JNK信号通路对缺氧诱导心房钠尿肽分泌的影响

[目的]探讨JNK信号通路对缺氧诱导心房钠尿肽（ANP）分泌的影响及其机制．[方法]采用由氮气制作的家兔缺氧离体心房灌流模型;采用放射免疫法测定ANP及内皮素-1（ET-1）值．[结果]在家兔离体心房灌流模型中,急性缺氧明显促进心房ANP及ET-1的分泌;MAPK信号转导通路的JNK途径抑制剂SP600125明显抑制缺氧引起的ANP及ET-1的分泌;预处理SP600125或同时预处理2种ET-1受体阻断剂（BQl23＋B0788）均明显抑制缺氧诱导心房ANP的分泌,而SP600125对缺氧诱导ANP分泌的抑制作用明显强于BQl23＋BQ788的抑制效应．[结论]急性缺氧明显增加离体心房ANP的分泌,JNK信号通路部分通过ET-1调节缺氧诱导ANP分泌的过程．     

高压氧预处理对小鼠运动耐力的影响

目的:探讨高压氧预处理对小鼠运动耐力和运动后血乳酸水平及自由基代谢的影响.方法:60只昆明种小白鼠随机分为3组,每组20只:高压氧预处理组(HBO)、常氧高氮对照组(HPA)、空白对照组(NPA).经过5 d暴露后每组取10只进行游泳力竭时间测定,另外10只进行游泳90 min后,采用对羟基联苯比色法测定血浆乳酸(LD)水平、TBA比色法测定丙二醛(MDA)、邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶(SOD).结果:与HPA组相比,NPA组小鼠的游泳力竭时间无统计学差异,而HBO组小鼠的游泳力竭时间明显延长(P<0.05),经过相同游泳时间后血浆乳酸水平较低(P<0.05);各组间血浆MDA含量及SOD活力无显著差别.结论:高压氧预处理可提高小鼠运动耐力且具有增强乳酸清除能力及抗疲劳作用,该作用与抗氧化酶活力及自由基代谢可能无关.     

M_2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流家兔心房钠尿肽分泌的影响

[目的]建立离体跳动灌流心房模型,并探讨激活M2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流心房钠尿肽(ANP)分泌的影响.[方法]利用急性剥离的家兔左心房和放射免疫分析方法观察M2型毒蕈碱受体对离体跳动灌流心房动力学及灌流液中ANP分泌的影响.[结果]记录到的离体跳动灌流心房模型心房内压及每搏搏出量与文献报道基本一致;卡巴胆碱明显抑制心房内压和搏出量,显著增加灌流心房ANP的分泌,此效应被M2型毒蕈碱受体抑制剂Methoctramine阻断.[结论]成功建立离体跳动灌流心房模型;M2型毒蕈碱受体的激活增加心房ANP的分泌.     

乙醇对离体蟾蜍心脏活动及心肌酶的影响

目的 观察不同浓度乙醇按不同灌流顺序对离体蟾蜍心脏活动的影响,探讨其作用机制.方法 蟾蜍24只,雌雄不限,随机分为正常对照组、乙醇浓度递增灌流组、乙醇浓度递减灌流组,每组8只.结果 与正常对照组相比:两种灌流顺序的乙醇组都显示心率减慢(P＜0.01或P＜0.05),心肌收缩幅度减小(P＜0.01),心肌ATP酶和超氧化物歧化酶(SOD)含量减少(P<0.01),丙二醛(MDA)含量增多(P<0.01);递增组与递减组相比,无显著差异.结论 急性乙醇中毒可导致离体蟾蜍心肌酶发生改变,对心率和心肌收缩幅度有抑制作用,且抑制作用呈浓度依赖性.     

褪黑素对小鼠抗疲劳、耐缺氧作用的实验研究

目的观察褪黑素(MT)对小鼠抗疲劳、耐缺氧的作用,并探讨其可能的作用机制。方法随机将小鼠分为8个组,分别为空白对照组、阳性对照组(红景天胶囊900 mg/kg)、褪黑素高剂量组(4 mg/kg)和褪黑素低剂量组(2 mg/kg)各2组,每组小鼠10只。灌胃给药36天后,分别进行负重游泳实验、耐缺氧实验,观察负重游泳力竭时间、耐缺氧存活时间及负重游泳后血清乳酸、乳酸脱氢酶、血清尿素氮、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等几个生化指标。结果与空白对照组相比,褪黑素能够显著延长小鼠力竭游泳时间和耐缺氧时间(P<0.05或0.01),明显降低血清MDA含量,提高乳酸脱氢酶和SOD活性(P<0.05)。结论褪黑素具有抗疲劳作用和提高小鼠耐缺氧能力。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠缺血/再灌心脏金属硫蛋白含量的影响

目的:在大鼠离体心脏缺血一再灌注(I/R)损伤模型上,观察bFGF对心肌金属硫蛋白的影响,探讨bFGF心肌保护作用的可能机制、方法:复制大鼠离体心脏I/R损伤模型。预先24h应用bFGF,以生理多导仪测定±dp/dt max.[Cd109]一血红素饱和法测定心肌MT含量,硫代巴比妥法测心肌丙二醛(MDA)含量,以自动生化分析仪测灌流液乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:bFGF可诱导心肌MT生成,bFGF组心肌MT含量升高,MDA含量大于I/R组.灌流液乳酸脱氢酶(LDH)及蛋白漏出明显减少,同时心功能明显改善。结论:MT参与了bFGF对大鼠离体心肌缺血-再灌注(I/R)损伤心肌保护作用。     

不同糖浓度K-H液对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响

目的:观察不同糖浓度的Krebs-Henseleit (K-H)液对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响.方法:采用Langendorff大鼠离体心脏灌流技术制备心脏缺血/再灌注损伤模型,用不同糖浓度的K-H液灌流心脏,灌流结束后测定心肌组织中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)的活性以及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量.结果:1.5倍糖浓度组(3g·L-1)能显著提高大鼠心肌组织中LDH、CK、GSH-PX的活性(P＜0.05),提高NO(P<0.05)、降低MDA(P<0.05)的含量.结论:1.5倍糖浓度组(3g·L-1) 对大鼠缺血/再灌注心肌有保护作用,可能是通过增加心肌细胞膜稳定性、增强大鼠抗氧化酶系统功能、松弛血管平滑肌增加血供、抑制心肌缺血/再灌注损伤时的脂质过氧化损伤来实现的.     

附子多糖对力竭运动小鼠自由基代谢的影响

目的:探讨附子多糖(FPS)对力竭小鼠运动过程中氧化损伤的保护作用。方法:雄性昆明小鼠随机分为安静组、力竭组、力竭+维生素C对照组、力竭+附子多糖组,采用一次性力竭游泳建立模型。观测各组小鼠的游泳耐力,测定血液、心肌、肝脏、肺超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)的含量。结果:与安静组相比,一次力竭游泳后,血液、心肌、肝脏、肺SOD的活性明显降低(P<0.01),而MDA含量显著升高(P<0.01);而附子多糖能够显著提高力竭小鼠的组织SOD活性(P<0.01),降低MDA含量(P<0.01),提高小鼠的耐力,且其效果在心肌和肝脏优于维生素C(P<0.05),而在血液和肺组织与维生素C相当(P>0.05)。结论:附子多糖能够通过提高小鼠机体抗氧化酶的活性,对抗力竭游泳引起的脂质过氧化反应,从而提高小鼠的运动能力,对抗运动性疲劳的产生。     

枸杞多糖对高温环境下力竭运动大鼠胸主动脉血管反应性及自由基代谢的影响

目的探讨枸杞多糖(LBP)对高温环境中力竭运动大鼠胸主动脉血管反应性及自由基代谢的影响。方法雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、高温力竭运动组、高温力竭运动+LBP组(200mg.kg-1d-1),后两组大鼠分别在高温条件下进行四周游泳训练到力竭。采用离体血管环灌流技术测定大鼠胸主动脉血管环对去甲肾上腺素(NA)的反应性;检测血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸(LD)、热休克蛋白70(HSP70)以及一氧化氮(NO)的变化。结果与对照组比较,高温力竭运动组胸主动脉血管环对NA的收缩反应增加(P<0.01);其血清中MDA、LD、HSP70含量升高,NO含量降低(P<0.05)。与高温力竭运动组比较,灌服LBP组大鼠能够降低NA对血管环引起的收缩幅度,其血清中SOD、NO及HSP70含量高于高温力竭运动组(P<0.01),而血清中MDA、LD的含量低于高温力竭运动组(P<0.01)。结论 LBP可减弱对NA的血管收缩反应,改善胸主动脉血管弹性,其机制可能与增强血清抗氧化酶活力,减少自由基及脂质过氧化物、提高机体血乳酸耐受力及增加HSP70的表达有关。     

二十八烷醇制剂对运动性疲劳大鼠自由基代谢和心脏内分泌功能的影响

目的 探讨二十八烷醇制剂对运动性疲劳大鼠运动能力、血液自由基代谢及心脏内分泌功能的影响.方法 以运动性疲劳大鼠为模型,记录一次性力竭运动时间,测定大鼠血清过氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,以及血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、心钠素(ANP)的含量.结果 与运动疲劳组相比,补充"二十八烷醇制剂"组大鼠力竭运动时间显著延长(P<0.05);血清SOD活性显著增强(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05);血浆ET含量显著减少(P<0.05),CGRP和ANP含量显著升高(P<0.05),且效果均优于丙酮酸-肌酸组.结论 二十八烷醇制剂可提高大鼠的运动能力.同时可增强血液抗氧化酶活性,抑制力竭运动后脂质过氧化作用,调节大鼠心肌内分泌功能,对心脏起到积极的保护作用.     

肌浆网释放Ca2+对心房钠尿肽分泌的影响

目的 观察肌浆网(sarcoplasmic reticulum,SR)释放Ca2+对心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)分泌的影响.方法 利用SR激活剂和阻断剂,采用搏动的离体心房灌流模型及放射免疫技术观察SR释放Ca2+对家兔心房ANP分泌的变化.结果 SR抑制剂Ryanodine明显促使心房ANP的分泌,同时显著抑制心房搏出量和心房搏动压,而SR激活剂咖啡因的作用与Ryanodine完全相反.心肌兴奋-收缩耦联脱敏剂2,3-丁二酮单肟(BDM)促使ANP的分泌,对心房搏出量和心房搏动压呈抑制效应.腺苷酸环化酶直接激活剂福司柯林明显抑制ANP分泌,同时显著增加cAMP逸出量和心房搏出量.阻断L-型Ca2+通道明显促进心房ANP的分泌,但未能改变咖啡因对ANP分泌的抑制效应.结论 阻断SK或L-型Ca2+通道使细胞内Ca2+浓度降低可促进ANP的分泌,而激活二者则抑制ANP分泌.     

大鼠心肌细胞低氧预处理与低氧后处理血红素氧化酶-1水平的比较

目的比较低氧预处理和低氧后处理对大鼠心肌细胞血红素氧化酶-1水平的影响。方法将培养的心肌细胞分为四组:对照组、低氧预处理组、低氧后处理组和联合组。分别测定各时间段细胞上清液中LDH水平和HO-1水平。结果低氧预处理组和低氧后处理组LDH的水平明显低于对照组(均P<0.01),HO-1水平明显高于对照组(均P<0.05)。联合组LDH的水平及HO-1水平与低氧预处理组、低氧后处理组差异没有显著性(均P>0.05)。结论该研究结果提示低氧预处理和低氧后处理对心肌细胞的保护作用部分是通过HO-1水平增加来实现的,同时也说明二者很可能是通过同一传导通路来实现心肌细胞的保护作用。     

异丙肾上腺素对家兔心房钠尿肽分泌的影响

[目的]观察β肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素对心房钠尿肽(ANP)分泌的影响,探讨其机制.[方法]采用搏动的心房灌流模型及放射免疫技术观察异丙肾上腺素对ANP分泌、环磷酸腺苷(cAMP)逸出量及心房动力学变化的影响.[结果]异丙肾上腺素可明显抑制ANP的分泌,显著增加心房搏出量及环磷酸腺苷逸出量;蛋白激酶非选择性抑制剂Staurosporine可减缓异丙肾上腺素对ANP分泌的抑制效应.[结论]β肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素抑制ANP分泌作用由cAMP依赖性信号传导途径来实现.     

喹啉酮衍生物对离体家兔心房正性肌力作用及心率的影响

目的观察和探讨自备研制出的喹啉酮衍生物对离体家兔心房的正性肌力作用及心率的影响。方法24只大耳白家兔随机分成4组,即米力农组及3种喹啉酮衍生物组,每组6只。利用搏动的离体心房灌流模型和RM6240C生物记录系统测定3种喹啉酮衍生物的心房搏出量、心房搏动压及心率。结果喹啉酮衍生物PHR02003明显增加心房搏出量和心房搏动压,但对心率无明显改变(P>0.05);喹啉酮衍生物PHR02001、PHR02004无显著性增加心房搏出量和心房搏动压(P>0.05)。结论在制备研制出的3种喹啉酮衍生物中PHR02003具有正性肌力作用。     

C型钠尿肽对家兔心房机械活动的影响及其作用机制

目的：观察C型钠尿肽（CNP）对心房机械活动和心房肌细胞内环核苷酸浓度的影响,并探讨其作用机制。方法：大耳白兔麻醉后立即开胸取出心脏置于氧饱和的36.5℃生理盐水中,剥离左心房后立即固定在心房灌流装置上,以不同浓度CNP（10、30和300 nmol•L^-1）处理各1个循环后,实时测定心房搏出量和心房搏动压。采用放射免疫法测定30 nmol•L^-1CNP 处理的cAMP和cGMP含量。结果：①与对照循环组比较,不同浓度的CNP（10、30和300 nmol•L^-1）组家兔心房搏出量和心房搏动压均明显降低（P<0.05或P<0.01）;CNP浓度越高心房搏出量和心房搏动压越低;其中300 nmol•L^-1CNP组心房搏出量和心房搏动压降低率分别达74.8%和76.9%。②与对照循环组比较,30 nmol•L^-1CNP组心房搏出量和心房搏动压均明显降低（P<0.01）;cGMP含量明显增多,约增加10.2倍（P<0.01 ）,cAMP含量则无明显变化 （P>0.05）。结论：CNP抑制家兔心房机械活动,其机制与增加细胞内cGMP含量有关,即经CNP- GC -cGMP信号转导途径调节心房机械活动。     

基质金属蛋白酶组织抑制因子-3基因转染血管平滑肌细胞移植对大鼠心肌梗死的治疗作用

目的 观察基质金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(VSMCs)移植,对大鼠心肌梗死(AMI)的治疗效果,并探讨其可能的机制.方法 取Wistar大鼠胸主动脉,采用组织块法培养VSMCs.左冠状动脉远端结扎方法复制AMI模型.随机分三组:冠状动脉结扎后3d向缺血心室壁内分别注射含有1×106个TIMP-3基因转染的VSMCs(TIMP-3组)、1×106个VSMCs(VSMC组)、不含细胞的DMEM液(DMEM组)各0.5mL.术后第4周,观察大鼠心脏功能变化,免疫组化染色检测TIMP-3和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达,RT-PCR法检测缺血心肌组织中TIMP-3和MMP-2 mRNA含量.结果 TIMP-3基因成功转入VSMCs中.术后4周,TIMP-3组的LVIDd、LVIDs、EDV和ESV值较正常鼠升高(P＜0.05),但小于VSMC(P ＜0.01)组和DMEM组(P＜0.01).RT-PCR结果显示:各移植组TIMP-3 mRNA含量均较对照组显著升高(P＜0.01),TIMP-3组较VSMC组、DMEM组明显增高(P＜0.01);TIMP-3组MMP-2 mRNA含量较VSMC组、DMEM组明显降低(P＜0.01).结论 将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制MMP-2的表达,进而抑制AMI后早期心肌重塑,改善心功能.     

紫绀型先心病缺氧致脂肪组织内分泌紊乱

目的 探讨紫绀型先心病缺氧是否致脂肪组织缺氧及内分泌功能紊乱.方法 选取紫绀型先心病(CCHD)和非紫绀型先心病(ACHD)手术患者共32例,其中CCHD 17例为实验组,ACHD 15例为对照组,比较身高、体重、血红蛋白.获取皮下脂肪组织,免疫组化检测缺氧诱导因子1(HIF-1α),RT-PCR法分析脂肪因子等表达,Western blot法检测P-NF κ BP65、P-IκB α、JNK和P-JNK蛋白表达.结果 实验组与对照组相比,身高(67.1±7.8)cm vs (72.6±9.5)cm(P ＜0.05);体重(7.9±2.2)kg vs (9.5±2.6)kg(P ＜0.05);血红蛋白(186.6±22.6)g/L vs(117.4±10.5)g/L(P ＜0.05).实验组HIF-1 α、内质网应激标志和炎症相关指标表达高于对照组(P＜0.05).结论 紫绀型先心病导致脂肪组织缺氧,脂联素表达下降,炎症因子增加,其变化可能与内质网应激相关.     

过表达HGF促慢性缺血心肌处血管生成的实验研究

目的研究过表达HGF对促进缺血心肌处血管生成作用及对心功能的影响。方法经左胸冠状动脉回旋支放置Ameroid环的方法建立稳定有效的慢性心肌缺血猪模型。随机分为3组(n=6)于缺血心肌处分别注射4×109pfu 200μL AdHGF、4×109pfu 200μL AdNull、200μL Ns。继续饲养4周,检测心脏功能及心肌HGF蛋白表达等。结果全部实验动物成功构建慢性缺血性心脏病模型;治疗后心脏彩超检查示AdHGF组左室前壁缺血区室壁增厚,灌注明显改善,运动增强,LVEDV、LEEF、FS明显增加(P<0.05);AdHGF组心肌组织HGF蛋白较对照组获得较高表达(P<0.05);AdHGF组心肌血管数量及密度均明显高于对照组(P<0.05);Ad-HGF组VIII因子阳性的血管数量明显高于AdNull组(P<0.05)。结论过表达HGF促进慢性缺血心肌处血管生成,增加心肌血流灌注,改善缺血心肌局部微环境,从而改善和保护心功能的作用。