骨髓间充质干细胞移植对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对野百合碱诱导的肺动脉高压(PAH)大鼠肺血管重构的影响.方法 体外分离、培养并纯化SD大鼠骨髓MSCs.健康雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(n＝15)、PAH组(n＝20)和MSCs移植组(n＝20).PAH组和MSCs移植组大鼠一次性项背部皮下注射野百合碱(50 mg·kg -1),复制PAH肺血管重建动物模型.3组大鼠在同等条件下饲养.3周后,MSCs移植组大鼠经舌下静脉注射5×109 L-1的经Hoechst 33342标记的MSCs细胞悬液1 mL,PAH组大鼠予等量低糖-Dulbecco改良Eagle's培养液(L-DMEM)注射,正常对照组不做任何处理.移植28 d,观察3组大鼠肺小动脉的显微结构及超微结构的改变.结果 PAH大鼠用MSCs移植28 d后,肺小动脉管壁厚度指标(WD/TD％、VA％)、放射性肺泡计数、肺非肌性小动脉肌化程度均较PAH组显著改善(P＜0.01);其肺小动脉的重构及超微结构的血气屏障、线粒体、板层小体等改变均有明显改善.荧光显微镜观察到Hoechst 33342标记的MSCs在肺内定植,且分化成大量新生血管并形成侧支循环,肺动脉重构得到有效逆转.结论 MSCs移植可有效减轻并逆转肺动脉重构的进程,其作用机制是MSCs分化形成新生血管,建立了侧支循环,从而修复野百合碱诱导的肺损伤.     

辛伐他汀干预大鼠高肺血流所致肺动脉高压的机制

目的了解辛伐他汀干预高肺血流所致肺动脉高压（PH）的作用机制。方法对大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术建立高肺血流所致PH动物模型,予辛伐他汀片2mg/（kg.d）干预11周后行肺动脉压力测定、检测肺血管平滑肌细胞凋亡率和肺血管平滑肌细胞增殖率并与无分流组和分流组比较。结果辛伐他汀能较好的降低肺动脉压力,辛伐他汀组大鼠肺动脉压力明显低于分流组大鼠;辛伐他汀能很好的诱导肺血管平滑肌细胞凋亡和抑制肺血管平滑肌细胞增殖;辛伐他汀组大鼠肺血管平滑肌细胞凋亡率明显高于分流组和无分流组（Pa〈0.01）;而辛伐他汀组大鼠的肺血管平滑肌细胞增殖率明显低于分流组和无分流组（Pa〈0.01）。结论辛伐他汀通过诱导肺血管平滑肌细胞凋亡和抑制肺血管平滑肌细胞增殖对高肺血流导致的PH起较好的干预作用。     

选择性肺动脉造影对先天性心脏病合并肺动脉高压的肺血管评价

肺动脉高压 (ＰＨ)是先天性心脏病 (ＣＨＤ)常见的并发症 ,术前正确评价ＰＨ ,对于判定手术适应证 ,选择手术方式及提高术后疗效均具有重要的意义[1,2 ] 。目前对肺高压的诊断主要依靠心导管检查及肺活检。但受方法学的影响 ,有时不能直接、如实地反映ＰＨ的程度和性质[3 ] 。近年来选择性肺动脉造影 (ＳＰＡ)开始用于ＰＨ的诊断[4 6] 。 1998年 10月～2 0 0 0年 4月我们对 5 2例ＣＨＤ患儿行ＳＰＡ检查 ,观察了动力型及梗阻型ＰＨ的ＳＰＡ影像学征象 ,总结如下。对象ＣＨＤ 5 2例。男 2 6例 ,女 2 6例 ;年龄 2～ 14 8(7 6±3 6 )岁。心内…     

慢性缺氧性肺动脉高压大鼠肺血管显微结构研究

目的 观察大鼠在慢性低氧环境中不同节段肺血管显微结构的变化规律，探讨其在慢性缺氧性肺动脉高压形成中的病理意义。方法 将23只Wistar大鼠随机分为对照组、低氧1周组、低氧2周组。以右心导管法测定肺动脉压力；对肺组织进行弹力纤维染色，计数各型肺内动脉百分比；应用计算机图像分析系统测定分别与三级呼吸道伴行的肺动脉的相对中膜面积（RMA）、厚度（RMT）及血管壁内弹力层（IEL）厚度。结果 低氧2周组大鼠肺动脉平均压明显高于对照组及低氧1周组，低氧1周组肺动脉平均压明显高于对照组；低氧2周组肌型动脉百分比（MA％）、三组动脉RMA、RMT均明显高于对照组及低氧1周组，低氧1周组MA％、肺泡水平动脉RMA、RMT明显高于对照组（P均＜0．05）。与对照线相比，低氧2周组和1周组肺内动脉血管壁IEL均明显减少（P均＜0．05）。多因素相关分析表明，肺动脉平均压与肺泡水平动脉RMA、RMT呈正相关；与肺泡水平肺动脉血管壁IEL厚度呈负相关（P均＜0．05）。结论 慢性低氧环境中大鼠肺血管结构呈现节段依赖性的重构规律，这一改变是缺氧性肺动脉高压形成的重要病理基础。     

法舒地尔对大鼠低氧性肺动脉高压及其肺血管结构重建的影响

目的 探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)及其肺血管结构重建的影响.方法 采用常压间断低氧法建立大鼠HPH模型.雄性SD大鼠24只,随机均分为对照组、模型组和法舒地尔干预组.测各组大鼠平均肺动脉压力(mPAP)、平均颈动脉压力(mCAP)、右心室肥厚指数(RVHI);光镜下结合图像分析进行肺血管结构重建观察;透射电镜观察肺小动脉内皮细胞超微结构的变化.结果 ①模型组mPAP、RVHI、肺小动脉管壁厚度与外径比值(WT%)、管壁面积与管总面积比值(WA%)分别为(31.38±1.98)mmHg、0.47±0.03、(31.13±5.74)%、(54.93±3.34)%均明显高于对照组(15.25±0.91)mmHg、0.25±0.02、(13.24±2.03)%、(31.81±3.62)%,P均＜0.01;管腔面积与管总面积比值(LA%)为(45.07±3.34)%,明显低于对照组(68.20±3.62)%,P＜0.01;透射电镜显示模型组肺小动脉内皮细胞损伤明显,内皮细胞周围平滑肌细胞增生、肿胀,胶原纤维增生.②法舒地尔干预组mPAP、RVHI、WT%、WA%分别为(16.63±1.53)mmHg、0.27±0.02、(17.08±2.24)%、(37.30±3.69)%显著低于模型组(P＜0.01),LA%为(62.70±3.69)%明显高于模型组(P＜0.01).法舒地尔干预后肺小动脉内皮细胞损伤、平滑肌细胞及胶原纤维增生均明显减轻.③各组间mCAP差异无统计学意义(F=1.239,P＞0.05).结论 法舒地尔对低氧所致的肺动脉高压、右心室肥厚及肺血管结构重建具有较好的预防和逆转作用.     

卡托普利及氯沙坦对肺动脉高压大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的 探讨卡托普利及氯沙坦对肺动脉高压(PAH)大鼠肺组织细胞凋亡的影响,以了解卡托普利及氯沙坦治疗PAH的可能作用机制.方法 40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、左肺切除加野百合碱组(模型组)、卡托普利干预组、氯沙坦干预组,每组10只.5周后观察各组平均肺动脉压(mPAP)、右心室与左心室加室间隔质量比[RV/(LV+S)];应用TUNEL法检测其肺组织细胞凋亡率,免疫组织化学染色检测其凋亡相关基因Bcl-2和Bax 在肺组织中的表达.结果 模型组mPAP及RV/(LV+S)[(5.27±0.44)kPa,(65.19±3.78)%]较卡托普利干预组[(3.46±0.37)kPa,(49.08±4.48)%]、氯沙坦干预组[(3.24±0.30)kPa,(48.51±5.07)%]及正常对照组[(2.34±0.21)kPa,(27.35±2.67)%]均增高,差异有统计学意义(Pa<0.05);模型组肺组织细胞凋亡率[(29.84±4.82)%]显著高于卡托普利干预组[(18.65±3.21)%]、氯沙坦干预组[(20.33±4.22)%]及正常对照组[(8.24±1.32)%],同时Bcl-2和Bax在模型组肺组织中的表达均显著高于卡托普利、氯沙坦干预组及正常对照组,差异有统计学意义(Pa<0.05).结论 卡托普利及氯沙坦干预可调节肺组织细胞凋亡,从而缓解PAH和肺血管重构的形成.     

内源性一氧化碳对缺氧性肺动脉高压与肺血管结构调节的研究

目的 研究内源性一氧化碳（CO）对缺氧性肺动脉高压（PH）和肺血管结构的调节作用。方法 将18只Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧＋ZnPP组。均以右心导管法测定肺动脉压力；对肺组织进行弹力纤维染色，测定肌型动脉百分比，以及肺中、小动脉的相对中膜面积（RMA）、厚度（RMT）；采用免疫组织化学法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达，核酸原位杂交法检测肺动脉Ⅲ型前胶原[Pro－α1（Ⅲ）胶原]mRNA表达。结果 鼠肌型动脉百分比和肺中、小型动脉RNA及PTM均明显增高；ZnPP促使低氧上述肺血管结构重建指标增高更加显著（P均＜0．01）。低氧大鼠肺动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及Pro－α1（Ⅲ）胶原mRNA表达均显著增高，ZnPP促使低氧大鼠动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及Pro－α1（Ⅲ）胶原mRNA表达更加明显（P均＜0．01）。结论 内源性CO在缺氧性PH和肺血管结构重建形成中发挥着重要的保护作用，其机制至少部分与CO对低氧大鼠肺动脉胶原蛋白合成的调节有关。     

缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺血管重塑的研究

目的：通过建立新生大鼠缺氧性肺动脉高压（hypoxia-induced pulmonary hypertension,HPH）模型,探讨HPH新生大鼠发病过程中肺血管重塑的变化。方法：将96只新生Wistar大鼠随机分为2组：缺氧组和常氧对照组,缺氧组建立新生大鼠HPH模型。分别于缺氧3、5、7、10、14、21 d 取缺氧组及对照组同日龄新生大鼠各8只测定其平均肺动脉压（mean pulmonary arteria pressure,mPAP）、右心室肥大指数（right ventricle hypertrophy index,RVHI）,血管重塑指标MT%、MA%,观察肺血管超微结构。结果：缺氧组大鼠在缺氧3、5、7、10、14、21 d mPAP持续上升,明显高于对照组（P<0.05）;随着缺氧时间的延长,差异更为显著。缺氧7 d后MT%、MA%、RVHI明显高于对照组（P<0.05）;随着缺氧时间的延长,差异同样更为显著。透射电镜显示,缺氧7 d后大鼠肺小动脉内膜增厚,内皮细胞增生、变性,细胞器增多;细胞外基质见胶原纤维沉积;出现肺血管重塑改变。结论：新生大鼠缺氧3～5 d肺动脉压力增高,处于肺血管痉挛阶段;缺氧7 d后肺血管出现重塑,右心室肥厚,出现不可逆变化;随着缺氧时间延长,上述变化加剧。     

血管紧张素转化酶抑制剂和AT1受体拮抗剂联合应用对肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的 探讨血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)及AT1受体拮抗剂联合应用对肺动脉高压(PAH)大鼠肺血管重构是否有叠加效应.方法 50只雄性SD大鼠(350 ～400 g),随机分为5组,每组10只:正常对照组、模型组、卡托普利干预组、氯沙坦干预组及卡托普利+氯沙坦联合干预组.5周后观察各组平均肺动脉压(mPAP)、心室质量即右心室/(左心室+室间隔)[RV/(LV+S)]、肺小动脉中膜厚度(WT)和新生内膜形成以及无肌型小动脉肌化程度的变化;免疫组织化学法检测SM-α-actin在肺动脉平滑肌细胞中的表达;应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测韧黏素-C(TN-C) mRNA在肺组织中的表达.结果 模型组有新生内膜形成,该组mPAP(39.42 ±3.15) mm Hg(1 mmHg=0.133 kPa)、心室质量(64.26±3.85)％、肺小动脉WT百分比(61.59±5.23)％、肺小动脉肌化程度(75.21±6.77)％、肺小动脉新生内膜增殖度(80.80±6.54)％及TN-CmRNA(△△Ct)(1.10±0.56)表达均高于正常对照组[(17.61±1.68) mm Hg、(26.35±3.04)％、(11.22±2.10)％、(16.57±2.31)％、0、4.60±0.70],差异均有统计学意义(P均＜0.05);同时模型组上述各项指标较其他干预组亦升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05);卡托普利+氯沙坦联合干预组与卡托普利、氯沙坦单独干预组进行上述各指标比较,差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 卡托普利及氯沙坦可干预PAH肺血管重构,从而缓解PAH和肺血管重构的形成;二者联合应用未证实产生叠加或协同效应.     

内源性硫化氢对大鼠高肺血流性肺动脉高压的调节作用

目的应用内源性硫化氢(hydrogensulfide,H2S)生成酶胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)的抑制剂炔丙基甘氨酸(propargylglycine,PPG),探讨H2S在大鼠高肺血流性肺动脉高压形成中的作用。方法雄性SD大鼠25只,体重120～140g,随机分为分流组(n=9)、分流 PPG组(n=8)和假手术组(n=8)。分流组及分流 PPG组大鼠经腹主动脉—下腔静脉穿刺术建立高肺血流动物模型,分流 PPG组大鼠腹腔内注射PPG37.5mg/(kg·d),分流组与假手术组大鼠每日给予等量生理盐水。分流术后4周,采用右心导管法测量各组大鼠肺动脉平均压(meanpulmonarypressure,MPAP),用敏感硫电极法测量大鼠血浆和肺组织H2S含量,分别计算大鼠心脏组织右心室/左心室 室间隔(rightventricle/leftventricle septum,RV/LV SP)和心脏重量/体重(heartweight/baseweight,HW/BW)的值。结果分流术后4周,分流组大鼠MPAP与假手术组比较差别无显著性;分流 PPG组大鼠MPAP较分流组及假手术组分别升高了17.70%和21.79%(P<0.05);分流组血浆H2S含量比假手术组明显升高(50.12±6.13vs45.16±5.56,P<0.05);分流 PPG组大鼠血浆H2S含量明显低于分流组和假手术组(38.56±4.98vs50.12±6.13、38.56±4.98vs45.16±5.56,P均<0.05);分流 PPG组大鼠RV/LV SP和HW/BW明显高于分流组和假手术组(0.33±0.03vs0.30±0.03、0.33±0.03vs0.29±0.02,P<0.05)。结论内源性H2S在高肺血流性肺动脉高压形成过程中发挥保护性调节作用。     

左向右分流致肺动脉高压对大鼠肺动脉胶原代谢的影响

目的建立左向右分流所致肺动脉高压大鼠模型,了解高肺血流量对肺血管胶原代谢的影响。方法对大鼠行腹主动脉下腔静脉分流术。术后11周以右心导管法测定肺动脉平均压(PAMP),采用免疫组织化学法检测大鼠肺动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果分流11周后大鼠肺循环与体循环血流量之比分别为3.3∶1.0,为大量左向右分流。PAMP较对照组明显升高(P<0.01)。分流组大鼠肺中、小型肺动脉中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达与对照组比较明显增加。结论高肺血流量可导致肺动脉高压,并促进肺动脉高压大鼠细胞外基质/胶原的堆积。     

肺高压肺血管重建大鼠基质金属蛋白酶1基因表达

目的：　探讨基质金属蛋白酶1(MMP1)基因表达与肺高压形成的关系。方法：　利用野百合碱(monocrotalineMCT)诱导的大鼠肺高压动物模型,经导管介入测定大鼠肺动脉平均压力,逆转录定量聚合酶链反应(RT PCR)检测不同时间点大鼠肺组织MMP 1mRNA相对表达水平。结果：　实验第3周肺动脉压力已明显升高,以第4周为最高,而大鼠肺组织MMP 1mRNA表达水平以实验第2周最为明显,第3,4周表达水平下调,但仍高于第1周。结论：　MMP1早期基因表达升高参与细胞外基质屏障的降解,对肺血管重建可能起了触发作用,实验后期表达水平下调可能是导致细胞外基质积聚的重要原因之一。     

野百合碱诱导大鼠肺高压时韧粘素mRNA表达水平的动态变化

目的：观察野百合碱(MCT)所致肺高压大鼠肺组织和肺动脉中韧粘素(TN)mRNA的动态表达水平,探讨其与肺高压肺血管重建的关系。方法：SD大鼠随机分为MCT组和正常对照组(CON),采用野百合碱皮下注射法诱导建立大鼠肺高压模型,并通过快速竞争性RT PCR技术检测不同时间点(给药后第7,14,21,28天)大鼠肺组织和肺动脉中TNmRNA的表达水平。结果：TN mRNA水平在给药后第7天即有上调,CON组肺组织TNmRNA为0.29±0.04,MCT组为0.56±0.08,两组间差异有显著性(P<0.01);CON组肺动脉TN mRNA 为0.30±0.04,MCT组为0.57±0.05,两组间差异有显著性(P<0.05)。TN mRNA水平上调早于肺动脉压的升高,随压力上升和时间延长TN mRNA继续增高。结论：TN参与了肺高压肺血管重建过程,在肺高压发病中可能具有重要作用。     

肾上腺髓质素对大鼠高肺血流性肺血管结构重构的干预作用

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对高肺血流性肺动脉高压大鼠肺血管结构重构的干预作用。方法 6周龄雄性SD大鼠21只,随机分为3组:对照组、分流组和分流+ADM组,每组大鼠各7只。对分流组和分流+ADM组大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术。对照组大鼠仅开腹暴露腹主动脉及下腔静脉,不做分流手术。8周后,对分流+ADM组大鼠,皮下埋置微量渗透泵,持续予ADM(1.5μg.kg-1.h-1)。2周后,采用右心导管法测定各组大鼠肺动脉压力,称重,并测定右心室/(左心室+室间隔)比值[RV/(LV+SP)],观察其肺动脉显微和超微结构的变化。结果与对照组比较,分流组大鼠肺动脉收缩压、肺动脉舒张压和肺动脉平均压均明显升高(Pa<0.01),RV/(LV+SP)比值明显增加(P<0.01),肺小血管肌化程度及中、小型肺动脉相对中膜厚度和相对中膜面积均明显增加(Pa<0.01),肺动脉超微结构发生明显改变,内皮细胞肿胀,内弹力层粗细不均甚至断裂,平滑肌细胞肥大,不同程度向合成表型转化。分流+ADM组与分流组比较,肺动脉压力和RV/(LV+SP)明显降低(Pa<0.01),肺动脉显微和超微结构改变明显缓解。结论通过微量渗透泵持续予ADM,能缓解大鼠高肺血流性肺动脉高压和肺血管结构重构的形成。     

通过微量渗透泵应用肾上腺髓质素对大鼠低氧性肺动脉高压的调节作用

目的研究肾上腺髓质素(ADM)对大鼠低氧性肺动脉高压的调节作用。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧 ADM组,每组各8只。对于低氧 ADM组大鼠通过微量渗透泵皮下持续给予ADM(300ng/h)。低氧2周后,以右心导管法测定肺动脉收缩压(sPAP)和肺动脉平均压(mPAP),测量体循环平均压(mSAP),检测右心室与左心室加室间隔比值[RV/(LV S)]。结果低氧2周后大鼠sPAP、mPAP和RV/(LV S)较对照组明显增高(P均<0.01),低氧 ADM组大鼠sPAP、mPAP和RV/(LV S)较低氧组明显减低(P均<0.01),而mSAP在3组之间无明显差异。结论通过微量渗透泵皮下持续给予低氧大鼠ADM,缓解了低氧性肺动脉高压形成。     

法舒地尔对大鼠低氧性肺动脉高压及其右心室肥厚的影响

目的 探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对大鼠低氧性肺动脉高压(HPH)及其右心室肥厚的影响.方法　雄性SD大鼠24只随机分为对照组、模型组和法舒地尔干预组(干预组).采用常压间断低氧法建立大鼠HPH模型.测定各组大鼠平均肺动脉压力(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI);透射电镜观察各组右心室心肌细胞超微结构变化.应用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 模型组大鼠mPAP、RVHI分别为(31.38±1.98) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)、0.47± 0.03,均明显高于对照组大鼠[(15.25±0.91) mmHg、0.25±0.02](Pa＜0.01);透射电镜显示对照组心肌细胞及毛细血内皮呈正常结构,模型组大鼠右心室心肌细胞线粒体明显增多、肿胀,嵴模糊、消失,心肌肌丝明暗带不清晰.干预组大鼠mPAP、RVHI分别为(16.63±1.53) mmHg、0.27±0.02,均显著低于模型组(Pa＜0.01).干预组大鼠右心室心肌细胞及毛细血管内皮基本正常.结论　法舒地尔对低氧所致的肺动脉高压、右心室肥厚及其心肌细胞损伤大鼠具有较好的预防和逆转作用.     

Pulmonary Hypertension in Congenital Heart Disease: Irreversible Vascular Changes in Young Infants

Among 280 infants under 1 year of age with congenital heart disease autopsied at the University of Colorado Health Sciences Center between 1959 and 1978, there were six instances of grade IV¹ pulmonary artery hypertension. Five were patients with ventricular septal defect (four associated with other cardiovascular malformations). The sixth was a patient with atrioventricular canal. The youngest was 2¹/₂ months of age. Advanced degrees of pulmonary hypertensive arteriopathy (grade IV or more) have been said to be rare in infants, especially under the age of 1 year. The fact that all of these cases occurred within the last few years of the study suggests the possibility of improved supportive care leading to the prolonged survival of infants who might otherwise have died prior to developing severe disease. In addition, the role of altitude in accelerating the arteriopathy must be considered in the present series. In any case, this unexpected increase in the frequency of severe pulmonary hypertensive arteriopathy should stimulate consideration of early surgical correction of the underlying cardiovascular malformation, especially in areas of relatively high altitude.     

血管内皮生长因子在肺出血新生鼠

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在肺出血新生鼠肺组织中的表达及其作用。方法生后7~8 d Wistar新生鼠,随机分为正常对照组(C组)、缺氧组(H组)、低温缺氧组(HH组)、低温缺氧后常氧复温组(HHR组)及低温缺氧后高氧复温组(HHRO2组)。C组置常温室内;H组置缺氧箱内6 h,吸氧体积分数为50~60 mL/L;HH组置(10±1)℃冰箱内6 h,吸氧体积分数同上;HHR组结束上述低温缺氧6 h后予常氧下复温2 h;HHRO2组同HHR组,但吸氧体积分数>95 mL/L。取各组大鼠肺组织,观察肺大体情况,切片HE染色观察肺组织病理学改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测其肺组织VEGF mRNA表达。结果H、HH、HHR和HHRO2组肺大体均呈现水肿,HH、HHR和HHRO2组可见点状、局灶至弥散性肺出血;各实验组组织学改变包括肺泡及间质水肿、间隔断裂、肺泡扩张及融合、肺泡出血,以HHRO2组最严重;VEGF 188 mRNA在H、HH组表达明显增高,与C组比较有显著差异(P<0.05,0.01);HHR和HHRO2组表达亦增高,但与C组比较差异无显著性。结论低温缺氧后复温供氧所致肺出血新生鼠肺组织水肿,可能与有明显血管通透作用的VEGF表达增高有关。