经典酚/氯仿抽提法和纯化试剂盒法提取全血基因组DNA的比较

目的 比较经典酚/氯仿法和纯化试剂盒法抽提全血基因组DNA的差异.方法 分别对两种方法抽提的全血DNA产物进行紫外分光光度仪、琼脂糖凝胶电泳和体外聚合酶链锁反应（PCR）扩增.结果 两种方法DNA的提取效率相似,TaKaBa试剂盒法提取的纯度[光密度（OD）260nm/280nm]较常规酚/氯仿法明显提高.结论 TaKaBa试剂盒法较传统酚/氯仿提取基因组DNA法快速、简便、经济,可用于PCR模板DNA的制备.     

尾加压素Ⅱ对大鼠肾小管上皮细胞的促丝裂作用

目的：研究尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠肾小管上皮细胞的促丝裂作用。方法：采用机械分离和酶消化法获取肾小管上皮细胞进行培养、鉴定;用免疫细胞化学法定位溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入到肾小管上皮细胞DNA内;用MTT和BrdU掺入法观察不同浓度UⅡ（0、10^-10、10^-9、10^-8、10^-7和10^-6mol•L^-1）对肾小管上皮细胞增殖和DNA合成的影响,以确定其促丝裂作用。结果：培养的细胞经Cytokeratin-18免疫细胞化学染色后,强度不一和不均匀分布的棕黄色颗粒定位于大部分细胞的胞核周围和胞浆内。培养的肾小管上皮细胞经BrdU掺入和免疫细胞化学显色后,细胞核内有棕黄色颗粒沉着。10^-10 mol •L^-1 UⅡ组的MTT值、 BrdU掺入量与对照组（0 mol•L^-1 UⅡ）比较差异无显著性（P>0.05）;10^-9和10^-8mol•L^-1 UⅡ组的MTT值、BrdU掺入量高于对照组（P<0.01或P<0.05）;与对照组比较,10^-7和10^-6 mol•L^-1 UⅡ组的MTT值明显增加（P<0.05）,但增加的幅度较10^-9 和10^-8mol•L^-1 UⅡ组低,而BrdU掺入量无明显改变。结论：UⅡ对体外培养的大鼠肾小管上皮细胞具有促丝裂作用。     

稀土元素钇对体外培养成骨细胞增殖、分化、矿化及凋亡的影响

目的：探讨稀土元素钇对成骨细胞增殖、分化、矿化及凋亡的影响,为研究稀土元素钇对骨质疏松的病理性发展提供一定理论指导。方法：⑴将成骨细胞MC3T3-E1分为对照组（给予PBS）和给药组(给予YCl₃至各梯度最终浓度为1×10^-9,1×10^-8,1×10^-7,1×10^-6,1×10^-5,1×10^-4mol·L^-1),利用CCK-8试验检测成骨细胞增殖活力;⑵选取3个浓度梯度YCl₃(最终浓度为1×10^-8,1×10^-6,1×10^-4mol·L^-1)处理成骨细胞。采用NBT/BCIP试剂盒检测碱性磷酸酶（ALP）表达,根据吸光值分析ALP活性;采用茜素红S染色法检测细胞矿化程度;采用AO/EB双染法测细胞凋亡,利用荧光显微镜观察凋亡细胞形态,分析荧光强度和凋亡情况。结果：稀土元素钇在低剂量(1×10^-...     

c-myc和k-ras基因多态性与辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤的关联性分析

目的：探讨c-myc和k-ras基因多态性与辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤的关系。方法：采用 ⁶⁰Co（剂量率0.382 Gy•min^-1,总剂量7 Gy）分别照射C57BL/6J和BALB/c小鼠建立小鼠胸腺淋巴瘤模型,6个月后处死小鼠,取胸腺组织,用Promega DNA纯化试剂盒提取胸腺淋巴瘤细胞基因组DNA,以聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法对c-myc基因rs51048361（C/T）、k-ras基因rs30221756（A/G）和rs30161609（T/C）单核苷酸多态性进行检测。结果：⁶⁰Co照射引起2种小鼠的胸腺瘤发生率不同,对应的 rs51048361位点基因型分别为C/C和T/T,rs30221756位点基因型分别为A/A和G/G,rs30161609位点基因型分别为T/T和C/C。结论：辐射敏感性不同的C57BL/6J和BALB/c 小鼠 ⁶⁰Co照射后rs51048361、rs30221756和rs30161609　位点基因型不同,推测c-myc和k-ras基因多态性与辐射诱发胸腺淋巴瘤有关联。     

尾加压素Ⅱ对体外高糖培养大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响及其意义

目的：探讨尾加压素Ⅱ（UⅡ）对体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞（MC）增殖影响的机制及意义。方法：体外高糖培养大鼠肾MC，分为5组：对照组及不同浓度UⅡ（10^-7、10^-8、10^-9和10^-10 mol•L^-1）组，37℃孵育24 h，用流式细胞术分析处于细胞周期中S期的MC比例，MTT比色法检测细胞增殖率，BrdU-ELISA法测定细胞培养上清中BrdU含量。结果：MTT实验，UⅡ10^-9及10^-8 mol•L^-1组细胞增殖率明显高于对照组（P<0.05），UⅡ10^-10及10^-7 mol•L^-1组细胞增殖率与对照组比较差异无显著性（P>0.05）；流式细胞术实验，UⅡ10^-9及10^-8 mol•L^-1组MC细胞周期中S期比例较对照组明显增加（P<0.05），UⅡ10^-10及10^-7 mol•L^-1组MC细胞周期中S期的比例与对照组比较差异无显著性（P>0.05）；BrdU-ELISA实验，UⅡ10^-9及10^-8 mol•L^-1组MC培养上清中BrdU含量明显低于对照组（P<0.05），UⅡ10^-10及10^-7 mol•L^-1组MC培养上清中BrdU含量与对照组比较差异无显著性（P>0.05）。结论：10^-9及10^-8 mol•L^-1浓度的UⅡ对体外高糖培养的大鼠肾小球MC具有明显促增殖作用。     

银离子、铜离子和锌离子对常见念珠菌的抗菌性能比较

目的 探讨银离子(Ag⁺)、铜离子(Cu²⁺)、锌离子(Zn²⁺)对5种常见念珠菌(白色念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌和光滑念珠菌)的抗菌作用。方法 使用去离子水分别将硝酸银、氯化铜和氯化锌配制为0.1 mol·L^-1的水溶液。取保存的白色念珠菌标准菌株ATCC-60193、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌,加入溶菌肉汤培养液,使用比浊仪调配菌液浊度为0.5麦氏单位,然后使用无菌去离子水将菌液稀释至10⁶ CFU·L^-1。取配制好的0.1 mol·L^-1的硝酸银、氯化铜和氯化锌溶液,分别倍比稀释为6个浓度(10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7 mol·L^-1),分别取各浓度的金属离子溶液100μL与预制好的5种念珠菌悬液100μL进...     

猫棒束孢对IR-Hep G2细胞氧化应激的改善作用及机制

目的 探讨猫棒束孢(IF)对胰岛素抵抗Hep G2(IR-HepG2)细胞氧化应激的保护作用及其机制。方法 MTT法测定不同浓度IF和胰岛素对Hep G2细胞增殖的影响,用含10^-8 mol·L^-1胰岛素的高糖DMEM培养基诱导Hep G2细胞48 h,建立Hep G2细胞胰岛素抵抗模型。采用试剂盒测定葡萄糖消耗量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、胰岛素受体底物1(IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-羟基酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)的含量。结果 在IF浓度为5μg·mL^-1和10μg·mL^-1对细胞生长无显著促进作用,故浓度选用于5μg·mL^-1和10μg·mL^-1;胰岛素处理48 h后只有10^-8 mol·L^-1剂量组对照细胞生长无显著抑制作用,故选用胰岛素浓度为10^-8 mol·L^-1,培养48 h建立胰岛素抵抗模型。与正常组比较,模型组IR-Hep ...     

硒和维生素E对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢的影响

目的：探讨硒(Se)和维生素E(VE)对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢的影响。方法：用不同浓度的Se和(或)VE作用于体外培养的Wistar大乳鼠心肌成纤维细胞,测定培养上清液中羟脯氨酸及Ⅰ型胶原的含量。结果：①低、中和高浓度Se(0.05、0.1和0.2 mg·L^-1)均可抑制NE(0.2 mg·L^-1)的促成纤维细胞(CFbs)胶原合成的作用（P<0.05）,以高浓度Se最为明显（56.13±1.31,P<0.05）;②不同浓度VE（1、10和100 mg·L^-1）均降低NE对CFbs胶原合成的促进作用,以1和100 mg·L^-1 的VE对羟脯氨酸含量的影响最显著（P<0.05）;③Se和VE的联合应用（0.05 mg·L^-1 Se+10 mg·L^-1 VE）,对CFbs的胶原合成的抑制作用更明显（41.34±1.73,0.39±0.04,P<0.05）。结论：Se和VE对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢有抑制作用。     

ERAP2基因多态性与重度子痫前期的相关性

目的：通过对子痫前期患者ERAP2基因SNP（rs2549782,rs1740150）分析,研究其跟子痫前期基因易感性的关系。方法：以35例重度子痫前期孕妇作为实验组,41例同期分娩的正常孕妇作为对照组。用Q iagen DNA提取试剂盒提取DNA后,行PCR扩增目的条带,经琼脂糖凝胶电泳检测并纯化后,由中国深圳华大基因公司测序,最后用Lasergene软件查看SNP位点并用统计学软件分析数据。结果：①重度子痫前期患者及正常妊娠组rs17408150位点均为T。②重度子痫前期患者rs2549782位点T的比率为37.14%,G的比率为62.86%;正常妊娠组rs2549782位点T的比率为34.15%,G的比率为65.85%,=0.074,P=0.786,OR值1.140,95%可信区间CI为0.444-2.922。③在分析rs17408150的过程中发现的新的SNP位点rs1423568（与rs17408150相差36个碱基）,其在重度子痫前期患者中T的比率为62.86%,C的比率为37.14%;正常妊娠组rs17408150位点T的比率为63.41%,C的比率为36.59%,=0.003,P=0.960,OR值1.024,95%可信区间CI为0.402-2.609。结论：ERAP2基因SNP位点（rs2549782,rs1423568,rs17408150）在中国南方汉族人群中跟子痫前期的基因易感性关系可能没有相关性。     

新疆维、汉民族KCNE2和KCNE3基因多态性与房颤的相关性研究

目的：探讨新疆维、汉不同民族KCEN2、KCNE3基因标签SNP与房颤的关系.方法：采用病例对照研究方法,收集新疆医科大学第一附属医院心脏中心、和田地区人民医院心脏内科等科室.按照与病例组民族和性别相同,年龄相同或相近的原则选出对照.使用DNA提取试剂盒提取外周血DNA,然后对单核苷酸多态性进行检测,分析维吾尔族和汉族KCNE2（rs9984281）、KCNE3（rs9516）、KCNE3（rs10898993）、KCNE3 （rs 3867279）、KCNE3 （rs626930）与房颤的关系进行统计分析.结果：（1）维吾尔族KCNE2 （rs9984281）、KCNE3 SNP1 （rs9516）、SNP2 （rs626930）、SNP3（rs3867279）、SNP4（rs10898993）与房颤无关.（2）汉族KCNE2 （rs9984281）、KCNE3 SNP1 （rs9516）、SNP2 （rs626930）、SNP3（rs3867279）、SNP4（rs10898993）与房颤无关.结论：在KCNE基因家族中无论是维吾尔族还是汉族,KCNE2（rs9984281）、KCNE3 SNP1 （rs9516）、SNP2（rs626930）、SNP3（rs3867279）、SNP4（rs10898993）与房颤患病均无关.