产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的分析

对我院 2 0 0 1年 10月～ 2 0 0 2年 5月临床分离的 30株非重复的产ESBLs大肠埃希菌进行检测 ,了解CTX M基因的检出情况及产CTX M酶大肠埃希菌的耐药性和同源性。采用琼脂平皿对倍稀释法进行耐药表型检测 ,抗菌药物为头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、头孢哌酮 舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星和阿米卡星。采用PCR方法进行 β 内酰胺酶基因型分析 ,对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析 ,用PFGE分型技术了解产CTX M酶大肠埃希菌的同源性。琼脂糖电泳结果表明 30株产ESBLs大肠埃希菌中有 13株携带CTX M基…     

产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型研究

目的　了解我院同时产质粒介导AmpC酶和超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的耐药性及其 β 内酰胺酶的基因型特征。方法　 110株临床分离无重复肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌耐药株 ,采用酶提取物三维实验检测AmpC酶 ,美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型筛选和确认实验检测ESBLs ;琼脂二倍稀释法测定抗生素对同时产AmpC酶和ESBLs菌株的最低抑菌浓度 (MICs) ;等电聚焦实验测定 β 内酰胺酶等电点 (pIs) ;质粒接合实验定位耐药基因 ;PCR通用引物扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型。结果　同时产AmpC酶和ESBLs菌株在肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌中的检出率分别为 7.7% (5 6 5 )、8.9% (4 4 5 )。该类产酶菌株产 2～ 3种pI5 .4～ 9.0 β 内酰胺酶 ,对第三代头孢菌素、氨曲南、头孢美唑和含酶抑制剂复合制剂的敏感性极低 ,但对亚胺培南均敏感。 9株质粒中均检出AmpC酶基因DHA 1亚型 ,其中 1株同时检出ACT 1亚型 ;ESBLs基因亚型分别为CTX M 14、CTX M 3、CTX M 9,各有 4、3、2株 ;有 3株还携带广谱酶TEM 1基因。结论　我院存在同时产质粒介导DHA 1、ACT 1型AmpC酶和CTX M型ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌流行株 ,药敏检测结果显示对大多数新型广谱 β 内酰胺类抗生     

肠杆菌科产CTX-M酶细菌耐药性与β-内酰胺酶基因型的关系

目的 :了解我院肠杆菌科产CTX M酶细菌耐药性与 β 内酰胺酶基因型的关系。方法 :对 2 0 0 1年 1 0月～ 2 0 0 2年 5月我院临床分离的 4 0株产ESBLs肠杆菌科细菌琼脂对倍稀释法测定 1 0种抗菌药物的最低抑菌浓度 :用针对SHV、TEM、CTX N基因的特异性引物进行PCR扩增确定 β 内酰胺酶基因型 :对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析。结果 :产CTX M酶菌中有 93～ 75 %产 2种或 2种以上 β 内酰胺酶。产CTX M酶菌株多重耐药率为 1 0 0 % ,对头孢噻肟、头孢吡肟、头孢他啶、头孢哌酮 /舒巴坦的耐药率分别为 81 .2 5 %、75 %、31 .2 5…     

儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析

目的　了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的情况及其耐药特点 .方法　对 2 0 2株肺炎克雷伯菌和 134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定 ,纸片扩散法进行常规药敏试验 ,按照NCCLS的标准判读结果 .结果　对 336株儿童患者感染菌株试验 ,共检测出 81株ES BLs菌株 ,ESBLs总产生率为 2 4 .1% ;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为 2 9.7% ,大肠埃希菌产ESBLs率为 15 .7% .产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株 (t=6 .6 0 3,p <0 .0 1) ,对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药 ,对复方新诺明、氨苄西林 /舒巴坦的耐药率也较高 (耐药率高于 6 0 % ) ,且多为多重耐药株 ,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮 /舒巴坦敏感率较高 (耐药率低于 30 % ) ;所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为 0 .结论　儿童感染细菌ESBLs发生率相当高 ,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌 ,耐药高且多重耐药情况严重 ,治疗较困难 ,需加强ESBLs检测 ,以合理使用抗生素 ,延缓和防止ESBLs的发生和播散     

北京发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β内酰胺酶(ESBL)及质粒型Ampc酶菌株的比率及其基因型。方法收集北京两家教学医院2001--2002年产ESBL且对头孢西叮耐药的59株大肠埃希菌和21株肺炎克雷伯菌，采用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点；接合试验证实酶基因有无可转移性，并用碱裂解法提取质粒；采用多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction，MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。脉冲场凝胶电泳(pulsed field gelel ectrophoresis，PFGE)确定耐药菌株的亲缘关系。结果北京两家医院ESBL中质粒型AmCZ酶的发生率，大肠埃希菌分别为0和2％，肺炎克雷伯菌则分别为9．7％和17．1％。1株大肠埃希菌及9株肺炎克雷伯菌产生DHA-1型质粒AmpC酶，同时也产CTX-3型(6株)或CTX—M-14(1株)或SHV-12(3株)型ESBL。10株中，3株肺炎克雷伯菌可将头孢西叮耐药性传给受体菌。这10株菌均至少携带1个约33—36kb的大质粒，未发现质粒的传播。PFGE发现这10株菌来自不同的克隆株。结论北京地区发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX—M型ESBL的肺炎克雷伯菌，它们来自不同的克隆。     

吉林地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的基因分型

目的对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带的ESBLs耐药基因进行分型,为临床合理应用抗生素提供理论依据。方法收集住院患者标本中分离出的51株大肠埃希菌和32株肺炎克雷伯菌,经PCR对上述菌株所携带的ESBLs耐药基因进行分型。结果产ESBLs大肠埃希菌中耐药质粒编码TEM型、SHV型和非TEM非SHV型超广谱β-内酰胺酶基因的百分率依次为80.4%,7.8%和11.8%;而在肺炎克雷伯菌中的百分率依次为78.1%,71.9%和25.0%。多数产ESBLs肺炎克雷伯菌同时产生一种以上的β-内酰胺酶。结论获得了吉林地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的不同基因型,ESBLs基因型具有地区性差异。     

大肠埃希菌的耐药特性及其产超广谱β-内酰胺酶的分析

观察大肠埃希菌的耐药特性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况，为临床正确选择抗生素提供药敏依据。用微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)，用ESBLs表型确证试验检测出产ESBLs的大肠埃希菌。共检出314株大肠埃希菌。对其中298株大肠埃希菌进行了ESBLs检验，检出产ESBLs菌81株，检出率为27．2％；81株产ESBLs菌对多种药物耐药率较高，除亚胺培南、头孢哌酮，舒巴坦、庆大霉素和阿米卡星外，大肠埃希菌产ESBLs株对其他9种抗生素的耐药性明显高于非产ESBLs株。大肠埃希菌产ESBLs率高，应引起临床高度重视，对检测出的大肠埃希菌均应进行ESBLs检测，产ESBLs细菌有较高的交叉耐药性和多重耐药性，对亚胺培南和头孢哌酮，舒巴坦的敏感性好。     

大肠埃希菌耐药性分析

目的了解大肠埃希茵产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况;比较产ESBLs菌与非产ESBLs菌时10种抗生素的耐药率.指导临床合理用药.方法收集2007年7月～2008年6月临床分离的大肠埃希菌36株,用双纸片增效试验法和K-B法,进行产ESBLs细菌的检测和药敏试验.结果 36株大肠埃希茵中,共检出产ESBLs菌27株,栓出率为75%,除亚胺培南外,产ESBLs菌对其它10种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs菌,亚胺培南未发现耐药株.结论本院大肠埃希菌产ESBLs率高,亚胺培南是治疗我院产ESBLs菌引起感染的有效抗生素.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌临床分离株药敏分析

目的了解郑州地区临床分离大肠埃希氏菌产超广谱β-内酰胺酶情况和耐药特征。方法双纸片法筛选及确证实验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),琼脂二倍稀释法对大肠埃希氏菌进行MIC检测。结果产ESBLs大肠埃希氏菌检出率为57.4%,产ESBLs菌株多数呈多重耐药,仅亚胺培南的耐药率在10%以下。结论本地区临床分离大肠埃希氏菌具有较高的产ESBLs流行率,对于产ESBLs大肠埃希氏菌应以亚胺培南为首选药物。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌遗传标记和耐药基因的研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的遗传标记基因（整合子qacE△1、转座子tnpU）、氨基糖苷类修饰酶编码aac（6′）-Ib基因和喹诺酮类药物耐药qnrA基因分布状况,为临床使用药物治疗感染和消毒灭菌工作提供参考。方法收集本院的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共60株,采用PCR方法检测这些菌株中qacE△1、tnpU、aac（6′）-Ib和qnrA基因,MIC法药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 60株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qacEΔ1基因检出率61.7%,tnpU基因检出率7.6%,aac（6′）-Ib检出率为11.7%,qnrA基因检出率3.3%。60株菌中有38株含1种或以上基因,其药敏敏感度最高的是亚胺培南、厄它培南、哌拉西林/他唑巴坦,敏感率均为97.4%,而对氨苄西林和头孢唑啉完全耐药。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药与耐药基因传递机制整合子和转座子系统密切相关,分离株携带qacE△1、tnpU、aac（6′）-Ib和qnrA基因是细菌呈多重耐药的主要原因,提示临床应慎重用药。     

ICU耐药黄杆菌携带β-内酰胺酶基因的研究

目的 :探讨ICU临床分离黄杆菌耐药株携带 β 内酰胺酶的类型及基因介导方式。方法 :研究对象为从ICU分离所得的三株黄杆菌临床耐药株。产 β 内酰胺酶情况采用纸片法定性检测 ;细菌质粒和染色体以市售试剂盒抽提 ;酶编码基因用PCR检测分析。结果 :3株菌均产 β 内酰胺酶 ,PCR分析在其染色体和质粒上共发现 6种酶基因。其中菌株 0 2 2 0 3存在染色体和质粒共同介导的PSE 1 ,0 2 2 4 4存在质粒介导的TEM、AmpC、PSE 1 ,而 0 2 2 5 8除由质粒介导的SHV、OXA 1、CTX M 1外 ,尚由染色体介导编码SHV、TEM。结论 :ICU分…     

73株大肠埃希菌耐药表型分析

目的分析临床分离的大肠埃希菌的耐药性、产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性率及耐药性之间的关系。方法用微量肉汤稀释法检测2009年10月至2010年3月分离的73株大肠埃希菌的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株。结果 73株大肠埃希菌产ESBLs20株,阳性率为27.4%。产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率〉95%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率均为95%,但头孢他定耐药率为20%。对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦、替卡西林/克拉维酸和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率〈30%,耐药率低于30%的还有头孢西丁、阿米卡星,未检测到亚胺培南耐药株。非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株。结论本医院分离的产ESBLs大肠埃希菌的比例低于国内其他地区,具有显著的耐药性。     

儿童产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的检测与分析

目的了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点.方法对202株肺炎克雷伯菌和134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定,纸片扩散法进行常规药敏试验,按照NCCLS的标准判读结果.结果对336株儿童患者感染菌株试验,共检测出81株ESBLs菌株,ESBLs总产生率为24.1%;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为29.7%,大肠埃希菌产ESBLs率为15.7%.产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株(t＝6.603,p<0.01),对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药,对复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦的耐药率也较高(耐药率高于60%),且多为多重耐药株,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦敏感率较高(耐药率低于30%);所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为0.结论儿童感染细菌ESBLs发生率相当高,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌,耐药高且多重耐药情况严重,治疗较困难,需加强ESBLs检测,以合理使用抗生素,延缓和防止ESBLs的发生和播散.     

与植入物感染相关大肠埃希菌的耐药特征

背景:生物材料植入人体后,往往会发生感染引起植入物松动、脱落甚至造成菌血症。以往研究未注重植入物相关感染中的细菌耐药性问题。目的:了解与植入物感染相关大肠埃希菌的耐药特征,为预防和更有效治疗该类感染提供策略。方法:以大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923和铜绿假单胞菌ATCC27853为质控菌株,选取17种临床常用抗生素进行药敏试验,计算耐药率,分析耐药特征。用表型确证试验筛选产AmpC酶和产ESBLs菌株,明确产酶率。抽提耐药质粒,以聚合酶链反应扩增检测耐药基因,分析基因型分布情况。结果与结论:17种抗生素中耐药率最低的是亚胺培南,其次为阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟,大部分菌株对其他抗生素均有较高耐药率,且呈多重耐药。筛选出42株(61.8%)产ESBLs菌株和27株(39.7%)产AmpC酶菌株,同时产ESBLs和AmpC酶菌株有23株(33.8%)。产ESBLs菌株中以携带CTX-M型基因最为多见占66.7%,有19株(45.2%)同时携带两种以上基因,产AmpC酶中大多数是产DHA型,有5株(18.5%)同时携带两种基因。提示与植入物感染相关的大肠埃希菌菌株耐药水平高、耐药谱扩大,且多呈多重耐药,耐药基因复杂多样。建议使用敏感药物联合阿米卡星治疗该类感染。     

聚类分析在大肠埃希菌耐药性研究中的应用

目的 探讨聚类分析在大肠埃希菌临床分离株同类系株的分离及在耐药性监测中的实用价值。方法 用WHONETSE软件对收集的大肠埃希菌的监测数据进行处理，用SPSSl0．0对收集到的药敏试验数据进行聚类分析。结果( 1)聚类分析可以将同类系菌株与非同类系菌株分成不同的类别，以树状图的形式可以直观地反映菌株间的相似性。(2)变量的数量和种类的选择对聚类分析的结果会产生明显的影响。结论 利用大肠埃希菌的药物敏感试验数据进行聚类分析可以将产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌与普通株分开，对推断抗生素的临床疗效具有一定意义；同时可以辨别菌株间的相关性，为进行细菌基因同源性研究提供参考数据。     

575株泌尿外科泌尿道感染大肠埃希菌耐药性分析

目的：了解医院泌尿外科泌尿道感染的主要病原菌及大肠埃希菌的耐药率,为临床合理用药提供依据。方法对2011~2013年泌尿外科住院泌尿道感染患者尿培养分离出的575株大肠埃希菌进行药敏分析。结果泌尿道感染以革兰氏阴性杆菌为主,其中大肠埃希菌占院54.2%~69.3%;产ESBLs菌株检出率为院36.9%~46.3%;2011~2013年泌尿外科及全院大肠埃希菌大多抗菌药物耐药率呈下降趋势,但对青霉素类、头孢一代耐药率较高,产ESBLs株耐药率明显高于非产ESBLs。结论泌尿道感染大肠埃希菌分离率最高,且细菌耐药严重,特别是产ESBLs株耐药更为严重,应当加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物,减少耐药菌株的产生。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性分析

目的:探讨产ESBLs菌的发生率、耐药特点,为临床治疗提供参考。方法:采用微量肉汤稀释法对139株大肠埃希菌、64株肺炎克雷伯菌和17株产酸克雷伯菌做药敏试验,同时用纸片扩散法确证产ESBLs菌。结果:产ESBLs菌的检出率分别为:大肠埃希菌41.7%(2007年)和46.8%(2008年);肺炎克雷伯菌25%(2007年)和52.3%(2008年);产酸克雷伯菌66.7%(2007年)和50%(2008年),产ESBLs菌耐药率普遍高于非产ESBLs菌(P<0.01或P<0.05)。结论:常规检测和监测产ESBLs菌十分必要,这对指导临床合理用药、有效控制感染的传播意义重大。     

革兰阴性菌对头孢替坦的耐药性分析

目的了解临床分离革兰阴性菌对头孢替坦的耐药性。方法收集2012年1月至2013年6月从医院各种临床标本中分离的革兰阴性菌,使用VITEK2-compact微生物全自动分析仪进行鉴定和药敏试验,对结果进行回顾性调查。结果分离出革兰阴性菌1 045株,其中肠杆菌科细菌627株,占60.0%;非发酵菌402株,占38.5%。分离前3位的细菌分别为大肠埃希菌（27.7%）、铜绿假单胞菌（20.2%）、肺炎克雷伯菌（14.5%）。肠杆菌科细菌对头孢替坦耐药率低,53.3%的大肠埃希菌和29.6%的肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢替坦耐药率均低于6.0%。非发酵菌中铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对头孢替坦的耐药率均高于90.0%。结论头孢替坦可以作为临床治疗产ESBLs细菌感染性疾病的一种经验性治疗方案。     

双黄连口服液对产超广谱β-内酰胺酶菌的体内外活性研究

了解四川地区临床分离菌中产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌的发生率及双黄连口服液对产ESBLs株的体内外抗菌活性,并与阳性对照药盐酸环丙沙星进行比较。方法:ES-BLs菌株检测法(酶抑制剂联合三代头孢菌素最低抑菌浓度测定法)检测产ESBLs菌的发生率;Kirby.     

同一株菌两种新基因型CMY-22、TEM-144β-内酰胺酶的发现及其临床意义

大肠埃希菌是临床常见致病菌，也是院内获得性感染的重要病原菌。其耐药性的变迁和多重耐药的出现，主要与耐药基因编码酶有关，其中以质粒介导的超广谱β-内酰胺酶（ESBL）和AmpC酶最为重要。我们在最近一项关于大肠埃希菌抗生素耐药相关基因的研究中，发现1株大肠埃希菌（ZY163）同时携带2种新型ESBL和AmpC酶，现报告如下。