增液汤抑制幼鼠胸腺细胞凋亡作用的机制探讨

目的 :观察预防性应用增液汤注射剂对幼鼠胸腺细胞凋亡及其相关基因的影响。方法 :给 4～ 5周龄Wistar大鼠腹腔注射增液汤注射剂和地塞米松 ,采用原位末端标记 (TUNEL)法分析不同处理组的凋亡细胞 ,同时采用免疫组化方法检测幼鼠胸腺细胞bcl 2和bax基因蛋白表达情况。结果 :用TUNEL法标记凋亡细胞 ,荧光显微镜下 ,地塞米松组可见致密浓染的黄绿色荧光 ,呈局灶状分布 ;而增液汤组只有散在的荧光。光镜观察地塞米松组TUNEL阳性细胞数目较多 ,其凋亡指数为 0 4 1± 0 0 1;增液汤组TUNEL阳性细胞数目较少 ,凋亡指数为 0 0 7± 0 0 0 4 ,与地塞米松组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。免疫组织化学结果表明 ,地塞米松组bcl 2基因蛋白呈低表达 ,其蛋白阳性率为 (0 196 0± 0 0 0 6 0 ) % ,bax蛋白过度表达 ,蛋白阳性率为 (0 4 315± 0 0 16 5 ) % ,bcl 2 /bax <1;相反增液汤组细胞bcl 2基因蛋白呈高表达 ,bax基因蛋白仅有少量表达 ,其蛋白阳性率为 (0 5 0 10± 0 0 170 ) %和 (0 185 4± 0 0 0 9) % ,bcl 2 /bax >1。两组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 :通过调控凋亡基因bcl 2 /bax表达 ,增强胸腺细胞对地塞米松的抵抗 ,进而抑制细胞凋亡 ,可能是增液汤抑制幼鼠胸腺细胞凋亡的重要作用环     

增液汤的药理作用研究

增液汤对小鼠二甲苯所致耳廓肿胀有显著的抗炎作用；对小鼠小肠蠕动有促进作用，并能增加大鼠的唾液分泌。     

TUNEL法检测新风胶囊对AA大鼠滑膜胸腺及胃粘膜细胞凋亡的影响

目的：观察以终末脱氧核糖核酸转移梅介导的原位缺口末端标记（ter分钟al deoxynucleotidyl transferase mediated DUTP nick end labeling,TUNEL)技术检测新风胶囊对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA)大鼠滑膜，胸腺及胃粘膜细胞凋亡的影响，探讨新风胶囊的作用机制。方法：采用弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎（AA）大鼠模型，设立正常对照组，模型对照组，甲氨喋呤（MTX）对照组，雷公藤多甙（Triperygium Wilfordii Polycoride Tablet,TPT)对照组和新风胶囊（Xinfeng Cepsule,XFC)治疗组。记录各组大鼠的关节炎指数及体重变化，应用流式细胞仪（FCM）以TUNEL法测定各组大鼠没,鹕腺及胃粘膜细胞凋亡率。结果：与治疗前相比，XFC、TPT及MTX组治疗后大鼠的关节炎指数显著降低（P＜0．05－0．01），XFC组治疗后AA大鼠体重增加（P＜0．05），而TPT及MTX组体重无显著变化（P＞0．05）；模型组滑膜胸腺细胞凋亡率显著低于，胃粘膜细胞凋亡率显著高于正常对照组（P＜0．05），XFC组滑膜及胸腺细胞凋亡率显著高于，胃粘膜细胞凋亡率显著低于模型组、TPT及MTX组（P＜0．05－0．01），结论：XFC与MTX，TPT一样能降低AA大鼠关节炎指数，在增加AA大鼠体重，促进滑膜，胸腺细胞凋亡及抑制胃粘膜细胞凋亡方面优于MTX和TPT。新风胶囊的作用机理是促进滑膜细胞凋亡，抑制滑膜增生，促进胸腺细胞凋亡，抑制自身免疫反应以及抑制胃粘膜细胞凋亡，保护胃粘膜。     

细胞凋亡的中药调节机制

中药可通过对细胞凋亡的各个不同环节的调控来诱导或抑制细胞凋亡；中药调节细胞凋亡具有广阔的临床应用前景。     

中药调控血管平滑肌细胞凋亡的作用机制研究进展

目的:阐明中药调控血管平滑肌细胞凋亡的作用机制研究现状。方法:查阅国内外近年来相关资料35篇并对其进行汇总、分析、综述。结果:多种中药可对血管平滑肌细胞在基因、蛋白等不同分子水平产生调控作用,抑制或促进其凋亡,从而逆转或改变其相应病理状态。结论:中药合理调控血管平滑肌细胞凋亡作用确切,具有明显的优势,对其机制进行分子生物学的深入研究有着广阔的前景。     

中药活性成分诱导HeLa细胞凋亡作用机制的实验研究近况

目的了解中药活性成分诱导HeLa细胞凋亡作用机制的实验研究近况。方法复习国内外相关文献,综述中药活性成分诱导HeLa细胞凋亡的作用机制。结果中药活性成分不仅能够通过阻断细胞周期来诱导细胞凋亡、还能通过影响Fas/Fasl系统、p53基因蛋白、Bcl-2基因家族、caspase家族的表达等来实现这一过程。结论中药活性成分在诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡中起重要作用,其作为宫颈癌的一种辅助治疗手段,有着广阔的临床应用前景。     

诱导细胞凋亡及抗凋亡的药物研究进展

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)又称程序性死亡 (ＰＣＤ) ,是一种生理的“细胞自杀”过程。ＰＣＤ与坏死性死亡不同 ,其主要靶目标是细胞核。ＰＣＤ可形成“死亡小体”(ａｐｏｐｔｉｘｂｏｄｙ) ,在琼脂糖凝胶电泳下可呈现典型的ＤＮＡ“梯状结构”(ｌａｄｄｅｒｐａｔｔｅｒｎ)。研究ＰＣＤ不仅可以揭示“死”的秘密 ,而且也是理解“生”的需要。如果该“亡”的细胞不能凋亡 ,而该“生”的细胞过早凋亡 ,都将影响机体正常“生”的需要。下面就将近年来人们在诱导凋亡及抗凋亡药物方面的研究进展作一概述。1　诱导细胞凋亡药物及其相关因素…     

中药抑制细胞凋亡的研究进展

就近年来中药抑制细胞调亡的文献进行整理,从中药调控细胞凋亡途径、影响凋亡信号传导、调控凋亡相关基因表达、调控细胞因子4个方面进行系统综述.认为中药在抑制细胞凋亡方面有较好的作用.     

细胞凋亡作用机制的研究进展

细胞凋亡(apoptosis,APO)是新近提出的有关细胞死亡的一种模式,是生物界重要的生命现象之一,就近几年来细胞凋亡机制研究进展作一综述,为相关研究提供参考。     

加味玉屏风汤对小鼠胸腺细胞凋亡的抑制作用

目的：研究不同浓度的加味玉屏风汤对地塞米松磷酸钠（Dex-p)诱导的小鼠胸腺细胞凋亡和胸腺细胞自发凋亡的影响。方法：通过体外细胞培养，采用琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜检测手段，观察加味玉屏风汤作用前后对胸腺细胞凋亡程度的影响。结果：胸腺细胞既可发生自发凋亡，又可由Dex-p诱导凋亡，细胞凋亡率与Dex-p呈浓度依赖关系，最佳诱导浓度为10^-7mol/L。加味玉屏风汤（200－400μg/ml）可不同程度地抑制由Dex-p(10^-7mol/L)诱导的胸腺细胞凋亡（P＜0.01)；而低浓度（＜100μg/ml)的加味玉屏风汤则对Dex-p(10^-7mol/L)诱导的胸腺细胞凋亡无明显影响（P＞0.05)；加味玉屏风汤200、400μg/ml可使胸腺细胞的自发凋亡率明显降低（P＜0.01)。结论：不同浓度加味玉屏风汤（200－400μg/ml)可不同程度抑制胸腺细胞的自发凋亡及由Dex-p(10^-7mol/L）诱导的凋亡。     

电针对创伤应激大鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的:观察创伤应激及电针对大鼠胸腺细胞增殖功能及细胞凋亡的影响。方法:Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、创伤应激组、创伤应激加电针组。建立创伤应激大鼠模型。电针选用的穴位为“足三里”和“阑尾”两穴。用MTT法检测胸腺细胞增殖功能,用TdT介导的脱氧尿嘧啶末端缺口标记法(TUNEL)检测胸腺细胞凋亡情况。结果:创伤应激能导致大鼠胸腺细胞发生凋亡,同时伴有胸腺细胞增殖能力的降低;电针能减少由于创伤应激诱导的胸腺细胞凋亡并改善胸腺增殖能力。结论:电针可通过抑制创伤应激诱导的胸腺细胞凋亡,起到改善应激后细胞免疫功能紊乱的作用。     

姬松茸多糖对大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的:观察姬松茸多糖对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱发大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响.方法:Wistar大鼠随机分为4组:正常组,模型组,姬松茸多糖低、高剂量组,每组10只.正常组和模型组灌胃(ig)生理盐水,姬 松茸多糖低、高剂量组ig姬松茸多糖溶液(60,120 mg·kg-1),1次/d,连续7d.模型组和姬松茸多糖低、高剂量于第7日腹腔注射DEX(0.02 g·kg-1).3h后处死各组动物,迅速无菌取胸腺,采用显微观察、流式细胞技术观察胸腺细胞形态学改变,胸腺细胞凋亡、脱氧核糖核酸(DNA)断裂百分率及线粒体膜电位变化,胸腺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化.结果:与模型组比较,姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体嵴肿胀明显减轻;姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞凋亡率[低、高剂量(5.96±1.14)％,(5.07±1.02)％],DNA断裂率[低、高剂量(3.67±0.49)％,(3.24±0.45)％]及胸腺组织MDA含量[低、高剂量(1.87±0.25),(1.72±0.23)μg·mg-1]均明显低于模型组[(7.14±1.62)％,(4.25±0.86)％,(2.16±0.38) μg·mg-1];姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体膜电位(荧光指数:低剂量38.57±6.29,高剂量41.36±7.18)及胸腺组织SOD活性量[低、高剂量(25.78±3.94),(27.36 ±4.21)U.mg-1]明显高于模型组(32.76 ±5.48)荧光指数,(21.45±3.52) i g· mg-1.结论:姬松茸多糖可阻断胸腺细胞DNA断裂和线粒体膜电位的下降,有效抑制DEX诱导的胸腺细胞凋亡,其作用机制与姬松茸多糖提高胸腺组织抗氧化功能有关.     

芍药苷对阿霉素诱导心肌细胞凋亡的保护作用及机制研究

目的:探讨芍药苷对阿霉素诱导大鼠心肌细胞凋亡的保护作用及其潜在的机制。方法:雄性SD大鼠60只,随机分成正常对照组、模型对照组、芍药苷10、20、40 mg/kg组和右丙亚胺150 mg/kg组,每组10只。除正常对照组外,大鼠尾静脉给予阿霉素15 mg/kg以诱导大鼠心肌细胞凋亡模型。芍药苷在静脉注射阿霉素前灌胃给药,连续3 d。给药结束后,分离血清和心脏。HE染色观察心肌组织形态学的改变;比色法测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的浓度; TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;DCFH-DA荧光法检测心肌组织中活性氧(ROS)的水平;Western blot检测心肌组织线粒体和细胞浆中细胞色素c蛋白的表达;Real-time PCR和比色法分别检测心肌组织中半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA表达和活性。结果:与正常对照组比较,模型对照组的心肌组织形态学产生了明显的改变,血清LDH和CK浓度、心肌细胞凋亡率、 ROS水平、线粒体细胞色素c的释放,以及caspase-3 mRNA表达和活性均明显升高(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,芍药苷20、40 mg/kg可明显抑制阿霉素诱导的上述效应(P<0.05或P<0.01)。结论:芍药苷对阿霉素诱导的心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与抑制ROS的产生进而减少线粒体细胞色素c的释放,从而下调casapse-3的表达和活性有关。     

芍药苷对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥大的抑制作用及其机制研究

目的:探讨芍药苷(PEF)对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌肥大的抑制作用及其潜在的机制。方法:雄性SD大鼠40只,随机分成5组,每组8只,正常组,模型组,PEF低、中、高剂量组(20,40,80 mg·kg-1),除正常组外,大鼠每天ih给予ISO(5 mg·kg-1,连续10 d)以诱导心肌肥大模型,ih ISO的同时ig给予PEF。给药结束后,分离心脏,测量全心重与体重以及左心室重与体重的比值;HE染色观察心肌细胞大小的改变;RT-q PCR检测肥大标志物心钠素(ANP)和脑钠素(BNP)以及心肌营养素-1(CT-1)的mRNA表达;Western blot和DCFH-DA荧光法分别检测心肌组织中CT-1蛋白的表达和活性氧(ROS)的水平。结果:与正常组比较,模型组全心重与体重、左心室重与体重的比值以及心肌细胞横截面积和ANP,BNP mRNA表达明显增加,同时心肌组织中CT-1 mRNA和蛋白表达以及ROS的水平也明显升高(P0.01);与模型组比较,PEF明显降低全心重与体重、左心室重与体重的比值以及心肌细胞横截面积和ANP,BNP mRNA表达,心肌组织中CT-1 mRNA和蛋白表达以及ROS的水平也明显降低。结论:PEF可抑制ISO诱导的心肌肥大,其机制可能与减少ROS的产生进而下调CT-1的表达有关。     

电针对吗啡戒断大鼠胸腺细胞凋亡相关基因的影响

目的:探讨电针抗吗啡戒断大鼠胸腺细胞凋亡的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为正常组、对照组、依赖组、电针组,连续20d递增量肌肉注射吗啡造成吗啡成瘾模型。造模后,依赖组立刻处死;对照组观察7d后处死;电针组电针双侧"足三里"穴(2/100Hz,2~4mA),每日1次,每次30min,治疗7d后处死。取大鼠胸腺,用免疫组化法检测凋亡基因Bcl-2、Bax、Fas、FasL蛋白表达。结果:与正常组比较,对照组和依赖组Bcl-2表达明显减少,Bax明显增加(P<0.01);电针组与对照组相比,Bcl-2表达上升(P<0.05),Bax表达的下降尚未达到统计学意义(P>0.05)。对照组及依赖组Fas、FasL的表达比正常组明显升高(P<0.01);电针组与对照组相比,Fas、FasL的表达均明显减少,差异显著(P<0.01)。结论:电针"足三里"穴增加吗啡戒断大鼠胸腺细胞内Bcl-2蛋白表达的水平,减少Bax蛋白表达水平,降低Bax/Bcl-2比值,抑制Fas、FasL表达水平的提高,可能是电针抗吗啡戒断大鼠胸腺细胞凋亡的作用机制之一。     

五味子多糖对环磷酰胺诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用

目的探讨五味子多糖对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CY)诱导小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用及相关机制。方法小鼠腹腔注射CY,建立胸腺细胞凋亡模型,施以不同浓度五味子多糖灌胃,利用流式细胞仪、末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL染色)及Bcl-2、Bax免疫组化分别观察不同剂量的五味子多糖对CY诱导的胸腺细胞凋亡的影响及机制。结果流式细胞仪和TUNEL染色显示CY组与对照组相比的细胞凋亡率明显增高,五味子多糖治疗组与CY组比较凋亡率明显降低(P<0.01)。CY组bcl-2基因表达明显下降,bax基因表达明显增加,Bcl-2/Bax比值下降。五味子多糖组与之相反,二者比值升高(P<0.01)。结论五味子多糖能够抑制CY诱导的胸腺细胞凋亡,降低胸腺细胞的损伤,其抑制作用可能通过促进Bcl-2表达、抑制Bax蛋白表达实现的。     

精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的抑制作用

目的探讨精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的抑制作用。方法 40只SPF级SD雄性大鼠随机分成5组:正常组、模型组、精杞低剂量组[500 mg/(kg·d)]、精杞高剂量组[1 000 mg/(kg·d)]和丙酸睾酮组[5 mg/(kg·d)],每组8只。给药组用药14 d后,除正常组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺25 mg/(kg·d)连续5 d,造模期间各给药组延续给药,造模结束后次日处死全部大鼠。HE染色法观察睾丸组织形态;透射电镜观察生精细胞超微结构;ELISA法检测血清睾酮(T)、卵泡生成素(FSH)和黄体生成素(LH)含量及附睾管腔液中唾液酸(SA)的含量;流式细胞仪分析精子细胞凋亡和细胞周期。结果与正常组比较,模型组睾丸曲精细管内各级生精细胞含量较少,结构杂乱,生精细胞核崩解、坏死,线粒体肿胀空泡化,嵴断裂,高尔基复合体结构紊乱。与模型组比较,各给药组病理减轻。与正常组比较,模型组大鼠T、FSH、LH、SA含量及各期细胞存活率、G₁期细胞比例降低,凋亡率及S期细胞比例增加(P<0.01)。与模型组比较,给药组T、FSH、LH、SA含量及各期细...     

黄芪多糖对Fas介导的糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的抑制作用

目的:观察黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠血糖、血清胰岛素及C肽、胰岛β细胞Fas表达及胰岛超微结构的影响,以初步探讨其治疗DM的作用及机制。方法:采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)55 mg/kg腹腔注射建立DM大鼠模型,实验分4组:正常对照组、DM模型组、APS低剂量组(200 mg/kg)和APS高剂量组(400 mg/kg),腹腔注射6 w,采用血糖仪测尾静脉血糖,放射免疫分析法测定大鼠血清胰岛素及C肽水平,免疫组织化学染色观察胰岛β细胞Fas的表达,电镜观察胰岛β细胞超微结构。结果:①模型组大鼠血糖水平较正常对照组显著升高(P<0.05),APS可显著降低DM大鼠血糖(P<0.05)。②模型大鼠血清胰岛素及C肽水平较正常大鼠显著降低(P<0.05),APS对二者无明显影响(P>0.05)。③正常大鼠胰岛β细胞Fas表达呈弱阳性,模型组大鼠β细胞Fas表达则呈强阳性,用药组大鼠β细胞Fas的表达较模型组显著减少。④模型组大鼠胰岛β细胞超微结构呈明显退行性变,APS可明显改善其超微结构。结...