阿司匹林对哮喘患儿IL-2和IL-4的调节作用

目的 观察阿司匹林对哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)分泌白细胞介素2(IL-2)和IL-4的调控作用.方法 分离并培养30例哮喘发作期患儿PBMC,经或不经系列浓度的阿司匹林共孵育后,再用植物血凝素(PHA)刺激,用ELISA法测定细胞培养上清液IL-2和IL-4的浓度.结果 随着阿司匹林浓度增加,PBMC分泌IL-4减少,IL-2增加.结论 阿司匹林对哮喘患儿IL-2、IL-4细胞因子的分泌紊乱具有调节作用.     

紫色悬钩子提取物对TNF-α诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的影响

目的 利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导培养建立及鉴定3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型,探讨紫色悬钩子提取物对胰岛素抵抗的影响。方法 采用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、地塞米松(Dex)、胰岛素联合诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,分别与0,2,5,10,15,20 ng·mL^-1 TNF-α共孵育24,48,72,96 h; MTT法检测紫色悬钩子提取物和TNF-α对3T3-L1脂肪细胞活力的影响;油红O染色观察细胞形态的变化;Western Blot检测Akt、p-Akt蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞对2-NBDG的摄取。结果 TNF-α浓度大于等于10 ng·mL^-1,诱导时间大于等于72 h能够显著降低胰岛素刺激后p-Akt的表达(P<0.01),产生胰岛素抵抗;胰岛素刺激后,与模型组相比,紫色悬钩子提取物都能够不同程度提高细胞中p-Akt的表达和对2-NBDG的摄取能力,其中Fr.3作用最显著(P<0.05)。结论 TNF-α诱导培养可以成功建立胰岛素抵抗细胞模型,紫色悬钩子提取物具有改善...     

提高天然人白细胞介素-2效价的研究

由不同浓度的植物血凝素(PHA)、羧甲基茯苓多糖(CMP)、葡萄糖酸钙组成的复合诱生剂刺激人外周血单个核细胞(PBMC)产生的白细胞介素-2(IL-2)比单独用PHA刺激产生的IL-2活性高.诱生时间采用24h预温,然后37℃、5%CO_2旋转培养36～48h,可使产生的IL-2效价比单用PHA刺激48h提高15倍左右.这种复合诱生剂诱生的IL-2经临床使用,证实安全、有效.临床未发生明显副作用.37例恶性肿瘤IL-2治疗组总缓解率86.5%.比非IL-2治疗37例恶性肿瘤组总缓解率62.2%差异显著.     

鹅不食草心菊内酯对肝星状细胞活化的抑制作用机制研究

目的 研究鹅不食草心菊内酯(helenalin)对LX-2人肝星状细胞(HSCs)活化的抑制作用及其机制.方法 用白细胞介素-1β(IL-1β)20 ng·mL-1刺激LX-2细胞建立体外细胞模型,另取未刺激细胞作为正常组.将损伤细胞分为5组:模型组、阳性对照组[LY294002(磷脂酰肌醇3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶通路...     

辛伐他汀和二苯基碘对自发性高血压大鼠外周血单个核细胞NOX2表达和IL-1β分泌的影响

目的 探讨辛伐他汀和二苯基碘(DPI)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激的自发性高血压大鼠(SHR)外周血单个核细胞NADPH氧化酶2(NOX2)mRNA的表达和自细胞介素β(IL-1β)分泌的影响.方法 分离SHR外周血单个核细胞并进行培养,将细胞随机分为5组,每组6只:空白对照(仅加入培养液,A)组,AngⅡ(10-6mol/L,B)组,AngⅡ(10-6mol/L)+DPI(10-5mol/L,C)组,AngⅡ(10-6mol/L)+辛伐他汀(10-5mol/L,D)组,AngⅡ(10-6mol/L)+二甲基亚砜(DMSO,E)组.用RT-PCR检测各组单个核细胞NOX2 mRNA的表达,ELISA检测各组单个核细胞IL-1β蛋白的分泌.结果 NOX2 mRNA表达和IL-1β分泌,B组较A组明显升高(P＜0.01),C、D组较B组均明显降低(P＜0.01),E组与B组间差异无统计学意义.结论 AngⅡ促进SHR外周血单个核细胞IL-1β分泌与AngⅡ促进NOX2的表达有关;辛伐他汀抑制SHR外周血单个核细胞IL-1β的分泌可能与抑制其NOX2的表达有关.     

地尔硫卓对刀豆凝集素诱导单个核细胞细胞因子表达的影响

目的探讨地尔硫卓对刀豆凝集素(ConA)诱导单个核细胞细胞因子表达的影响。方法ficoll密度梯度离心法分离大鼠脾脏单个核细胞,分对照组、ConA组和地尔硫卓-ConA处理组。ELISA测定上清中细胞因子浓度。结果单个核细胞在ConA的刺激下,其上清液中IL-10、TNF-α、IL-6急剧增高,IL-1β低水平表达,TGF-β1未见明显表达。地尔硫卓干预后,IL-10、TNF-α、IL-6的浓度明显减低。结论地尔硫卓能抑制ConA所诱导的单个核细胞IL-10、TNF-α、IL-6的表达。     

青藤碱对胶原诱导性关节炎小鼠肿瘤坏死因子-α、白介素-17及核因子-κB的影响

目的 观察青藤碱(SIN)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠关节炎指数(AI)评分、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)及滑膜核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响.方法 将30只DBA/1小鼠用随机数字表法分为正常组、CIA组、SIN组3组,每组各10只,诱导CIA组与SIN组小鼠建立CIA模型,予青藤碱(SIN)药物干预SIN组,对三组分别进行AI评分,测定血清TNF-α、IL-17的水平及滑膜NF-κB蛋白的表达.结果 SIN组和CIA组TNF-α、IL-17的水平及滑膜NF-κB蛋白的表达均较正常组升高,且SIN组小鼠的AI评分较CIA组明显降低,血清TNF-α[(170.73±11.05)pg·mL-1比(347.97±13.45)pg·mL-1,F=1021.67,P<0.01]、IL-17[(470.30±122.02)pg·mL-1比(621.78±48.96)pg·mL-1,F=184.42,P<0.01]水平明显减少,滑膜NF-κB[(0.53±0.04)pg·mL-1比(0.84±0.04)pg·mL-1,F=804.05,P<0.01]蛋白的表达下调.结论 SIN能改善CIA小鼠关节肿胀,降低血清TNF-α、IL-17的分泌,这可能与其下调了滑膜NF-κB的表达有关.     

人IL-24重组蛋白免疫刺激及血管形成抑制作用

目的 探讨人重组白细胞介素-24(rhIL-24)蛋白体外免疫刺激功能和血管形成抑制作用.方法 将原核稳定表达得到的rhIL-24蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC),ELISA检测其刺激免疫细胞分泌白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及γ-干扰素(IFN-γ)的活性;利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型观察rhIL-24蛋白抑制血管形成的效应.结果 rhIL-24蛋白孵育的PMBC在不同时段分泌的IL-6、TNF-α及IFN-γ浓度与阴性对照组相比存在显著差异;rhIL-24蛋白能明显抑制CAM二级和三级血管形成,与阴性组比较,差异极显著.结论 rhIL-24蛋白具有明显的免疫刺激功能和血管形成抑制作用.     

IL-17和RORγt在类风湿关节炎CD4+T细胞中的表达及临床意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4+ T细胞中白细胞介素(IL)-17、孤核受体(RORγt)表达及意义。方法 35例RA患者分为病情活动组(A组,20例)和RA病情稳定组(B组,15例);另设健康人作对照(C组,15例)。取外周血单个核细胞(PBMC),免疫磁珠阴选CD4+ T细胞,通过流式细胞术(FCM)检测CD4+ T细胞内IL-17蛋白水平;非特异性刺激剂(A-CD3、A-CD28)刺激CD4+ T细胞后,RT-PCR检测IL-17、RORγt mRNA水平。结果与B组和C组比较,A组IL-17蛋白水平和IL-17、RORγt mRNA表达均显著增高(P<0.01),且B组各指标也高于C组(P<0.05)。A-CD3/A-CD28刺激CD4+ T细胞12h后,IL-17、RORγt mRNA表达水平较刺激24h明显增加(P<0.01),且两组各指标亦均高于未刺激组(P<0.05)。结论 RA患者外周血CD4+ T细胞中IL-17、RORγt mRNA高表达,这可能与RA病情活动相关。     

螺旋藻多糖对CHB患者PBMC免疫功能的影响

目的观察螺旋藻多糖对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞免疫功能的影响。方法运用MTT法和流式细胞术分别测定螺旋藻多糖对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞增殖能力和细胞周期的影响,采用ELISA法检测外周血单个核细胞培养上清细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4浓度,同时用RT-PCR法检测外周血单个核细胞IFN-γm RNA的表达。结果螺旋藻多糖能增强慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞的增殖能力,能增强慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞分泌IFN-γ和IL-2,且能降低分泌IL-4。螺旋藻多糖能上调慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞IFN-γm RNA的表达。结论螺旋藻多糖对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞的免疫功能具有调节作用。     

1,25-二羟维生素D_3对肾间质纤维化大鼠IL-17的调节作用

目的:观察1,25-二羟维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]对肾间质纤维化大鼠中白介素-17(IL-17)的调节作用。方法:54只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻(UUO)模型组和UUO+1,25(OH)_2D_3干预组,模型组和干预组行左侧输尿管结扎术,干预组给予1,25(OH)_2D_33 ng·100 g~(-1)·d~(-1)灌胃,其余两组给予等量花生油灌胃,灌胃满1 d、3 d、7 d后取左肾,采用免疫组织化学的方法检测IL-17、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平。结果:经光镜及免疫荧光检查证实造模成功。UUO模型组与假手术组比较,α-SMA和IL-17的表达水平均显著升高(P<0.05);干预组与UUO模型组比较,上述指标均显著降低(P<0.05)。结论:IL-17可能参与了肾间质纤维化的发生和发展;1,25(OH)_2D_3可能通过直接或间接下调IL-17的表达延缓肾间质纤维化的进展。     

α、β和γ扰素对人白细胞介素2产生的作用

作者选择刀豆素A、葡萄球菌肠毒素A(SEA)及金黄色葡萄球菌(SAU,90℃,10分钟灭活)作为白细胞介素2(IL-2)的诱生剂,刺激人外周血单个核细胞(PBMC)产生IL-2。用小鼠IL-2依赖性细胞毒性T淋巴细胞(CTLL)及胸腺细胞增殖法检测IL-2活性。PBMC预处理的方法有两种:一种方法是以不同浓度的干扰素(IFN)在37℃下对PBMC预处     

吡格列酮降低胰岛素抵抗状态下的氧化应激水平

目的：探讨吡格列酮对胰岛素抵抗状态下的氧化应激水平的影响。方法：分别用TNF—α（4ng／mL）和高浓度胰岛素（10^-7mol／L）刺激人肝癌细胞HepG2,建立胰岛素抵抗细胞模型。MTT法观察细胞毒性作用;氧化酶法检测细胞培养液中的葡萄糖浓度;用DCF—DA探针标记,流式细胞仪检测细胞内活性氧的水平;免疫荧光检测NF—κB核转位。结果：TNF—α和高浓度胰岛素刺激HepG2后,导致葡萄糖摄取障碍,细胞培养液上清中葡萄糖浓度较对照组显著升高,同时细胞内活性氧的水平较对照组也显著升高。吡格列酮显著改善胰岛素抵抗状态,同时显著降低细胞内氧化应激的水平。吡格列酮还能逆转TNF—α和高浓度胰岛素引起的NF—κB核转位。结论：吡格列酮能抑制NF—κB核转位,降低氧化应激水平,改善胰岛素抵抗状态。     

测定白细胞介素2活性的一种简单微量法

作者根据白细胞介素2(IL-2)能激发带IL-2受体的人外周白细胞增殖,介绍一种改良的微量测定法。作者用重组IL-2(rIL-2)和由混合淋巴细胞反应(MLR)产生的含有IL-2的上清液,诱导依赖IL-2鼠细胞毒性T细胞系(BD2.10)、依赖IL-2的人T细胞系(NO.9)、植物血凝素(PHA)激活的人T细胞以及在含10%胎牛血清或自体血清的培养液中培养10天的人外周血单个核细胞即“训练细胞”(educated cell)的增殖。通过~3H-胸苷掺入测定细胞增     

IL-23诱导人外周血单个核细胞对MUTZ-1细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响

目的 白介素-23(IL-23)诱导人外周血单个核细胞对骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系MUTZ-1增殖、凋亡及相关基因表达的影响.方法 采用密度梯度离心法分离获得正常人外周血单个核细胞(PBMNC),细胞分4组:阴性对照组(未加IL-23),3个浓度IL-23组(2、10、50 ng/ml),体外诱导72 h,并与MUTZ-1共培养.MTT实验检测MUTZ-1细胞增殖.流式细胞仪检测MUTZ-1细胞凋亡和细胞周期变化.Real time-PCR和Western-blot检测MUTZ-1细胞Bax、Bcl-2、caspase-3、survivin mRNA和蛋白表达.结果 2、10、50 ng/ml IL-23诱导的PBMNC与MUTZ-1细胞共培养后,MUTZ-1细胞增殖速度、S期细胞比例明显降低,细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例明显增加,呈时间和浓度依赖性,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);同时Bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达明显上调,Bcl-2、survivin mRNA和蛋白表达明显下调,呈时间和浓度依赖性,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 IL-23诱导PBMNC能够明显抑制MUTZ-1细胞增殖,促进MUTZ-1细胞凋亡,其机制与上调Bax、caspase-3表达、下调Bcl-2、survivin表达有关.     

异基因骨髓间充质干细胞对类风湿关节炎患者主要细胞因子表达的影响

目的探讨在体外环境中,异基因骨髓间充质干细胞(bMSCs)对类风湿关节炎(RA)患者的白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α和转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法采集健康供者的骨髓标本,经密度梯度离心分离、纯化获得其bMSCs,进行体外培养扩增。同时采集RA患者的外周血,分离单个核细胞。将来源于健康供者的bMSCs分别与来源于RA患者的单个核细胞和健康供者的单个核细胞在体外进行共培养,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞内细胞因子IL-1、TNF-α和TGF-β1表达的变化。结果经bMSCs与RA单个核细胞共培养7d后,IL-1和TNF-α表达量低于单独RA组,差异有统计学意义(P<0.05)。但是单独正常单个核细胞和bMSCs与正常单个核细胞共培养后比较IL-1和TNF-α表达差异无统计学意义(P>0.05);经bMSCs与RA单个核细胞共培养7d后,TGF-β1表达量高于单独RA组(P<0.05)。单独正常单个核细胞和bMSCs与正常单个核细胞共培养后比较TGF-β1表达差异统计学意义(P<0.05)。结论异基因骨髓间充质干细胞在体外可以特异性调节RA患者细胞因子的表达。bMSCs可能在RA发病发展中起一定的作用,bMSCs有可能用于RA的治疗。     

痤疮患者外周血IL-17、TNF-α及Th22细胞水平与痤疮严重程度的相关性研究

目的 探究痤疮患者外周血白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及外周血辅助性T细胞22(Th22)细胞水平与痤疮严重程度的相关性。方法 选择2020年5月至2022年1月门诊进行治疗的痤疮患者78例作为观察组，同一阶段体检的健康体检者47例作为对照组，比较2组外周血IL-17、TNF-α、IL-22、Th22细胞水平。按Pillsbury法将78例痤疮患者分为轻度(Ⅰ级)组19例，中度(Ⅱ～Ⅲ级)组39例，重度(Ⅳ级)组20例，比较3组血清外周血IL-17、TNF-α、IL-22、Th22细胞水平。并进一步分析外周血IL-17、TNF-α及Th22细胞水平与痤疮严重程度的相关性。结果 相较于对照组，观察组IL-17、TNF-α、IL-22及Th22细胞水平均明显上调(P<0.05)。相较于轻度组，中、重度组IL-17、TNF-α、IL-22、Th22细胞水平均明显上调(P<0.05);相较于中度组，重度组IL-17、TNF-α、IL-22、Th22细胞水平均明显上调(P<0.05)。IL-17、TNF-α、Th22预测痤疮严重程度的曲线下面积(AUC...     

他汀类药物对C反应蛋白直接诱导人外周血单个核细胞IL-6表达的影响

目的　观察离体急性冠状动脉综合征 (ACS)病人外周血单个核细胞对C 反应蛋白 (CRP)直接刺激的反应性及亲水性他汀 (普伐他汀 )与亲脂性他汀 (氟伐他汀 ,辛伐他汀 )药物干预后的效果。方法　离体培养ACS(n =15 )病人、稳定型心绞痛 (SAP)病人 (n =13)与健康人 (n =15 )外周血单个核细胞 ,CRP(2 0mg·L-1)刺激细胞 2 4h后检测细胞培养液上清中IL 6的表达 (ELISA)。普伐他汀、氟伐他汀、辛伐他汀分别按照不同浓度 (1× 10 -6,2 5× 10 -6,5× 10 -6,7 5× 10 -6,1× 10 -5mol·L-1)预先孵育细胞 2h后继以CRP刺激 2 4h ,ELISA分析培养液上清中的IL 6水平。结果　CRP(2 0mg·L-1)明显激活ACS病人外周血单个核细胞IL 6的表达。健康组、SAP组和与ACS组IL 6表达分别为(987± 10 2 )ng·L-1,(991± 134)ng·L-1,(312 9± 333)ng·L-1,均较其基础状态 (未受CRP刺激 )明显增高 (P <0 0 5 ) ;受CRP刺激状态下 ,ACS组IL 6表达是健康组的数倍(P <0 0 5 )。ACS病人外周血单个核细胞在不同剂量普伐他汀、氟伐他汀、辛伐他汀药物干预下 ,IL 6表达下降水平有所不同。结论　一定浓度的CRP能直接诱导人外周血单个核细胞IL 6表达增加 ,提示CRP能直接激活炎症反应 ,在ACS及其并发症的病理机制中可能发挥重要作用。他汀类药?     

FlowCytomix 检测类风湿关节炎患者细胞因子表达谱

目的 应用FlowCytomix检测类风湿关节炎患者(RA)细胞因子表达谱,探讨其在RA发病及治疗中的作用。方法 分离RA患者及健康对照者外周血单个核细胞(PBMCs),经PHA刺激后,收集细胞培养上清,FlowCytomix检测上清中细胞因子浓度。结果 与健康对照组相比,RA患者IL-17、IL-6、IL-1β、TNF-α水平均显著升高(P<0.05),但IFN-γ水平显著降低(P<0.05),IL-10水平无明显改变。RA患者疾病活动组IL-17、IL-6、IL-1β、TNF-α水平显著高于缓解组(P<0.05),但IFN-γ水平低于缓解组(P<0.05);IL-17、IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平与DAS28评分显著相关(P<0.05)。结论 FlowCytomix多细胞因子检测系统可特异、灵敏地检测RA患者PBMCs中细胞因子产生,RA患者PBMCs中IL-17、IL-6、IL-1β、TNF-α水平反映了其关节的炎症程度及活动状态。     

儿茶素对IL-1α诱导佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞功能的影响

目的:研究儿茶素(catechin,Cat)对重组大鼠白细胞介素1α(rIL-1α)诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)功能的影响,并探讨其部分机制。方法:采用弗氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠AA模型,分离培养大鼠成纤维样滑膜细胞,用MTT法检测FLS的增殖能力,放射免疫法(R IA)测定FLS产生PGE2和cAMP水平。结果:选择10 ng.mL-1为rIL-1α的最佳刺激浓度,Cat(100,50,25 mg.mL-1)体外给药可不同程度地抑制rIL-1α对AA大鼠FLS的促增殖反应,明显下调升高的PGE2的水平,明显上调降低的cAMP水平。结论:rIL-1α可以促进AA大鼠FLS的增殖,降低cAMP,升高PGE2,Cat能明显逆转rIL-1α对FLS的影响。