再生障碍性贫血外周血Th17和CD4~+ CD25~+ Treg细胞表达情况研究

本研究旨在探讨成人再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)外周血Th17和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达情况。45例初发AA患者分为轻型AA(n=25)和重型AA(n=25)两组,15例正常人作为对照。应用流式细胞术检测AA患者外周血中Th17和CD4+CD25+Treg的比例,ELISA检测血清及刺激后外周血单个核细胞(PBMNC)上清液中的白介素(IL-17)、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并与正常对照组比较。结果表明:重型AA(SAA)组外周血Th17细胞比例,血清中IL-17及IFN-γ表达高于轻型AA(MAA)和正常人组,而重型AA组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例降低。与轻型AA和正常对照相比,重型AA患者单个核细胞培养后上清液中IL-17及IFN-γ表达水平显著增加。AA患者血红蛋白计数与Th17细胞及血清IL-17表达呈负相关,与CD4+CD25+Treg表达成正相关。结论:重型AA患者外周血Th17细胞应答增强,而CD4+CD25+Treg细胞缺乏,贫血的严重程度与外周血Th17/Treg免疫应答失衡密切相关。     

Th9、Th17、CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞在慢性淋巴细胞白血病患者外周血中的变化

目的探讨慢性淋巴细胞白血病患者外周血中Th9、Thl7和CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞及相关细胞因子的表达水平及意义。方法采用流式细胞仪检测36例CLL患者和45例健康对照组外周血Th9、Th17和Treg细胞的表达率,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测外周血中细胞因子IL-9、IL-17、TGF-β的表达水平。结果 1)CLL组患者外周血Th9、Th17细胞比例及细胞因子IL-9、IL-17浓度均明显高于健康对照组[(1.29±0.35)%vs(0.74±0.23)%,P0.05;(2.15±0.46)%vs(1.08±0.37)%,P0.05;(24.25±7.05)%vs(16.35±5.42)%,P0.05;(11.47±3.99)%vs(7.36±2.85%),P0.05]。CD4~+CD25~+FoxP3~+细胞比例及细胞因子TGF-β浓度明显低于对照组[(4.76±0.89)%vs(7.26±1.95)%,P0.05;(3.82±1.39)%vs(6.82±2.01)%,P0.05]。2)相关性分析:患者Th9、Th17细胞比例及IL-9、IL-17浓度与淋巴细胞计数负相关(γ_s=-0.374,P=0.034;γ_s=-0.382,P=0.032;γ_s=-0.445,P=0.011;γ_s=-0.413,P=0.024);患者Treg细胞比例及TGF-β浓度与淋巴细胞计数正相关(γ_s=0.416,P=0.023;γ_s=0.403,P=0.028)。结论慢性淋巴细胞白血病患者Th9、Th17与CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞比例失衡,血清IL-9、IL-17和TGF-β水平变化,这些原因可能参与慢性淋巴细胞白血病的免疫发病过程。     

过继妊娠诱导的CD4+CD25+调节性T细胞治疗不明原因复发性流产

目的 观察过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对不明原因流产的作用机制及妊娠预后的影响.方法 以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,磁珠分选雌性CBA/J小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞并流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞纯度.将未孕CD4+CD25+Treg细胞和正常妊娠孕14d的CD4+CD25+Treg分别转输至流产模型孕4d(着床期)的雌性CBA/J孕鼠,于孕14d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率并测定宿主外周血和母胎界面组织体外培养上清液中Th1Th2/Th3型细胞因子(IFN-γ/TGF-βI/IL-10)水平.结果 与对照组比较,过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+Treg细胞的宿丰孕鼠的胚胎吸收率(11.32%)显著下降;外周血TGF-β 1/IFN-γ中位数(438)和IL-10/IFN-γ中位数(14)显著增加;母胎界而上TGF-β 1中位数(5899.02pg/mL)和IL-10中位数(158.85pg/mL)显著增加,IFN-γ中位数(18.46 pg/mL)显著下降.结论 孕早期过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+Treg细胞疗法能诱导宿主母胎免疫耐受并调节细胞因子表达,有利于妊娠维持的Th2、Th3应答偏移.     

桥本甲状腺炎患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞及IL-10的检测及临床意义

目的评价检测桥本甲状腺炎(HT)患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg)及白细胞介素-10(IL-10)的临床意义。方法选择30例临床确诊初次发病HT患者作为观察组,另选择30例同时期年龄、性别匹配的健康体检者作为对照组,均抽取空腹静脉血,采用流式细胞术测定外周血CD4~+CD25~+Treg占CD4~+T细胞的百分比、CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T细胞的百分比以及CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+CD25~+Treg的百分比,采用酶联免疫吸附实验检测IL-10水平。结果两组的外周血CD4~+CD25~+Treg占CD4~+T细胞的百分比差异无统计学意义(P0.05);观察组的外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T细胞的百分比、CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+CD25~+Treg的百分比均明显低于对照组(P0.05);观察组的IL-10水平显著低于对照组(P0.05)。结论桥本甲状腺炎患者的外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞比例、IL-10水平低于健康人群;推测CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg、IL-10可能参与了桥本甲状腺炎的发病。     

CD4+CD29+辅助性T细胞在脊髓损伤患者的表达与临床意义

目的探索CD4+CD29+辅助性T细胞在脊髓损伤患者的表达与临床意义。方法收集脊髓损伤患者75例, 以50例健康人作为对照组, 采用流式细胞术检测外周血CD4+CD29+辅助性T细胞及其胞内细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及白介素4(IL-4)含量; 分别在伤后第3及7天复查三者, 并分析三者与Frankel分级的相关性。结果与正常人比较, 脊髓损伤患者CD4+CD29+T细胞及IL-4含量明显升高, 而IFN-γ含量明显降低(P < 0.05);治疗第3天, CD4+CD29+T细胞及IL-4较受伤第1天均有不同程度下降, 而IFN-γ不同程度回升, 其中以D及E级的改变明显(P < 0.05)。治疗第7天, CD4+CD29+T细胞及IL-4继续下降, IFN-γ继续回升, 其中D及E级患者的CD4+CD29+T细胞、IFN-γ及IL-4均较day3有显著性差异(P < 0.05)。相关性分析提示CD4+CD29+T细胞及IL-4均与Frankel分级具有显著正相关性, 而IFN-γ与Frankel分级呈显著负相关性。结论CD4+CD29+辅助性T细胞及IL-4升高, 而IFN-γ降低是脊髓损伤的重要免疫特征, 与病情转归相关, 且与损伤程度呈相关性, 因此具有重要临床意义。      

骨髓增生异常综合征患者CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞特点及环孢素对其的影响

目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastie syndrome,MDS)-难治性贫血(refractory anemia,RA)及难治性血细胞减少伴有多系发育异常(refractory cytopenia with multiple dysplasia,RCMD)患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与白细胞介素(interleukin,IL)-10表达水平,评估环孢素对MDS患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响。方法选择2016年1月至2018年1月于新疆维吾尔自治区人民医院25例MDS-RA及RCMD患者(MDS组)和13名健康对照(健康对照组),采用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测外周血标本CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10表达水平,检测MDS-RA及RCMD患者在应用以环孢素为基础的免疫抑制方案治疗前、治疗6个月后及MDS组治疗有效及无效的CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10的表达情况。结果全部25例患者中,13例(52%)有效,12例(48%)无效。MDS组CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞比例显著高于健康对照组[(0.37±0.10)%与(0.12±0.06)%,t=2.02,P<0.001]。MDS组IL-10水平显著高于健康对照组[(7.16±1.27)μg/L与(2.75±1.06)μg/L,t=2.03,P<0.001]。MDS治疗有效组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例低于无效组[(0.15±0.06)%与(0.26±0.08)%,t=1.71,P<0.001],有效组IL-10水平低于无效组[(3.22±1.01)μg/L与(4.25±1.22)μg/L,t=2.06,P=0.030]。25例MDS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例与IL-10表达水平呈正相关关系(r=0.35,P=0.02)。结论MDS患者存在CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与IL-10的表达升高,环孢素治疗后降低。     

慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+调节性T细胞及部分细胞因子的变化

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ和TGF-β的变化,探讨其与乙型肝炎慢性化的关系。方法选择24例CHB患者作为CHB组、8例急性乙型肝炎(AHB)患者作为AHB组,12例健康体检者作为正常对照组,流式细胞仪检测各组CD4+CD25+调节性T细胞的百分率,ELISA双抗体夹心法检测慢性乙型肝炎组和正常对照组上述5种细胞因子的水平。结果 CHB组CD4+CD25+调节性T细胞百分率均明显高于AHB组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。CHB组和AHB组的CD4+CD25+Treg百分率与血清HBV-DNA及ALT之间无相关关系(P>0.05)。CHB组血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ和TGF-β水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。CHB组IL-2及IFN-γ分别与ALT正相关(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎患者存在免疫紊乱,CD4+CD25+调节性T细胞和Th1/Th2细胞的失衡与乙型肝炎慢性化有关。     

抗病毒治疗对不同类型HCV感染者外周血中CD4+CD25high调节性T细胞的影响

目的:探讨抗病毒治疗对不同类型HCV感染者外周血中CD4+ CD25high,调节性T细胞(Treg)频率及其功能的影响.方法:收集急性丙型肝炎患者26例、慢性丙型肝炎患者65例、肝硬化患者52例和健康对照者32例,分别抽取患者在治疗初期、治疗后和随访24周时的外周血,采用流式细胞术分析Treg细胞的表达频率,同时检测患者HCV-RNA和肝功能,ELISA法检测IFN-γ、IL-2和IL-10等细胞因子.结果:(1)急性丙型肝炎组患者治疗前、治疗后和随访后外周血标本中Treg细胞占CD4+T细胞的百分含量与健康对照组无明显差异(P＞0.05),但HCV-RNA和ALT均有较高的阴转率(80％以上).慢性丙型肝炎组患者(12.32±4.51)％和肝硬化组患者(18.17±4.16)％外周血中Treg细胞频率均明显高于健康对照组(4.69±2.16)％(P＜0.01),抗病毒治疗结束后[(7.66±4.03)％,(15.24±4.28)％]较治疗前均有明显下降(P＜0.05),其中慢性丙型肝炎组有66.2％的患者获得了SVR,肝硬化组亦有40.4％的患者获得了SVR,且获得SVR患者的Treg细胞频率明显低于本组未获得SVR患者(P＜0.05).(2)慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗后,获得SVR患者外周血中随着Treg细胞频率的下降IFN-γ和IL-2明显升高,而IL-10则明显降低(P＜0.01);未获得SVR患者的IFN-γ和IL-2呈先升高后降低趋势,IL-10表达亦相反(P＜0.05).结论:Treg主要通过抑制HCV特异性Thl细胞反应来实现疾病的慢性化,通过抑制或去除Treg细胞来刺激HCV特异性免疫反应或许是治疗慢性HCV感染的一个新策略.     

骨髓增生异常综合征患者CD4+CD25+调节性T细胞及血清白细胞介素-10表达水平的变化及意义

目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)及血清白细胞介素(IL)-10的变化及意义.方法 选取2010年10月至2012年12月江苏省兴化市人民医院血液科收治的23例初诊MDS患者为研究对象,纳入研究组,再根据MDS国际预后评分系统(IPSS)将其分为4个亚组,分别为高危型组(n=5),中危Ⅰ型组(n=11),中危Ⅱ型组(n=4),低危型组(n=3).选择同期于本院就诊的10例非恶性免疫性血液病患者纳入对照组.分别采用流式细胞术和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测研究组各亚组及对照组患者CD4+ CD25+ Treg比例与血清IL-10表达水平,并运用统计学方法进行分析比较.研究组各亚组与对照组患者年龄、性别构成比等基线资料比较,差异均无统计学差异(P＞0.05).本研究遵循的程序符合江苏省兴化市人民医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员批准,征得受试对象的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书.结果 ①研究组CD4+ CD25+ Treg比例和血清IL-10表达水平分别为(6.89±1.28)％和(7.02±1.83) μg/L,显著高于对照组的(2.72±0.46)％和(3.72±1.76) μg/L,差异均有统计学意义(t=5.263,3.824;P＜0.05).②研究组4个亚组中,CD4+CD25+ Treg比例及血清IL-10表达水平整体比较,差异均有统计学意义(F=10.464,9.898;P＜0.05).其中,低危型组和中危Ⅰ型组,以及中危Ⅱ型组和高危型组CD4+ CD25+ Treg比例与血清IL-10表达水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);而低危型组和中危Ⅱ型组,低危型组和高危型组,中危Ⅰ型组和中危Ⅱ型组,以及中危Ⅰ型组和高危型组CD4+ CD25+ Treg比例及血清IL-10表达水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).③研究组中,MDS患者外周血CD4+ CD25+ Treg比例与血清IL-10表达水平呈正相关关系(r=0.326,P=0.022).结论 CD4+ CD25+ Treg的数量和(或)功能失衡在MDS的发生、发展过程中起着重要作用,且CD4+ CD25+Treg比例及血清IL-10表达水平随预后危险级别的升高而升高,提示免疫异常是MDS发生、发展的一个促进因素.因此,CD4+ CD25+Treg有望成为MDS免疫靶向治疗的新靶点.     

移植患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞、TGF-β1及IL-10的表达

目的观察肝肾移植患者外周血中调节性T细胞(Treg细胞)的百分比与转化生长因子β1(TGF-β1)及白细胞介素10(IL-10)水平的表达情况及其相关性。方法15例移植患者的外周静脉血,采用流式细胞术检测CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞的百分比,并以20例体检健康者为对照组;用酶联免疫吸附试验法检测移植患者血清中细胞因子TGF-β1、IL-10的水平,分析这2种细胞因子水平与CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比的关系及移植前后TGF-β1、IL-10水平的差异。结果与对照组比较,移植患者移植前CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);肝肾移植后CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比下降为0。肝肾移植前CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比与TGF-β1、IL-10的水平呈正相关(P<0.05)。TGF-β1、IL-10的水平移植后低于移植前,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4^+CD25^+CD127^low Treg的百分比与TGF-β1、IL-10的水平存在一定相关性;移植后CD4^+CD25^+CD127^low Tre细胞百分比下降为0,可能与应用大量免疫抑制剂有关。     

三氧化二砷上调重型再生障碍性贫血患者外周血中CD4~+ CD25~+ CD127~(low)调节性T细胞比例

目的:探究三氧化二砷(ATO)对重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)患者外周血调节性T细胞(Treg)比例的影响。方法:选取20名初诊重型再生障碍性贫血患者,采集外周血并提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMNC)。PBMNC经不同浓度ATO(0、1、2.5和5μmol/L)处理96 h后流式细胞术检测CD4~+ CD25~+ CD127~(low) Treg比例,RT-PCR检测Foxp3 mRNA表达水平,ELISA检测IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β1细胞因子水平。结果:2.5和5μmol/L ATO能明显上调Treg比例(P0.01),且随ATO浓度的增加,Treg比例上升幅度增大(r=0.616)。在ATO浓度为1μmol/L时,Treg比例增加,但结果无统计学意义(P0.05)。1、2.5和5μmol/L ATO均能明显上调Foxp3 mRNA表达水平(P0.05,P0.01,P0.01),且Foxp3 mRNA表达水平的增加与Treg比例的增加呈线性正相关(r=0.523),总体相关系数95%置信区间为(0.37,0.67)。1、2.5和5μmol/L ATO均能显著降低IFN-γ水平(P0.01);2.5和5μmol/L ATO能显著降低IL-4(P0.01,P0.01)和IL-17(P0.05,P0.01)水平;1和2.5μmol/L ATO对TGF-β1水平均无明显影响,5μmol/L ATO能显著降低TGF-β1水平(P0.05)。结论:ATO能够通过上调再障患者外周血Treg细胞比例介导免疫调节作用,并不同程度降低IFN-γ、IL-4、IL-17水平。     

恶性梗阻性黄疸患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义

目的:探讨恶性梗阻性黄疸患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryTcell,Treg)的变化及其意义。方法:采用流式细胞术对35例恶性、29例良性梗阻性黄疸患者和30例健康对照者外周血Treg数量进行检测,观察Treg数量与黄疸时间、黄疸程度的关系。结果:(1)与健康对照者比较,梗阻性黄疸患者(包括良性、恶性患者)Treg水平显著上升(均P<0.01);恶性梗阻性黄疸患者Treg水平较良性为高(P<0.01);(2)重度黄疸患者(总胆红素>171μmol/L)外周血Treg数量明显高于轻度黄疸患者(P<0.01);(3)Treg水平与CD3+、CD4+、CD8+T细胞值及NK细胞呈非常显著负相关,而与总胆红素之间呈非常显著正相关。结论:恶性梗阻性黄疸患者外周血CD4+CD25+Treg数量明显升高,存在免疫调节紊乱,可能是其机体细胞免疫受抑制的重要机制。     

红细胞输注无效患者外周血T淋巴细胞亚群和CD4~+CD25~+调节性T细胞水平的变化

目的通过观察红细胞输注前后患者T淋巴细胞亚群和调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)水平的变化,探讨其与红细胞输注无效的关系。方法选择反复输注红细胞患者30例,采用流式细胞术检测输血前后外周血CD3+T细胞的水平和CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+Treg的水平。结果红细胞输注无效组患者输血后的CD3+T细胞以及CD3+CD4+T细胞的水平较输血前升高(P<0.05),CD3+CD8+T细胞无改变(P>0.05),CD4+CD25+Treg下降(P<0.05);而有效组患者CD4+CD25+Treg的水平增高(P<0.05),CD3+T细胞、CD3+CD4+及CD3+CD8+T细胞的水平无变化(P>0.05)。结论异体红细胞输注造成机体免疫功能改变,CD4+CD25+Treg水平的下降导致T细胞的异常活化,可能最终导致红细胞输注无效的发生。     

外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用

目的观察恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(CD4+CD25+CD127lowTreg)的数量变化,探讨外周血CD4+CD25+CD127lowTreg检测在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用。方法以35例正常人作为对照组,采用流式细胞术检测74例肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg在CD4+T细胞的比例,分析不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T细胞的百分比,采用实时荧光定量RT-PCR技术检测PBMC转录因子Foxp3表达水平。结果肿瘤患者外周血中CD4+CD25+CD127low Treg占CD4+T细胞百分比为(6.19±1.82)%,明显高于对照组(3.12±1.16)%,差异具有统计学意义(P0.05)。其中Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg百分比分别为(6.08±2.14)%、(6.88±2.65)%,明显高于Ⅰ-Ⅱ期患者(5.65±1.86)%,P0.05;病理分型为低分化者CD4+CD25+CD127lowTreg百分比为(6.72±2.60)%,明显高于高分化者(5.94±2.11)%,P0.05;有淋巴结转移者CD4+CD25+CD127lowTreg百分比为(6.95±3.12)%,明显高于无淋巴结转移者(5.02±2.09)%,P0.05。结论恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T细胞的比例明显升高,监测CD4+CD25+CD127lowTreg有利于评估肿瘤患者的免疫功能和辅助判断肿瘤患者的病情进展及预后。     

致敏小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞磁珠分选及体外扩增

本研究探讨致敏小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞的分选及体外扩增。流式细胞术检测致敏小鼠及正常小鼠体内CD4+ CD25+ Treg细胞水平,免疫磁珠分选方法从小鼠脾细胞中分选出CD4+T细胞、CD4+ CD25+ Treg细胞和CD4+ CD25-T细胞,负载抗CD3/CD28单克隆抗体MACSiBead联合IL-2共同刺激CD4+ CD25+ Treg细胞进行体外扩增培养,用0.4%台盼蓝染色并计数检测细胞的活性,流式细胞术检测分选后细胞纯度、主要表面标记及Foxp3基因的表达。结果表明:致敏小鼠体内CD4+ CD25+ Treg水平较正常小鼠升高(P<0.05)。分选出CD4+ CD25+ Treg细胞纯度平均达到87%,细胞活性大于97%,高表达Foxp3基因。体外扩增2周后细胞数扩增倍数能够达到42倍,CD4+ CD25+ Treg细胞所占比例为85.32%,Foxp3表达由(76.92±1.72)%稍下降至(75.33±2.11)%(P>0.05)。结论:免疫磁珠分选法能够分选出高纯度的CD4+ CD25+ Treg细胞,该分选方法不影响分选靶细胞的细胞活力;体外成功扩增了CD4+ CD25+ Treg细胞,扩增后的CD4+ CD25+ Treg细胞表面标记及Foxp3基因表达无明显改变。     

胃癌区域淋巴结中CD4~+CD25~+Foxp3~+T水平与细胞因子相关性分析

目的观察胃癌区域淋巴结中CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞(Treg细胞)分布及与外周血白介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-β_1的关系。方法采用流式细胞术检测48例胃癌患者(淋巴结转移26例,无转移22例)区域引流淋巴结中Treg细胞频数;ELISA方法检测外周血血清TGF-β_1和IL-10水平。分析Treg细胞与TGF-β_1、IL-10相关性。结果 Treg细胞在淋巴结转移患者阳性淋巴结中水平为(18.16±2.51)%,显著高于阴性淋巴结[(13.51±2.48)%],差异有统计学意义(P0.05),且阴性淋巴结Treg细胞比例显著高于无转移患者淋巴结[(9.27±2.16)%],差异有统计学意义(P0.05)。ELISA结果提示淋巴结转移患者外周血TGF-β_1和IL-10水平显著高于无转移患者,差异有统计学意义(P0.05)。胃癌患者引流区淋巴结Treg细胞分布比例与外周血血清TGF-β_1(r=0.73,P0.01)和IL-10水平(r=0.81,P0.01)呈明显正相关。结论胃癌患者区域引流淋巴结中Treg细胞分布与淋巴结转移密切相关,Treg细胞可能通过分泌TGF-β_1和IL-10导致胃癌淋巴结微环境发生免疫抑制,是胃癌发生淋巴结转移的重要因素之一。     

食管癌患者外周血CD3+T细胞分泌细胞因子的水平变化及其临床意义

目的探讨食管癌患者外周血CD3~+T细胞分泌细胞因子的水平变化及其临床意义。方法选取2016年1月至2018年1月在西安交通大学第二附属医院接受治疗的28例食管癌患者为研究组,28例健康体检者为健康对照组。比较两组患者的外周血T细胞、外周血CD3~+T细胞分泌因子白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10、IL-12表达水平、外周血CD3~+T细胞分泌因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和干扰素(IFN)-γ表达水平。结果研究组CD3~+/CD4~+、CD4~+/CD8~+表达水平低于对照组,研究组CD3~+/CD8~+、CD3~+表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组IL-2、IL-10、IL-12表达水平低于对照组,研究组IL-4表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。研究组TNF-α表达水平高于对照组,研究组IFN-γ表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论对于食管癌患者,食管癌患者外周血CD3~+T细胞分泌细胞因子CD4~+/CD8~+、CD3~+/CD4~+表达水平显著增高,说明患者的免疫耐受力与免疫逃逸存在较明显的关系。     

胃癌患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞检测及临床意义

目的观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞与胃癌患者的关系,探讨其临床意义。方法用流式细胞术分析胃癌患者外周血淋巴细胞中Treg细胞的表达。结果胃癌患者手术前、后外周血淋巴细胞中Treg细胞比例分别为(6.35±1.85)和(4.54±1.42)%(P<0.05),术后复发时比例为(7.17±1.55)%;化疗前、后分别为(6.47±1.97)%和(8.81±2.01)%(P<0.05)。早期胃癌Treg细胞为(5.88±1.54)%,明显低于进展期胃癌(7.04±1.66)%(P<0.05)。结论胃癌患者外周血Treg细胞在术后1周比例减少,复发时比例上调,提示其参与了胃癌发生、发展的全过程。化疗后Treg细胞增加,可能与药物诱导的增值分化有关。不同进展期病人外周血中Treg细胞的水平有助于了解病情,判断预后。     

外周血中CD4~+CD25~+与CD8~+CD28~-调节性T细胞与Graves病的关系研究

目的分析Graves病(GD)患者外周血中CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T(Tr)细胞的变化。方法选择该院内分泌科门诊或住院部43例GD患者为研究对象,其中内分泌科门诊确诊的19例GD患者为试验初发组。接受治疗且甲状腺功能恢复正常的24例GD患者为治疗缓解组;选择同期健康体检者20例为健康对照组。采用流式细胞术检测3组外周血中CD4+CD25+和CD8+CD28-Tr细胞水平。结果试验初发组外周血CD4+CD25+Tr细胞水平为(4.56±4.14)%,明显低于健康对照组的(8.84±4.45)%,差异有统计学意义(P0.05),CD8+CD28-Tr细胞水平为(14.95±5.38)%,与健康对照组的(10.65±6.37)%比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗缓解组外周血中CD4+CD25+Tr细胞水平为(6.99±6.35)%,与健康对照组比较,差异无统计学意义(P0.05),但其CD8+CD28-Tr细胞水平为(20.48±6.07)%,高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CD4+CD25+Tr细胞水平可能与GD发病有关,CD8+CD28-Tr细胞可能与GD病程发展有关。     

原因不明复发性流产病理妊娠患者外周血CD4+CD25+Treg、Foxp3mRNA的表达

目的探讨原因不明复发性流产(URSA)病理妊娠患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA的表达。方法采用流式细胞术测外周血CD4+CD25+Treg,半定量、实时荧光定量PCR分析外周血单个核细胞Foxp3转录水平;检测70例原因不明复发性流产史妇女(URSA未孕组)、20例病理妊娠妇女(URSA病理妊娠组)、22例正常妊娠妇女组(正常妊娠组)、20例正常非孕妇女组(对照组)外周血中CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA的表达情况。采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-10(IL-10)水平。结果 URSA未孕组外周血CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA、IL-10比例明显低于正常非孕妇女组,两组比较,差异均有统计学意义(t分别=3.61、4.18、2.71,P均<0.05);URSA病理妊娠组外周血中CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA、IL-10低于正常妊娠妇女组,两组比较,差异均有统计学意义(t分别=3.79、12.56、4.42,P均<0.05)。结论外周血CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA和IL-10表达水平降低可能与URSA病理妊娠患者的发病有关。