。结论:阿司匹林在体外可以通过下调NF-κB p65蛋白表达,影响细胞周期,诱导Hela细胞凋亡。     

莪术油注射液对宫颈癌细胞株Hela增殖及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的：探讨莪术油注射液对宫颈癌细胞Hela增殖的抑制作用及潜在作用机制。方法：采用CCK-8法筛选莪术油最佳给药剂量,并设立对照组和莪术油处理高、中、低剂量组。CCK-8法检测莪术油对Hela细胞生长曲线的影响;流式细胞术检测莪术油对Hela细胞周期的影响;Western Blot试验检测莪术油对Hela细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达的调节作用。结果：CCK-8试验表明,莪术油给药剂量越大,其对Hela细胞增殖的抑制作用越明显,以高剂量组为最优。流式细胞术试验表明,莪术油可将Hela细胞阻滞在G1期,使S期和G2期细胞比例明显降低。Western Blot试验结果显示,莪术油处理后Wnt3a、β-catenin、C-myc、CyclinD1蛋白表达相较于对照组其表达明显降低。结论：莪术油注射液通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制宫颈癌细胞增殖。     

青藤碱联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞增殖作用的影响

目的研究青藤碱联合顺铂对体外培养宫颈癌Hela细胞增殖的作用,及Maspin、Caspase-3、环氧化酶(COX)-2蛋白在Hela细胞中的表达。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞系,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定青藤碱及其联合顺铂对宫颈癌Hela细胞增殖的影响;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率;免疫细胞化学测定Maspin、Caspase-3、COX-2蛋白表达情况。采用方差分析和LSD-t检验进行统计分析。结果青藤碱对人Hela细胞有增殖抑制作用,呈时间、浓度依赖性,与顺铂联用后协同抑制细胞增殖(P<0.05),凋亡率明显增高(P<0.05),上调Maspin表达,下调Caspase-3、COX-2表达。结论青藤碱具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖的作用,与顺铂联合对宫颈癌Hela细胞的增殖具有协同抑制作用。     

宫颈癌术后紫杉醇联合顺铂同步放化疗的临床研究

目的：探索含高危因素宫颈癌根治性术后紫杉醇联合顺铂同步放化疗的疗效及毒性。方法180例宫颈癌患者均行根治性手术,术后病理证实具有高危因素,并于术后3~4周行辅助同步放化疗。治疗方案：研究组(TP组)为紫杉醇135~150 mg/m2 d1+顺铂25~30 mg/m2 d1~3,每3周1次同步化疗。对照组(P组)为顺铂35~40 mg/m2,每周1次同步化疗。全组病例采用相同放疗方案：总放疗剂量45~59 Gy,1.8~2.2 Gy/次,4~5次/周。主要研究内容为5年无局部复发生存率(LRFS)、5年无瘤生存率(DFS)、5年无远处转移生存率(FDMS)、5年总生存率(OS)以及毒性反应。结果全组中位随访期33个月(1~84个月),未能观察到研究组较对照组可以提高无瘤生存期、无局部复发生存期和总生存期。研究组和对照组5年无远处转移生存率分别为95.4%和82.6%,差异具有统计学意义(P=0.034<0.05)。而研究组治疗期间37.8%的患者出现了3/4级白细胞下降,44.4%的患者出现严重骨髓抑制。结论与顺铂相比,紫杉醇联合顺铂辅助同步放化疗未能提高含高危因素的宫颈癌术后患者的总生存率,但它具有提高无远处转移生存率的优势,而且除了血液学毒性外,其毒副作用整体可接受。     

重组质粒白细胞介素-24对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的生长及血管生成的抑制作用研究

目的探讨基因重组质粒白细胞介素(IL)-24对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的生长及血管生成的抑制作用。方法对4周龄裸鼠注射人宫颈癌细胞株Hela细胞建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,把造模成功的裸鼠分为磷酸盐缓冲液(PBS)、空载质粒、基因重组质粒IL-243组,分别向瘤内注射PBS、pDC316+Lipofec-tamine2000、pDC316-hIL-24+Lipofectamine2000,比较干预后各组移植瘤的体积及微血管生成的情况。结果 IL-24基因成功转染入实验组肿瘤细胞并在其中成功表达,移植瘤的质量组间比较差异有统计学意义(P<0.01),PBS组、空载质粒组的移植瘤质量高于基因重组IL-24组(P<0.01),PBS组、空载质粒组移植瘤质量差异无统计学意义(P>0.05);PBS组、空载质粒组微血管密度显著高于重组IL-24组(P<0.01),但PBS、空载质粒组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-24能够抑制宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的生长,抑制肿瘤新生血管生长是抑制肿瘤生长的机制之一。     

新辅助化疗治疗宫颈癌的疗效评价

目的探讨宫颈癌新辅助化疗治疗ⅠB2期、ⅡA2期及ⅡB期宫颈癌的疗效。方法收集我院2010年4月至2015年1月诊治的宫颈癌患者(ⅠB2期、ⅡA2期、ⅡB期)共121例,按照术前是否化疗分为2组。观察组患者在新辅助化疗(方案:紫杉醇+卡铂)后给予手术治疗,对照组患者进行常规手术治疗。观察两组患者化疗的效果。比较两组患者的手术情况、并发症发生情况、复发率及死亡率。结果新辅助化疗前,观察组ⅠB2期、ⅡA2期及ⅡB期患者的肿瘤直径分别为(4.8±0.8)、(4.3±0.6)、(4.9±0.9)cm,治疗后分别为(1.3±0.4)、(1.7±0.5)、(2.2±0.5)cm,治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。所有患者均在化疗后接受手术治疗。观察组、对照组的平均手术时间、术中出血量比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组、对照组分别有0例、6例患者出现术后感染,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组淋巴结转移情况无显著差异(P>0.05),两组均无阴道切缘阳性病例及宫旁浸润病例。观察组、对照组分别有3、11例术后脉管受侵,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者均从治疗结束随访至2016年1月,观察组中位随访时间为35个月,对照组为45个月。观察组、对照组各失访4例。随访中,观察组的复发率为7.81%,病死率为3.13%;对照组的复发率为8.51%,病死率为4.26%。两组复发率及病死率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论新辅助化疗治疗ⅠB2期、ⅡA2期及ⅡB期宫颈癌患者的效果良好,可降低术后并发症,减少脉管受侵,提高手术成功率,具有临床价值。