产毒性大肠杆菌不耐热和耐热肠毒素基因克隆及序列分析

目的:用基因工程方法克隆产毒性大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)基因,以制备检测ETEC的单克隆抗体.方法:利用PCR技术扩增LT和ST基因并将它们插入T-easy载体中,采用全自动测序仪进行核苷酸序列分析.结果:DNA序列分析表明,克隆的ETEC-LT-B DNA序列与GenBank公布序列比较在17、69、101、102位点有碱基变异,同源性98.9%;ETEC-STDNA序列与GenBank公布序列一致.结论:成功获得正确的ETEC的LT和ST基因,为其重组表达及后续研究奠定了实验基础.     

产毒性大肠杆菌不耐热和耐热肠毒素基因克隆及序列分析

目的：用基因工程方法克隆产毒性大肠杆菌（ETEC）不耐热肠毒素（LT）和耐热肠毒素（ST）基因,以制备检测ETEC的单克隆抗体.方法：利用PCR技术扩增LT和ST基因并将它们插入T-easy载体中,采用全自动测序仪进行核苷酸序列分析.结果：DNA序列分析表明,克隆的ETEC-LT-B DNA序列与GenBank公布序列比较在17、69、101、102位点有碱基变异,同源性98.9%;ETEC-STDNA序列与GenBank公布序列一致.结论：成功获得正确的ETEC的LT和ST基因,为其重组表达及后续研究奠定了实验基础.     

耐热肠毒素试验检测产毒性大肠菌的体会

目前 ,我们在检测产毒素大肠埃希氏菌时 ,除血清学测验外主要是测定其肠毒素来证实。测定方法甚多 ,我国目前在测定LT(不耐热肠毒素 )时多采用双向琼脂扩散试验 ,测定ST(耐热肠毒素 )时多采用乳鼠灌胃试验。1　材料与方法1 1　材料　乳鼠 :分别按不同批次购于贵阳医学院动物室和省防疫站动物室 ,前者健康 4日龄小白鼠9只 ,2日龄 5只 ,共 1 4只 ;后者 3日龄 9只 ,4日龄5只的健康大白鼠。Honde氏产毒性肉汤培养基 :按何晓青主编卫生防疫细菌检验中的配方配制。菌株来源 :来源于一起食物中毒标本分离的产毒性大肠菌 (经血清学及生化学反应证…     

肠毒性大肠菌不耐热肠毒素检测方法研究

目的探讨改进检测肠毒性大肠菌不耐热肠毒素的方法、方法采用改进平板免疫溶血试验方法并建立微量被动免疫溶血试验法。结果微量被动免疫溶血试验和平板免疫溶血试验敏感度一致。结论微量被动免疫溶血试验比平板免疫溶血试验法简化了试验步骤,节约时间,并保留了原方法敏感度高、结果易判断的优点。     

产毒大肠杆菌不耐热肠毒素单克隆抗体的临床应用研究

<正> 产毒大肠杆菌(ETEC)产生不耐热(LT)和耐热(ST)两种肠毒素,是引起小儿腹泻的重要病原菌。近年来,用免疫学方法检测大肠杆菌LT有很大发展,但这些方法均需应用抗-LT血清。由于LT提纯复杂,大批量生产抗-LT血清还存在一定困难。为了解决这个问题,我们对解放军302医院研制的抗人源产毒大肠杆菌LT单克隆抗     

大肠杆菌不耐热肠毒素的粘膜免疫机理

大肠杆菌不耐热肠毒素（ＬＴ）是由Ａ、Ｂ两种亚单位组成的ＡＢ５型蛋白，其中Ａ亚单位具有ＡＤＰ－核糖基化活性，Ｂ亚单位具有与肠粘膜上皮细胞膜上的神经节苷脂结合的作用。它能引起人和猪等动物的腹泻。另外，它还是强有力的粘膜免疫原和粘膜免疫佐剂。了解其粘膜免疫机理，对于发展ＥＴＥＣ菌苗和粘膜免疫佐剂具有重要意义。本文分别从ＬＴ的粘膜免疫原性和佐剂效应两方面对其粘膜免疫机理作一讨论。     

产不耐热肠毒素大肠杆菌所致夏季婴幼儿腹泻的临床观察

1968年 Gorback 及 Sack 自霍乱样腹泻病人的粪便中分离出产肠毒素大肠杆菌 ETEC(Entero-toxigenic Escherichia Coli)后,国外对 ETEC的研究及报告较多。Sack 认为,ETEC 是发展中国家小儿急性腹泻的常见病因,是发达国家婴幼     

抗产肠毒素性大肠杆菌的耐热和不耐热肠毒素交联菌苗的研制

作者用碳化二亚胺使耐热(ST)和不耐热(LT)肠毒素结合的方法,研制 ST 和 LT 毒素交联菌苗,这种菌苗对产生 LT 或 ST 肠毒素的不同血清型的大肠杆菌都有防御作用。用 Clements 等方法从大肠杆菌711株提取纯化的 LT 全毒素,用 Staples 等方法提     

大肠杆菌耐热肠毒素单克隆中和抗体的制备

大肠杆菌耐热肠毒素(ST)有STa和ST_(a)两类.为了进一步研究ST_(a)与肠粘膜细胞分泌功能的关系,作者研制了STa单克隆抗体.     

平板免疫溶血试验检测大肠杆菌不耐热肠毒素的效果观察

杨正时等新近创建一种平板免疫溶血试验,用于检测大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)。为了探索其检测效果,我们于1985年对180株大肠杆菌同时采用平板免疫溶血试验、Biken试验和兔肠结扎试验检测LT,并进行比较。现报告如下。     

大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位研究进展

不耐热肠毒素B亚单位(heat-labile enterotoxin B subunit,LTB)是产肠毒素性大肠杆菌分泌到细胞周质的肠毒素的组成部分,具有黏膜免疫佐剂活性,可介导细菌与肠上皮细胞结合.此文对LTB的结构、重组表达、作为黏膜佐剂的免疫学评价和作用机制等方面进行综述.     

用发酵罐透析培养制备大肠杆菌不耐热肠毒素

本文报导用二株大肠杆菌、三种培养基及不同培养条件作不耐热肠毒素产毒试验的结果。菌株为大肠杆菌853/67株和411(5)株。培养基为Mitchell氏改良葡萄糖-盐类培养     

用大肠杆菌耐热肠毒素免疫大鼠的保护作用

产生耐热(ST)及/或不耐热(LT)肠毒素的大肠杆菌是引起人类急性腹泻的常见病因。由于用 ST 肠毒素作主动免疫对产生 ST肠毒素的活菌是否有防御作用尚无有价值的报导,因此,作者用大鼠作模型进行了这方面的实验。     

产肠毒素性大肠杆菌不耐热肠毒素作为口服流感灭活疫苗佐剂的活性

作者报告了以产肠毒素性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)为粘膜佐剂,与全流感病毒灭活疫苗同时口服免疫小鼠的效果.甲型流感病毒X-31株经培养浓缩并以蔗糖梯度离心后,稀释成1mg/ml浓度,按0.025%浓度加入福马林于4C作用3天使病毒完全灭活;采用6～10周龄BALB/c雌性小鼠于轻度麻醉下口饲不同剂量纯化的灭活X-31病毒(加或不加25μgLT),间隔1周免疫3次.同时采用单剂腹腔注射(不加LT)或末次口服后1周腹腔注射加强免疫1剂(不加LT)作为对照.末次接种后3周采集小鼠血清及肺与鼻腔冲洗液标本,经霍乱弧菌受体破坏酶处理后,用ELISA检测样品的抗病毒IgG和IgA.以标准方法测定血凝抑制抗体及中和抗体滴度;在接种后3周或     

用霍乱肠毒素和大肠杆菌不耐热肠毒素的特异性抗体作ELISA鉴别两种毒素

本文介绍了用两种酶联免疫吸附试验(ELISA)和家兔肠袢试验检测和鉴别霍乱弧菌肠毒素(CT)和产肠毒素性(ET)大肠杆菌不耐热肠毒素(LT).用免疫亲和柱层析法分别分离抗-CT和抗-LT单价特异性抗体以及抗CT和LT的共同抗体,用这些抗体建立了以下两种ELISA     

卵黄LT抗毒素亲和层析纯化大肠杆菌不耐热肠毒素

大肠杆菌不耐热毒素 (Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｈｅａｔ -ｌａｂｉｌｅｅｎｔｅｒａｔｏｘｉｎｔｏｘｉｎ ,ＬＴ)是产毒性大肠杆菌 (ＥＴＥＣ)感染人畜引起急性腹泻的主要毒素之一 ,关于它的提纯方法有不少报道[1-3 ] ,一般采用沉淀、超滤、浓缩、凝胶层析 ,离子交换层析及超速离心等多种技术联合使用。本文采用ＬＴ免疫母鸡所产蛋的卵黄中提取的抗ＬＴ抗体作亲和层析柱 ,纯化大肠杆菌不耐热肠毒素ＬＴ ,方法简便、纯度高 ,生物学活性完好。1　材料和方法1 1　材料1 1 1　试剂　ｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢ .ｓｕｌｆａｔｅ(日本一制药株式…     

卵黄IT抗毒素亲和层析纯化大肠杆菌不耐热肠毒素

大肠杆菌不耐热毒素(Escherichia coli heat-labileenteratoxintoxin,LT)是产毒性大肠杆菌(ETEC)感染人畜引起急性腹泻的主要毒素之一,关于它的提纯方法有不少报[1-3],一般采用沉淀、超滤、浓缩、凝胶层析,离子交换层析及超速离心等多种技术联合使用.     

发展中国家产肠毒素大肠杆菌疫苗的研究方向

1998年12月,WHO在日本召开国际会议,对产肠毒素大肠杆菌(ETEC)和肠出血性大肠杆菌的流行病学和疫苗研究进展、免疫策略等进行回顾.5年后,2003年在瑞士召开的会议上再次回顾了ETEC疫苗的研究进展,评价了发展中国家儿童中的流行病学和疫苗试验的成败,确定了发展中国家未来大肠杆菌疫苗研究的方向.     

大肠杆菌不耐热肠毒素的粘膜免疫原性(英)

大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）是一种有效的粘膜免疫原，口服或鼻内接种后可诱导高分泌性和全身性抗体应答。此外，LT在抗其他共服抗原的抗体应答中起到佐剂作用。为了研究LT亚单位的粘膜免疫原性和佐剂作用，作者从超量产生的大肠杆菌培养基中分别克隆和提纯LT全毒素和无毒性B亚单位（LTB），并分别用重组 LT、LTB及两者混合物鼻内免疫小鼠，检测它们诱导血清LTB特异性IgG、IgA和粘膜S-IgA的能力。     

被动免疫溶血试验,Biken试验和基因探针法检测大肠杆菌不耐热肠毒素的效果比较

我们于1985年同时用被动免疫溶血试验、Biken 试验和基因探针法检测埃希氏大肠杆菌不耐热肠毒素,对昆明附近从腹泻病人粪便中分离的39株大肠杆菌进行了检测,并对其结果进行了比较,现报告如下:材料和方法一、菌株:产 LT 标准菌株 E.coli 44813(来源于卫生部药品生物制品检定所)。不产 LT 的 E.coli C600(来源于中国科学院微生物研究所)。测定菌株是从昆明附近腹泻