RNA干扰介导的Cdx2沉默对人胃癌细胞MGC-803裸鼠移植瘤生长的影响

目的 建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,探讨Cdx2基因RNA干扰(RNAi)的重组慢病毒载体(pLL-Cdx2-siRNA)对人胃癌细胞MGC-803裸鼠移植瘤Cdx2基因表达和肿瘤生长的影响.方法 建立人胃癌细胞MGC-803裸鼠移植瘤模型,随机分为实验组(pLL-Cdx2-siRNA组),空载体组(pLL3.7组)和生理盐水组.隔天向各组动物肿瘤内分别注射Cdx2基因沉默的重组慢病毒载体pLL-Cdx2-siRNA、空载体pLL3.7或生理盐水0.2 mL,共6次,测量各组肿瘤体积的大小;11d后处死裸鼠,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测移植瘤中Cdx2基因的表达,脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术检测肿瘤细胞的凋亡.结果与生理盐水组和空载体组相比,实验组的肿瘤生长速度明显减慢(P＜0.05),肿瘤细胞Cdx2 mRNA和蛋白表达明显下降(P＜0.05);实验组肿瘤细胞的凋亡指数(16.7±5.6)％明显高于空载体组( 10.5±4.1)％和生理盐水组(11.2±4.3)％(P＜0.05).结论慢病毒载体pLL-Cdx2-siRNA瘤内注射可抑制人胃癌细胞MGC-803裸鼠移植瘤的生长.     

卡铂对子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长及Tie2基因表达的影响

目的:研究卡铂对子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及对肿瘤组织中酪氨酸激酶受体(Tie2)的影响.方法:应用扩增培养的Ishikawa细胞株建立子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型.随机将10只成瘤裸鼠分为卡铂化疗组(化疗组)和空白对照组(对照组),分别应用伯尔定注射液(25.0 mg·kg-1)和5%葡萄糖(0.2 ml·只-1)瘤体内注射治疗,观察移植瘤体积及瘤体质量变化,计算抑瘤率;实时定量PCR和蛋白质印迹法检测移植瘤组织中Tie2 mRNA和蛋白表达.结果:化疗组移植瘤体积为(175.99±29.57)mm3,对照组为(521.05±76.36)mm3,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);化疗组肿瘤质量较对照组减轻(P＜0.001);化疗组抑瘤率为66.22%±6.15%.化疗组Tie2 mRNA及蛋白表达水平均低于对照组(分别为P＜0.05、P＜0.001).结论:卡铂具有抑制子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用,肿瘤组织中Tie2的表达受到抑制,提示其在抗肿瘤过程中可能具有抗血管生成的作用.     

丙戊酸对卵巢癌裸鼠移植瘤血管形成的影响

目的探讨丙戊酸(VPA）对卵巢癌裸鼠移植瘤血管形成的影响。方法建立人卵巢癌裸鼠皮下转移瘤模型,将24只裸小鼠随机分为对照组、VPA组、顺铂（DDP）组、VPA+DDP 4组,每组6只。观察并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线、计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率。采用免疫组化SP法检测各组裸鼠皮下移植瘤中CD105 和sFlk-1的表达水平。结果① 治疗组裸鼠移植瘤的体积较对照组明显变小;② 各治疗组肿瘤组织的CD105表达较对照组均明显下降(P＜0.05),sFlk-1表达较对照组均明显增高(P＜0.05)。结论VPA对卵巢癌裸鼠移植瘤有明显抑制作用,其作用机理可能与抑制肿瘤血管形成有关,与DDP联合应用其抑瘤作用增强。     

HIF-1α反义寡核苷酸治疗人胃癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法 用人胃癌细胞株SCG-7901建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为反义寡核苷酸(ASOND)组、正义寡核苷酸(SOND)组和对照组,瘤体内分别注射阳离子脂质体包裹的HIF-1α ASOND、HIF-1α SOND和空白阳离子脂质体.观察各组动物的肿瘤生长曲线,测瘤重计算抑瘤率,光学显微镜下观察肿瘤细胞形态学变化,免疫组化方法 检测各组肿瘤组织HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达.结果 ASOND组裸鼠的肿瘤生长受到明显抑制,ASOND组瘤重与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);ASOND组、SOND组抑瘤率分别为47.94%、16.88%,差异有统计学意义(P＜0.01);ASOND组肿瘤组织中HIF-1α、VEGF和MVD的表达低于SOND组和对照组(P＜0.01).结论 肿瘤原位注射HIF-1α反义寡核苷酸治疗胃癌裸鼠皮下移植瘤能降低HIF-1α的表达,继而减少VEGF的生成和新生血管的形成,抑制肿瘤的生长.     

hAG(K1～3)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因真核表达质粒对裸胃癌皮下移植瘤的作用

目的 探讨hAG(K1-3)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因在体内对裸鼠胃癌皮下移植瘤的生长抑制作用.方法 通过亚克隆法构建重组质粒pBud-hAG及pBud-hAC-TRAIL,将人胃癌细胞SGC-7901注射裸鼠皮下形成移植瘤,并将移植瘤小鼠随机分为实验组和对照组.实验组包括pBud-hAG组和pBud-hAG-TRAIL组,各5只;对照组包括空质粒(pBud)组和生理盐水组,各5只.然后分别将2种重组质粒分次多点注入实验组移植瘤体内,并与对照组比较,通过检测移植瘤的体积和肿瘤微血管密度(MVD)研究其对肿瘤生长抑制情况及对肿瘤血管密度的影响.结果 pBud-hAG组和pBud-hAG-TRAIL组移植瘤的MVD分别是(4.6±1.2)个/高倍视野(HP)和(4.8±0.9)个/HP(P>0.05),而pBud组和生理盐水组分别是(17.4 ±2.4)个/HP和(18.2±2.7)个/HP,实验组和对照组之间差异有统计学意义(P<0.05).pBud-hAG组和pBud-hAG-TRAIL组的sTRAIL和hAG mRNA及蛋白表达均为阳性,其移植瘤体积分别是(1.862 ±0.017)cm3和(1.325±0.012)cm3(P<0.05),而pBud组和生理盐水组分别是(3.637±0.032)cm3和(3.521 ±0.028)cm3,实验组与对照组差异有统计学意义(P<0.05).结论 hAG(K1-3)通过抑制血管内皮细胞的生长而抑制肿瘤血管的生成,而TRAIL则通过诱导肿瘤细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞生长,因此hAG(K1-3)联合TRAIL具有更强的抗肿瘤作用.     

shRNA靶向autotaxin对人胃癌细胞AGS裸鼠移植瘤的生长的抑制效应

目的 探讨靶向autotaxin的短发夹RNA(shRNA)对人胃癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用.方法 将已构建成功的靶向autotaxin及非特异性短发夹RNA的质粒载体pSUPER-ATX、pSUPER-mock(阴性对照)和空白质粒pSUPER-control转染胃癌AGS细胞株,并将获得的相应各组细胞与野型细胞(WT)分组种植到裸鼠皮下,以建立人胃癌裸鼠移植瘤对比模型,随后观察监测各组裸鼠的肿瘤生长情况,HE染色检测移植瘤及各器官形态学改变.第8周裸鼠处死并剥离出肿瘤组织,HE染色观察肿瘤细胞的形态,免疫组化及Western blot方法检测autotaxin蛋白及相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达.结果 各组裸鼠的内脏未受到明显的毒害和损伤.第7周pSUPER-ATX组裸鼠移植瘤的体积和质量与其余组相比均有显著性缩小(P＜0.05),抑制率大约在50％左右.与野型组、阴性对照组及空白质粒组相比,pSUPER-ATX组移植瘤的autotaxin、MMP-2、MMP-9表达均有显著性下调(P＜0.05).并且autotaxin和MMP-2的表达有明显相关性(r=0.869,P＜0.01).而阴性对照组pSUPER-mock的上述指标与野型组及空白对照组相比,其差异无统计学意义.结论 所构建的靶向autotaxin的shRNA能够抑制人胃癌AGS细胞裸鼠移植瘤的生长.     

LAMβ1基因下调VEGF表达抑制人胆管癌裸鼠移植瘤生长

【摘要】 目的 探讨LAMβ1基因对人胆管癌细胞QBC939裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法 构建重组慢病毒LAMβ1过表达载体;将24只裸鼠按随机数字表分为3组,分别为实验组（转染LV LAMβ1）、阴性对照组（空载慢病毒）以及空白对照组,每组8只。制备密度为1×107/ml胆管癌QBC939细胞悬液,取02ml分别注入裸鼠皮下,每3d测量瘤体大小,4周后处死裸鼠取出裸鼠皮下瘤体。采用RT PCR、免疫组化检测瘤组织LAMβ1及VEGF表达。结果 成功构建过表达慢病毒LAMβ1载体;与阴性对照组和空白对照组比较,实验组裸鼠皮下移植瘤生长受到抑制,重量与体积明显减小（F体积=1804,P＜001;F重量=4287,P＜001）;实验组裸鼠瘤组织中LAMβ1 mRNA和蛋白水平较阴性对照组及空白对照组增高,转移因子VEGF mRNA和蛋白水平下降（P＜005）。结论LAMβ1基因过表达通过下调转移因子VEGF表达抑制胆管癌裸鼠皮下移植瘤的生长。     

抑癌基因PDCD4的表达对南蛇藤提取物抑制人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探讨抑癌基因程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达变化在南蛇藤提取物(COE)抑制人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长中的作用.方法 将外源性重组真核质粒pcDNA3.1-PDCD4转染到人胃癌细胞SGC-7901内,经G418筛选并建立高表达PDCD4的稳定转染细胞.同时建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组、pcDNA3.1组、pcDNA3.1-PDCD4组、COE组、pcDNA3.1+COE组、pcD-NA3.1-PDCD4+ COE组.观察各组移植瘤生长状况、免疫组织化学法检测移植瘤组织内PDCD4、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达情况.结果 pcDNA3.1-PDCD4组、COE组、pcDNA3.1+COE组、pcDNA3.1-PDCD4+ COE组与对照组相比,均可抑制肿瘤的生长(P＜0.05),抑瘤率分别为59.29％、57.52％、58.41％、71.68％;均可上调PDCD4、E-cadherin蛋白的表达,下调N-cdherin、Vimentin蛋白的表达(P＜0.05).pcDNA3.1-PDCD4+ COE组与其余3组相比,抑瘤率更高(P＜0.05),PDCD4、E-cadherin、N-cdherin、Vimentin蛋白表达水平的变化更大(P＜0.05).结论 抑癌基因PDCD4可能参与COE对胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,其机制可能与影响上皮间质转化(EMT)过程有关.     

靶向沉默RACK1基因对肺腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:研究沉默RACK1基因对人肺腺癌细胞株A549裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:使用人肺腺癌细胞株A549建立裸鼠皮下移植瘤模型。待肿瘤直径为0.3~0.5 cm时将荷瘤裸鼠随机分成3组,每组6只,分别于瘤内注射生理盐水(空白组)、空载质粒-脂质体复合物(空载组)及shRNARACK1质粒-脂质体复合物(实验组)。观察三组裸鼠的皮下移植瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线,并用Western blot检测各组肿瘤组织中RACK1蛋白的表达。结果:移植瘤形成后第28天,与空白组和空载组比较,实验组移植瘤生长速率、肿瘤体积和重量均明显降低(P0.05)。转染干扰载体RACK1-shRNA对裸鼠肺腺癌移植瘤的的抑瘤率为39%。Western blot结果显示,实验组移植瘤组织中RACK1蛋白的表达明显低于空白组和空载组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:沉默RACK1基因对肺腺癌裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用。     

电转染血管能抑素基因对C57小鼠Lewis肺癌生长和转移的影响

目的建立Lewis肺癌移植瘤模型,人血管能抑素(canstatin)基因重组表达载体电穿孔法转染至肿瘤局部,观察对肿瘤生长和转移的抑制作用。方法将Lewis肺癌细胞接种于C57BL小鼠皮下,成瘤后将30只小鼠随机分成3组,分别瘤体内注射血管能抑素重组载体、空载体和生理盐水,基因枪于注射部位电击,2周后PT-PCR法检测肿瘤组织中血管能抑素基因的表达并观察小鼠体重、肿瘤体积变化及肺转移结节数目。结果成功建立Lewis肺癌皮下移植瘤模型;电击2周后重组载体组仍存在血管能抑素基因的表达,重组载体组小鼠肿瘤体积由(1.03±0.11)cm3增加至(1.51±0.19)cm3,而空载体组由(1.01±0.09)cm3增至(2.45±0.18)cm3、NS组由(1.02±0.10)cm3增至和(2.54±0.21)cm3;重组载体组体积与后两组比较(P<0.01),即生长速度受到显著的抑制。重组载体组、空载体组和NS组的肺转移结节数分别为(3.50±1.24),(7.60±2.51)和(7.70±2.45);重组载体组与后两组比较(P<0.01),即肿瘤转移亦受到显著的抑制。结论血管能抑素可明显抑制Lewis肺癌移植瘤的生长与转移。     

靶向Notch1基因的siRNA对裸鼠人肝细胞癌移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨Notch1基因在人肝细胞癌HepG2细胞裸鼠移植瘤中的作用。方法于裸鼠腋下接种0.2×108/mL的HepG2细胞悬液,建立人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型,将其分为3组:未处理组(接种PBS悬浮的未转染细胞)、空载体转染组(接种空载体转染的细胞)和Notch1转染组(接种靶向Notch1基因的siRNA转染的细胞)。连续2周观察转染荷瘤裸鼠的生长情况,采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)研究肿瘤组织中的细胞凋亡,利用R T-PCR和蛋白质印迹技术检测肿瘤组织中Notch1、bcl-2和bax mR NA和蛋白的表达。结果 Notch1 siRNA转染组中肿瘤的生长明显受到抑制,其肿瘤的重量为(0.685±0.138)g,显著低于未处理组(2.896±0.513)g和空载体转染组(2.776±0.623)g(F=29.672,均P<0.01)。TUNEL结果表明,Notch1 siR NA转染组每500个细胞中凋亡的细胞数为(91±3),明显高于未处理组(10±3)和空载体转染组(11±2)中细胞凋亡的数目(P<0.05);此外,RT-PCR和Western印迹结果表明Notch1 siRNA转染组中裸鼠肿瘤组织Notch1和bcl-2 mRNA和蛋白表达均显著下降,而bax的表达显著上升,3组间比较差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论降低Notch1基因的表达能抑制人肝细胞癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤的生长,诱导HepG2细胞凋亡,后者可能与bax表达的上升和bcl-2表达的下调相关。     

贝伐单抗联合TNP-470治疗结肠癌的实验研究

目的观察贝伐单抗联合血管生成抑制剂TNP-470治疗裸鼠结肠癌移植瘤的疗效,二者是否有协同效果。方法随机将48只大肠癌裸鼠分为对照组(A组)、贝伐单抗组(B组)、血管生成抑制剂(C组)、贝伐单抗与血管生成抑制剂联合组(D组),A组于左侧腋部皮下注射0.9%生理盐水30mg/kg,B组于左侧腋部皮下注射贝伐单抗5mg/kg,C组于左侧腋部皮下注射血管生成抑制剂TNP-470 30mg/kg,D组于左侧腋部皮下注射贝伐单抗5mg/kg和TNP-470 30mg/kg,1次/d,连用14d,至治疗结束时处死裸鼠,测量皮下移植瘤的长短径,分析各组间肿瘤体积差异的显著性;测量皮下移植瘤重量,计算抑瘤率;用细胞凋亡检测试剂盒测定裸鼠移植瘤凋亡水平,免疫组化检测结肠癌转移瘤血管内皮生长因子(VEGF)的表达和肿瘤微血管密度(MVD)。结果各实验组肿瘤的生长明显受到抑制,裸鼠皮下移植瘤瘤重、抑瘤率,D组和A组、B组、C组比较差异均有统计学意义(P<0.01),且B组、C组和A组之间差异亦有统计学意义;B、C、D组均可诱导移植瘤的凋亡,且差异有统计学意义;D组中的VEGF表达及MVD计数较A、B、C组均明显降低,差异有统计学意义。结论贝伐单抗与血管生成抑制剂TNP-470联合治疗结肠癌裸鼠皮下移植瘤比贝伐单抗或TNP-470单药治疗具有更强的抑瘤作用,二者联和应用,抗肿瘤效应明显增强。     

人结肠癌动物皮下实体瘤模型的建立

 摘 要：【目的】 建立临床背景清楚的结肠癌动物皮下实体瘤模型,为结肠癌发病机制及治疗策略的研究提供可靠的实验动物模型。【方法】 采用组织块直接移植法将收集到的12例结肠癌组织临床标本移植到免疫缺陷小鼠右侧肩胛皮下,第1-2代用NOD-Scid小鼠;将每个病例的第二代皮下肿瘤,分别连续皮下接种至NOD-Scid小鼠和BALB/C裸小鼠两组动物中,传代至第5代。观察每个病例在两种品系动物的成瘤时间、标本的成瘤率;进行HE染色和CDX-2及 CK20免疫组化检测。【结果】 本实验NOD-Scid小鼠组的第3代和第5代皮下移植瘤的病例成瘤率分别为92%、58%,BALB/C裸小鼠组的分别为75%、50%。病理切片显示肿瘤组织细胞排列成不规则腺体状,有病理性核分裂相。CDX-2、CK20染色呈阳性。【结论】初步建立了临床背景清楚的人结肠癌的NOD-Scid小鼠和BALB/C裸小鼠皮下移植瘤模型,为进一步研究结肠癌发病机理及治疗策略奠定基础。     

Retroviral vector containing human p16 gene and its inhibitory effect on Bcap -37 breast cancer cells

目的　研究p16基因对肿瘤细胞生长抑制及细胞周期阻滞作用。方法　将p16cDNA插入逆转录病毒载体pLXSN构建成p16基因逆转录病毒重组体pLp16SN。利用基因转染方法 ,将pLp16SN及pLXSN导入逆转录病毒包装细胞系PA317细胞 ,获得逆转录病毒。用逆转录病毒感染Bcap 37乳腺癌细胞 ,经G4 18筛选获阳性克隆。利用Northern和Westernblotting方法检测p16基因的表达。检测转基因细胞的生长速度 ,细胞周期及裸鼠成瘤等细胞生物学行为的改变。结果　Northern及Westernblotting显示转染p16基因的Bcap 37细胞p16基因mRNA及蛋白质表达明显增高。此细胞较未转染基因的Bcap 37细胞和转染空载体的Bcap 37细胞生长速度慢 ,G1期细胞比率增高 ,裸鼠接种成瘤体积小。结论　p16基因高表达能够抑制乳腺癌细胞Bcap 37的生长 ,并阻滞细胞从G1期进入S期     

沉默低氧诱导因子-2α下调DLK1表达对乳腺癌干细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探讨RNA干扰（RNA interference,RNAi）沉默低氧诱导因子-2α（hypoxia induciblefactor-2α,HIF-2αα）基因下调DLK1表达对乳腺癌干细胞（breast cancer stem cells,BCSCs）裸鼠移植瘤生长的影响.方法 建立BCSCs裸鼠移植瘤模型,原位注射RNAi慢病毒载体和空载体慢病毒载体至裸鼠左右侧背部移植瘤组织中,定期观察成瘤时间、瘤体体积及重量,进一步绘制生长曲线及计算抑瘤率.HE染色检测移植瘤组织病理,RT-PCR和Western blot法检测移植瘤组织HIF-2α、DLK1及CD44 mRNA和蛋白表达.结果 成功建立BCSCs裸鼠移植瘤模型.与空载体组相比,RNAi组移植瘤生长速率、瘤体体积和重量均明显降低（15.1％ vs 21.6％,5.80 cm3 vs 3.30 cm3,3.0 g vs 1.7 g,P＜0.05）,抑瘤率为43.1％;HE染色显示RNAi组出现明显缺血坏死;RT-PCR结果提示RNAi组移植瘤组织中HIF-2α、DLK1及CD44蛋白表达均明显下调（0.59 ±0.02 vs 0.21 ±0.01,0.32 ±0.01 vs 0.08 ±0.01,0.76 ±0.03 vs0.04 ±0.01,P＜0.05）;Western blot结果也提示RNAi组移植瘤组织中HIF-2α、DLK1及CD44蛋白表达均明显下调（0.49 ±0.02 vs 0.28 ±0.01,0.43 ±0.02 vs0.11 ±0.01,0.62±0.03 vs 0.23±0.01,P＜0.05）.结论 沉默HIF-2α基因下调DLK1表达有效抑制BCSCs裸鼠移植瘤生长,DLK1可能参与BCSCs未分化表型维持,并增强其致瘤性.     

胃癌患者术后早期肠内营养与肠外营养疗效比较

【目的】研究肠内营养对胃癌患者术后胃肠功能恢复的影响。【方法】胃癌患者76例,随机分为肠内营养组(EN)和肠外营养组(PN),每组38例。术后均给予营养支持7 d。观察两组腹胀、腹泻、恶心、呕吐、排便等情况,以及血清的白蛋白、血红蛋白、前白蛋白、AST、ALT、肌酐水平变化。【结果】PN组的平均肛门排气时间为5.8 d,EN组的平均肛门排气时间为4.1 d,两组差异有统计学意义(P<0.05)。PN组平均排便时间为4.6 d,EN组平均排便时间为3.2 d,两组差异有统计学意义(P<0.05)。术后第4天时,两组的白蛋白、血红蛋白、前白蛋白较术前1 d明显下降,PN组和EZ组之间差异无统计学意义(P>0.05)。EN组术后第4~8天白蛋白、血红蛋白、前白蛋白上升幅度明显高于PN组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。术后第8天,两组ALT和肌酐差异无统计学意义(P>0.05),AST差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】胃癌患者术后早期肠内营养安全可行,能够早期恢复肠道功能,优于肠外营养。     

中人氟安对人肝癌裸鼠异位移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨中人氟安对人肝癌裸鼠异位移植瘤生长的影响。方法:建立人肝癌裸鼠异位移植瘤模型55只,随机分为阴性对照NS 0.1ml组(NS),阳性对照5-FU200mg/kg组(5-FU),中人氟安100mg/kg组(FIL)、中人氟安200mg/kg组(FIM)和中人氟安300mg/kg组(FIH),各组均为肿瘤局部给药。于治疗前及治疗后15d内多次测量肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线图;给药后15d处死小鼠剥离肿瘤称瘤重,计算抑瘤率;观察小鼠实验前后的生长情况及体重变化;收集血样本查血常规。结果:FIH组小鼠用药1周内全部死亡,故未纳入统计结果分析,NS组、5-FU组、FIL组、FIM组平均肿瘤体积分别为:(842.78±100.15)、(408.25±40.68)、(313.12±18.53)、(171.74±10.09)mm3,FIM组抑瘤率73.5%,与NS组抑瘤率0%比较差异有统计学意义(P<0.01),与5-FU组抑瘤率46.0%比较差异有统计学意义(P<0.05);FIL组抑瘤率52.4%,与5-FU组抑瘤率46.0%比较差异无统计学意义(P>0.05);FIM组与FIL组抑瘤率比较差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠体重及小鼠体重增加两项指标,不同剂量实验组与NS组的比较其差异均无统计学意义(P>0.05);不同剂量实验组与5-FU组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);5-FU组和NS组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05);而不同剂量实验组之间分别进行两两比较,其差异均无统计学意义(P>0.05)。白细胞计数、血小板计数及血红蛋白计数三项指标两两比较中,不同剂量实验组与NS组比较其差异无统计学意义(P>0.05),而与5-FU组比较差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组和NS组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05);不同剂量实验组之间分别进行两两比较,其差异均无统计学意义(P>0.05);红细胞计数两两比较中,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:中人氟安瘤内植入对人肝癌裸鼠异位移植瘤的抑瘤作用明显,在有效剂量范围内全身毒性反应不明显。     

HIF-1α基因转染人胃腺癌SGC7901细胞对裸鼠移植瘤的影响及机制

目的 探讨低氧诱导因子(HIF)-1α基因转染人胃腺癌SGC7901对裸鼠移植瘤血管生成及EphA2表达的影响及其可能机制.方法 采用HIF-1α基因重组质粒pGCsi-shHIF-1α,转染胃腺癌SGC7901细胞并接种裸鼠(SGC7901/shRNA,实验组),建立裸鼠皮下人胃腺癌移植瘤模型,动态观测裸鼠肿瘤体积和质量;设SGC7901(未转染组)、转染空质粒的SGC7901(SGC7901/Neo,空载体组)为对照.观察移植瘤生长情况,8周后,获取移植瘤模型瘤组织,称取湿重,免疫组化SP法检测移植瘤组织的微血管密度,Western blot检测上皮细胞激酶A2(EphA2)表达.结果 与未转染组比较,空载体组瘤体积、质量改变不明显,HIF-1α转染的实验组的瘤体积、质量明显降低;HIF-1α转染的实验组诱导血管增生、形成血管生成拟态和EphA2蛋白表达较未转染组组、空载体组明显降低(P<0.05,P<0.01).结论 HIF-1α基因转染可明显抑制裸鼠人胃腺癌移植瘤的生长,该作用可能与其抑制肿瘤血管新生、形成血管拟态及EphA2蛋白表达有关.     

莪术醇联合氟尿嘧啶对裸鼠胃癌移植瘤生长、增殖细胞核抗原和P27表达的影响

目的  观察莪术醇联合氟尿嘧啶对胃癌裸鼠皮下移植瘤的影响。方法  将人胃癌细胞株BGC823接种于裸鼠皮下建立荷瘤裸鼠模型。将荷瘤裸鼠随机分为对照组、莪术醇组、氟尿嘧啶组、联合用药组（莪术醇联合氟尿嘧啶）,记录各组的肿瘤体积和瘤重。应用荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和免疫组织化学法检测各组肿瘤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、P27的表达。结果  对照组肿瘤体积和重量比其他3组升高（P <0.05）;联合用药组肿瘤体积和重量低于莪术醇组（P <0.05）;联合用药组肿瘤体积和重量与氟尿嘧啶组比较,差异无统计学意义（P >0.05）。各实验组肿瘤组织中PCNA的表达均低于对照组（P <0.05）;与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组PCNA的表达降低（P <0.05）。各实验组移植瘤组织中P27的表达均高于对照组（P <0.05）;与莪术醇组比较,联合用药组P27的表达增强（P <0.05）;与氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27 mRNA的相对表达有升高趋势,但差异无统计学意义（P >0.05）。与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27蛋白阳性率升高（P <0.05）。结论  莪术醇联合氟尿嘧啶能抑制胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其机制可能与调节PCNA、P27基因有关。

     

健脾为基础中药方对人胃癌MKN-45裸小鼠皮下移植瘤生长及瘤组织内P-Stat3蛋白表达的影响

目的研究健脾为基础中药方对人胃癌MKN-45裸小鼠皮下移植瘤生长及瘤组织内P-Stat3蛋白表达的影响。方法将裸小鼠皮下移植瘤模型随机分为中药组及生理盐水组,比较第31天2组实验鼠皮下移植瘤生长及瘤组织内P-Stat3的蛋白表达情况。结果中药组的抑瘤率为23.68%,P-Stat3蛋白表达相对定量值为(0.33±0.52),与生理盐水组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论健脾为基础的中药方可抑制人胃癌细胞MKN-45裸小鼠皮下移植瘤的生长,并能抑制P-Stat3的蛋白表达。